第二十一章 免疫學(xué)檢測原理

1、-作者xxxx-日期xxxx第二十一章 免疫學(xué)檢測原理【精品文檔】第二十一章 免疫學(xué)檢測原理   第一部分 學(xué)習(xí)習(xí)題   一、填空題 1抗原抗體反應(yīng)的最大特點是_。2顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合后，可以發(fā)生_反應(yīng)；可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合后，在比例合適的情況下，可以發(fā)生_反應(yīng)。3細(xì)胞因子的檢測可以分為_、_、_三類。   二、多選題 A型題 1抗原-抗體反應(yīng)所不具有的特征是： A分子表面的可逆結(jié)合 B具有高度特異性 C出現(xiàn)肉眼可見的反應(yīng)需要適當(dāng)?shù)谋壤?D二者結(jié)合后，立即出現(xiàn)可見反應(yīng) E. 二者反應(yīng)受電解質(zhì)、酸堿度和濃度的影響 2檢測可溶性抗原不能用： AELISA B

2、單向瓊脂擴(kuò)散 C直接凝集反應(yīng) D反向間接凝集反應(yīng) E協(xié)同凝集試驗 3.不屬于抗原抗體反應(yīng)的是： A. 酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA） B錫克試驗 C抗球蛋白試驗 D放射免疫分析法（RIA） EE花環(huán)試驗 4乳膠妊娠診斷試驗屬于： A協(xié)同凝集反應(yīng) B反向間接凝集反應(yīng) C直接凝集反應(yīng) D間接凝集反應(yīng) E間接凝集抑制反應(yīng) 5下列免疫學(xué)測定方法敏感性最高的是： A沉淀反應(yīng) B凝集反應(yīng) CELISA D放射免疫測定 E補(bǔ)體結(jié)合試驗 6抗原抗體反應(yīng)最適宜的PH值為： A. 55 C56 D68 E89 7用免疫熒光技術(shù)間接法檢測組織中的抗原，應(yīng)將熒光素標(biāo)記： A. 抗原 B相應(yīng)抗 C抗免疫球蛋白抗體 D抗

3、原-抗體復(fù)合物 E抗C3抗體 8用ELISA雙抗體夾心法檢測抗原A時，固相載體的包被物是： A. 酶標(biāo)抗A抗體 B未標(biāo)記的抗A抗體 C酶標(biāo)抗原A D未標(biāo)記的抗球蛋白抗體 E酶標(biāo)抗球蛋白抗體 9用免疫熒光技術(shù)直接法檢測病原微生物時，熒光素應(yīng)標(biāo)記在： A. 微生物上 B抗人Ig抗體上 C抗原-抗體復(fù)合物上 D.抗微生物抗體上 E抗C3抗體上 10診斷DTH的皮膚試驗，在前臂內(nèi)注射少量可溶性抗原后，觀察時間為： A10分鐘 B.30分鐘 C.6小時 D12小時 E.72小時 11可以用于對抗原進(jìn)行免疫組化定位的方法是： ANorthern Blot BWestern Blot C溶血空斑試驗 D免疫

4、熒光技術(shù) E混合淋巴細(xì)胞反應(yīng) 12不能刺激T細(xì)胞增殖分化的物質(zhì)是： A. 結(jié)核桿菌純蛋白衍生物（PPD） B.刀豆蛋白A（Con A） C植物血凝素（PHA） D細(xì)菌的脂多糖（LPS） E美洲商陸（PWM） 13用ELISA雙抗體夾心法檢測血清中甲胎蛋白（AFP），應(yīng)選擇的固相包被物是： A已知AFP B酶標(biāo)記AFP C抗AFP抗體 D酶標(biāo)記抗AFP抗體 E待檢血清 14能夠定量測定待檢物的免疫學(xué)試驗方法是： A環(huán)狀沉淀實驗 B單向瓊脂擴(kuò)散 C抗球蛋白實驗 D補(bǔ)體結(jié)合試驗 E對流免疫電泳 15用于檢測細(xì)胞免疫功能的皮膚試驗是： A青霉素皮試 B錫克試驗 C結(jié)核菌素試驗 D破傷風(fēng)抗毒素皮試 E白

5、喉抗毒素皮試 B型題 AWestern Bloting B細(xì)胞毒實驗 C溶血空斑實驗 DE花環(huán)實驗 EPHA淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實驗 1測T細(xì)胞數(shù)量 2測定抗體生成細(xì)胞數(shù) 3測定NK細(xì)胞殺傷活性 4測定非特異性細(xì)胞免疫功能 A測定Tc細(xì)胞的效應(yīng)功能 BIgG測定 CSmIg測定 DT細(xì)胞亞群測定 E淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化實驗 5PHA可用于 6免疫比濁法可用于 7流式細(xì)胞儀可用于 8細(xì)胞毒實驗可用于   X型題 1ELISA A酶與相應(yīng)底物作用產(chǎn)生顏色 B抗原或抗體可以特異性吸附于固相載體上 C可以用酶標(biāo)測定儀作定量分析 D蛋白酶是其標(biāo)記酶 E雙抗體夾心法可以檢測未知抗體 2能測定抗原的實驗包括 A絮

6、狀沉淀試驗 B間接凝集試驗 C火箭電泳 D酶聯(lián)免疫吸附試驗 E熒光免疫技術(shù)   三、名詞解釋 1酶聯(lián)免疫吸附試驗 2放射免疫分析法 3免疫熒光技術(shù) 4凝集反應(yīng) 5直接凝集反應(yīng) 6間接凝集反應(yīng) 7對流免疫電泳   四、問答題 1、從外周血分離淋巴細(xì)胞的方法有哪些？2、簡述細(xì)胞毒試驗的原理3、簡述細(xì)胞因子的檢測原理  第二部分 參考答案   一、填空題 1特異性2凝集、沉淀3免疫學(xué)檢測法、生物活性檢測法、分子生物學(xué)檢測法   二、多選題 A型題 1. D 2. C 3.E 4.E 5.D 6.D 7.C 8.B 9.D 10.E 11.D 12 .

7、D 13.C 14B 15.C B型題 1.D 2.C 3.B 4.E 5.E 6.B 7.D 8.A X型題 1.ABCD 2.ABCDE   三、名詞解釋 1酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）：將已知抗原或抗體吸附在固相載體表面，使抗原抗體反應(yīng)在固相表面上進(jìn)行，用洗滌方法使固相上的抗原抗體復(fù)合物與液相中游離抗原或抗體分開。用于抗原或抗體的定量檢測。2放射免疫分析法（RIA）：用放射性核素標(biāo)記抗原或抗體進(jìn)行的免疫學(xué)檢測。常用于微量抗原或抗體的定量檢測。3免疫熒光技術(shù)：用熒光素與抗體連接成熒光抗體、再與待檢標(biāo)本中的抗原反應(yīng)，在熒光顯微鏡下觀察抗原抗體反應(yīng)的部位，用于抗原的定位檢測。4凝集

8、反應(yīng)：顆粒性抗原（如細(xì)菌、細(xì)胞等）與相應(yīng)的抗體結(jié)合后形成肉眼可見的凝集塊。5直接凝集反應(yīng)：將細(xì)菌或紅細(xì)胞與相應(yīng)抗體直接反應(yīng)，出現(xiàn)細(xì)菌或紅細(xì)胞凝集的現(xiàn)象。6間接凝集反應(yīng)：將可溶性抗原包被（結(jié)合）在無關(guān)載體顆粒表面，再與相應(yīng)抗體反應(yīng)后，出現(xiàn)載體顆粒凝集的現(xiàn)象。7對流免疫電泳：在瓊脂糖電泳凝膠的正負(fù)極端打孔，并分別加入抗體和抗原，在電場的作用下，抗體和抗原作定向擴(kuò)散，其中抗體由于電滲作用，擴(kuò)散方向為正極向負(fù)極，而抗原則由于電泳作用，擴(kuò)散方向為負(fù)極向正極，在二著比例適當(dāng)?shù)奈恢贸霈F(xiàn)沉淀線。用于抗原或抗體的定性檢測。  四、問答題 1. 從外周血分離淋巴細(xì)胞的方法有哪些？答案（1）依靠淋巴細(xì)胞物

9、理特征的分離方法* 葡聚糖-泛影葡酸（Ficoll）等密度梯度離心法，根據(jù)淋巴細(xì)胞的比重將其與其他血細(xì)胞成分分離。* 尼龍綿分離法：根據(jù)B淋巴細(xì)胞粘附于尼龍棉的特性，將B細(xì)胞與T細(xì)胞分開。（2）依靠表面標(biāo)記的分離方法* E花環(huán)分離法：T細(xì)胞表面的CD2是綿羊紅細(xì)胞（SRBC）受體，能使T細(xì)胞與SRBC結(jié)合形成E花環(huán)，因花環(huán)形成后比重變大，采用密度梯度離心即可將T細(xì)胞從其他淋巴細(xì)胞中分離出來。* 免疫磁珠分離法：將某種表面標(biāo)記特異性抗體包被在磁性微珠上，與磁珠交聯(lián)的抗體能夠特異性結(jié)合具有這種表面標(biāo)記的細(xì)胞結(jié)合，然后用強(qiáng)磁場可將具有這種表面標(biāo)記的細(xì)胞分離出來。* 流式細(xì)胞術(shù)分離法：利用各種熒光素標(biāo)

10、記的表面標(biāo)記特異性抗體，使不同表面標(biāo)記的細(xì)胞結(jié)合上不同的熒光素，借助熒光活化細(xì)胞分選儀（FACS）將各種細(xì)胞分離開來。2. 簡述細(xì)胞毒試驗的原理答案：（1）對于可溶性物質(zhì)（如抗體、補(bǔ)體、腫瘤壞死因子等）導(dǎo)致的靶細(xì)胞破壞，可以采用簡單的染色法來進(jìn)行檢測，原理是當(dāng)靶細(xì)胞破壞時，其胞膜完整性被破壞，當(dāng)用染料（如臺盼藍(lán)、酚紅、結(jié)晶紫等）染色時，損傷的細(xì)胞漿將會著色，而未受損的靶細(xì)胞因胞膜完整，會拒染。結(jié)合光密度的測定，能夠進(jìn)行定量檢測。（2）對于效應(yīng)細(xì)胞（如CTL、NK等）對靶細(xì)胞的損傷，可以采用同位素釋放法、酶釋放法來進(jìn)行測定。其原理如下：* 51Cr釋放法：用Na251CrO4標(biāo)記靶細(xì)胞，若效應(yīng)細(xì)胞損傷靶細(xì)胞，51Cr將釋放進(jìn)入上清，檢測上清中的放射活性，即可計算出效應(yīng)細(xì)胞對靶細(xì)胞的殺傷活性。* 酶釋放法：靶細(xì)胞內(nèi)具有多種酶，當(dāng)靶細(xì)胞受損時，這些酶將從胞內(nèi)釋放至上清，通過上清中酶活性的檢測，可以計算出效應(yīng)細(xì)胞殺傷靶細(xì)胞的活性。最常用的酶是乳酸脫氫酶。（3）細(xì)胞凋亡檢測法：某些因