大豆苷元對離體心臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用

1、大豆苷元對離體心臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用作者：張生枝，鐘星明，黃虎龍，陳潔玲，冒宸，葉麗 娟，曾靖【摘要】目的研究。方法應(yīng)用大鼠離體心肌缺血再灌 注損傷模型，在灌流液中加入高、低劑量的大豆苷元。測定 冠脈流量、心率、左心室收縮壓、左心室內(nèi)壓最大變化速率 及心肌組織乳酸脫氫酶(l dh)和心肌肌酸激酶活性的變化。 結(jié)果與溶劑組比較，大豆苷元能使左心室收縮壓升高、左心 室內(nèi)壓最大變化速率增大；能使心肌ldh及ck的活性升高； 冠脈流量、心率未見明顯變化。結(jié)論大豆苷元可通過增大左 心室內(nèi)壓最大變化速率、增強(qiáng)心肌收縮力及減少心肌酶的釋 放對離體心臟缺血再灌注損傷起保護(hù)作用?！娟P(guān)鍵詞】大豆苷元；缺血再

2、灌注損傷a bstract：objectivet oexplorethetherapeuticeffectsofdaidz yocardialischemia/ ardialischemia/rep lwasmadeandwastrea andlowdose). thecha rybloodflowlevels, entricularsystolicein (dd)onisolatedm reperfusionratmyoc erfusioninjurymode tedwithdd(highdose ngesofcoronaryarte heartrate,andleftv pressure,

3、aswellastheactivitiesoflact dh)andcreatinekina ated.resultscompar edwi ththedmsogroup eisolatedmyocardiaheleftventricularseleftventriculardihangingspeedincreaticactivitiesofldhissueincreased. thehenthetheleftventr ssuref schangingspe edandlimitstherele aseofckandldh.key words:daudzein (dd) ； myocard

4、ialischem ia/reperfusioninjury大豆苷元(daidzein，dd)系葛根中的主要成分之一，葛 根的有效成分為大豆苷元、染料木苷、黃豆黃苷、染料木素、 黃豆黃素。葛根素的臨床應(yīng)用非常廣泛，對心腦血管疾病dflowlevelsandtheh bviouschange. concl ticeffectonmyocard usioninjurybecause esmyocardialcontraatedehydrogenase(l se (ck)wereinvestig,aftertreatment, thltissueshowedthatt ystolicpressure

5、,th astolicpressure1 sc sed,aswellasenzyma andckinmyocardialt coronaryarteryblooeartratesshowednoousionddhastherapeu ialischemia/reperf itdilatestheenhancctileforce,strongt iculardiastolicpre1，2、視網(wǎng)膜疾病3等具有良好療效；大豆苷元也具 有抗心律失常4、抑制膽囊收縮5、耐缺氧6、影響 免疫器官7等作用。本實(shí)驗(yàn)通過lang endorff心臟灌流 裝置研究dd對心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。1材料與儀器藥

6、物大豆苷元由沈陽藥科大學(xué)植化教研室提供，純度為98%,實(shí)驗(yàn)前用二甲基亞砜溶解，使用時(shí)用k-h液稀釋至所 需濃度，ldh和ck檢測試劑盒購自南京建成生物工程研究所。動物sd大鼠購自江西中醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心，體質(zhì)量220250g，雌雄各半。儀器心臟灌流裝置，rm6240bd型多道生理信號采集處理 系統(tǒng)，hss-1型恒溫裕槽及l(fā)okpa壓力換能器，均購自成都 儀器廠。2 方法心臟灌流及給藥的方法健康sd大鼠24只，體質(zhì)量220 250g,隨機(jī)分為4組，每組6只，分別為心臟缺血再灌注模 型組，溶劑對照組(dmso)，dd高、低劑量組。大鼠10°/。水 合氯醛(3ml/kg)腹腔麻醉后，開胸迅

7、速取出心臟，置于4°c 改良k_h液中。迅速將主動脈套上langendorff心臟灌流裝 置，以37°c新鮮k-h液、左心室收縮壓、左心室內(nèi)壓最大變 化速率(土dp/d tmax)。用量筒測定同時(shí)間點(diǎn)各組的灌流量。 每個(gè)樣本以心臟停灌前各項(xiàng)指標(biāo)為1，計(jì)算出各時(shí)段的心臟灌流量、hr、lvsp及土dp/dtmax與心臟停灌前的比值。心肌組織生化指標(biāo)測定心臟灌流結(jié)束后，將心肌組織制 成10%的勻漿，于-80°c保存。按試劑盒說明，測定各組心肌 組織乳酸脫氫酶(ldh )、心肌肌酸激酶(ck)活性。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法運(yùn)用prism統(tǒng)計(jì)軟件，對各劑量藥物處理組 與模型組之間進(jìn)行單因

8、素方差分析。3結(jié)果dd對心臟缺血再灌注時(shí)lvsp, 士dp/dtmax的影響如 13所示，各劑量的dd均能在一定程度上增大lvsp和左心 室內(nèi)壓最大變化速率。兩種濃度的dd對灌流量及心率無明 顯影響。dd對心臟缺血再灌注時(shí)心肌ldh的影響高、低劑量dd再 灌注后，心肌ldi4的活性較模型組均升高。結(jié)果見圖4。dd對心臟缺血再灌注損傷時(shí)心肌ck的影響低劑量dd再 灌注后，心肌ck的活性升高。結(jié)果見圖5。4討論心臟疾病是目前危害人類健康的三大疾病之一。20世紀(jì) 80年代以來，隨著各種冠狀動脈再通技術(shù)廣泛應(yīng)用于臨床， 心肌再灌注損傷(myoc ardialreperfusioni njury； mr

9、i)越 來越受到重視。心肌缺血再灌注導(dǎo)致的心肌可逆性或不可逆 性損傷均造成心肌舒縮功能降低，表現(xiàn)為持久的心輸出量減 少，心室內(nèi)壓最大變化速率降低，再灌性心律失常、心肌內(nèi) 酶的外漏和冠脈流量減少等8。本實(shí)驗(yàn)主要觀察dd對離體心肌缺血再灌注損傷模型大鼠的心率、左心室內(nèi)壓最大變化速率(土dp/dtmax)、lvsp的 變化以及對心肌酶的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，dd能通過升高 lvsp,增大左心室內(nèi)壓最大變化速率，能減少心肌ck和ldh 酶的溢出，抑制心肌內(nèi)酶的釋放，從而保護(hù)缺血再灌注損傷 的心肌。dd減少心肌ck和ldh酶的溢出，這可能與穩(wěn)定心肌 細(xì)胞膜，增強(qiáng)心肌細(xì)胞對缺血及缺氧的耐受能力有關(guān)。目前 認(rèn)

10、為心肌缺血再灌注損傷的機(jī)制主要與氧自由基的生成、鈣 超載和白細(xì)胞激活有關(guān)9。本課題組的前期研究表明，dd 具有抗實(shí)驗(yàn)性心律失常、局麻、影響心房肌電生理特性、ca2+ 拮抗、耐缺氧、抗過氧化損傷等作用1015。也有人報(bào) 道dd具有抗氧化、擴(kuò)血管等作用1618 。那么，dd是 否能通過抗氧化作用保護(hù)缺血再灌注心肌，有待于進(jìn)一步研 究?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】1高艷芳.葛根素治療冠心病心絞痛臨床療效觀察 j.實(shí)用全科醫(yī)學(xué)，xx，3(5):410.2林樂整，王齊蘭.中醫(yī)綜合療法治療急性腦梗死療 效觀察j.河北中醫(yī)，xx，27(6):410.3張芹蓮.葛根素注射液在眼科學(xué)的臨床應(yīng)用j.長春中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1999，1

11、5(3):45.4 葉和楊，邱峰，曾靖，等.大豆苷元的抗心律失常 作用j.中國中藥雜志，xx，9(9):853.5 曾靖，李冬蓮，邱峰，等.大豆苷元對豚鼠膽囊自 發(fā)性收縮運(yùn)動的影響j.贛南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，xx，25(1):1.6 曾靖，黃志華，邱峰，等.大豆苷元的抗缺氧作用 j.中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，xx，21(6):145.7 曾靖，邱峰，葉和楊，等.大豆苷元對免疫器官的 影響j.贛南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，xx，24(2)：9.8 梁日欣，肖永慶，高偉，等.川芎內(nèi)酯a預(yù)處理 對大鼠離體心臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用j.中藥藥理 與臨床，xx，20(6):1.9 金銘，王建枝.病理生理學(xué)m.北京：人民衛(wèi)生 出版社

12、，xx : 202.10 葉和揚(yáng)，邱峰，曾靖，等.大豆苷元抗心律失常 作用的研究j.中國中藥雜志，xx，23(9 ): 853.11 曾靖，邱峰，葉和揚(yáng)，等.大豆苷元局部麻醉作 用的研究j.贛南醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，xx，24(6):637.12 葉和楊，陳秋英，邱峰，等.大豆苷元對離體豚 鼠心房肌電生理特性的作用j.中藥材，xx，29(4):312.13 曾靖，李良東，邱峰，等.大豆苷元對家兔胸主 動脈條收縮的影響j.中藥材，xx，28(11):1024.14 曾靖，黃志華，邱峰，等.大豆苷元耐缺氧的實(shí) 驗(yàn)研究j.中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，xx，21(6):454.15 黃玉珊，曾靖，黃玉萍，等.大豆苷元對大

13、鼠心、 腦、肝組織中sod和mda的影響j.華西藥學(xué)，xx，2 2(2): 138.16 unga ry, osundahunsiof, s himonie. thermalstabilityofgenisteinanddaidzinanditseffectontheirantioxid antactivity j . jagrcfoodchemxx,51(15)： 4394.17 woodmanol,boujaoudem. chr onictreatmentofmaleratswithdaidzeinandl7betaoestradio1 inducesthecontributionofedhftoendothelium-dependentr