專題2 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用

1、考點(diǎn)考點(diǎn)1、微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)、微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)一、培養(yǎng)基的分類一、培養(yǎng)基的分類例：加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌；伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌例：加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌；伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基可以鑒別大腸桿菌選擇培養(yǎng)基的應(yīng)用選擇培養(yǎng)基的應(yīng)用加入青霉素的培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基分離酵母菌、霉菌等真菌分離酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基分離金黃色葡萄球菌分離金黃色葡萄球菌不加氮源的無(wú)氮培養(yǎng)基不加氮源的無(wú)氮培養(yǎng)基分離固氮菌分離固氮菌不加含碳有機(jī)物的無(wú)碳培養(yǎng)基不加含碳有機(jī)物的無(wú)碳培養(yǎng)基分離自養(yǎng)型微生物分離自養(yǎng)型微生物加入氨基喋呤的培養(yǎng)基加入氨基喋呤的培養(yǎng)基分離雜交瘤

2、細(xì)胞分離雜交瘤細(xì)胞二、微生物的營(yíng)養(yǎng)要素二、微生物的營(yíng)養(yǎng)要素 1、有關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的敘述中，正確的是、有關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的敘述中，正確的是 a.是碳源的物質(zhì)不可能同時(shí)是氮源是碳源的物質(zhì)不可能同時(shí)是氮源 b.凡碳源都能提供能量凡碳源都能提供能量 c.除水以外的無(wú)機(jī)物只能提供無(wú)機(jī)鹽除水以外的無(wú)機(jī)物只能提供無(wú)機(jī)鹽 d.無(wú)機(jī)氮源也能提供能量無(wú)機(jī)氮源也能提供能量d 2、如下表所示為某微生物培養(yǎng)基的配方，請(qǐng)回答：、如下表所示為某微生物培養(yǎng)基的配方，請(qǐng)回答： （1）依物理性質(zhì)，該培養(yǎng)基屬于）依物理性質(zhì)，該培養(yǎng)基屬于培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。依用途劃分，則屬于依用途劃分，則屬于培養(yǎng)基。培養(yǎng)基。 （2）根據(jù)培養(yǎng)基原料，所

3、培養(yǎng)微生物的同化作用）根據(jù)培養(yǎng)基原料，所培養(yǎng)微生物的同化作用類型是類型是，培養(yǎng)的微生物可能是，培養(yǎng)的微生物可能是。 （3）培養(yǎng)基中的碳源是）培養(yǎng)基中的碳源是。生長(zhǎng)因子是。生長(zhǎng)因子是。 （4）如何要鑒別自來(lái)水中的大腸桿菌是否超標(biāo)，）如何要鑒別自來(lái)水中的大腸桿菌是否超標(biāo)，至少要加入至少要加入和和，除去，除去。選擇選擇液體液體異養(yǎng)型異養(yǎng)型酵母菌、霉菌酵母菌、霉菌ch2o無(wú)無(wú)瓊脂瓊脂伊紅美藍(lán)伊紅美藍(lán)青霉素青霉素三、無(wú)菌技術(shù)三、無(wú)菌技術(shù)滅菌方法滅菌方法要求要求適用范圍適用范圍灼燒滅菌灼燒滅菌干熱滅菌干熱滅菌高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌 160170 12h100kpa 121 15-30min接種環(huán)的接種環(huán)

4、的滅菌滅菌培養(yǎng)皿、玻璃培養(yǎng)皿、玻璃棒的滅菌棒的滅菌培養(yǎng)基、無(wú)菌培養(yǎng)基、無(wú)菌水的滅菌水的滅菌四、培養(yǎng)基的制備過(guò)程四、培養(yǎng)基的制備過(guò)程稱量溶化滅菌倒平板計(jì)算考點(diǎn)考點(diǎn)2、微生物的分離操作、微生物的分離操作以純化大腸桿菌為例以純化大腸桿菌為例一、菌落與菌苔一、菌落與菌苔 單個(gè)或少數(shù)同單個(gè)或少數(shù)同種細(xì)菌在固體培種細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖養(yǎng)基上大量繁殖時(shí)，就會(huì)形成一時(shí)，就會(huì)形成一個(gè)肉眼可見(jiàn)的，個(gè)肉眼可見(jiàn)的，具有一定形態(tài)結(jié)具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細(xì)胞群體，構(gòu)的子細(xì)胞群體，叫做菌落。叫做菌落。二、二、純化大腸桿菌純化大腸桿菌的方的方法法平板劃線法平板劃線法二、二、純化大腸桿菌純化大腸桿菌的方法的方法稀釋涂布平板

5、法法稀釋涂布平板法法3 3、研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌、研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟如下圖所示，為土壤樣品。下列菌株，篩選的主要步驟如下圖所示，為土壤樣品。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是 a. a.培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源 b. b.如果要測(cè)定中活細(xì)菌數(shù)量，常采用稀釋涂布平板法如果要測(cè)定中活細(xì)菌數(shù)量，常采用稀釋涂布平板法 c. c.若圖中為對(duì)照實(shí)驗(yàn)，則其中應(yīng)以苯酚作為惟一碳源若圖中為對(duì)照實(shí)驗(yàn)，則其中應(yīng)以苯酚作為惟一碳源 d. d.使用平板劃線法可以在上獲得單菌落使

6、用平板劃線法可以在上獲得單菌落c4 4、微生物平板劃線示意圖。劃線的順序?yàn)?、微生物平板劃線示意圖。劃線的順序?yàn)?234512345。下列操。下列操作方法正確的是作方法正確的是a.a.只有操作前將接種環(huán)放在火焰旁灼燒滅菌只有操作前將接種環(huán)放在火焰旁灼燒滅菌b.b.劃線操作需在火焰上進(jìn)行劃線操作需在火焰上進(jìn)行c.c.在在5 5區(qū)域中才可以得到所需菌落區(qū)域中才可以得到所需菌落d.d.在在1234512345區(qū)域中畫線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌區(qū)域中畫線前后都要對(duì)接種環(huán)滅菌d （1 1）鑒定分解尿素的細(xì)菌的方法：在以）鑒定分解尿素的細(xì)菌的方法：在以 為為唯一氮源的培養(yǎng)基加入唯一氮源的培養(yǎng)基加入 指示劑，指示

7、劑指示劑，指示劑若變紅色，說(shuō)明該菌種分解尿素。若變紅色，說(shuō)明該菌種分解尿素。 （2 2）鑒定纖維素分解菌的方法：利用）鑒定纖維素分解菌的方法：利用 染色染色法，如果培養(yǎng)基中出現(xiàn)法，如果培養(yǎng)基中出現(xiàn) ，則說(shuō)明含有纖維，則說(shuō)明含有纖維素分解菌。素分解菌?？键c(diǎn)考點(diǎn)3、微生物的鑒定與數(shù)目測(cè)定、微生物的鑒定與數(shù)目測(cè)定尿素尿素酚紅酚紅剛果紅剛果紅透明圈透明圈附加：纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括附加：纖維素酶是一種復(fù)合酶，至少包括c c1 1、c cx x和葡萄糖和葡萄糖苷酶。苷酶。1 1、微生物的鑒定原理、微生物的鑒定原理稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法 5 5、請(qǐng)回答下列與檢驗(yàn)飲用水有關(guān)的問(wèn)題：、請(qǐng)回答下列

8、與檢驗(yàn)飲用水有關(guān)的問(wèn)題： （1 1）檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí)，通常將水樣進(jìn)行一系）檢驗(yàn)大腸桿菌的含量時(shí)，通常將水樣進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的水樣用涂布器分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，記錄菌落別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，記錄菌落數(shù)量數(shù)量, ,這種方法稱為這種方法稱為 。下面四種菌。下面四種菌落分布圖中，不可能由用該方法得到的是落分布圖中，不可能由用該方法得到的是 。 a b c d a b c d （2 2）用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)是否需要設(shè)置對(duì)照）用該方法統(tǒng)計(jì)樣本菌落數(shù)時(shí)是否需要設(shè)置對(duì)照組？組？ 。為什么？。為什么？

9、。稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法d需要需要判定培養(yǎng)基是否被雜菌污染判定培養(yǎng)基是否被雜菌污染 請(qǐng)回答下列與檢驗(yàn)飲用水有關(guān)的問(wèn)題：請(qǐng)回答下列與檢驗(yàn)飲用水有關(guān)的問(wèn)題： （3 3）如分別?。┤绶謩e取0.1ml0.1ml已稀釋已稀釋10103 3倍的水樣分別涂布倍的水樣分別涂布到三個(gè)瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)基記錄到三個(gè)瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，培養(yǎng)基記錄到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為到大腸桿菌的菌落數(shù)分別為5555、5656、5757，則每升原，則每升原水樣中大腸桿菌數(shù)為水樣中大腸桿菌數(shù)為 。 （4 4）已知大腸桿菌能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣，現(xiàn)提供）已知大腸桿菌能發(fā)酵乳糖并產(chǎn)酸產(chǎn)氣，現(xiàn)提供足量的已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液和具塞試管，應(yīng)如足量的已滅菌的乳糖蛋白胨培養(yǎng)液和具塞試管，應(yīng)如何判斷待檢水樣中是否含有大腸桿菌？何判斷待檢水樣中是否含有大腸桿菌？5.6108個(gè)個(gè)通過(guò)無(wú)菌操作通過(guò)無(wú)菌操作，向試管內(nèi)注入一定量待檢水樣，向試管內(nèi)注入一定量待檢水樣，再注入已滅菌的乳