磷酸鹽緩沖液配制方法

1、磷酸鹽緩沖液（PBS配制方法PBSPBS （135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4 ， pHPBS緩沖液（）：NaCI 137mmol/L, KCI L , Na2HPO4 L KH2PO4 L稱 7.9g NaCI , 0.2g KCI , 0.24g KH2PO4（or 1.44g Na2HPO4）和 1.8g K2HPO4, 溶 于 800 ml 蒸餾水中，用 HCl 調(diào)節(jié)溶液的 pH 值至，最后加蒸餾水定容至 1 L 。保 存于4C冰箱中即可。需要注意的是，通常所說的濃度 0.01 M 指的是緩沖溶液中所有的磷酸根

2、濃度，而 非 Na 離子或 K 離子的濃度， Na 離子和 K 離子只是用來調(diào)節(jié)滲透壓的。 母液的配制：0.2M Na2HPO4 稱取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4 稱取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于 1000ml 水各種濃度PB（pH=£配制：先配 0.2M PB （pH=，100ml）:取 19ml L 的 NaH2PO4 81ml L 的 Na2HPO4,即 可。然后 只需將 0.2M PB （pH= 按相應(yīng)比例適當(dāng)稀釋 即可,如：0.1M PB（PH=） ：取 500ml 0.2M PB ,加水稀釋至 1

3、000ml 即可。0.01M PB （PH=）:取 50ml 0.2M PB，加水稀釋至 1000ml 即可。0.02M PB （ PH=）：取 100ml 0.2 M PB，加水稀釋至 1000ml 即可。 若需要NaCI的話，加入 NaCI至（g/100ml ）即可。另：其它各種另 PH值的0.2M PB （ 100ml）配方：7939290858101551453833282319ml161349556267727781ml84870.01M磷酸鹽緩沖液（PBS配制方法稱取 8g NaCI、0.2g KCI、1.44g Na2HPO4和 0.24g KH2PO4，溶于 800ml 蒸餾水

4、中， 用HCI調(diào)節(jié)溶液的pH值至，最后加蒸餾水定容至 1L即可。在15lbf/in2（1034 X 105Pa）高壓下蒸氣滅菌（至少 20分鐘），保存存于室溫或4C冰箱中。需要注意的是，通常所說的濃度 0.01M 指的是緩沖溶液中所有的磷酸根濃度，而 非 Na 離子或 K 離子的濃度， Na 離子和 K 離子只是用來調(diào)節(jié)滲透壓的。 如果是用 于免疫組化的話，則需要在配置的時候分別加入 100 u/mI 青霉素和鏈霉素之后再 調(diào)PH定容、滅菌消毒。PHH2O 1000100010001000NaCINa2HPO4NaH2PO4根據(jù)經(jīng)驗來看，新鮮配置的 PBS攪勻后其PH值約在之間，可是在溫度的影

5、響下， 尤其在夏天，其電離常數(shù)發(fā)生了改變， 在經(jīng)過晝夜的時間后，PH值會明顯改變（我 親自測過偏酸）。所以做實驗的同學(xué)可要注意了，PH值可能會影響實驗結(jié)果， 甚至可能導(dǎo)致陰性。所以務(wù)必記得這個時候和天氣，要加強實驗條件控制問題。每次 使用前最好用試紙測一下過夜了的PBS如果發(fā)生偏酸或偏堿，注意重新?lián)Q新液。PBS緩沖液稱取 NaCI 8g , KCI 0.2g , Na2HPO4?12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于 900ml 雙蒸水中，用鹽酸調(diào)pH值至，加水定容至1L,常溫保存?zhèn)溆?。PBST緩沖液取300 口 I Tween-20 加入PBS 100ml中，混勻后即刻使用

6、?，F(xiàn)用現(xiàn)配。如果是把所有固體加大十倍，配置為濃縮液，工作時候十倍稀釋，那么，在剛配好濃縮液時，PH在左右，明顯偏酸。不能用鹽酸調(diào)。雖然可以用氫氧化鈉顆粒調(diào)， 但是有更方便的方法。十倍稀釋以后，PH自動升高到所需要的值。不需要其它任何處理。這個可以先取 少量試一試，配好之后再測一次 的PBS配方詳細(xì)1. NaCl 137mmol/L ， KCl L ， Na2HPO4 L， KH2PO4 L2. 向燒杯中加入約 800 ml 的去離子水，充分?jǐn)嚢枞芙狻?. 滴加濃鹽酸將 pH 值調(diào)節(jié)至，然后加入去離子水將溶液定容至 1 L 。4. 高溫高壓滅菌后，室溫保存。注意：上述 PBS Buffer 中無二價陽離子，如需要，可在配方中補充 1 mM CaCl2 和 0.5 mM MgCl2。L PBS（磷酸緩沖液 Phosphate Buffer Solution ，PBS）的配制：甲液：L Na2HPO溶液：稱取磷酸氫二鈉9.465g 7.099g,加蒸 餾水至1000ml ; 乙液：L KH2P04溶液:稱取磷酸二氫鉀，9.07g 6.803g, 加蒸餾水至100