柴胡的研究進展及提取試驗方案設(shè)計

1、中藥化學(xué)實驗改革答辯中藥化學(xué)實驗改革答辯安徽中醫(yī)學(xué)院安徽中醫(yī)學(xué)院0808中藥一班中藥一班E E組組組員：崔亞寧、江靜怡、劉華佗、馬小雷、汪組員：崔亞寧、江靜怡、劉華佗、馬小雷、汪 勇、鄭傳柱勇、鄭傳柱柴胡柴胡柴胡的來源性狀柴胡的來源性狀柴胡的化學(xué)成分柴胡的化學(xué)成分柴胡的提取精制柴胡的提取精制柴胡的質(zhì)量評價柴胡的質(zhì)量評價含柴胡的中成藥含柴胡的中成藥柴胡的來源性狀柴胡的來源性狀 傘形科多年生草本植物柴胡(北柴胡BupleurumchineseDC)和狹葉柴胡(南柴胡Bupleurumscorzonerifolium Willd)的干燥根。原產(chǎn)中國，東北、華北、西北、華東各地。朝鮮、日本、蘇聯(lián)也有分

2、布。 柴胡的來源性狀柴胡的來源性狀 藥材來源藥材來源 1. 藥材性狀藥材性狀 2.u 北柴胡： 呈圓柱形或長圓錐形，根頭膨大頂端殘留 3-15個莖基或短 纖維狀葉基，下部常分枝。表面黑褐色或淺棕色，具縱皺紋、支根痕及皮孔。質(zhì)硬而韌，不易折斷，斷面呈片狀纖維性，皮部淺棕色，木部黃白色。氣微香，味微苦。u 南柴胡： 圓錐形，較細(xì)。根頭頂端有多數(shù)纖維狀葉殘基，下部多不分枝或稍分枝。表面紅棕色或黑棕色，靠近根頭處多具細(xì)密環(huán)紋。質(zhì)稍軟，易折斷，斷面略平坦，不顯纖維性。具敗油氣。南柴胡北柴胡二、柴胡化學(xué)成分二、柴胡化學(xué)成分 柴胡根中主要成份為柴胡皂苷，其次含有植物甾醇、側(cè)金盞花醇，以及少量揮發(fā)油、多糖;地

3、上部分主要含黃酮類、少量皂苷類、木脂素類、香豆素類等成分。 皂苷類皂苷類 柴胡中主要含有柴胡皂苷a、c、d;尚含3一0一乙酞基柴胡皂苷a、6一0一乙酞基柴胡皂苷a、柴胡皂苷e、6一0一乙酞柴胡皂苷一a，23一0一乙酞基柴胡皂苷乙一d;6一0一乙基柴胡皂苷一b:，柴胡皂苷一f等。1.皂苷皂苷a（C42H68O13） l 物理性質(zhì)：本品為結(jié)晶粉末，易溶于水，稀醇，特別是熱水和熱醇，在丁醇和戊醇中溶解性大，難溶或不溶于苯，乙醚，氯仿等溶劑。 l 化學(xué)反應(yīng)：Molish反應(yīng)陽性，Lieberman-Burchard反應(yīng)產(chǎn)生紫色。l 藥理作用：有抗炎作用和降低血清膽固醇和甘油三酯以及鎮(zhèn)靜、解熱作 用2.

4、皂苷皂苷c（C48H78O17） u 物理性質(zhì)：易溶于水，稀醇，特別是熱水和熱醇，在丁醇和戊醇中溶解性大，難溶或不溶于苯，乙醚，氯仿等溶劑。u 化學(xué)性質(zhì)：Molish反應(yīng)陽性，Lieberman-Burchard反應(yīng)產(chǎn)生紫色。u 藥理作用：保肝、抗細(xì)菌內(nèi)毒素等作用。 3.皂苷皂苷d（C42H68O13） u 物理性質(zhì)： 白色粉末，易溶于熱水、稀醇、熱甲醇和熱乙醇u 化學(xué)性質(zhì)：Molish反應(yīng)陽性，Lieberman-Burchard反應(yīng)產(chǎn)生紫色。u藥理作用：有抗炎作用、降低血清膽固醇和甘油三酯等。三、柴胡的提取精制三、柴胡的提取精制1.實驗?zāi)康膶嶒災(zāi)康?.實驗原理實驗原理熟悉三萜皂苷類化合物的

5、熟悉三萜皂苷類化合物的 檢識及鑒定方法檢識及鑒定方法 三萜皂苷類，由于糖分子的引入，三萜皂苷類，由于糖分子的引入，使極性增大，可溶于水，易溶于熱水、使極性增大，可溶于水，易溶于熱水、稀醇、熱甲醇和熱乙醇中，幾乎不溶稀醇、熱甲醇和熱乙醇中，幾乎不溶于或難溶于丙酮、乙醚以及石油醚等于或難溶于丙酮、乙醚以及石油醚等極性小的有機溶劑。極性小的有機溶劑。 柴胡皂苷在水飽和的正丁醇中溶柴胡皂苷在水飽和的正丁醇中溶解度較大，且可以與水分成二相，可解度較大，且可以與水分成二相，可利用此性質(zhì)從水溶液中用正丁醇提取利用此性質(zhì)從水溶液中用正丁醇提取皂苷，借以與親水性的糖、蛋白質(zhì)等皂苷，借以與親水性的糖、蛋白質(zhì)等分離

6、。此外為避免原生苷環(huán)氧醚鍵的分離。此外為避免原生苷環(huán)氧醚鍵的斷裂，防止皂苷次生化，可在提取溶斷裂，防止皂苷次生化，可在提取溶劑中加入劑中加入5%吡啶。吡啶。掌握柴胡中總皂苷的提取掌握柴胡中總皂苷的提取 分離方法及操作分離方法及操作3.實驗步驟實驗步驟殘渣殘渣 95%乙醇乙醇溶液溶液400ml含含0.5%吡啶的吡啶的含含0.5%吡啶的吡啶的95%乙醇溶液乙醇溶液300ml回回流流1h抽濾抽濾藥材藥材50g合并濾液合并濾液蒸餾回收至蒸餾回收至300ml加水?dāng)嚢杓铀當(dāng)嚢璩闉V抽濾200ml水飽和正丁醇水飽和正丁醇萃取萃取1.2.3.取濾液取濾液取上層液取上層液減壓蒸餾減壓蒸餾回收正丁醇回收正丁醇加入乙

7、醚加入乙醚抽濾抽濾4.5.7.6.8.總皂苷總皂苷濃縮物濃縮物回回流流0.5h抽濾抽濾四、柴胡的定性檢識四、柴胡的定性檢識理化檢識理化檢識泡沫試驗泡沫試驗 取柴胡總皂苷樣品適量加水5ml溶解強烈振搖，產(chǎn)生持久性泡沫 (皂苷具有降低水溶液表面張力的作用） 顯色反應(yīng)顯色反應(yīng)uLiebermann-BurchardLiebermann-Burchard反應(yīng)：反應(yīng)：取柴胡總皂苷樣品適量，加乙酸酐1ml溶解，加濃硫酸-乙酸酐（1:20）數(shù)滴產(chǎn)生黃、紅、紫、藍(lán)顏色變化-最后褪色。 uMolish反應(yīng)反應(yīng) ：取柴胡總皂苷樣品適量，加乙醇1ml溶解，加5%-萘酚乙醇液1-3滴，搖勻后沿試管壁緩緩加入濃硫酸，在

8、兩液面間產(chǎn)生紫色光環(huán)。 溶血試驗溶血試驗 取柴胡總皂苷樣品適量，加0.9%生理鹽水溶解，加幾滴2%的紅細(xì)胞懸浮液，溶液由混濁變澄明，發(fā)生溶血現(xiàn)象。（皂苷水溶液與紅細(xì)胞接觸時，紅細(xì)胞壁上的膽甾醇與皂苷結(jié)合，生成不溶于水的復(fù)合物沉淀，破壞了血紅細(xì)胞的正常通透性，使細(xì)胞內(nèi)滲透壓增加而發(fā)生崩解，從而導(dǎo)致溶血現(xiàn)象） 薄層板：薄層板：硅膠G-CMC-Na板 對照品：對照品：柴胡皂苷a、柴胡皂苷d 展開劑：展開劑：乙酸乙酯-乙醇-水（8：2：1） 顯色劑：顯色劑：2對二甲氨基苯甲醛的40硫酸溶液 對照品的制備：對照品的制備：精密稱取柴胡皂苷a對照品適量,用甲醇制成每毫升含0.5mg的 溶液,作為對照品溶液a

9、。精密稱取柴胡皂苷d對照品適量，用 甲醇制成每毫升含0. 5 m g的溶液, 作為對照品溶液。 樣品的制備：樣品的制備：取柴胡總皂苷樣品少量用甲醇溶解作為供試品。 薄層層析薄層層析: 照薄層色譜法實驗, 吸取上述各種溶液各5 l ， 分別于同一以羧甲 基纖維鈉為粘合劑的硅膠G薄層板上, 以醋酸乙酯- 乙醇- 水( 8： 2： 1)為展開劑展開, 取出, 晾干, 噴以2% 對二甲氨基苯甲醛的40%硫酸 溶液, 在60 加熱至斑點顯色清晰，置日光及紫外光燈（365nm） 下檢識 觀察記錄：觀察記錄：記錄圖譜并計算Rf值。 薄層色譜檢識薄層色譜檢識五、含柴胡的中成藥五、含柴胡的中成藥1.小柴胡顆粒（片）小柴胡顆粒（片）l 組成：柴胡、黃芩、半夏、黨參組成：柴胡、黃芩、半夏、黨參 、 生姜、甘草、大棗。輔料為生姜、甘草、大棗。輔料為 蔗糖。蔗糖。l 功效：解表散熱，疏肝和胃。用于功效：解表散熱，疏肝和胃。用于 外感病，邪犯少陽證，癥見外感病，邪犯少陽證，癥見 寒熱往來、胸脅苦滿、食欲寒熱往來、胸脅苦滿、食欲 不振、心煩喜嘔、口苦咽干不振、心煩喜嘔、口苦咽干.2.柴胡鎮(zhèn)咳片柴胡鎮(zhèn)咳片組成：柴胡干浸膏 功效