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1、1chapter10 chapter10 酶的作用機(jī)制和酶的調(diào)節(jié)酶的作用機(jī)制和酶的調(diào)節(jié)一、酶的活性部位一、酶的活性部位(一)酶活性部位的特點(diǎn)(一)酶活性部位的特點(diǎn) 在酶蛋白中只有少數(shù)特異的氨基酸殘基參與底物結(jié)合及催化作用,在酶蛋白中只有少數(shù)特異的氨基酸殘基參與底物結(jié)合及催化作用,這些特異的氨基酸殘基比較集中的區(qū)域,即與酶活力直接相關(guān)的區(qū)域這些特異的氨基酸殘基比較集中的區(qū)域,即與酶活力直接相關(guān)的區(qū)域稱為酶的活性部位或稱為酶的活性部位或活性中心活性中心(通常將酶的結(jié)合部位和催化部位總稱(通常將酶的結(jié)合部位和催化部位總稱為酶的活性部位或活性中心)。為酶的活性部位或活性中心)。(二)研究酶活性部位(二

2、)研究酶活性部位(活性中心)活性中心)的方法的方法1、側(cè)鏈基團(tuán)化學(xué)修飾、側(cè)鏈基團(tuán)化學(xué)修飾2、動(dòng)力學(xué)參數(shù)測(cè)定法、動(dòng)力學(xué)參數(shù)測(cè)定法3、x射線晶體結(jié)構(gòu)分析法射線晶體結(jié)構(gòu)分析法2chapter10 chapter10 酶的作用機(jī)制和酶的調(diào)節(jié)酶的作用機(jī)制和酶的調(diào)節(jié)二、二、酶活力的測(cè)定酶活力的測(cè)定n1 1)酶活力:又稱為酶活性,一般把酶催化一定化學(xué)反)酶活力:又稱為酶活性,一般把酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力稱為酶活力,通常以在一定條件下酶所催化應(yīng)的能力稱為酶活力,通常以在一定條件下酶所催化的化學(xué)反應(yīng)速度來(lái)表示。的化學(xué)反應(yīng)速度來(lái)表示。n因此酶活力可用單位時(shí)間內(nèi)單位體積中底物的減少量因此酶活力可用單位時(shí)間內(nèi)單位體

3、積中底物的減少量或產(chǎn)物的增加量表示,單位為或產(chǎn)物的增加量表示,單位為mol/minmol/min等等2 2)酶活力單位:一般用活力單位)酶活力單位:一般用活力單位u(unit)u(unit)表示,許多酶表示,許多酶活力單位都是以最佳條件或某一固定條件下每分鐘催化活力單位都是以最佳條件或某一固定條件下每分鐘催化生成一微摩爾產(chǎn)物所需要的酶量為一個(gè)酶活力單位。生成一微摩爾產(chǎn)物所需要的酶量為一個(gè)酶活力單位。3chapter10 chapter10 酶的作用機(jī)制和酶的調(diào)節(jié)酶的作用機(jī)制和酶的調(diào)節(jié)二、二、酶活力的測(cè)定酶活力的測(cè)定3 3)酶的比活力:是指每毫克酶蛋白所含有的酶活力單位)酶的比活力:是指每毫克酶

4、蛋白所含有的酶活力單位數(shù),它是酶制劑純度的一個(gè)指標(biāo)。數(shù),它是酶制劑純度的一個(gè)指標(biāo)。4 4)酶的收率:指純化過(guò)程中酶活性的收率。)酶的收率:指純化過(guò)程中酶活性的收率。5 5)純化倍數(shù):指提純后與提純前酶比活力的比值。)純化倍數(shù):指提純后與提純前酶比活力的比值。4chapter10 chapter10 酶的作用機(jī)制和酶的調(diào)節(jié)酶的作用機(jī)制和酶的調(diào)節(jié)三、三、酶活性的調(diào)節(jié)控制和調(diào)節(jié)酶酶活性的調(diào)節(jié)控制和調(diào)節(jié)酶(413413頁(yè))頁(yè))(一)酶別構(gòu)調(diào)控(一)酶別構(gòu)調(diào)控別構(gòu)酶別構(gòu)酶:含有:含有活性中心和別構(gòu)中心活性中心和別構(gòu)中心,酶蛋白有多個(gè)亞基,有四級(jí)結(jié)構(gòu)。,酶蛋白有多個(gè)亞基,有四級(jí)結(jié)構(gòu)。當(dāng)轉(zhuǎn)一性的代謝物非共價(jià)

5、地結(jié)合到別構(gòu)中心時(shí),它的催化活性就發(fā)生當(dāng)轉(zhuǎn)一性的代謝物非共價(jià)地結(jié)合到別構(gòu)中心時(shí),它的催化活性就發(fā)生改變。改變。 調(diào)節(jié)酶調(diào)節(jié)酶:可以在多酶體系中對(duì)代謝反應(yīng)起調(diào)節(jié)作用,它們本身的活:可以在多酶體系中對(duì)代謝反應(yīng)起調(diào)節(jié)作用,它們本身的活性受到嚴(yán)格的調(diào)節(jié)控制。主要指別構(gòu)酶和共價(jià)調(diào)節(jié)酶。性受到嚴(yán)格的調(diào)節(jié)控制。主要指別構(gòu)酶和共價(jià)調(diào)節(jié)酶。 (二)可逆共價(jià)修飾調(diào)控(二)可逆共價(jià)修飾調(diào)控 共價(jià)調(diào)節(jié)酶共價(jià)調(diào)節(jié)酶:其催化性質(zhì)因受到一個(gè)小基團(tuán)的共價(jià)修飾而發(fā)生顯著的變:其催化性質(zhì)因受到一個(gè)小基團(tuán)的共價(jià)修飾而發(fā)生顯著的變化,有活性與無(wú)活性相互轉(zhuǎn)變。如糖原磷酸化酶因它的一個(gè)專一性絲氨酸殘化,有活性與無(wú)活性相互轉(zhuǎn)變。如糖原磷酸

6、化酶因它的一個(gè)專一性絲氨酸殘基得失磷酸基團(tuán)而發(fā)生活性變化。基得失磷酸基團(tuán)而發(fā)生活性變化。5(三)酶原的激活(三)酶原的激活 有些酶在生物體內(nèi)首先合成的是酶的無(wú)活性前體形式,稱為酶原,這些有些酶在生物體內(nèi)首先合成的是酶的無(wú)活性前體形式,稱為酶原,這些酶原在一定的條件下,去掉一個(gè)或幾個(gè)特殊的肽鍵,從而使酶的構(gòu)象發(fā)生一酶原在一定的條件下,去掉一個(gè)或幾個(gè)特殊的肽鍵,從而使酶的構(gòu)象發(fā)生一定的變化,成為有活性的酶,這個(gè)過(guò)程叫定的變化,成為有活性的酶,這個(gè)過(guò)程叫酶原的激活酶原的激活。chapter10 chapter10 酶的作用機(jī)制和酶的調(diào)節(jié)酶的作用機(jī)制和酶的調(diào)節(jié)三、三、酶活性的調(diào)節(jié)控制和調(diào)節(jié)酶酶活性的調(diào)

7、節(jié)控制和調(diào)節(jié)酶(413413頁(yè))頁(yè))6chapter10 chapter10 酶的作用機(jī)制和酶的調(diào)節(jié)酶的作用機(jī)制和酶的調(diào)節(jié)四、四、寡聚酶、同工酶及誘導(dǎo)酶寡聚酶、同工酶及誘導(dǎo)酶(428428頁(yè))頁(yè))(一)寡聚酶(一)寡聚酶 酶蛋白由二個(gè)以上的亞基組成,有四級(jí)結(jié)構(gòu)。大部分別構(gòu)酶是寡聚酶。酶蛋白由二個(gè)以上的亞基組成,有四級(jí)結(jié)構(gòu)。大部分別構(gòu)酶是寡聚酶。(二)同工酶(二)同工酶 催化同一種化學(xué)反應(yīng),但其酶蛋白本身的分子結(jié)構(gòu)和組成卻有所不同催化同一種化學(xué)反應(yīng),但其酶蛋白本身的分子結(jié)構(gòu)和組成卻有所不同的一組酶。如的一組酶。如 哺乳動(dòng)物哺乳動(dòng)物5種種乳酸脫氫同工酶(乳酸脫氫同工酶(ldh) (三)誘導(dǎo)酶與結(jié)構(gòu)酶三)誘導(dǎo)酶與結(jié)構(gòu)酶 結(jié)構(gòu)酶是指細(xì)胞中天然存在的酶,它的含量較為穩(wěn)定,受外界的影響很結(jié)構(gòu)酶是指細(xì)胞中天然存在的酶,它的含量較為穩(wěn)定,受外界的影響很小。小。 誘導(dǎo)酶是指當(dāng)細(xì)胞中

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