真菌D葡聚糖檢測反應(yīng)機(jī)理

1、真菌(1-3)- -D 葡聚糖檢測反應(yīng)機(jī)理目前臨床上隨著廣譜抗生素、各類免疫抑制劑、移植插管等新技術(shù)的不 斷發(fā)展應(yīng)用 , 其真菌感染尤其是深部真菌感染出現(xiàn)明顯上升趨勢 , 而作為臨 床診斷的細(xì)菌培養(yǎng)其陽性率很低 , 且檢測周期長 , 不能適應(yīng)臨床治療診斷的 要求, 因此迫切需要快速、準(zhǔn)確的檢測方法 . 因此對血液中的早期 (1-3)- -D 葡聚糖快速定量檢測 , 將對臨床對癥治療具有很深的現(xiàn)實(shí)意義。人體血漿中 (1-3)- -D 葡聚糖快速檢測對早期診斷深部真菌感染具有重要的參考價(jià)值。 該試驗(yàn)的基本原理是試劑中含凝固酶原及凝固蛋白原的冷凍干燥品 . 在適 宜條件下 , 微量 (1-3)- -

2、D 葡聚糖能激活試劑中的凝固酶原產(chǎn)生凝集反應(yīng) , 通過測定凝集反應(yīng)過程中的濁度變化從而定量檢測血漿中 (1-3)- -D 葡聚糖 含量.內(nèi)毒素定量檢測的反應(yīng)機(jī)理 細(xì)菌內(nèi)毒素作為革蘭陰性菌細(xì)胞壁外層中的脂多糖成份 (LPS), 具有多 種的生物活性 , 微量的內(nèi)毒素進(jìn)入機(jī)體將會出現(xiàn)發(fā)熱、血壓降低、寒戰(zhàn)、引 起DIC、內(nèi)毒素?cái)⊙Y等一系列臨床反應(yīng)，因此對血液中的早期內(nèi)毒素快速 定量檢測 , 將對臨床對癥治療具有很深的現(xiàn)實(shí)意義。人體血漿中內(nèi)毒素檢測 對分別診斷革蘭陰性桿菌感染具有重要的參考價(jià)值。 反應(yīng)試劑中含凝固酶原 及凝固蛋白原的冷凍干燥品 . 在適宜條件下 , 微量革藍(lán)氏陰性菌內(nèi)毒素能 激活試劑

3、中的凝固酶原產(chǎn)生凝集反應(yīng)形成凝膠 , 通過測定在形成凝膠過程中 的濁度變化從而定量檢測血漿中革藍(lán)氏陰性菌內(nèi)毒素 .、檢測體液內(nèi)毒素的臨床意義由革蘭氏陰性菌所引起的內(nèi)毒素血癥及膿毒血癥是目前臨床上的主要死亡原因之一。在各類抗生素殺滅革蘭氏陰性菌的同時(shí)，也會使后者釋放出 一定數(shù)量的內(nèi)毒素，從而加重內(nèi)毒素血癥。早期診斷的細(xì)菌學(xué)培養(yǎng)需時(shí)長， 而且由于抗生素的應(yīng)用，其培養(yǎng)陽性率低。早期的數(shù)小時(shí)內(nèi)作為臨床上搶救 感染性休克的關(guān)鍵， 臨床醫(yī)師僅能根據(jù)臨床特征與體征推斷病源學(xué)而帶有一 定的盲目性，因此，早期體液中內(nèi)毒素的正確、快速定量檢測及相應(yīng)的對癥 治療就顯得格外重要。過去的內(nèi)毒素檢測能定性而不能定量，而且

4、個(gè)體差異 和實(shí)驗(yàn)室間的誤差較大，無法成為有價(jià)值的臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目，北京金山川公司 研制的MB-80微生物快速動(dòng)態(tài)檢測系統(tǒng)能定量檢測體液內(nèi)毒素的含量，經(jīng)國內(nèi)多家單位使用現(xiàn)已在其他省市開始作為臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目進(jìn)行收費(fèi)。 該儀器檢 測內(nèi)毒素具有結(jié)果穩(wěn)定、檢測快（ 1 小時(shí)）、重復(fù)性好、準(zhǔn)確率高、不同的檢 測人員操作引起的誤差小等優(yōu)點(diǎn)。內(nèi)毒素定量檢測在重癥病人、感染病人（如腦膜炎）以及其他有嚴(yán)重創(chuàng) 傷等疾病的病人均有重要的臨床意義，這使得內(nèi)毒素研究一直是熱點(diǎn)，但過 去由于方法的限制，內(nèi)毒素檢測也是臨床的難點(diǎn)。二、深部真菌檢測的臨床意義動(dòng)態(tài)定量檢測體液中真菌含量是應(yīng)用 MB-80微生物快速動(dòng)態(tài)檢測系統(tǒng)進(jìn) 行的。

5、該方法可以快速診斷用常規(guī)方法難以確診的深部真菌感染， 應(yīng)用 MB-80 檢測真菌，其檢出率遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于傳統(tǒng)的血培養(yǎng)方法， 使病原體的監(jiān)測更加準(zhǔn)確， 更快速，MB-80系統(tǒng)具有很高的靈敏度和優(yōu)異的數(shù)據(jù)分析功能，檢測低限 5pg/ml的真菌1-3- B -D葡聚糖量。因近年來，一些罕見的條件致病真菌引起深部感染，臨床重癥病人，特 別是廣譜抗生素和化療藥物的應(yīng)用， 真菌感染已成為感染導(dǎo)致死亡的重要原 因之一，而有研究發(fā)現(xiàn)早期發(fā)現(xiàn)并給予適當(dāng)?shù)闹委煟婢腥究梢暂^好地得 到控制，這就要求一種能迅速確定有無深部真菌感染的方法，因系統(tǒng)抗真菌 藥物種類較少，抗菌譜較廣，不因真菌種類而異。當(dāng)檢測到標(biāo)本中葡聚糖含 量

6、較高時(shí)，即刻予以系統(tǒng)治療，不必等鑒定出種屬，否則會貽誤最佳治療時(shí) 機(jī)。而常規(guī)真菌血培養(yǎng)需時(shí)長，鑒定過程復(fù)雜，陽性率低，不能快速提供明 確臨床指示。 MB-80 應(yīng)用試劑盒及儀器檢測，能快速地檢測出體液中真菌 1-3- B -D葡聚糖的實(shí)際含量，對重癥病人，有著非常重要的臨床意義，對長 期住院病人應(yīng)用廣譜抗生物， 腫瘤化療等等病人， 必將帶來一定的臨床效益。三、MB-80微生物快速檢測系統(tǒng)技術(shù)指標(biāo)及功能1. 靈敏度：最小檢出值 1pg/ml ；2. 精密度：批間差 CV<10%；3. 準(zhǔn)確性：回收率 75-125%；4. 標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍： 1-9000pg/ml ；5. 相關(guān)系數(shù)r :絕對值

7、0.980 ;6. 檢測時(shí)間： 60 分鐘?？啥繖z測人體體液（血液、尿液、腦積液、胸積液、腹水等）中細(xì)菌 內(nèi)毒素、深部真菌的含量，為臨床醫(yī)生早期確診內(nèi)毒素血癥及真菌感染癥提供有價(jià)值的參考 依據(jù)MB-80微生物快速定量檢測系統(tǒng)原理采用光電轉(zhuǎn)換原理， 通過測定生物試劑與微生物細(xì)胞的特定成分反應(yīng)產(chǎn) 生的濁度變化，建立反應(yīng)時(shí)間（T）與微生物含量（C）關(guān)系的標(biāo)準(zhǔn)曲線，從 而定量測定樣品中細(xì)菌內(nèi)毒素、真菌葡聚糖的含量。二、MB-80微生物快速定量檢測系統(tǒng)用途1. 人體體液（血液、尿液、血清、腹水、腦脊液等）細(xì)菌內(nèi)毒素、真菌 葡聚糖、革蘭陽性菌肽聚糖定量檢測；2. 人用及獸用注射藥品、生物制品及醫(yī)療器械（一次性血袋、血小板的 一次性管道、 一次性注射器、 消毒棉棒、 注射生理鹽水等） 的細(xì)菌內(nèi)毒