固相萃取技術

1、姓名：胡敏華學號：20120204專業(yè)：藥物化學體內(nèi)藥物分析樣品前處理技術應用進展固相萃取技術摘要：固相萃取是近年來發(fā)展較快的樣品預處理技術.主要闡述了固 相萃取技術的基本原理及方法，綜述了固相萃取技術的發(fā)展狀況及應 用.關鍵詞：體內(nèi)紗物分析；樣品前處理；固相萃取體內(nèi)藥物分析是由藥物分析學派生出來的一門通過各種分析方法，研究藥物 在生物機休其代謝物和內(nèi)源性物質的質與量的變化規(guī)律的新興學科。與常規(guī)藥 物分析相比，體內(nèi)藥物分析在選擇性、靈敏度等方面都有許多不同，體內(nèi)藥物分 析在靈敏度和選擇性等方面有較高要求。生物體內(nèi)藥物分析時，由于體液成份十 分復朵，且干擾物質較多，而藥物濃度一般相對而言較低。若

2、耍準確地測定生物 樣品屮的藥物濃度，必須除去妨礙測定的雜質，對樣品進行預處理。根據(jù)生物樣品的種類、所用的測定手段、被測藥物的種類及濃度等不同，預 處理方法各異。因此如何方便、快捷地對樣品進行預處理，將少量的藥物從大量 復雜的生物基質中分離出來，以便準確定性、定量，是體內(nèi)藥物分析面臨的首耍 問題。近年來，高效液相色譜法及毛細管電泳法廣泛應用于體內(nèi)藥物分析屮，生物 樣品的預處理技術也得到了飛快地發(fā)展，特別是固相萃取技術(spe) 木文旨 在對近年相關文獻報道的兒種藥物分析過程屮生物樣品固相萃取預處理技術及 其在藥物分析中的應用進行綜述。固相萃取技術來純化生物樣品時采用的一種方法，自上世紀70年代誕

3、生以 來，以其高效、高選擇性、高度自動化的特點，被廣泛應用于各種生物樣品的分 離和純化。1、固相萃取的原理固相萃取(soild phase extraction,簡稱spe)是一個包括液相和固定相的物理 萃取過程。在萃取過程中，固相對分析物的吸附力大于樣品液。當樣品通過固相 柱時，分析物被吸附在柱子固泄相的表面，具他干擾物組分則通過柱子，而分析 物也可被適當溶劑洗脫下來。固相萃取不需耍人量溶劑，處理過程中也不會產(chǎn)生 乳化現(xiàn)象；因此采用高效、高選擇性的吸附劑萃取能顯著減少溶劑的用量；其預 處理過程簡單，費用也低。spe和hplc的基木原理相同，但日的則不同。hplc是要在各化合物保持 好峰形的前

4、提下短時間內(nèi)將其分離，而spe是要從含有許多復雜成分的樣品液中，分離人們感興趣的化合物，并對其進行進一步分析。因此，傳統(tǒng)的spe柱 填料的顆粒往往比hplc柱大得多。目前市面上主要使用的是鍵合硅膠柱和聚合 樹脂柱。2、相萃取的吸附劑2.1吸附劑的分類2.1.1親脂型吸附劑親脂性鍵合和硅膠苯基、烷基、氧基鍵合相硅膠都可用作固相萃取劑，其屮最常用的是十八 烷基鍵合相硅膠(簡稱c18)o親脂性鍵合相硅膠易吸附非極性物質，易用有機溶 劑洗脫，適于萃取、純化疏水性藥物和毒物，使用起來方便、省時，h前國內(nèi)外 研究者選用c18作為萃取劑已經(jīng)非常廣泛。(2)大孔吸附樹脂大孔吸附樹脂適于吸附分子量較大的物質，并

5、可選用不同極性的樹脂。最為常用的系列是由二乙烯苯及苯乙烯共聚而成的非極性型xad和二乙烯苯與 含氮朵環(huán)共聚而成的gdx401-403o2.1.2親水型吸附劑固和萃取的親水性填料主要有硅藻土、棉纖維等，其原理是依據(jù)分配作用， 水基質樣品分布于吸附劑表面作為固定相，與水不相溶的有機溶劑為流動相，流 動相洗脫親脂性的約物，以達到萃取的目的。此方法回收率高，但沒有親脂型吸 附劑萃取時方便省時。2.1.3離子交換樹脂利用藥物的酸堿性，用陰離子或陽離子交換樹脂作為萃取劑，吸附藥物后, 再用酸性或堿性溶液洗脫"°】。冋收率?？蛇_到90%以上，而且有較高的選擇性, 但使用起來較麻煩、費時。

6、按照所采用固相萃取劑的種類，可將固相萃取法分為3類：離子交換、反相 和止相固相萃取。當前固相萃取劑的開發(fā)主要側重于擴大萃取劑的適用范圍，將 極性、非極性基團，離子交換基團或高分子樹脂混合使用的混合型吸附劑，成為 冃前研究的熱點。主耍根據(jù)分析物的極性、溶解度、pkn等理化性質，選取適合 的固相萃取柱。隨著新型固相萃取劑的應用，出于可以綜合應用多種作用機制， 從而提高了各種固相萃取方法的應用范圍山】。3. spe在藥物分析中的應用隨著預處理技術的日益完善，固相萃取以其高效性、高選擇性、高自動化程 度和低耗性等優(yōu)點在藥物分析中應用的不斷增多，豐富了樣品預處理方法。并且 與lc/ms或hplc聯(lián)用，從

7、而使樣品在線預處理得以實現(xiàn)的特點，固相萃取技 術在夯物篩選等高通量、組合化學領域得到廣泛應用l,2-,4,o由于固相萃取技術有很多的優(yōu)點使得苴在藥物分析和藥物檢測領域迅速發(fā) 展。李巍等z用斧示脈沖伏安法測定牛黃解毒片小的黃苓昔時，由于牛黃解毒片中成分復雜，必須提純富集到足夠濃度的黃苓甘，用固相萃取技術進行前處理, 70%的乙醇提取，流速為每秒1滴。除雜效果非常好，并且重現(xiàn)性和冋收率較高, 靈敏度高，方法簡便，經(jīng)濟。朱炳輝等在用hplc測定蛇膽川貝液和蛇膽.汁 屮的牛磺膽酸含量時，用流動相超聲提取樣品，并注入活化的sep-pakc18 |®1相 萃取小柱，牛磺膽酸被小柱飽和吸附后的流出

8、液作反相高效液相色譜法測定用的 供試液，結呆在0.02530.253mg/ml質量濃度范i韋i內(nèi)，?；悄懰徕c進樣濃度與 峰面積響應值呈良好的線性關系，且1=0。999o該方法測定蛇膽汁和蛇膽川貝 液中的牛磺膽酸含量，簡便實用，分析結果準確可靠，可作為蛇膽汁和蛇膽川貝 液的質量控制方法。同吋，依據(jù)冃標成分離子化能力的強弱，可采用強陽離子固 相萃取柱進行預分組和凈化處理，建立了-種固相萃取一高效液相色譜測沱保健 品中格列毗嗪、格列唾酮、格列齊特、鹽酸二甲雙弧、格列本腺、瑞格列奈和鹽 酸苯乙雙弧7種降糖化藥的方法，此方法能對非法摻入合成菊的降糖樣晶進行篩 查和分析w hu等i兇以萊克多巴胺為模板分子

9、，采用微波輔助加熱制備了磁性 分子印跡微球，并采用分散固相萃取液和色譜熒光檢測法萃取分離豬肝和豬肉屮 的多種激動劑類藥物殘留，回收率為82。0%92。0%, rsd為5。8%10。0%磁分離技術和分散固相萃取方法的結合避免了柱填充過程，并且吸附劑可以 多次重復使用。xu等3】制備了-種具有均勻分子印跡涂覆層的吸附攪拌棒，且 應用于吸附攪拌萃取飼料、豬肉和豬肝屮痕量的多巴胺等激動劑類藥物，方法回 收率為73%o 6%92。3%, rsd為2。9%8。1%在內(nèi)填磁芯的玻璃毛細管表 而合成的多巴胺印跡層結合牢同、厚度均勻（20。6m）,表現(xiàn)出很好的選擇性和萃 取容量，且可重復使用40次以上。利用sp

10、e述可以分析人體體液中的抗組胺和 抗抑郁等藥物，如namera等1201用頂空固相微萃取一氣質聯(lián)用的方法，分析血液 中的四環(huán)抗抑郁劑。他們用0。5ml的1 mol/lm氧化鈉處理0.5ml血液后加入 內(nèi)標，再置于密封的12ml頂空瓶中，加熱到120°c, 100l聚二甲氧基硅烷纖維 萃取45 min,隨后采用gc分離后，用選擇離子檢測方式下的質譜法進行分析， 該方法線性范圍達3個數(shù)量級，rsd為5%10%o4、spe技術的發(fā)展前景spe是一種集萃取、濃縮、解吸于一體的實驗方法。以高效、高度自動化、 高選擇性的特點廣泛用于分析化學的樣品分離和純化，應用十分理想。在近兒十 年來發(fā)展十分迅

11、速，尤其在中藥分析領域，發(fā)展趨勢及前景更是一片大好。隨著 研究的不斷深入，萃取裝置不斷改良，各種性能優(yōu)越的吸附劑不斷被開發(fā)出來， spe在體內(nèi)藥物分析領域屮將擔任越來越重要的角色，今后也必將在樣品預處理 屮，尤其是在復雜屮藥分析的前處理方面發(fā)揮越來越大的作用。參考文獻：1 李好枝.體內(nèi)藥物分析m.北京:中國醫(yī)藥科技出版社.2004.2 童珊珊，余江南，劉文英.體內(nèi)藥物分析中的樣品預處理技術j.藥學進展.2001, 25(1):24-27.3 dimson p, et al. american laboratory, 1986,(10):82-94.4 broich j r, hoffman d

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