人類(lèi)疾病動(dòng)物模型2PPT課件

1、2021-10-271人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述 人類(lèi)疾病動(dòng)物模型： 是指醫(yī)學(xué)研究中建立的具有人類(lèi)疾病表現(xiàn)的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)對(duì)象和相關(guān)材料。 應(yīng)用動(dòng)物模型是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)識(shí)生命科學(xué)客觀規(guī)律的實(shí)驗(yàn)方法和手段。 人類(lèi)疾病動(dòng)物模型的研究，本質(zhì)上是比較醫(yī)學(xué)的應(yīng)用科學(xué)。 第1頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-272 人類(lèi)疾病動(dòng)物模型的定義和意義 人類(lèi)疾病動(dòng)物模型的設(shè)計(jì)原則 動(dòng)物模型的分類(lèi) 影響動(dòng)物模型質(zhì)量的因素人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述第2頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-273人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述 應(yīng)用動(dòng)物模型的意義：1、避免人體實(shí)驗(yàn)造成的危害2、可研究平時(shí)不易見(jiàn)到的疾病3、可提供發(fā)病率低，潛伏期和病程長(zhǎng)的疾病的動(dòng)物模型4、克服復(fù)雜因素

2、，增加方法學(xué)的可比性5、樣品收集方便，實(shí)驗(yàn)結(jié)果易分析6、有利于更全面地認(rèn)識(shí)疾病的本質(zhì)第3頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-274 生物醫(yī)學(xué)科研專(zhuān)業(yè)設(shè)計(jì)中常要考慮如何建立動(dòng)物模型的問(wèn)題，因?yàn)楹芏嚓U明疾病及療效機(jī)制的實(shí)驗(yàn)不可能或不應(yīng)該在病人身上進(jìn)行。常要依賴(lài)于復(fù)制動(dòng)物模型，但一定要進(jìn)行周密設(shè)計(jì)，設(shè)計(jì)時(shí)要遵循下列一些原則。 1、相似性 2、重復(fù)性 3、可靠性 4適用性和可控性 5 5易行性和經(jīng)濟(jì)性人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述第4頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-275人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述 動(dòng)物模型的設(shè)計(jì)原則1、相似性 能夠找到與人類(lèi)疾病相同的動(dòng)物自發(fā)性疾病當(dāng)然最好。例如日本人找到的大白鼠原發(fā)性高血壓就是研究人類(lèi)原發(fā)性高

3、血壓的理想模型，小型豬自發(fā)性冠狀動(dòng)脈粥樣硬化是研究人類(lèi)冠心病的理想模型；自發(fā)性狗類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎與人類(lèi)幼年型類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎十分相似，也是一種理想模型，等等。 與人類(lèi)完全相同的動(dòng)物自發(fā)性疾病模型畢竟不可多得，往往需要人工加以復(fù)制。為了盡量做到與人類(lèi)疾病相似，首先要注意動(dòng)物的選擇。其次，為了盡可能做到模型與人類(lèi)相似，還要在實(shí)踐中對(duì)方法不斷加以改進(jìn)。 如果動(dòng)物模型與臨床情況不相似，在動(dòng)物身上有效治療方案就不一定能用于臨床，反之亦然。第5頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2762、重復(fù)性 理想的人類(lèi)疾病動(dòng)物模型應(yīng)該是可重復(fù)的，應(yīng)是可標(biāo)準(zhǔn)化的，不能重復(fù)的動(dòng)物模型是無(wú)法進(jìn)行應(yīng)用研究的。 為了增強(qiáng)動(dòng)物模型復(fù)制時(shí)的重

4、復(fù)性，必須在動(dòng)物品種、品系、年齡、性別、體重、健康情況、飼養(yǎng)管理；實(shí)驗(yàn)及環(huán)境條件，季節(jié)、晝夜節(jié)律、應(yīng)激、室溫、濕度、氣壓、消毒滅菌；實(shí)驗(yàn)方法步驟；藥品生產(chǎn)廠家、批號(hào)、純度規(guī)格、給藥劑型、劑量、途徑、方法；麻醉、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛等用藥情況；儀器型號(hào)、靈敏度、精確度；實(shí)驗(yàn)者操作技術(shù)熟練程度等等方面保持一致，因?yàn)橐恢滦允侵貜?fù)性的可靠保證。人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述第6頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-277 3、可靠性 復(fù)制的動(dòng)物模型應(yīng)力求可靠的反映人類(lèi)疾病，即可特異地可靠地反映該種疾病或某種機(jī)能、代謝、結(jié)構(gòu)變化。同時(shí)應(yīng)具備該種疾病的主要癥狀和體征，并經(jīng)受一系列檢測(cè) (如心電圖、臨床生理、生化指標(biāo)檢驗(yàn)、病理切片等)

5、加以證實(shí)。若易自發(fā)地出現(xiàn)某些相應(yīng)病變的動(dòng)物，就不應(yīng)加以選用，易產(chǎn)生與復(fù)制疾病相混淆的疾病者也不宜選用。 人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述第7頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2784適用性和可控性 設(shè)計(jì)復(fù)制人類(lèi)疾病動(dòng)物模型，應(yīng)盡量考慮在今后臨床能應(yīng)用和便于控制其疾病的發(fā)展，以便于開(kāi)展研究工作。人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述第8頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-279 5 5易行性和經(jīng)濟(jì)性 復(fù)制動(dòng)物模型設(shè)計(jì)，應(yīng)盡量做到方法容易執(zhí)行和合乎經(jīng)濟(jì)原則。 小動(dòng)物如大小鼠、地鼠、豚鼠等也可以復(fù)制出十分近似的人類(lèi)疾病模型。它們?nèi)菀鬃龅竭z傳背景明確，體內(nèi)微生物可加控制，模型性狀顯著且穩(wěn)定，年齡、性別、體重等可任意選擇，而且價(jià)廉易得、便于飼養(yǎng)管

6、理，因此可盡量采用。 除非不得已或一些特殊疾?。ㄈ缌〖?、脊髓灰白質(zhì)炎等）研究需要外，盡量不用靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物。除了在動(dòng)物選擇上要考慮易行性和經(jīng)濟(jì)性原則外，在模型復(fù)制的方法上、指標(biāo)的觀察上也都要注意這一原則。人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述第9頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2710動(dòng)物模型的分類(lèi)u按產(chǎn)生原因分類(lèi) u按系統(tǒng)范圍分類(lèi) u按模型種類(lèi)分類(lèi)人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述第10頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2711按產(chǎn)生原因分類(lèi)：1、誘發(fā)性或?qū)嶒?yàn)性動(dòng)物模型（Experimental Animal Models）2、自發(fā)性動(dòng)物模型（Spontaneous Animal Models）3、抗疾病型動(dòng)物模型（Negative A

7、nimal Model）4、生物醫(yī)學(xué)動(dòng)物模型（Biomedical Animal Model）人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述第11頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2712人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述 動(dòng)物模型的分類(lèi)按產(chǎn)生原因分類(lèi)： 1.誘發(fā)性動(dòng)物模型：又稱(chēng)為實(shí)驗(yàn)性動(dòng)物模型，是指研究者通過(guò)使用物理的、化學(xué)的、生物的或復(fù)合的致病因素作用于動(dòng)物，造成動(dòng)物組織、器官或全身一定的損害，出現(xiàn)某些類(lèi)似人類(lèi)疾病時(shí)的功能、代謝或形態(tài)結(jié)構(gòu)方面的病變。第12頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2713 誘發(fā)性疾病動(dòng)物模型具有能在短時(shí)間內(nèi)復(fù)制出大量疾病模型，并能?chē)?yán)格控制各種條件使復(fù)制出的疾病模型適合研究目的需要等特點(diǎn)，因而為近代醫(yī)學(xué)研究所常用，特

8、別是藥物篩選研究工作所首選。但誘發(fā)模型和自然產(chǎn)生的疾病模型在某些方面畢竟存在一定差異。因此在設(shè)計(jì)誘發(fā)性動(dòng)物模型要盡量克服其不足，發(fā)揮其特點(diǎn)人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述第13頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2714人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述 物理因素 ：機(jī)械損傷、放射線損傷、氣壓、手術(shù) 化學(xué)因素 ：化學(xué)藥致癌、化學(xué)毒物中毒、強(qiáng)酸強(qiáng)堿燒傷、某種有機(jī)成分的增加或減少導(dǎo)致?tīng)I(yíng)養(yǎng)性疾病等。 生物因素 ：細(xì)菌、病毒、寄生蟲(chóng)、生物毒素等。 復(fù)合因素 ：應(yīng)用單一因素誘發(fā)難以達(dá)到實(shí)驗(yàn)的要求時(shí)第14頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2715人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述 2.自發(fā)性動(dòng)物模型：指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物未經(jīng)任何人工處置，在自然條件下動(dòng)物自然發(fā)生、或由

9、于基因突變的異常表現(xiàn)通過(guò)遺傳育種保留下來(lái)的動(dòng)物模型。 利用這類(lèi)動(dòng)物疾病模型來(lái)研究人類(lèi)疾病的最大優(yōu)點(diǎn)，就是疾病的發(fā)生、發(fā)展與人類(lèi)相應(yīng)的疾病很相似，均是在自然條件下發(fā)生的疾病，其應(yīng)用價(jià)值就很高，但是這類(lèi)模型來(lái)源較困難，不可能大量應(yīng)用。第15頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2716 一般自發(fā)性動(dòng)物模型的獲得是通過(guò)對(duì)各種動(dòng)物的疾病進(jìn)行大規(guī)模的普查，以發(fā)現(xiàn)自發(fā)性疾病的病例，然后通過(guò)遺傳育種，將這種自發(fā)性疾病模型保持下來(lái)，并培育成具有特定遺傳性狀的突變系，以供研究。近年來(lái)許多動(dòng)物遺傳病的模型就是通過(guò)這樣的方法建立的。在這方面小鼠和大鼠的各種自發(fā)性疾病模型開(kāi)發(fā)和應(yīng)用得最多。如:自發(fā)性高血壓大鼠、肥胖癥小鼠、腦中

10、風(fēng)大鼠等。這類(lèi)模型在遺傳病、代謝病、免疫缺陷病、內(nèi)分泌疾病和腫瘤等方面的應(yīng)用正日益增多。人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述第16頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2717人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述 突變系的遺傳疾病很多，可分為代謝性疾病、分子疾病和特種蛋白質(zhì)合成異常性疾病。近交系的腫瘤模型隨實(shí)驗(yàn)動(dòng)物種屬、品系的不同，其腫瘤的發(fā)生類(lèi)型和發(fā)病率有很大差異。第17頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2718人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述 必須指出，以上兩種動(dòng)物模型各有其優(yōu)缺點(diǎn)。事實(shí)上很多疾病可用不同方式獲得。例如已知有不少自發(fā)性腫瘤模型，也可用各種致癌劑誘發(fā)產(chǎn)生腫瘤模型。值得注意的是它們?cè)诎l(fā)病機(jī)理和疾病內(nèi)在特征方面存在著各自的特點(diǎn)。如自發(fā)性腫

11、瘤和誘發(fā)性腫瘤對(duì)藥物的敏感性有明顯區(qū)別。此外，大部分自發(fā)性動(dòng)物模型是通過(guò)人為定向培育而成的，畢竟不同于人類(lèi)自然發(fā)病情況，因此，自發(fā)和誘發(fā)模型所具有的優(yōu)缺點(diǎn)只是相對(duì)的。對(duì)使用者來(lái)說(shuō)，最重要的是所選擇的模型究竟能否達(dá)到研究目的。第18頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2719 3.抗病性動(dòng)物模型: 是指特定的疾病不會(huì)在某種動(dòng)物身上發(fā)生，從而可以用來(lái)探討為何這種動(dòng)物對(duì)該疾病有天然的抵抗力。如哺乳動(dòng)物均易感染血吸蟲(chóng)病，但居住于洞庭湖流域的東方田鼠卻不能復(fù)制血吸蟲(chóng)病。 4.生物醫(yī)學(xué)動(dòng)物模型: 是指利用健康動(dòng)物生物學(xué)特征來(lái)提供人類(lèi)疾病相似表現(xiàn)的疾病模型。如：兔胸腔的特殊結(jié)構(gòu)。人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述第19頁(yè)/共86

12、頁(yè)2021-10-2720人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述 按系統(tǒng)范圍分類(lèi) 1.疾病的基本病理過(guò)程動(dòng)物模型：是指各種疾病共同性的一些病理變化過(guò)程模型。 疾病的基本病理過(guò)程：致病因素在一定條件下作用于動(dòng)物，使動(dòng)物組織、器官或全身造成一定病理?yè)p傷，出現(xiàn)各種功能、代謝和形成結(jié)構(gòu)的變化，其中有些變化是各種疾病都可能發(fā)生的，不是各種疾病所特有的一些變化，如發(fā)熱、缺氧、水腫、炎癥、休克、彌漫性血管內(nèi)凝血、電解質(zhì)紊亂、酸堿平衡障礙等。第20頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2721 2.各系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型：是指與人類(lèi)各系統(tǒng)疾病相應(yīng)的人類(lèi)疾病動(dòng)物模型。 如心血管、呼吸、消化、造血、泌尿、生殖、內(nèi)分泌、神經(jīng)、運(yùn)動(dòng)等系統(tǒng)疾病模型，

13、還包括各種傳染病、寄生蟲(chóng)病、地方病、維生素缺乏病、物理?yè)p傷性疾病、職業(yè)病和化學(xué)中毒性疾病的動(dòng)物模型。人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述第21頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2722（三）按模型種類(lèi)分類(lèi)疾病模型的種類(lèi)包括整體動(dòng)物、離體器官和組織、細(xì)胞株等。整體動(dòng)物模型是常用的疾病模型之 一，也是研究人類(lèi)疾病的常用手段。人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述第22頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2723人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述 按中醫(yī)藥體系分類(lèi) 根據(jù)中醫(yī)證分類(lèi)，動(dòng)物模型可分為陰虛、陽(yáng)虛動(dòng)物模型、氣虛動(dòng)物模型、血虛動(dòng)物模型、脾虛和腎虛動(dòng)物模型、厥脫證動(dòng)物模型等。 按中藥理論分類(lèi)，人類(lèi)疾病動(dòng)物模型包括解表藥動(dòng)物模型，清熱藥、瀉下藥、祛風(fēng)濕藥、利

14、水滲濕、溫里藥、止血藥、止咳藥、化痰藥、平喘藥、安神藥、平肝息風(fēng)藥、補(bǔ)益藥、理氣藥、活血化瘀藥等動(dòng)物模型。 第23頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2724人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述 影響動(dòng)物模型的因素1、致模因素對(duì)動(dòng)物模型復(fù)制的影響 應(yīng)明確研究目的，清楚相應(yīng)人類(lèi)疾病的發(fā)生、臨床癥狀和發(fā)病機(jī)制，熟悉致病因素對(duì)動(dòng)物所產(chǎn)生的臨床癥狀和發(fā)病情況，致病因素的劑量。 2、動(dòng)物因素對(duì)動(dòng)物模型復(fù)制的影響 品種、品系、年齡體重、性別、生理狀態(tài)等第24頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2725 3、實(shí)驗(yàn)技術(shù)因素對(duì)動(dòng)物模型的影響實(shí)驗(yàn)季節(jié)、晝夜過(guò)程、麻醉深度、手術(shù)技巧、實(shí)驗(yàn)給藥、對(duì)照組的影響等。 4、環(huán)境因素和營(yíng)養(yǎng)因素對(duì)復(fù)制動(dòng)物模型

15、的影響 復(fù)制模型的成敗往往與環(huán)境的改變有密切關(guān)系。擁擠、飲食改變、過(guò)度光照、噪音、屏障系統(tǒng)的破壞等，任何一項(xiàng)被忽視都可能給模型動(dòng)物帶來(lái)嚴(yán)重影響。人類(lèi)疾病動(dòng)物模型概述第25頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2726動(dòng)物模型的制作1、查找文獻(xiàn)并咨詢(xún)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)所需動(dòng)物和條件是 否可行，了解前人所積累的經(jīng)驗(yàn)，避免低水平的重復(fù)或缺乏科學(xué)依據(jù)的盲動(dòng)所造成人力 物力的浪費(fèi)；2、從動(dòng)物品種、品系、年齡、性別、體重、生物學(xué)特點(diǎn)、動(dòng)物微生物污染級(jí)別等方面選取最可比擬的動(dòng)物，不可認(rèn)為選越高級(jí)動(dòng)物可比性越高。 第26頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2727第二節(jié)第二節(jié) 免疫免疫缺陷動(dòng)物缺陷動(dòng)物第27頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2

16、728 免疫缺陷動(dòng)物 是指由于先天性遺傳突變或用人工方法造成一種或多種免疫系統(tǒng)組成成分缺陷的動(dòng)物。 免疫缺陷動(dòng)物的分類(lèi)先天性免疫缺陷動(dòng)物：T淋巴細(xì)胞功能缺陷動(dòng)物：裸小鼠、裸大鼠B淋巴細(xì)胞功能缺陷動(dòng)物：CBA/N小鼠NK細(xì)胞功能缺陷動(dòng)物：Beige小鼠聯(lián)合免疫缺陷動(dòng)物：SCID小鼠獲得性免疫缺陷及其相關(guān)的AIDS動(dòng)物模型：小鼠AIDS模型、猴AIDS模型、黑猩猩的HIV感染模型第28頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2729 裸小鼠(nu)指先天性無(wú)胸腺的裸小鼠。導(dǎo)致這種異常狀態(tài)的裸基因（nu）是一個(gè)隱性突變基因，位于11號(hào)常染色體上。目前裸基因已經(jīng)回交到不同的小鼠品系中，即導(dǎo)入不同的遺傳背景。帶有裸

17、基因的小鼠品系包括：NIH-nu、BALB/c-nu、C3H-nu和C57BL/6-nu等。各個(gè)品系裸小鼠因其遺傳背景不同，所表現(xiàn)的細(xì)胞免疫反應(yīng)和實(shí)驗(yàn)檢查指標(biāo)也不盡相同。第29頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2730裸小鼠(nu) 帶有純合裸基因（nu/nu）的小鼠具有的主要特征：全身無(wú)毛，呈裸體外表，無(wú)胸腺，缺乏成熟T細(xì)胞的輔助、抑制及殺傷功能，B細(xì)胞功能基本正常。成年裸小鼠較普通鼠具有較高的NK細(xì)胞活性。 裸小鼠的應(yīng)用：腫瘤學(xué)、微生物學(xué)、免疫學(xué)、寄生蟲(chóng)學(xué)、毒理學(xué)等基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)的研究中第30頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2731第31頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2732 裸大鼠（ rnu） 基因符號(hào)為

18、rnu，純合子裸大鼠（rnu/rnu）具有與裸小鼠基本相似的特征，無(wú)胸腺，缺乏功能性T淋巴細(xì)胞，B細(xì)胞功能基本正常，NK細(xì)胞活力增強(qiáng)，抵抗力差，易患呼吸道疾病。 裸大鼠軀干部仍有稀少毛而并非象裸小鼠樣完全無(wú)毛，頭部及四肢毛更多。 裸大鼠同樣能接受人類(lèi)正常組織和腫瘤異種移植，因其體型較大，可提供相對(duì)較多的血樣及瘤組織，也易于進(jìn)行外科手術(shù)，在腫瘤研究上更方便。第32頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2733第三節(jié)第三節(jié) 腫瘤疾病動(dòng)物模型腫瘤疾病動(dòng)物模型分類(lèi)：1.自發(fā)性腫瘤（spontaneous tumorspontaneous tumor）動(dòng)物模型： 指實(shí)驗(yàn)動(dòng)物未經(jīng)任何有意識(shí)的人工處置，在自然情況下發(fā)

19、生的腫瘤所形成的模型。2.2.誘發(fā)性腫瘤（induced tumorinduced tumor）動(dòng)物模型： 是使用致癌因素在實(shí)驗(yàn)條件下誘發(fā)動(dòng)物發(fā)生腫瘤的動(dòng)物模型。3.3.移植性腫瘤（transplant tumortransplant tumor）動(dòng)物模型： 指將動(dòng)物或人體腫瘤移植同種或異種動(dòng)物連續(xù)傳代而培養(yǎng)出的模型。 第33頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2734誘發(fā)性腫瘤模型：1.方法：1)1) 原位誘發(fā)：指將致癌物直接與動(dòng)物靶組織或靶器官接觸而誘發(fā)該組織或器官發(fā)生腫瘤，接觸方法可通過(guò)涂抹、灌注、喂養(yǎng)或埋置等 。2)2) 異位誘發(fā)：將與致癌物接觸后的動(dòng)物組織或器官埋置于該動(dòng)物或另一正常動(dòng)物皮下

20、而產(chǎn)生的該組織或器官的腫瘤。異位誘發(fā)腫瘤具有易于觀察和取材的優(yōu)點(diǎn)。2.2.誘癌物： 放射線局部照射、化學(xué)致癌物（烷化劑、亞硝胺類(lèi)、芳香胺類(lèi)）、生物毒素（黃曲酶毒素）、細(xì)菌（幽門(mén)螺桿菌）、腫瘤病毒感染。 第34頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2735舉例：1.1.二乙基亞硝胺(DEN)誘發(fā)小鼠肺癌： 采用小鼠皮下注射1DEN水溶液，每周一次，(每次劑量為56mg/kg體重，總劑量為868mg)。觀察時(shí)間為100d左右。此模型誘發(fā)率約40%。若將DEN總劑量增到1176mg時(shí)，半年誘發(fā)率可達(dá)90以上。2.2.亞胺基偶氮甲苯(OAAT)(OAAT)誘發(fā)小鼠肝癌： 用l lOAATOAAT苯溶液涂于動(dòng)物兩

21、肩胛間皮膚上，隔日1 1次，每次2 23 3滴、一般涂100100次。7 7個(gè)月以上誘發(fā)肝腫瘤約5555。3.3.黃曲霉素誘發(fā)大鼠肝癌： 在 大 鼠 飼 料 中 加 入 黃 曲 霉 素 ， 含 0 . 0 1 1 -0 . 0 1 1 -0.015ppm0.015ppm，喂養(yǎng)6 6個(gè)月，誘發(fā)率達(dá)8080。 第35頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2736注意：1.1. 必須適當(dāng)選擇：致瘤方法、動(dòng)物種系、致癌物種類(lèi)與溶劑、給藥劑量與途徑及觀察時(shí)間等盡量簡(jiǎn)便可行，有較好的重復(fù)性，并有利于與人腫瘤比較。2.2. 方法和種系應(yīng)對(duì)所用致瘤物敏感。3.3. 致癌物的劑量應(yīng)能保證動(dòng)物存活率較高、誘發(fā)期較短而又可誘

22、發(fā)較高頻率的腫瘤 第36頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2737移植性腫瘤模型：方法：1.實(shí)體瘤移植 腫瘤細(xì)胞皮下接種7-10d處死荷瘤動(dòng)物選擇生長(zhǎng)良好、無(wú)壞死液化的瘤組織2-3mm3+生理鹽水或其它營(yíng)養(yǎng)液無(wú)菌套管針抽吸接種同種受體動(dòng)物右前腋窩皮下。2. 腹水瘤移植： 腫瘤細(xì)胞皮下接種7-10d處死荷瘤動(dòng)物取腹水含葡萄糖平衡鹽水稀釋至適當(dāng)濃度腹腔注射（腹水瘤）或皮下注射（實(shí)體瘤）。第37頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2738評(píng)價(jià):1. 同時(shí)接種同樣量的瘤細(xì)胞，生長(zhǎng)速度較一致，個(gè)體差異較小。2. 接種成活率近100%100%。3.3. 對(duì)宿主影響相類(lèi)似。4.4. 可連續(xù)傳代，試驗(yàn)周期短，條件易于控制。

23、5.5. 主要問(wèn)題是宿主對(duì)移植物產(chǎn)生免疫排斥反應(yīng)。第38頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2739第四節(jié)第四節(jié) 心血管疾病動(dòng)物模型心血管疾病動(dòng)物模型高脂飼料誘發(fā)高血脂及動(dòng)脈粥樣硬化癥模型非喂養(yǎng)法誘發(fā)高血脂及動(dòng)脈粥樣硬化癥模型第39頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2740高脂飼料誘發(fā)高血脂及動(dòng)脈粥樣硬化癥模型 造模機(jī)制：1.1.動(dòng)物飼料中加入過(guò)量的膽固醇和脂肪，飼養(yǎng)一定時(shí)間后，其主動(dòng)脈及冠狀動(dòng)脈處逐漸形成粥樣硬化斑塊，并出現(xiàn)高血脂癥。2.2.高膽固醇和高脂飲食，加入少量膽酸鹽，可增加膽固醇的吸收，如再加入甲狀腺抑制藥- - -甲基硫氧嘧啶或丙基硫氧嘧啶可進(jìn)一步加速病變的形成。 第40頁(yè)/共86頁(yè)2021-

24、10-2741造模方法: : 1. 1.小型豬： 用1 12 2高脂食物飼喂6 6個(gè)月以上即可形成動(dòng)脈粥樣硬化病變。 評(píng)價(jià)：形成動(dòng)脈粥樣硬化病變特點(diǎn)及分布都與人類(lèi)近似。 2.2.猴： 選用3.53.510.5kg10.5kg，3 36 6歲的恒河猴飼喂高脂飼料( (5050麥粉、8 8玉米粉、8 8麥麩、1 1膽固醇、8 8蛋黃、8 8豬油、1717白糖及適量的小蘇打和食鹽）。1 1個(gè)月后造成猴的實(shí)驗(yàn)性高血脂癥。血清膽固醇較正常時(shí)升高3.13.13.23.2倍。 評(píng)價(jià)：猴的膽固醇代謝、血漿脂蛋白組成及高脂血癥與人相似，是較理想的模型。 第41頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2742 3. 3. 兔

25、： 選用2kg2kg左右體重，每天膽固醇0.3g0.3g，4 4個(gè)月后形成主動(dòng)脈粥樣硬化斑塊；劑量增至0.5g0.5g，3 3個(gè)月出現(xiàn)斑塊；增至1.0g1.0g，可縮為2 2個(gè)月。在飼料中加入1515蛋黃粉、0.50.5膽固醇和5%5%豬油，3 3周后，將膽固醇減去再喂3 3周，可使斑塊發(fā)生率達(dá)100100，血清膽固醇可升高至2000mg%2000mg%。 評(píng)價(jià)：對(duì)喂飼膽固醇非常敏感，在短期內(nèi)便能出現(xiàn)明顯的病變。因?yàn)橥脤?duì)外源性膽固醇的吸收率可高達(dá)75759090，對(duì)高血脂的清除能力低( (靜脈注射膽固醇后，高脂血癥可持續(xù)3 34 4天) )。 但兔作模型不夠理想，主要表現(xiàn)為血源性泡沫細(xì)胞增多，

26、且病變分布與人的病變也有差異。第42頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2743 4. 4.大鼠： 配方一飼料( (1 1-4-4膽固醇、1010豬油，0.2%0.2%甲基硫氧嘧啶、8989-86-86基礎(chǔ)飼料) )，喂服7 71010天?？尚纬筛吣懝檀佳Y。 配方二飼料( (1010蛋黃粉、5 5豬油、0.50.5膽鹽、8585基礎(chǔ)飼料) )，喂服7 7天可形成高膽固醇血癥。 評(píng)價(jià)：飼養(yǎng)方便、抵抗力強(qiáng)、食性與人相近。所形成的病理改變與人早期者相似，不易形成似人體的后期病變，較易形成血栓。第43頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2744 5. 5.小鼠： 雄性小鼠飼以1 1膽固醇及1010豬油的 高 脂 飼

27、 料 ， 7 7 天 后 血 清 膽 固 醇 即 升 為34334315mg15mg；若在飼料中再加入0.30.3的膽酸，連飼7 7天，血清膽固醇可高達(dá)53053036mg36mg 評(píng)價(jià)：容易飼養(yǎng)和節(jié)省藥品等優(yōu)點(diǎn)，但是取血不便，難做動(dòng)態(tài)觀察，所以較少采用。第44頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2745 6. 6.雞： 4 48 8周的萊克亨雞，在飼料中加入1 1-2-2膽固醇或1515蛋黃粉，再加5 51010豬油，經(jīng)過(guò)6 61010周，血膽固醇即升至1000mg1000mg4000mg4000mg，胸主動(dòng)脈斑塊發(fā)生率達(dá)100100。 評(píng)價(jià)：雞為雜食動(dòng)物，僅在普通飼料中加入膽固醇，就可形成動(dòng)脈粥樣

28、硬化斑塊。病變發(fā)生較快，在斑塊中有時(shí)伴有鈣化和形成潰瘍。第45頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2746非喂養(yǎng)法誘發(fā)高血脂及動(dòng)脈粥樣硬化癥模型 造模方法: : 1. 1.免疫法： 將大鼠主動(dòng)脈勻漿給兔注射，可引起血膽固醇、脂蛋白及甘油三酯升高。給兔注射馬血清10ml/kg/10ml/kg/次，共4 4次，每次間隔1717天。 評(píng)價(jià): : 動(dòng)脈內(nèi)膜損傷率為8888，冠狀動(dòng)脈亦有粥樣硬化的病變，若同時(shí)給予高膽固醇飼料，病變更加明顯。第46頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2747 2. 2.兒茶酚胺法： 給兔靜脈滴注去甲腎上腺素lmg/24hlmg/24h，時(shí)間為30min30min。一種方法是先滴15min

29、15min，休息5min5min后再滴15min15min。另一種方法是每次點(diǎn)滴5min5min和休息5min5min，反復(fù)6 6次。 評(píng)價(jià): : 持續(xù)兩周，均可引起主動(dòng)脈病變，呈現(xiàn)血管壁中層弱性纖維拉長(zhǎng)、劈裂或斷裂，病變中出現(xiàn)壞死及鈣化。第47頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2748 3. 3.半胱氨酸法： 給兔皮下注射同型半胱氨酸硫代內(nèi)酯每天202025mg/kg(25mg/kg(以5 5葡萄糖溶液配成lmg/mllmg/ml的濃度) )，連續(xù)20202525天。 評(píng)價(jià)： 成年兔及幼兔均可出現(xiàn)動(dòng)脈粥樣硬化的典型病變。冠狀動(dòng)脈管腔變窄、動(dòng)脈壁內(nèi)膜肌細(xì)胞增生、纖維狀異物質(zhì)。如同時(shí)在飼料中加入202

30、0的膽固醇，則出現(xiàn)顯著的動(dòng)脈粥樣硬化病變。第48頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2749 4. 4.表面活化劑法： 給大鼠腹腔注射Troton WRl339 300mg/kgTroton WRl339 300mg/kg體重。 評(píng)價(jià): : 給藥9h9h后可使血清膽固醇升高3 34 4倍；20h20h后雄性大鼠血清膽固醇仍為正常的3-43-4倍，而雌性大鼠卻為6 6倍左右。用藥后24h24h左右升脂作用達(dá)最高點(diǎn)，48h48h左右恢復(fù)正常。其中以甘油三酯升高最強(qiáng)，其次是磷脂、游離膽固醇，對(duì)膽固醇酯沒(méi)有影響。第49頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2750第五節(jié)第五節(jié) 呼吸、消化疾病動(dòng)物模型呼吸、消化疾病動(dòng)物模

31、型肝纖維化動(dòng)物模型支氣管哮喘動(dòng)物模型第50頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2751 肝纖維化動(dòng)物模型 模型概述：1.1.任何可引起肝損傷的因素長(zhǎng)期、反復(fù)作用于肝臟，均可產(chǎn)生肝細(xì)胞變性、壞死，繼而肝細(xì)胞再生和纖維組織增生，導(dǎo)致肝纖維化。2.2.已有化學(xué)性損傷、免疫性、生物學(xué)、酒精性和營(yíng)養(yǎng)性肝纖維化模型。每種方法因致病因素不同，給藥途徑不同，產(chǎn)生肝硬化的機(jī)理、纖維化出現(xiàn)早晚、穩(wěn)定性、出現(xiàn)率、重復(fù)性及機(jī)體自然患病過(guò)程相似程度等都不盡相同。 第51頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2752造模方法： 1.1.免疫法： 免疫性肝纖維化產(chǎn)生的機(jī)理是型變態(tài)反應(yīng)引起，白蛋白和血清的大分子物質(zhì)，作為異種抗原進(jìn)入大鼠體內(nèi)后

32、，刺激其產(chǎn)生相應(yīng)的抗體，當(dāng)抗原再次進(jìn)人機(jī)體后抗原抗體結(jié)合，形成抗原抗體免疫復(fù)合物(IC)(IC)，抗原的反復(fù)、長(zhǎng)期刺激，過(guò)量的免疫復(fù)合物來(lái)不及被清除，沉積于肝臟的血管壁內(nèi)外，引起血管炎，造成肝損傷。反復(fù)導(dǎo)致肝細(xì)胞變性、壞死，再生，纖維增生等變化，最后發(fā)展為肝纖維化、肝硬化。 動(dòng)物選用雄性WistarWistar大鼠，體重130g130g左右。取豬血清0.5ml0.5ml，腹腔內(nèi)注射，每周2 2次，共8 8次( (豬血清的制備：取新鮮豬血，離心制血清，濾過(guò)除菌，分裝放低溫冰箱備用) )。第52頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2753 評(píng)價(jià): : 大鼠第3 3周出現(xiàn)肝細(xì)胞變性、壞死，第4 4周增生的膠

33、原纖維形成纖維束，從中央靜脈到門(mén)管區(qū)之間相互伸延，發(fā)生纖維化。 模型特點(diǎn)： 肝纖維化出現(xiàn)早，出現(xiàn)率高； 動(dòng)物整體損傷輕微，毛發(fā)、生長(zhǎng)情況正常； 纖維化組織中大量膠原增生，、型前膠原mRNAmRNA增多。 慢性活動(dòng)性肝炎患者循環(huán)免疫復(fù)合物多為陽(yáng)性，豬血清模型可用于慢性肝炎所致肝纖維化的研究，對(duì)于研究免疫復(fù)合物的形成，沉積和清除及對(duì)于防治免疫損傷性肝纖維化有效藥物的篩選，具有意義。第53頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2754 2. 2.化學(xué)性損傷法： 雄性WistarWistar大鼠，體重130g130g左右，用硫代乙酰胺腹腔內(nèi)注射，第1 1次20mg/100g20mg/100g體重，從第二次起12

34、mg/100g12mg/100g體重，每周注射2 2次，共8 8周。 評(píng)價(jià): : 第3 3周，在肝小葉間中間帶出現(xiàn)大片的肝細(xì)胞變性壞死和炎細(xì)胞浸潤(rùn)，炎細(xì)胞浸潤(rùn)、壞死細(xì)胞數(shù)和程度超過(guò)豬血清模型。6 6周后出現(xiàn)增生纖維束，纖維增生晚于和少于豬血清模型。大鼠肝纖維組織中有I I型膠原的mRNAmRNA增多。第54頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2755 3. 3.四氯化碳法： 180180200g Wistar200g Wistar或SDSD大鼠，皮下注射40%-40%-50%CCl50%CCl4 4，油溶液(0.3ml/100g)(0.3ml/100g)，每周2 2次，第2 2周始，隔日以2020-3

35、0-30酒精lmllml灌胃( (或作為唯一飲料) )，飼以單純玉米面( (混以0.50.5膽固醇) )，共1010周。 評(píng)價(jià)：第2 2周出現(xiàn)小葉中心小片狀肝細(xì)胞變性壞死，第4 4周開(kāi)始有較薄的纖維間隔形成，第6 6周肝臟間隔進(jìn)一步增厚，有假小葉形成：第8 8周形成厚的纖維間隔，分割形成假小葉。大鼠成活率60%-60%-80%80%。 該模型是目前國(guó)內(nèi)外常采用的動(dòng)物模型，可靠且復(fù)制時(shí)間短，肝纖維化進(jìn)展穩(wěn)定，適合于肝硬化過(guò)程的動(dòng)態(tài)研究。第55頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2756 支氣管哮喘動(dòng)物模型 大鼠、豚鼠和狗最常用。根據(jù)制模方式可分為：1.1.主動(dòng)免疫致敏動(dòng)物模型： 利用哺乳類(lèi)大動(dòng)物( (如

36、狗、羊和猴) )在自然狀態(tài)下感染線圓蟲(chóng)類(lèi)寄生蟲(chóng)( (主要是蛔蟲(chóng)) )，血清中長(zhǎng)期存在高滴度的抗某一寄生蟲(chóng)抗原的特應(yīng)性抗體(IgE)(IgE)，再次受到這一寄生蟲(chóng)抗原的攻擊，即迅速地產(chǎn)生抗原抗體反應(yīng)，并使呼吸道產(chǎn)生支氣管哮喘反應(yīng)；2.2.被動(dòng)免疫致敏動(dòng)物模型： 在實(shí)驗(yàn)前，用特殊的抗原及免疫輔佐劑注入動(dòng)物體內(nèi)，使動(dòng)物致敏后，制備抗血清輸入動(dòng)物使其被動(dòng)致敏，再用同一抗原進(jìn)行攻擊建立哮喘模型。 第56頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2757 卵白蛋白激發(fā)哮喘模型 造模機(jī)制： 過(guò)敏原卵白蛋白注入豚鼠體內(nèi)，其可溶性抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生IgEIgE抗體，使機(jī)體處于致敏狀態(tài)。當(dāng)豚鼠再次接觸此抗原時(shí)，IgEIgE介導(dǎo)發(fā)

37、生抗原抗體反應(yīng)，使細(xì)胞脫顆粒，釋放出活性化學(xué)物質(zhì)如組胺、嗜酸性粒細(xì)胞趨化因子等，作用于支氣管引起氣道高反應(yīng)致哮喘。 第57頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2758 鄰苯二甲酸酐(PA)(PA)致變應(yīng)性哮喘模型 機(jī)制： 苯酐是小分子化合物，屬半抗原。由于半抗原不能刺激機(jī)體產(chǎn)生免疫反應(yīng)，故需與蛋白結(jié)合成全抗原，形成新的抗原決定簇而發(fā)揮致敏作用。據(jù)此實(shí)驗(yàn)制備了兩種不同載體的苯酐全抗原即PA-HASPA-HAS和PA-PA-BSABSA。用致敏的抗血清給正常動(dòng)物注射使其致敏，并在相應(yīng)抗原吸入攻擊下同樣可誘發(fā)出哮喘。第58頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2759 血小板活性因子(PAF)(PAF)誘發(fā)哮喘模型

38、造模機(jī)制 PAFPAF是目前已知的唯一能引起氣道高反應(yīng)性炎癥介質(zhì)。PAFPAF引發(fā)哮喘發(fā)作的原因可能是PAFPAF通過(guò)嗜酸性粒細(xì)胞的活化趨向、脫顆粒、釋放嗜酸性細(xì)胞蛋白X(Epx)X(Epx)、嗜酸性細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)(ECP)和堿性蛋白等細(xì)胞毒性物質(zhì)引起氣道上皮細(xì)胞損傷和脫落。另外，激活的嗜酸性細(xì)胞本身又合成和釋放PAFPAF，使這一過(guò)程加劇，最終引起氣道高反應(yīng)性。 第59頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2760第六節(jié)第六節(jié) 內(nèi)分泌、營(yíng)養(yǎng)疾病動(dòng)物模型內(nèi)分泌、營(yíng)養(yǎng)疾病動(dòng)物模型糖尿病動(dòng)物模型缺鐵性貧血?jiǎng)游锬Ｐ途S生素D缺乏性佝僂病動(dòng)物模型第60頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2761模型概述 糖尿病

39、動(dòng)物模型復(fù)制方法主要包括5 5種：1.1.注射致高血糖因子，如生長(zhǎng)激素、胰高糖素、糖皮質(zhì)激素以及兒茶酚胺類(lèi)激素等，復(fù)制出某些繼發(fā)性糖尿病模型。2.2.注射化學(xué)物質(zhì)引起胰島細(xì)胞的損傷，如鏈脲佐菌素(STZ)(STZ)、四氧嘧啶、二苯硫代卡肥腙可造成胰島細(xì)胞不可逆損傷；環(huán)丙庚哌、天門(mén)冬素酶、6 6氨基尼克酰胺、2 2脫氧葡萄糖、甘露庚酮糖可引起細(xì)胞可逆性損傷。糖尿病動(dòng)物模型第61頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-27623.3.注射生物及生物制品引起細(xì)胞破壞，如鼠腦炎、心肌炎病毒M M型變異可誘發(fā)若干品系的成年小鼠糖尿病，ILIL1 1在一定劑量和范圍內(nèi)對(duì)細(xì)胞有選擇性細(xì)胞毒作用，導(dǎo)致IDDMIDDM。4

40、.4.手術(shù)切除胰腺的大部分或全部，并給予高糖飲食刺激，引起繼發(fā)性永久性糖尿病。5.5.篩選、引種、繁殖遺傳性及自發(fā)性糖尿病，這類(lèi)動(dòng)物模型更接近人類(lèi)糖尿病的自然起病及發(fā)展，尤其適于研究糖尿病的病因?qū)W。第62頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2763造模方法 1.1. 病毒誘發(fā)法 DBA/2DBA/2雌性小鼠，皮下接種腦炎、心肌炎病毒M M型變異株4 47 7天后出現(xiàn)明顯的高血糖，伴有血中及胰腺中胰島素含量降低。 評(píng)價(jià)： 其高血糖為特發(fā)性，伴明顯低胰島素血癥，在某些小鼠中可自然緩解，但糖耐量異常及高血糖在恢復(fù)期中仍將存在，其生化方面與人類(lèi)MODPMODP相似。第63頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-27642

41、.2.四氧嘧啶法 SDSD大鼠200g200g左右，40mg/kg40mg/kg四氧嘧啶靜脈注射1 1次，觀察血糖300mg/l300mg/l，持續(xù)2 2周可以認(rèn)為造模成功。3.3.鏈脲佐菌致糖尿病WistarWistar大鼠 鏈脲佐菌素可造成動(dòng)物胰島細(xì)胞大量壞死，通過(guò)不同給藥方法，可復(fù)制出速發(fā)型類(lèi)似NIDDMNIDDM和遲發(fā)型類(lèi)似IDDMIDDM的動(dòng)物模型。第64頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-27654.4. 高糖飼喂誘發(fā)法 選用SHR/NLHSHR/NLHCPCP大鼠5 5周齡，喂飼含5454庶糖飲食。1 1個(gè)月時(shí)，觀察到OGTTOGTT異常，6.56.5個(gè)月時(shí)胰島素反應(yīng)異常，9 9個(gè)月時(shí)可

42、見(jiàn)體重減輕，衰弱。 評(píng)價(jià)： 一些動(dòng)物品系有自發(fā)或在施加誘導(dǎo)的條件下發(fā)生糖尿病的傾向。SHR/NLH-CPSHR/NLH-CP大鼠模型某些代謝和組織病理特征與人類(lèi)非胰島素依賴(lài)性糖尿病相似，該模型還可觀察糖尿病肝腎損害。第65頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2766缺鐵性貧血?jiǎng)游锬Ｐ?缺鐵性貧血（IDAIDA）發(fā)生的主要原因是由于鐵的攝入不足和/ /或鐵丟失過(guò)多，引起機(jī)體血紅蛋白合成障礙導(dǎo)致。IDAIDA模型有大鼠、小鼠、兔、雞、貓、狗、猴等，其中以大鼠最為常用。第66頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2767 方法：1.1. 給予低鐵飲食。飼料含鐵量50mg/kg50mg/kg能滿(mǎn)足大鼠的基本需要，低鐵飼

43、料的鐵含量10mg/kg10mg/kg，標(biāo)準(zhǔn)飼料鐵含量為220-270mg/kg220-270mg/kg。飼料配方以酪蛋白或脫脂奶粉作為蛋白來(lái)源，玉米淀粉或蔗糖作為碳水化合物來(lái)源，加入植物油，混合維生素和混合無(wú)機(jī)鹽配制。近來(lái)通過(guò)絡(luò)合劑1%EDTA-2Na1%EDTA-2Na除去國(guó)產(chǎn)飼料中的鐵，取得滿(mǎn)意的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。 2.2. 給動(dòng)物逐次少量放血，造成鐵的慢性丟失。通常采用剪尾的方法，一方面放血不但引起鐵的丟失，而且還可以引起其它營(yíng)養(yǎng)素的丟失；另一方面剪尾易引起動(dòng)物感染而死亡。3.3. 低鐵飲食輔以定期少量放血。第67頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2768 評(píng)價(jià)：1.1.IDAIDA大鼠早期(Hb1

44、00g/L)(Hb100g/L)表現(xiàn)為毛發(fā)生長(zhǎng)差、脫毛、眼球腫脹突出、蒼白、興奮為主，晚期(Hb60g/L)(Hb60g/L)表現(xiàn)為倦怠、活動(dòng)減少，易感染為主；2.2.血液學(xué)及生化檢查表現(xiàn)為血紅蛋白及骨髓鐵( (功能池) )、血清濃度( (交換池) )、血清運(yùn)鐵蛋白及肝臟鐵含量( (貯存池) )均顯著低于正常對(duì)照組。其中以血紅蛋白和骨髓鐵的變化較敏感。3.3.低鐵飼料喂養(yǎng)大鼠5 5、6 6周即可復(fù)制出上述表現(xiàn)，F(xiàn)344F344、WistarWistar大鼠的反應(yīng)性?xún)?yōu)于SDSD大鼠。4.4.此模型形成期短、穩(wěn)定、可行，是研究IDAIDA的一個(gè)可靠動(dòng)物模型。 第68頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-27

45、69維生素D缺乏性佝僂病動(dòng)物模型 VitDVitD可從食物中攝取，即外源性VitDVitD，另外，皮膚中7-7-脫氫膽固醇經(jīng)日光紫外線照射后可轉(zhuǎn)變VitD3VitD3，即內(nèi)源性VitD3VitD3。阻斷飼料中維生素D D攝入減少光照，可制成維生素D D缺乏性佝僂病模型。佝僂病模型建立較方便、可行，重復(fù)性好，可采用不同動(dòng)物。第69頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2770方法：1 1大鼠 20-21d20-21d斷奶大鼠給予不含VitDVitD飼料，常見(jiàn)配方( (玉米76%76%，蛋清粉5%5%，小麥麩13%13%，碳酸鈣5%5%，食鹽1%1%或玉米76%76%，賴(lài)氨酸0.5%0.5%，小麥麩20%2

46、0%，碳酸鈣3%3%，食鹽1%1%) )。鈣、磷的含量根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)確定。大鼠飼養(yǎng)于避光環(huán)境，于2l2l、3030、5555、77d77d活殺。 大鼠在飼養(yǎng)20-30d20-30d時(shí)血清鈣磷降低，堿性磷酸酶增高；骨X X光片示先期鈣化帶模糊，干垢端毛糙，毛刷狀改變；骨病理切片顯示軟骨細(xì)胞向骨干呈舌島狀增生，骨化線參差不齊。判定模型成功。第70頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-27712 2豬 用不含維生素D D的飼料養(yǎng)母豬，避光，產(chǎn)仔后繼續(xù)原飼料喂養(yǎng)，仔豬于6-126-12周時(shí)出現(xiàn)佝僂病體征。檢測(cè)血清1-1-羥化酶活力增高，表示豬佝僂病模型成立。在治療4 4周后(1(1，25-25-(OH)(OH)2

47、 2D D3 3 lmg/d)lmg/d)，佝僂病仔豬1-1-羥化酶活力無(wú)變化。提示佝僂病仔豬為1 1，25-(OH)25-(OH)2 2D D3 3產(chǎn)生的先天缺陷。 第71頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2772第七節(jié)第七節(jié) 神經(jīng)系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型神經(jīng)系統(tǒng)疾病動(dòng)物模型疼痛動(dòng)物模型記憶動(dòng)物模型癲癇動(dòng)物模型第72頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2773疼痛動(dòng)物模型 疼痛作為主觀的感受和體驗(yàn)，是一種復(fù)雜的生理心理反應(yīng)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)只能間接借助由于傷害性刺激引起的“痛”反應(yīng)作為測(cè)量指標(biāo)。按刺激性質(zhì)可分為四大類(lèi)，即熱刺激法、電刺激法、機(jī)械刺激法和化學(xué)刺激法。 第73頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2774一、大鼠光熱法

48、 造模機(jī)制： 用小型聚光燈產(chǎn)生一定強(qiáng)度的光束，經(jīng)凸透鏡聚焦照射大鼠的尾巴或家兔鼻部以致痛，大鼠以甩尾為痛反應(yīng)指標(biāo)，家兔以甩頭為痛反應(yīng)指標(biāo)。第74頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2775 方法：1. 200g雄性大鼠，裝入固定筒內(nèi)，尾巴外露，先用75乙醇擦凈尾部，用墨汁在尾部下1/3處標(biāo)出光刺激點(diǎn)的位置(墨汁能易于吸熱)。2.調(diào)節(jié)輻射熱測(cè)痛儀的焦距，在聚焦的鼠臺(tái)檔板作標(biāo)記，使鼠尾光刺激點(diǎn)位置與檔板上標(biāo)記重合。每次實(shí)驗(yàn)于每日同一時(shí)間進(jìn)行。3.照射開(kāi)始到甩尾反應(yīng)的潛伏期為痛閾。負(fù)載電壓20V，選用潛伏期在5s以?xún)?nèi)的動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)先測(cè)3次，每次間隔5min，計(jì)算其平均值為基礎(chǔ)痛閾。4.為防止皮膚灼傷，光照截止時(shí)間10s或以潛伏期升高150為限。第75頁(yè)/共86頁(yè)2021-10-2776模型