p研究進(jìn)展PPT課件

1、概述概述1P53P53研究成果研究成果2P53P53與腫瘤與腫瘤3P53P53與腫瘤治療與腫瘤治療4 p53第1頁/共19頁 p53 1979年，Lane等及Linzer等在研究SV40病毒轉(zhuǎn)化的細(xì)胞時，發(fā)現(xiàn)了一種與SV40 T抗原緊密結(jié)合的一種分子量約為53*1000的細(xì)胞蛋白，在腺病毒感染的細(xì)胞中夜發(fā)現(xiàn)了這種蛋白的存在，而且與E16 58*1000的病毒蛋白結(jié)合成復(fù)合物形式。當(dāng)初并不太清楚其結(jié)構(gòu)功能，所以將其稱之為p53蛋白概述第2頁/共19頁 p53 p53基因組DNA位于17p13.1位點上，橫跨16-20kb的一段DNA序列。P53基因由11個外顯子組成，第一個外顯子區(qū)沒有蛋白質(zhì)編碼

2、功能，而且距第二個外顯子有8-10kb之遙。進(jìn)化過程中p53基因是高度保守的，對于來源于不同種系生物系統(tǒng)p53基因序列進(jìn)行比較，有五段氨基酸殘疾序列是高度保守的，分別是13-19，117-142.171-181，234-258和270-286位置上的氨基酸序列。這五段在進(jìn)化上處于高度保守狀態(tài)的序列是p53蛋白功能的重要依賴區(qū)。P53基因的編碼產(chǎn)物是一種由393個氨基酸殘基組成，分子量為53*1000的核磷酸化蛋白。概述第3頁/共19頁 p53概述第4頁/共19頁 p53概述第5頁/共19頁 p53研究成果第6頁/共19頁 p53P53與腫瘤P53與蛋白質(zhì)相互作用 一些蛋白質(zhì)能與P53蛋白作用，

3、導(dǎo)致其正常生物學(xué)功能的喪失，DNA腫瘤病毒如 HPV16、18、SV40和腺病毒編碼癌蛋白，引起宿主細(xì)胞的惡性病變，這些癌蛋白如 SV40T抗原、腺病毒ELa、ELb、HPVE6能與Rb，P53結(jié)合. Scheffner證實，HPVE6結(jié)合 P53后，啟動細(xì)胞內(nèi)蛋白酶降解P53，從而降低P53正常功能.而SV40T，腺病毒ELb沒有發(fā)現(xiàn)這種降解作用方式.此外，P53還可以被細(xì)胞基因產(chǎn)物相互作用而失活，如MDM2可 結(jié)合P53而使其失活，在一些常見的人類肉瘤中，都有MDM2基因擴(kuò)增，這種擴(kuò)增可能干擾P53的正常功能.第7頁/共19頁 p53P53與腫瘤P53與蛋白質(zhì)相互作用 第8頁/共19頁 p

4、53P53基因突變與失活P53與腫瘤 P53正常功能的喪失，最主要的方式是基因突變，通過腫瘤中大量的突變體分 析，證實大部分突變是位于4個突變熱點之一的錯義突變.這4個突變熱點是aa129-146、 171-179、234-260、270-287:正對應(yīng)于P53基因進(jìn)化最保守區(qū)段，體外實驗證實突 變體失去特異位點的結(jié)合能力，此外，突變體還可以改變P53的球形構(gòu)象. 隨著研究的深入，對P53突變有了新的認(rèn)識，Dan等認(rèn)為腫瘤中 P53突變可分為三類:零突變:即突變體無功能，不參與相互作用;負(fù)突變:即失去 負(fù)調(diào)控功能，并能使野生型失活，但并不直接參與致癌;正突變:失去負(fù)調(diào)控功能， 并獲得轉(zhuǎn)化能力，

5、這種突變體可直細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化中代替癌基因起啟動作用.第9頁/共19頁 p53P53基因突變與失活P53與腫瘤 目前認(rèn)為，P53失活機(jī)理是，野生型P53以四聚體形式與特異位點結(jié)合，反式激活 下游生長抑制基因的表達(dá)，一系列的方式能使P53失活，在一些腫瘤中，單一或兩個 P53位點的喪失降低四聚體濃度，無義突變造成P53翻譯中斷，C端酸性結(jié)構(gòu)域的丟失 影響四聚體形成;最常見的是錯義突變，野生型與突變體形成更穩(wěn)定的四聚體，喪失 正常功能.第10頁/共19頁 p53P53與腫瘤P53突變與腫瘤 P53基因與人類50%的腫瘤有關(guān)，目前發(fā)現(xiàn)的有肝癌、乳腺癌、膀胱癌、胃癌、結(jié) 腸癌、前列腺癌、軟組織肉瘤、卵巢癌

6、、腦瘤、淋巴細(xì)胞腫瘤、食道癌、肺癌、成骨肉瘤等，人類腫瘤中P53突變主要在高度保守區(qū)內(nèi)，以175、248、249、273、282位點 突變最高，不同種類腫瘤不同。第11頁/共19頁 p53P53與腫瘤治療抑瘤機(jī)理第12頁/共19頁 p53P53與腫瘤治療P53基因療法 P53基因治療理論依據(jù)通過攜帶正常p53基因的病毒轉(zhuǎn)染腫瘤細(xì)胞，使p53蛋白大量表達(dá)，從而逆轉(zhuǎn)因p53蛋白缺失或功能異常而致的細(xì)胞低分化、無限增值、抗凋亡等腫瘤細(xì)胞的生物學(xué)行為，使腫瘤細(xì)胞死亡 2004年，適用腺病毒載體治療頭頸部腫瘤的p53基因療法才在中國批準(zhǔn)，這也是迄今為止第一個獲批準(zhǔn)的能夠常規(guī)用于人體臨床治療的基因治療方法

7、第13頁/共19頁 p53P53與腫瘤治療重建p53蛋白活性 機(jī)理：開發(fā)出一種小分子物質(zhì)，通過它可以與腫瘤細(xì)胞內(nèi)突變的p53蛋白發(fā)生相互作用，促使該突變蛋白改變構(gòu)象，恢復(fù)其正常功能。 目前已經(jīng)開發(fā)出了能夠破壞MDM2-p53間相互作用的藥物，這樣就能釋放出p53蛋白，恢復(fù)其活性。第14頁/共19頁 p53P53與腫瘤治療頭頸部腫瘤治療 頭頸部腫瘤p53基因便已發(fā)生率極高，達(dá)95%，應(yīng)用p53基因治療惡性腫瘤最先考慮的是頭頸部腫瘤。有60%的病人經(jīng)p53基因治療后腫瘤明顯消退，其治療效果明顯高于單純化療治療頭頸部腫瘤的療效第15頁/共19頁 p53P53與腫瘤治療卵巢癌治療 一組p53基因產(chǎn)生突變的晚期卵巢癌患者經(jīng)多療程的p53基因治療和化療后，病情減輕，存活率得到改善 美國愛荷華州大學(xué)的Richard Buller博士報告了他們對接受過前期加強(qiáng)性治療的36名晚期卵巢癌患者應(yīng)用腺病毒載體向腹膜內(nèi)導(dǎo)入功能性p53抑癌基因結(jié)合化療/期臨床試驗的初步結(jié)果。結(jié)果表明經(jīng)多次基因治療/化療結(jié)合治療的患者平均存活14.8個月。第16頁/共19頁 p53 在未來10年里，人們還將對p53蛋白在代謝、生殖、生育、生殖細(xì)胞基因組失穩(wěn)、腫瘤、生物壽命等眾多領(lǐng)域里的作用進(jìn)行更深入的研究。同時也將利用TP5