分子生物學(xué)名詞解釋及大題總結(jié)_第1頁
分子生物學(xué)名詞解釋及大題總結(jié)_第2頁
分子生物學(xué)名詞解釋及大題總結(jié)_第3頁
分子生物學(xué)名詞解釋及大題總結(jié)_第4頁
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文檔簡介

1、學(xué)習(xí)必備歡迎下載分子生物學(xué)總結(jié)1DNA 的一級結(jié)構(gòu):指DNA 分子中核苷酸的排列順序。2DNA 的二級結(jié)構(gòu):指兩條DNA 單鏈形成的雙螺旋結(jié)構(gòu)、三股螺旋結(jié)構(gòu)以及四股螺旋結(jié)構(gòu)。3DNA 的三級結(jié)構(gòu):雙鏈DNA 進(jìn)一步扭曲盤旋形成的超螺旋結(jié)構(gòu)。4DNA 的甲基化: DNA 的一級結(jié)構(gòu)中,有一些堿基可以通過加上一個甲基而被修飾,稱為 DNA 的甲基化。甲基化修飾在原核生物 DNA 中多為對一些酶切位點(diǎn)的修飾,其作用是對自身 DNA 產(chǎn)生保護(hù)作用。真核生物中的 DNA 甲基化則在基因表達(dá)調(diào)控中有重要作用。真核生物DNA 中,幾乎所有的甲基化都發(fā)生于二核苷酸序列5-CG-3的 C 上,即 5-mCG-3

2、.5CG 島:基因組 DNA 中大部分 CG 二核苷酸是高度甲基化的 ,但有些成簇的、穩(wěn)定的非甲基化的 CG 小片段 ,稱為 CG 島,存在于整個基因組中。“CG”島特點(diǎn)是 G+C 含量高以及大部分 CG 二核苷酸缺乏甲基化。6DNA 雙螺旋結(jié)構(gòu)模型要點(diǎn):( 1) DNA 是反向平行的互補(bǔ)雙鏈結(jié)構(gòu)。( 2) DNA 雙鏈?zhǔn)怯沂致菪Y(jié)構(gòu)。螺旋每旋轉(zhuǎn)一周包含了 10 對堿基,螺距為3.4nm. DNA 雙鏈形成的螺旋直徑為2 nm。每個堿基旋轉(zhuǎn)角度為36 度。DNA 雙螺旋分子表面存在一個大溝和一個小溝,目前認(rèn)為這些溝狀結(jié)構(gòu)與蛋白質(zhì)和 DNA 間的識別有關(guān)。( 3) 疏水力和氫鍵維系 DNA 雙螺

3、旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。 DNA 雙鏈結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定橫向依靠兩條鏈互補(bǔ)堿基間的氫鍵維系, 縱向則靠堿基平面間的疏水性堆積力維持。7核小體的組成:染色質(zhì)的基本組成單位被稱為核小體, 由 DNA 和 5 種組蛋白 H1,H2A,H2B,H3和 H4 共同構(gòu)成。各兩分子的 H2A,H2B,H3 和 H4 共同構(gòu)成八聚體的核心組蛋白,DNA 雙螺旋纏繞在這一核心上形成核小體的核心顆粒。 核小體的核心顆粒之間再由 DNA 和組蛋白 H1 構(gòu)成的連接區(qū)連接起來形成串珠樣結(jié)構(gòu)。8順反子( Cistron):由結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄生成的RNA 序列亦稱為順反子。9單順反子 ( monocistron):真核生物的一個結(jié)構(gòu)基因與相應(yīng)

4、的調(diào)控區(qū)組成一個學(xué)習(xí)必備歡迎下載完整的基因,即一個表達(dá)單位,轉(zhuǎn)錄物為一個單順反子。從一條 mRNA 只能翻譯出一條多肽鏈。10多順反子 (polycistron): 原核生物具有操縱子結(jié)構(gòu), 幾個結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄在一條 mRNA 鏈上,因而轉(zhuǎn)錄物為多順反子。每個順反子分別翻譯出各自的蛋白質(zhì)。11原核生物 mRNA 結(jié)構(gòu)的特點(diǎn) :(1) 原核生物 mRNA 往往是多順反子的,即每分子 mRNA 帶有幾種蛋白質(zhì)的遺傳信息。( 2) mRNA 5端無帽子結(jié)構(gòu), 3端無多聚 A 尾。( 3) mRNA 一般沒有修飾堿基。12真核生物 mRNA 結(jié)構(gòu)的特點(diǎn):( 1) 5端有帽子結(jié)構(gòu)。即 7甲基鳥嘌呤三磷酸鳥

5、苷 m7GpppN。( 2) 3端大多數(shù)帶有多聚腺苷酸尾巴。( 3)分子中可能有修飾堿基,主要有甲基化。( 4)分子中有編碼區(qū)和非編碼區(qū)。14tRNA 的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)(1)tRNA 是單鏈小分子。(2)tRNA 含有很多稀有堿基。(3)tRNA 的 5端總是磷酸化, 5末端核苷酸往往是pG.(4)tRNA 的 3端是 CCA OH 序列。是氨基酸的結(jié)合部位。(5)tRNA 的二級結(jié)構(gòu)形狀類似于三葉草,含二氫尿嘧啶環(huán)(D 環(huán))、T環(huán)和反密碼子環(huán)。(6)tRNA 的三級結(jié)構(gòu)是倒L 型。 D 環(huán)和 T 環(huán)在 L 的拐角上。15rRNA(1)rRNA 是細(xì)胞內(nèi)含量最豐富的RNA ,它們與核糖體蛋白共同構(gòu)成

6、核糖體,后者是蛋白質(zhì)合成的場所。(2) 核糖體和 rRNA 一般都用沉降系數(shù) S 表示大小。原核生物核糖體的沉降系數(shù)為 70S,由 50S 和 30S 兩個大小亞基組成, 30S 小亞基含有 16SrRNA 和 21 種蛋白質(zhì)。 50S 大亞基含有 23S 和 5SrRNA 以及 34 種學(xué)習(xí)必備歡迎下載蛋白質(zhì)。真核生物沉降系數(shù)為80S,由大小亞基組成。 40S 小亞基含有18SrRNA 和 30 多種蛋白質(zhì)。 60SrRNA 含有 5S、5.8S 和 28SrRNA 以及大約 45 種蛋白質(zhì)。16核酶( ribozyme):某些 RNA 分子能催化自身或其他RNA 分子進(jìn)行化學(xué)反應(yīng),即具有酶

7、樣的催化活性,這類具有催化活力的RNA 稱為核酶。 核酶分為 3 類:(1) 異體催化的剪切型。( 2)自體催化的剪切型 (3)內(nèi)含子的自我剪切型。17核內(nèi)不均一 RNA(hnRNA ):真核生物轉(zhuǎn)錄生成的mRNA 前體即為 hnRNA 。這類 mRNA 前體必須經(jīng)過一系列的加工處理才能變成成熟的 mRNA 。加工過程的主要環(huán)節(jié)包括:( 1) 5端加帽 ( 2) 3端加尾 (3)內(nèi)含子的切除和外顯子的連接 (4)分子內(nèi)部的甲基化修飾 (5)核苷酸序列的編輯作用。18miRNA :是一種單鏈小分子 RNA ,廣泛存在于真核生物中,是一組不編碼蛋白質(zhì)的短序列 RNA ,其特點(diǎn)就是高度的保守性、時序

8、性和組織特異性。研究表明 miRNA 可能決定組織和細(xì)胞的功能特異性,也可能參與了復(fù)雜的基因調(diào)控,對組織的發(fā)育起重要作用。19siRNA :小干擾 RNA 。是人工合成的短的雙鏈RNA ,它可抑制細(xì)胞內(nèi)特定基因的表達(dá),導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄后基因失活。siRNA 是 RNAi 的重要工具。20反義 RNA :堿基序列正好和有意義mRNA 互補(bǔ)的 RNA 稱為反義 RNA 。這類 RNA 也是單鏈 RNA ,可與 mRNA 配對形成雙鏈,最終抑制 mRNA 作為模板進(jìn)行翻譯,這是反義 RNA 主要的調(diào)控功能。21順式作用元件( cis-acting element):真核生物基因中的調(diào)控序列被稱為順式作用元件

9、 ,包括:啟動子和上游啟動子元件,增強(qiáng)子,反應(yīng)元件, Poly(A) 加尾信號。22增強(qiáng)子( enhancer):是一段短的 DNA 序列,其中含有多個作用元件,可以特異性與轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合,增強(qiáng)基因的轉(zhuǎn)錄活性。增強(qiáng)子可以位于基因的任何位置,增強(qiáng)子的功能與其位置和方向無關(guān)。23基因: 是核酸分子中貯存遺傳信息的遺傳單位, 是指貯存有功能的蛋白質(zhì)多肽鏈或 RNA 序列信息及表達(dá)這些信息所必需的全部核苷酸序列。一個基因不僅僅包括編碼蛋白質(zhì)肽鏈或 RNA 的核酸序列,還包括保證轉(zhuǎn)錄所必需的學(xué)習(xí)必備歡迎下載調(diào)控序列及位于編碼區(qū) 5端上游的非編碼序列, 內(nèi)含子和位于編碼區(qū) 3端下游的非編碼序列。24基因組:

10、泛指一個細(xì)胞或病毒的全部遺傳信息。在真核生物體中,基因組是指一套完整單倍體 DNA 和線粒體 DNA 的全部序列,既包括編碼序列,也包括非編碼序列。25病毒基因組包括:單鏈正股RNA ,單鏈負(fù)股 RNA ,雙鏈 RNA ,雙鏈 DNA和單鏈正股 DNA 。26SARS 冠狀病毒屬于:單鏈正股 RNA 病毒。逆轉(zhuǎn)錄病毒屬于: 單鏈正股 RNA病毒。27逆轉(zhuǎn)錄病毒基因組包括三個結(jié)構(gòu)基因:gag、pol 和 env。分別編碼: 核心蛋白、逆轉(zhuǎn)錄酶和膜蛋白 。28操縱子( operon):是指數(shù)個功能上相關(guān)聯(lián)的結(jié)構(gòu)基因串聯(lián)在一起,構(gòu)成信息區(qū),連同其上游的調(diào)控區(qū)(包括啟動子和操縱序列)和下游的轉(zhuǎn)錄終止信

11、號所構(gòu)成的基因表達(dá)單位,所轉(zhuǎn)錄的 RNA 為多順反子。29質(zhì)粒:是存在于細(xì)菌染色體之外的、具有自主復(fù)制能力的環(huán)狀雙鏈DNA 分子。30質(zhì)粒的不相容性: 具有相同復(fù)制起始位點(diǎn)和分配區(qū)的兩種質(zhì)粒不能共存于一個宿主菌,這種現(xiàn)象稱為質(zhì)粒的不相容性。31轉(zhuǎn)座因子: 既可移動的基因成分, 是指能在一個 DNA 分子內(nèi)部或兩個 DNA 分子之間移動的 DNA 片段。原核生物的轉(zhuǎn)座因子包括: 插入序列、轉(zhuǎn)座子和 Mu 噬菌體 。32插入序列 : 是一類較小的沒有表型效應(yīng)的轉(zhuǎn)座因子,由一個轉(zhuǎn)位酶基因及兩側(cè)的反向重復(fù)序列組成。33轉(zhuǎn)座子:是一類較大的可移動成分,除有關(guān)轉(zhuǎn)座的基因外,至少帶有一個與轉(zhuǎn)座作用無關(guān)的并決

12、定宿主菌遺傳性狀的基因。34斷裂基因: 真核生物的結(jié)構(gòu)基因, 由若干個編碼區(qū)和非編碼區(qū)互相間隔而又連續(xù)鑲嵌而成,去除編碼區(qū)再連接后,可翻譯出由連續(xù)氨基酸組成的完整蛋白質(zhì)這些基因稱為斷裂基因。35snRNA:核內(nèi)小 RNA ,分子中尿嘧啶含量最豐富。snRNA 和核內(nèi)蛋白質(zhì)組成學(xué)習(xí)必備歡迎下載小分子核糖核蛋白體,作為RNA 剪接的場所。36啟動子:能夠被RNA 聚合酶識別并結(jié)合并起始轉(zhuǎn)錄的核苷酸序列。典型的啟動子包括 TATA 盒, CAAT 盒和 GC 盒。37反應(yīng)元件:一些信息分子的受體被細(xì)胞外信息分子激活后,能與特異的DNA序列結(jié)合,調(diào)控基因的表達(dá)。這些特異的DNA序列實(shí)際上也是順式元件,

13、由于能介導(dǎo)基因?qū)?xì)胞外的某種信號產(chǎn)生反應(yīng),被稱為反應(yīng)元件。38基因家族:指核苷酸序列或編碼產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)具有一定程度同源性的一組基因。39端粒 DNA 重復(fù)序列: TTAGGG 。微衛(wèi)星 DNA 常見重復(fù)單位 (AC) 和( TG)。40衛(wèi)星 DNA :是出現(xiàn)在非編碼區(qū)的串聯(lián)重復(fù)序列。其特點(diǎn)是具有固定的重復(fù)序列,該重復(fù)單位首尾相連形成重復(fù)序列片段,通常存在于間隔 DNA 和內(nèi)含子中。衛(wèi)星 DNA 可分為大衛(wèi)星 DNA 、小衛(wèi)星 DNA 和微衛(wèi)星 DNA 。41端粒:以線性染色體形式存在的真核基因組DNA 的末端都有一種特殊的結(jié)構(gòu),端粒。該結(jié)構(gòu)是一段DNA 序列和蛋白質(zhì)形成的一種復(fù)合體,僅在真核細(xì)胞

14、染色體末端存在。端粒的功能主要有:保護(hù)線性 DNA 的完整復(fù)制,保護(hù)染色體末端及決定細(xì)胞的壽命等。42Alu 家族:序列中有限制性內(nèi)切酶Alu 的酶切位點(diǎn)。重復(fù)單位是300bp.屬短散在核元件,為靈長類基因組所特有。43假基因:是指與某些有功能的基因結(jié)構(gòu)相似,但不能表達(dá)基因產(chǎn)物的基因。44人類基因組的四張圖譜: 遺傳圖、物理圖、序列圖和轉(zhuǎn)錄圖。遺傳圖指基因或 DNA 標(biāo)記在染色體上以遺傳距離表示的相對位置。物理圖指基因或 DNA 標(biāo)記間的實(shí)際距離。序列圖指人類基因組的全部核苷酸序列,也是最詳盡的物理圖。轉(zhuǎn)錄圖指基因圖譜。45端粒酶:由三部分組成,端粒 RNA ,端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶,端粒酶協(xié)同蛋白。

15、端粒酶兼有提供 RNA 模版和催化逆轉(zhuǎn)錄酶的功能。端粒酶通過一種爬行模型的機(jī)制維持染色體的完整。46. 半保留復(fù)制:子代細(xì)胞的 DNA ,一股單鏈從親代完整的接受過來,另一股單鏈則完全重新合成,兩個子細(xì)胞的 DNA 都和親代 DNA 堿基序列一致,這種復(fù)制方式稱為半保留復(fù)制。47. 半不連續(xù)復(fù)制:順著解鏈方向生成的子鏈,復(fù)制是連續(xù)進(jìn)行的,這股鏈稱為學(xué)習(xí)必備歡迎下載領(lǐng)頭鏈。另一股鏈因為復(fù)制方向與解鏈方向相反,不能順著解鏈方向連續(xù)延長,必須等模板鏈解開至足夠長度,然后從5-3生成引物并復(fù)制子鏈。延長過程中,又要等待下一段有足夠長度的模板再次生成引物而延長。這股不連續(xù)復(fù)制的鏈稱為隨從鏈。領(lǐng)頭鏈連續(xù)復(fù)

16、制而隨從鏈不連續(xù)復(fù)制,這就是復(fù)制的半不連續(xù)復(fù)制。48. 岡崎片段:隨從鏈的復(fù)制由于與解鏈方向相反,必須待母鏈解開足夠長度后才開始生成引物接著延長。復(fù)制中形成的不連續(xù)復(fù)制片斷就是岡崎片段。49. 滾環(huán)復(fù)制:是某些低等生物或染色體外的 DNA 的復(fù)制形式。環(huán)狀 DNA 外環(huán)打開,伸出環(huán)外作母鏈復(fù)制,內(nèi)環(huán)不打開一邊滾動一邊復(fù)制。最后,一個雙鏈環(huán)就滾動復(fù)制成兩個雙鏈環(huán)。50. TT 二聚體:在紫外線照射下,相鄰的兩個DNA 分子上的嘧啶堿基之間共價結(jié)合而成的。51. 著色性干皮?。菏怯捎?DNA 損傷修復(fù)有缺陷而造成的一種遺傳性疾病,患者有較高的皮膚癌發(fā)病傾向。對該病的研究,發(fā)現(xiàn)了一些與切除損傷部位有

17、關(guān)的蛋白質(zhì),稱為 XP 蛋白。52. 切除修復(fù): DNA 損傷修復(fù)的一種方式。通過切除損傷部位,剩下的空隙由DNA-pol I 催化 dNTP 聚合而填補(bǔ),最后由 DNA 連接酶結(jié)合裂隙。切除損傷在原核生物需 Uvr 蛋白類,真核生物需 XP 蛋白類。53. 光修復(fù):生物體內(nèi)有一種光修復(fù)酶,被光激活后能利用光所提供的能量使紫外線照射引起的嘧啶二聚體分開,恢復(fù)原來的非聚合狀態(tài),稱為光修復(fù)。54. DNA 損傷的修復(fù)類型: 光修復(fù)、切除修復(fù)、重組修復(fù)和 SOS修復(fù) 。55. 重組修復(fù)時, recA 蛋白被激活,使得 LexA 蛋白被水解。56. 突變的分子改變類型:(1)錯配 :DNA 分子上的堿

18、基配對又稱點(diǎn)突變。(2) 缺失,插入和框移 :缺失和插入都可以導(dǎo)致框移突變。 框移突變 是指三聯(lián)體密碼的閱讀方式改變,造成蛋白質(zhì)氨基酸排列順序發(fā)生改變,其后果是翻譯出的蛋白質(zhì)可能完全不同。(3)重排:DNA 分子中較大片斷的交換,稱為重組或重排。57. 點(diǎn)突變分為: 轉(zhuǎn)換和顛換。轉(zhuǎn)換是指由一種嘧啶變成另一種嘧啶,或一種嘌學(xué)習(xí)必備歡迎下載呤變成另一種嘌呤。顛換是指由嘧啶變成嘌呤,或由嘌呤換為嘧啶。58. 突變的意義:(1)突變是進(jìn)化、分化的分子基礎(chǔ)。(2)只有基因型改變的突變。(3)致死性的突變。(4)突變是某些疾病的發(fā)病基礎(chǔ)。59. D環(huán)復(fù)制:是線粒體 DNA 的復(fù)制形式。復(fù)制時需合成引物。

19、MtDNA 為雙鏈,第一個引物以內(nèi)環(huán)為模板延伸。至第二個復(fù)制起始點(diǎn)時,又合成另一個反向引物,以外環(huán)為模板進(jìn)行反向的延伸,最后完成兩個雙鏈環(huán)狀DNA 的復(fù)制。60. 逆轉(zhuǎn)錄酶有三種活性:(1)RNA 指導(dǎo)的 DNA 聚合酶活性。(2)DNA 指導(dǎo)的 DNA 聚合酶活性。(3)RNA 酶 H( RNaseH)活性。61. RNA 復(fù)制:是指某些病毒在宿主細(xì)胞中以自身 RNA 為模板,以宿主細(xì)胞中的 4 種 dNTP 為原料,按 5-3方向催化合成互補(bǔ)的 RNA 鏈,此過程稱為 RNA復(fù)制。62. 逆轉(zhuǎn)錄:是指以 RNA 為模板,利用宿主細(xì)胞中 4 種 dNTP 為原料,按 5-3 方向催化合成與

20、RNA 互補(bǔ)的 DNA 鏈的過程。63. 逆轉(zhuǎn)錄病毒復(fù)制過程:( 1)逆轉(zhuǎn)錄酶以 RNA 為模板,催化 dNTP 聚合生成 DNA 互補(bǔ)鏈,產(chǎn)物是RNA/DNA 雜化雙鏈。(2)雜化雙鏈中的 RNA 被逆轉(zhuǎn)錄酶中有RNA 酶活性的組分如RNaseH 水解 .(3)利用單鏈 DNA 為模板,由逆轉(zhuǎn)錄病毒催化合成第2 條 DNA 互補(bǔ)鏈。64. Klenow 片斷具有: DNA 聚合酶活性 和 3-5核酸外切酶活性 。65. DNA pol I 的功能:對復(fù)制中的錯誤進(jìn)行較讀,對復(fù)制和修復(fù)中出現(xiàn)的空隙進(jìn)行填補(bǔ)。66. DNA 復(fù)制的保真性依賴的機(jī)制 :(1)遵守嚴(yán)格的堿基配對規(guī)律。學(xué)習(xí)必備歡迎下載

21、(2)聚合酶在復(fù)制延長中對堿基的選擇功能。(3)復(fù)制出錯時有即時的較讀功能。67. 引發(fā)體:解螺旋酶, DnaC 蛋白,引物酶和 DNA 起始復(fù)制區(qū)域組成。68. 拓?fù)洚悩?gòu)酶作用:( 1)拓?fù)涿?I 切斷 DNA 雙鏈中的一股,使 DNA 解鏈旋轉(zhuǎn)中不致打結(jié),適當(dāng)時候又把切口封閉,使 DNA 變?yōu)樗沙跔顟B(tài)。反應(yīng)不需 ATP。( 2)拓?fù)涿?II 在無 ATP 時,切斷處于正超螺旋的 DNA 分子雙鏈某一部位,斷端通過切口使超螺旋松弛;在利用 ATP 功能的情況下,松弛狀態(tài)的 DNA又進(jìn)入負(fù)超螺旋狀態(tài),斷端在同一酶催化下連接恢復(fù)。69復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的異同:相似之處:(1)都是酶促的核苷酸聚合反應(yīng)。(

22、2)都以 DNA 為模板。(3)都需依賴 DNA 的聚合酶。(4)聚合過程中都是核苷酸之間形成磷酸二酯鍵。(5)都從 5-3方向延伸聚核苷酸鏈。(6)都遵從堿基配對規(guī)律。區(qū)別:( 1)模板。復(fù)制:兩股鏈均復(fù)制。轉(zhuǎn)錄:不對稱轉(zhuǎn)錄。( 2)原料。復(fù)制: dNTP。轉(zhuǎn)錄: NTP。( 3)酶。 復(fù)制: DNA 聚合酶。轉(zhuǎn)錄: RNA 聚合酶。( 4)產(chǎn)物。復(fù)制:子代雙鏈 DNA(半保留復(fù)制)。轉(zhuǎn)錄:mRNA, rRNA, tRNA.( 5)堿基配對。復(fù)制: A-T ,C-G。轉(zhuǎn)錄: A-U , G-C,T-A 。 .70真核生物 RNA 聚合酶轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物和對鵝膏蕈堿的反應(yīng)。( 1) RNA-pol I

23、 :轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物: 45S-rRNA對鵝膏蕈堿的反應(yīng):耐受。( 2) RNA-pol II :轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物: hnRNA對鵝膏蕈堿的反應(yīng) : 極敏感。( 3) RNA-pol III:轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物: 5S-RNA, tRNA , snRNA. 對鵝膏蕈堿的反應(yīng):中度敏感。71. 轉(zhuǎn)錄:以 DNA 一條鏈為模板,以四種NTP 為原料,在 DNA 指導(dǎo)的聚合酶學(xué)習(xí)必備歡迎下載作用下,按照堿基互補(bǔ)原則(A-U,T-A,G-C )合成 RNA 鏈的過程。72. 不對稱轉(zhuǎn)錄:轉(zhuǎn)錄時因為( 1)DNA 分子雙鏈一股鏈用作模板指引轉(zhuǎn)錄,另一股鏈不轉(zhuǎn)錄。(2) 模板鏈并非總是在同一條鏈上。故稱為不對稱轉(zhuǎn)錄。73. 原核生

24、物聚合酶組成:由四種亞基組成 2 五聚體的蛋白質(zhì)。其中 2 亞基稱為核心酶。 因子辨認(rèn)起始點(diǎn)。 決定哪些基因被轉(zhuǎn)錄。起催化作用。 起結(jié)合 DNA 模板(開鏈)作用。74 操縱子:轉(zhuǎn)錄是不連續(xù)、分區(qū)段進(jìn)行的。每一轉(zhuǎn)錄區(qū)段可視為一個轉(zhuǎn)錄單位,稱為操縱子。 操縱子包括若干個結(jié)構(gòu)基因及其上游的調(diào)控序列。 調(diào)控序列中的啟動子是 RNA 聚合酶結(jié)合模板 DNA 的部位,也是控制轉(zhuǎn)錄的關(guān)鍵部位。75 電子顯微鏡下觀察到的羽毛狀的圖形說明: 在同一 DNA 模板上,有多個轉(zhuǎn)錄同時在進(jìn)行 。在 RNA 鏈上觀察到的小黑點(diǎn)是 多聚核蛋白體 。轉(zhuǎn)錄和翻譯都在高效率的進(jìn)行。76 轉(zhuǎn)錄空泡: 由酶 -DNA-RNA 形

25、成的轉(zhuǎn)錄復(fù)合物。77 依賴 因子的轉(zhuǎn)錄終止 :因子是由相同亞基組成的六聚體,它是原核生物轉(zhuǎn)錄終止因子??山Y(jié)合轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 RNA 3端的多聚 C 特殊序列,還有 ATP 酶和解螺旋酶活性。 因子與轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物 RNA 3 端的多聚 C 結(jié)合后, 因子和 RNA 聚合酶都發(fā)生構(gòu)象改變,從而使 RNA 聚合酶停頓,解螺旋酶活性使 DNA 和 RNA 雜化雙鏈拆離,轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物從轉(zhuǎn)錄復(fù)合物中釋放。78 非依賴 因子的轉(zhuǎn)錄終止:RNA 鏈延長至終止區(qū)時,轉(zhuǎn)錄出的堿基序列隨即形成莖環(huán)結(jié)構(gòu) 。這種二級結(jié)構(gòu)是阻止轉(zhuǎn)錄繼續(xù)向下游推進(jìn)的關(guān)鍵。其機(jī)制有兩方面: 一是莖環(huán)結(jié)構(gòu)在 RNA 分子形成可能改變 RNA 聚合酶的構(gòu)象。

26、由于酶構(gòu)象的改變導(dǎo)致酶模板結(jié)合方式的改變,可使酶不再向下游移動,于是轉(zhuǎn)錄停頓。其二,轉(zhuǎn)錄復(fù)合物(酶 DNA-RNA )上有局部的 RNA/DNA 雜化雙鏈。 RNA 分子和DNA 分子都要形成自己的雙鏈,雜化鏈形成的機(jī)會不大,本來不穩(wěn)定的雜化鏈更不穩(wěn)定,轉(zhuǎn)錄復(fù)合物趨于解體。接著一串寡聚 U 是使 RNA 鏈從模板學(xué)習(xí)必備歡迎下載脫落的促進(jìn)因素,因為所有的堿基配對中以U 和 A 的配對最不穩(wěn)定。79 TFII 的功能:TFIID :TBP (TATA 結(jié)合蛋白)結(jié)合 TATA 盒。 TAF( TBP 輔助因子)輔助TBP-DNA 結(jié)合。TFIIA :穩(wěn)定 IID-DNA 復(fù)合物。TFIIB :促

27、進(jìn) RNA-pol II 結(jié)合及作為其他因子結(jié)合的橋梁。TFIIF:解螺旋酶TFIIE :ATPaseTFIIH: 蛋白激酶活性。80 轉(zhuǎn)錄起始前復(fù)合物(PIC ):是真核生物轉(zhuǎn)錄因子之間先互相辨認(rèn)結(jié)合,然后以復(fù)合體的形式與 RNA 聚合酶一同結(jié)合于轉(zhuǎn)錄起始前的 DNA 區(qū)域而成。 81 真核生物 mRNA 轉(zhuǎn)錄終止及加尾修飾真核生物 mRNA 轉(zhuǎn)錄終止后,緊接著發(fā)生加尾修飾。過程如下:在模板鏈上轉(zhuǎn)錄終止點(diǎn)上游約百個或上千個核苷酸處常有一組共同的序列 AATAAA 。此序列后接著相當(dāng)多的 GT 序列。這些序列稱為轉(zhuǎn)錄終止的修飾點(diǎn)。 轉(zhuǎn)錄越過修飾點(diǎn)后, mRNA 在修飾點(diǎn)被切斷,隨即加入 pol

28、y A 尾及帽子結(jié)構(gòu)。下游的 RNA 雖然繼續(xù)轉(zhuǎn)錄,但很快被 RNA 酶降解。因此有理由相信,帽子結(jié)構(gòu)是保護(hù) RNA 免受降解的,因為修飾點(diǎn)以后的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物無帽子結(jié)構(gòu)。82 外顯子:在斷裂基因及其初級轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物上出現(xiàn),并表達(dá)為成熟RNA 的核酸序列。83 內(nèi)含子:隔斷基因的線性表達(dá)而在剪接過程中被除去的核酸序列。84 人類最龐大的一個基因是: 抗肌萎縮蛋白基因 。85 剪接體:是由 snRNP 與 hnRNA 結(jié)合,使內(nèi)含子形成套索并拉近上下游外顯子距離的復(fù)合體。剪接體是 mRNA 剪接的場所。剪接過程的化學(xué)反應(yīng)稱為二次轉(zhuǎn)酯反應(yīng) 。86 mRNA 編輯:通過對 mRNA 中的加工,使遺傳信息在 m

29、RNA 水平上發(fā)生改變。87 tRNA 的轉(zhuǎn)錄后加工:( 1)tRNA 前體的剪接。先由核酸內(nèi)切酶進(jìn)行催化進(jìn)行剪切反應(yīng),再由連接學(xué)習(xí)必備歡迎下載酶將外顯子連接起來。( 2)加上 3端 CCA-OH 。( 3)化學(xué)修飾。包括:甲基化反應(yīng) ,使某些嘌呤變成甲基嘌呤。還原反應(yīng) ,使某些尿嘧啶還原成雙氫尿嘧啶(DHU )。轉(zhuǎn)位反應(yīng) ,尿嘧啶核苷轉(zhuǎn)變?yōu)榧倌蜞奏ず塑眨ǎC摪狈磻?yīng) ,某些腺苷酸脫氨成為次黃嘌呤核苷酸(I)。88 rRNA 的轉(zhuǎn)錄后加工(1)rRNA 前體的剪接 。45S-rRNA 經(jīng)剪接后,分出屬于小亞基的 18S rRNA ,余下的部分再剪接成 5.8S,28S rRNA 。rRNA 成

30、熟后,就在核仁上裝配,與核蛋白體蛋白質(zhì)一起形成核蛋白體,輸出胞漿。(2)化學(xué)修飾 .主要是甲基化反應(yīng)。89. 開放閱讀框架( ORF ):從 mRNA 5 端起始密碼子 AUG 到 3端終止密碼子之間的核苷酸序列,各個三聯(lián)體密碼連續(xù)排列編碼一個蛋白質(zhì)多肽鏈,稱為開放閱讀框架。90 遺傳密碼的特點(diǎn):(1)連續(xù)性 。編碼蛋白質(zhì)氨基酸序列的各個三聯(lián)體密碼連續(xù)閱讀。(2)簡并性 。除甲硫氨酸和色氨酸外,其他氨基酸都有2 個或多個密碼子為之編碼,密碼子中第三位堿基是可以不同的,這稱為密碼子的簡并性。(3)通用性 。蛋白質(zhì)生物合成的整套密碼,從原核生物到人類都通用。(4)擺動性 。反密碼與密碼之間不嚴(yán)格遵

31、守常見的堿基配對規(guī)律,尤其是密碼子的第三位堿基對反密碼子的第一位堿基,即使不嚴(yán)格配對也能辨認(rèn)配對,這種現(xiàn)象稱為擺動配對。91 原核生物翻譯起始復(fù)合物形成:( 1)核蛋白體亞基分離。核蛋白體大小亞基分離。 IF-1,IF-3 與小亞基結(jié)合,促進(jìn)大小亞基分離。( 2)mRNA 在小亞基定位結(jié)合。原核生物 mRNA 在小亞基定位涉及兩種機(jī)制。其一,在各種原核 mRNA 起始 AUG 上游約 813 核苷酸部位,存在 49 個核苷酸的一致序列,富含嘌呤堿基如AGGAGG ,稱為學(xué)習(xí)必備歡迎下載S-D 序列。而原核小亞基16S rRNA 的 3端有一段富含嘧啶的段序列如 UCCUCC ,通過與 S-D

32、序列堿基配對使mRNA 與小亞基結(jié)合。S-D 序列又稱核蛋白體結(jié)合位點(diǎn)(RBS )。其二,mRNA 上緊接 S-D序列后的小核苷酸序列可被核蛋白體小亞基蛋白rpS-1 識別結(jié)合。( 3)起始氨基酰 tRNA 的結(jié)合。起始 fMet-tRNA ifMet 和 GTP 結(jié)合的 IF-2一起,識別結(jié)合對應(yīng)小亞基 P 位的 mRNA 起始密碼 AUG ,起始時 A 位被 IF-1 占據(jù),不與任何氨基酰 tRNA 結(jié)合。( 4)核蛋白體大亞基結(jié)合。上述結(jié)合 mRNA 、fMet-tRNA ifMet 的小亞基再與核蛋白體大亞基結(jié)合, 同時 IF2 結(jié)合的 GTP 水解釋能,促使 3 種 IF釋放,形成由

33、完整核蛋白體、 mRNA 、起始氨基酰 tRNA 組成的翻譯起始復(fù)合物。此時,結(jié)合起始密碼 AUG 的 fMet-tRNA ifMet 占據(jù) P 位,而 A 位空留,對應(yīng) mRNA 上 AUG 后的下一組三聯(lián)體密碼,準(zhǔn)備相應(yīng)氨基酰 tRNA 的進(jìn)入。92 肽鏈的延長。(1)進(jìn)位。核糖體 A 位上 mRNA 密碼子所規(guī)定的氨酰 tRNA 進(jìn)入核糖體 A 位上稱為進(jìn)位。這一過程需延長因子 EF T 的參與。延長因子有三種:1 EF-Tu. 功能:協(xié)助氨基酰 tRNA 進(jìn)入核糖體。與氨基酰 tRNA 以及 GTP 結(jié)合形成 EF-Tu-GTP- 氨基酰 -tRNA, 將氨基酰 -tRNA 轉(zhuǎn)運(yùn)到核糖

34、體的 A 位。2EF-Ts. 功能:促進(jìn) EF-Tu-GTP 的再生。 EF-Tu-GTP 在參加一輪核糖體循環(huán)后轉(zhuǎn)變?yōu)?EF-Tu-GDP ,EF-Ts 使 EF-Tu-GDP 再轉(zhuǎn)變成EF-Tu-GTP ,后者可被再利用。3 EF-G. 功能:促進(jìn)肽酰 -tRNA 移位。促進(jìn) mRNA- 肽酰 -tRNA 由 A位移到 P 位,促進(jìn) tRNA 的釋放。(2) 成肽。在轉(zhuǎn)肽酶的催化下, P 位上的肽?;c A 位上的氨基酰基成肽,成肽反應(yīng)在 A 位進(jìn)行,卸載的 tRNA 仍在 P 位。(3)轉(zhuǎn)位。在轉(zhuǎn)位酶的催化下,新生肽鏈-tRNA 連同 mRNA 從 A 位移到 P位,而卸載的 tRNA

35、移入 E 位。 A 位空留并對應(yīng)下一組三聯(lián)體密碼。93 終止因子:又稱釋放因子(RF)。其功能是識別mRNA 上的終止密碼子,學(xué)習(xí)必備歡迎下載終止肽鏈的合成并釋放出肽鏈。原核生物中釋放因子是RF-1,RF-2,RF-3. RF-1識別密碼子 UAA 及 UAG ,RF-2 能識別 UAA及 UGA 。RF-3 結(jié)合 GTP ,并能促進(jìn) RF-1,RF-2 與核糖體結(jié)合。94 原核肽鏈終止過程:肽鏈延長到 mRNA 終止密碼在核蛋白體 A 位出現(xiàn),終止密碼子不能被任何氨基酰 -tRNA 識別進(jìn)位。 RF-1,RF-2 進(jìn)入 A 位,識別結(jié)合終止密碼。 RF-1 或 RF-2 任一釋放因子結(jié)合終止

36、密碼后都可觸發(fā)核蛋白體構(gòu)象改變,誘導(dǎo)轉(zhuǎn)肽酶轉(zhuǎn)變?yōu)轷ッ富钚浴J剐律逆溑c結(jié)合在 P 位的 tRNA 間酯鍵水解,將合成的肽鏈釋出。 再促使 mRNA 、卸載 tRNA 及 RF 從核蛋白體脫離。 RF-3 有 GTP 酶活性,能介導(dǎo)RF-1,RF-2 與核蛋白體的相互作用。95 分子伴侶:分子伴侶是細(xì)胞中的一類保守蛋白質(zhì),可識別肽鏈的非天然構(gòu)象,促進(jìn)各功能域和整體蛋白質(zhì)的正確折疊。細(xì)胞中至少有兩類分子伴侶家族:熱休克蛋白和伴侶素。96 蛋白質(zhì)合成后的加工:(1)新生肽鏈的折疊 。(2)一級結(jié)構(gòu)的修飾 。包括: 肽鏈 N 端的修飾 ,個別氨基酸的修飾 ,多肽鏈的水解修飾 。(3)空間結(jié)構(gòu)的修飾 。

37、包括: 亞基聚合 ,輔基連接 ,疏水脂鏈的共價連接 。97 起始因子 :(1) IF-1. 能促進(jìn) IF-2 、IF-3 的活化。fMet(2) IF-2. 促進(jìn) fMet-tRNA i30SGTP(3) IF-3. 功能是使30S亞基從不具活性的核糖體釋放,輔助mRNA與小亞基結(jié)合,并阻止大小亞基重新聚合。98 信號假說機(jī)制:這一假說認(rèn)為,分泌性蛋白初級產(chǎn)物的N-端有信號肽結(jié)構(gòu)。 在分泌性蛋白合成中,信號肽一出現(xiàn),就被信號肽識別粒子與其受體對接蛋白結(jié)合,促使膜通道開放,信號肽帶動合成中的蛋白質(zhì)沿通道穿過膜,信號肽在沿通道折回膜內(nèi)時,被位于膜外側(cè)的信號肽酶切斷,使成熟的蛋白質(zhì)釋放到細(xì)胞外。99

38、 抗生素類作用位點(diǎn):學(xué)習(xí)必備歡迎下載四環(huán)素類:作用于核蛋白體小亞基,抑制氨基酰-tRNA 與小亞基結(jié)合。鏈霉素、卡那霉素:作用與核蛋白體小亞基,改變構(gòu)象引起讀碼錯誤。氯霉素:作用與核蛋白體大亞基。抑制轉(zhuǎn)肽酶,阻斷延長。紅霉素:作用與核蛋白體大亞基。抑制轉(zhuǎn)肽酶,妨礙轉(zhuǎn)位。放線菌酮:作用與真核核蛋白體大亞基。抑制轉(zhuǎn)肽酶,阻斷延長。嘌呤霉素:作用與真核、原核核蛋白體。屬氨基酰 -tRNA 類似物,進(jìn)位后引起未成熟肽鏈脫落。100 白喉毒素作用機(jī)制 :可使真核生物延長因子eEF-2 發(fā)生 ADP 糖基化而失活。干擾素作用機(jī)理 :(1)誘導(dǎo)特異蛋白激酶活化,該活化的激酶使真核主要的起始因子eIF2 磷酸

39、化失活,從而抑制病毒蛋白質(zhì)的合成。(2)干擾素與雙鏈 RNA 共同活化 2-5A合成酶, 2-5A可活化核酸內(nèi)切酶 RNaseL ,后者使病毒 mRNA 降解,阻斷病毒蛋白質(zhì)合成。101. 管家基因:有些基因產(chǎn)物對生命全過程都是必不可少的。這類基因在一個生物個體的幾乎所有細(xì)胞中持續(xù)表達(dá),通常稱為管家基因。管家基因的表達(dá)水平受環(huán)境因素影響很小,而是在個體各個生長階段的大多數(shù)、或幾乎全部組織中持續(xù)表達(dá),或變化很小。這類基因表達(dá)稱為 基本(或組成性)基因表達(dá)。102 誘導(dǎo):可誘導(dǎo)基因在一定環(huán)境中表達(dá)增強(qiáng)的過程稱為誘導(dǎo)。阻遏:可阻遏基因表達(dá)產(chǎn)物水平降低的過程稱為阻遏。103 基因表達(dá)調(diào)控的生物學(xué)意義:

40、(1)適應(yīng)環(huán)境、維持生長和增殖。(2)維持個體發(fā)育與分化。104 原核生物轉(zhuǎn)錄的影響因素:(1)啟動子。啟動子決定轉(zhuǎn)錄的效率和方向。(2) 因子。(3)阻遏蛋白具有負(fù)調(diào)控作用。(4)正調(diào)控蛋白促進(jìn)基因的轉(zhuǎn)錄。學(xué)習(xí)必備歡迎下載(5)倒位蛋白通過 DNA 重組倒位而調(diào)節(jié)基因表達(dá)。倒位蛋白 是一種位點(diǎn)特異性的重組酶。(6)RNA 聚合酶抑制物可與RNA 結(jié)合并抑制轉(zhuǎn)錄。(7)衰減子。105 衰減子( attenuator ):細(xì)菌中 mRNA 轉(zhuǎn)錄和翻譯是偶聯(lián)在一起的。這一特點(diǎn)使細(xì)菌中的一些操縱子的特殊序列可以在轉(zhuǎn)錄過程中控制轉(zhuǎn)錄水平。這些特殊序列稱為衰減子。106 乳糖操縱子(1)乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)

41、:含有 Z、 Y、A 三個結(jié)構(gòu)基因,分別編碼半乳糖苷酶、透酶和乙酰基轉(zhuǎn)移酶。此外,含有一個操縱基因O,一個啟動序列P,一個 CAP 結(jié)合位點(diǎn)和一個基因I。I 基因編碼一種阻遏蛋白,與操縱基因O 結(jié)合。啟動序列 P、操縱序列 O 和 CAP 結(jié)合位點(diǎn)組成乳糖操縱子的調(diào)控區(qū)。(2)阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)控作用:1當(dāng)有乳糖存在時,乳糖通過 半乳糖苷酶變?yōu)榘肴樘?,再?jīng)透酶進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。真正的誘導(dǎo)劑是半乳糖而不是乳糖。乳糖可與阻遏蛋白結(jié)合,導(dǎo)致阻遏蛋白與操縱序列 O 解離,啟動基因轉(zhuǎn)錄。2當(dāng)沒有乳糖存在時,沒有誘導(dǎo)劑與阻遏蛋白結(jié)合,阻遏蛋白與操縱序列 O 結(jié)合,發(fā)揮負(fù)性調(diào)控作用,基因不轉(zhuǎn)錄。(3)CAP 的正性

42、調(diào)控作用:1當(dāng)沒有葡萄糖及 cAMP 濃度較高時, cAMP 和 CAP 結(jié)合緊密,此時 CAP 結(jié)合在 CAP 結(jié)合位點(diǎn),刺激 RNA 轉(zhuǎn)錄活性。2當(dāng)有葡萄糖存在及cAMP 濃度較低時, cAMP 和 CAP 結(jié)合受阻,因此 lac 操縱子表達(dá)下降。(4)協(xié)調(diào)調(diào)節(jié):1當(dāng)葡萄糖存在, 乳糖存在時:盡管乳糖作為誘導(dǎo)劑和阻遏蛋白結(jié)合,使阻遏蛋白與操縱序列 O 解離。但由于 cAMP 濃度較低, cAMP 和 CAP結(jié)合受阻,基因處于關(guān)閉狀態(tài)。2當(dāng)葡萄糖存在,乳糖不存在時:此時無誘導(dǎo)劑存在,阻遏蛋白與學(xué)習(xí)必備歡迎下載DNA 結(jié)合。而且由于葡萄糖的存在,CAP 也不能發(fā)揮正性調(diào)控作用,基因處于關(guān)閉狀態(tài)

43、。3當(dāng)葡萄糖和乳糖都不存在時:CAP 可以發(fā)揮正性調(diào)控作用, 但由于沒有誘導(dǎo)劑,阻遏蛋白的負(fù)調(diào)控作用使基因仍處于關(guān)閉狀態(tài)。4當(dāng)葡萄糖不存在,乳糖存在時:此時CAP 可以發(fā)揮正性調(diào)控作用,阻遏蛋白由于誘導(dǎo)劑的存在而失去復(fù)調(diào)控作用,基因被打開,啟動轉(zhuǎn)錄。107 色氨酸操縱子調(diào)控機(jī)制:(1)當(dāng)細(xì)胞內(nèi)色氨酸增多時, 結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄受到抑制。 衰減子轉(zhuǎn)錄物有 4 段特殊序列。片段 1 和 2,2 和 3,3 和 4 能配對形成發(fā)夾結(jié)構(gòu),形成發(fā)夾能力的強(qiáng)弱依次為片段 1/2> 片段 2/3> 片段 3/4 。片段 3/4 所形成的發(fā)夾結(jié)構(gòu)之后緊接著寡尿嘧啶,是不依賴 因子的轉(zhuǎn)錄終止信號。(2)

44、當(dāng)細(xì)胞內(nèi)有色氨酸存在時,形成色氨酰 tRNA ,核糖體編譯可通過片段 1 并通過片段 2,核糖體在到達(dá)片段 3 之前就從 mRNA 脫落。在這種情況下,片段 1/2 和片段 2/3 都不能形成發(fā)夾結(jié)構(gòu),只有片段 3/4 形成發(fā)夾結(jié)構(gòu),即形成轉(zhuǎn)錄終止信號,從而導(dǎo)致 RNA 聚合酶作用停止。(3) 當(dāng)細(xì)胞內(nèi)沒有色氨酸存在時,色氨酰 tRNA 缺乏,核糖體停留在兩個相鄰的色氨酸密碼子的位置上, 片段 1/2 不能形成發(fā)夾結(jié)構(gòu), 片段 2/3 之間形成形成發(fā)夾結(jié)構(gòu), 則片段 3/4 之間就不能形成轉(zhuǎn)錄終止信號, 后面的基因得以轉(zhuǎn)錄。108 SD 序列:mRNA 起始密碼子前的一段富含嘌呤核苷酸的核糖體

45、結(jié)合位點(diǎn)。109 原核翻譯水平的調(diào)控:( 1) SD 序列是影響翻譯的重要因素。( 2) mRNA 的穩(wěn)定性是調(diào)控翻譯的方式之一。( 3)翻譯產(chǎn)物也可以對相應(yīng) mRNA 的翻譯進(jìn)行調(diào)控。( 4)小分子 RNA 可以抑制特定 mRNA 的翻譯。110真核生物基因表達(dá)在DNA 水平的調(diào)控主要通過下列幾種方式:( 1)染色質(zhì)丟失。( 2)基因擴(kuò)增。學(xué)習(xí)必備歡迎下載( 3)基因重排。( 4) DNA 甲基化。( 5)染色質(zhì)結(jié)構(gòu)可影響基因表達(dá)。111反式作用因子:真核細(xì)胞內(nèi)有大量的序列特異的DNA 結(jié)合蛋白,其中一些蛋白的主要功能是使基因開放或關(guān)閉,稱為反式作用因子。112轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物形成的步驟:(1

46、)TFIID 結(jié)合 TATA 盒。(2)RNA pol 識別并結(jié)合 TFIID DNA 復(fù)合物。(3)其他轉(zhuǎn)錄因子與 RNA pol 結(jié)合,轉(zhuǎn)錄起始部位的 DNA 解鏈,形成轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物。113反式作用因子的特點(diǎn):(1)一般具有三個功能結(jié)構(gòu)域: DNA 結(jié)構(gòu)域、轉(zhuǎn)錄活性域和結(jié)合其他蛋白的結(jié)合域。(2)能識別并結(jié)合基因調(diào)控區(qū)中的順式作用元件。(3)對基因表達(dá)有正性和負(fù)性調(diào)控作用,即激活和阻遏基因的表達(dá)。114鋅指結(jié)構(gòu):是指在結(jié)合DNA 結(jié)構(gòu)域中含有較多的半胱氨酸(Cys) 和組氨酸(His)的區(qū)域,借肽鏈的彎曲使2 個 Cys 和 2 個 His 或 4 個 Cys 與一個鋅離子絡(luò)合成的指狀結(jié)

47、構(gòu)。115同源結(jié)構(gòu)域:許多反式作用因子結(jié)合 DNA 的結(jié)構(gòu)域中有一段相同的保守序列。是由 60 個左右的氨基酸組成的螺旋回折螺旋結(jié)構(gòu)的區(qū)域,稱為同源結(jié)構(gòu)域。116亮氨酸拉鏈:有些反式作用因子結(jié)合 DNA 結(jié)構(gòu)域中有一段約 30 個氨基酸組成的核心序列,每隔 6 個氨基酸有規(guī)律的出現(xiàn) 1 個亮氨酸殘基,能形成兩性 -螺旋。在螺旋的一側(cè)是排列成行的亮氨酸,具有疏水性,稱為亮氨酸拉鏈區(qū)。兩個亮氨酸拉鏈區(qū)的單體以疏水作用形成亮氨酸拉鏈。117反式作用因子DNA 結(jié)合域的結(jié)構(gòu)模式:(1)鋅指結(jié)構(gòu)。(2)同源結(jié)構(gòu)域。(3)亮氨酸拉鏈。學(xué)習(xí)必備歡迎下載(4)螺旋環(huán)螺旋結(jié)構(gòu)。(5)堿性 螺旋。118轉(zhuǎn)錄活化結(jié)

48、構(gòu)域結(jié)構(gòu)模型:(1)酸性 螺旋結(jié)構(gòu)域(2)富含谷氨酰胺結(jié)構(gòu)域(3)富含脯氨酸結(jié)構(gòu)域。119 mRNA 的選擇性剪接方式(1)外顯子選擇方式可保留或部分保留外顯子。(2)內(nèi)含子選擇方式可刪除或部分刪除內(nèi)含子。(3)互斥外顯子是指兩個外顯子不能同時被保留。(4)內(nèi)部剪切位點(diǎn)造成內(nèi)含子或外顯子的部分序列被切除或保留。120 翻譯起始的調(diào)控(1)阻遏蛋白的調(diào)控作用。(2)翻譯起始因子的功能調(diào)控。(3)5AUG 對翻譯的調(diào)控作用。(4)mRNA 非編碼區(qū)長度對翻譯的影響。121 翻譯后水平的調(diào)控(1)新生肽鏈的水解。(2)肽鏈中氨基酸的共價修飾。(3)通過信號肽分揀、運(yùn)輸、定位。122. 同源重組:是指

49、發(fā)生在同源序列間的重組,它通過鏈的斷裂和再連接,在兩個 DNA 分子同源序列之間進(jìn)行單鏈或雙鏈片段的交換。又稱基本重組。123 Holliday 模型:(1)兩個同源染色體DNA 排列整齊(2)一個 DNA 的一條鏈斷裂,并與另一個DNA 對應(yīng)的鏈連接,形成Holliday中間體。(3)通過分支移動產(chǎn)生異源雙鏈DNA 。(4) Holliday 中間體切開并修復(fù),形成兩個雙鏈重組 DNA 。即片段重組體和拼接重組體。學(xué)習(xí)必備歡迎下載124 細(xì)菌的基因轉(zhuǎn)移:細(xì)菌中,可以通過接合、轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)和細(xì)胞融合四種方式,在不同 DNA 分子間發(fā)生共價連接,即基因轉(zhuǎn)移。125 接合作用:當(dāng)細(xì)胞或細(xì)菌通過菌毛相

50、互接觸時,質(zhì)粒 DNA 可以從一個細(xì)胞(細(xì)菌)轉(zhuǎn)移導(dǎo)另一個細(xì)胞(細(xì)菌) ,這種類型的 DNA 轉(zhuǎn)移稱為接合作用。126 轉(zhuǎn)化作用: 通過自動獲取或人為的供給外源 DNA ,使細(xì)胞或培養(yǎng)的受體細(xì)胞獲得新的遺傳表型,這就是轉(zhuǎn)化作用。127 轉(zhuǎn)導(dǎo)作用:當(dāng)病毒從被感染的細(xì)胞(供體)釋放出來,再次感染另一細(xì)胞(受體)時,發(fā)生在供體細(xì)胞和受體細(xì)胞之間的 DNA 轉(zhuǎn)移及基因重組即為轉(zhuǎn)導(dǎo)作用。自然界常見的例子就是噬菌體感染宿主時伴隨發(fā)生的基因轉(zhuǎn)移。當(dāng)噬菌體感染宿主時會有兩種結(jié)局,一是溶菌生長途徑,二是溶源菌生長途徑。128 特異位點(diǎn)重組:由整合酶催化,在兩個 DNA 序列的特異位點(diǎn)之間發(fā)生的整合稱為位點(diǎn)特異的

51、重組。129 重組 DNA 常用的工具酶1限制性核酸內(nèi)切酶:識別特異序列,切割DNA 。2DNA 連接酶3DNA 聚合酶 I。具有完整的 5-3聚合,3 -5外切活性,以及 5-3外切活性。用枯草桿菌蛋白酶可將 DNA 聚合酶 I 裂解成兩個片段,大片段稱為 Klenow 片段。具有 5-3聚合, 3-5外切活性,無 5-3外切活性。Klenow 片段用途:( 1)在 cDNA 克隆中,第二股鏈的合成。( 2) DNA 序列分析。( 3)補(bǔ)齊雙鏈 DNA 的 3端。( 4)通過補(bǔ)齊 3端,使 3端標(biāo)記。4逆轉(zhuǎn)錄酶。5堿性磷酸酶。能去除末端磷酸基。6末端轉(zhuǎn)移酶。在3羥基末端進(jìn)行同聚物加尾。7多聚核苷酸激酶。催化多聚核苷酸5羥基磷酸化,或標(biāo)記探針。學(xué)習(xí)必備歡迎下載130 限制性核酸內(nèi)切酶:就是識別DNA 的特異序列,并在識別位點(diǎn)或其周圍切割雙鏈 DNA 的一類內(nèi)切酶。131 回文結(jié)構(gòu):大部分II 類限制性核酸內(nèi)切酶識別DNA 位點(diǎn)的核苷酸序列呈二元旋轉(zhuǎn)對稱,

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