菊花的組織培養(yǎng)(3)課件

1、菊 花 的 組 織 培 養(yǎng)菊 花 的 組 織 培 養(yǎng) 大多綠色開花植大多綠色開花植物都是靠物都是靠種子種子繁殖。繁殖。那么，有沒有不用那么，有沒有不用種子來培育植物的種子來培育植物的方法呢？方法呢？ 扦插扦插嫁接嫁接壓條壓條 莖的營養(yǎng)莖的營養(yǎng)繁殖方式繁殖方式 指在人工培養(yǎng)基上，離體培指在人工培養(yǎng)基上，離體培養(yǎng)植物的器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體，養(yǎng)植物的器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體，并使其生長、增殖、分化以及再生植株并使其生長、增殖、分化以及再生植株的技術(shù)。的技術(shù)。 組織培養(yǎng)組織培養(yǎng)即已分化的細(xì)胞，仍具有發(fā)育形成即已分化的細(xì)胞，仍具有發(fā)育形成完整個體的潛能。完整個體的潛能。離體的植物離體的植物器官、

2、組織、器官、組織、細(xì)胞細(xì)胞脫分化脫分化愈愈傷傷組組織織再分化再分化 胚狀胚狀體或體或叢芽叢芽植植物物體體植物組織培養(yǎng)的基本過程植物組織培養(yǎng)的基本過程在植物中在植物中, 去分化細(xì)胞成為薄壁細(xì)胞去分化細(xì)胞成為薄壁細(xì)胞, 稱為稱為愈傷組織愈傷組織 外植體：外植體：脫分化：脫分化：再分化：再分化：愈傷組織：愈傷組織：愈傷組織愈傷組織（二）影響植物組織培養(yǎng)的因素（二）影響植物組織培養(yǎng)的因素1.不同的植物組織，培養(yǎng)的難易程度差別很不同的植物組織，培養(yǎng)的難易程度差別很大。例如，煙草和胡蘿卜的組織培養(yǎng)較為容大。例如，煙草和胡蘿卜的組織培養(yǎng)較為容易，而枸杞愈傷組織的芽誘導(dǎo)就比較難。因易，而枸杞愈傷組織的芽誘導(dǎo)就

3、比較難。因此，此，植物材料的選擇直接關(guān)系到實驗的成敗。植物材料的選擇直接關(guān)系到實驗的成敗。對于同一種植物材料，材料的年齡、保存時對于同一種植物材料，材料的年齡、保存時間的長短等也會影響實驗結(jié)果。間的長短等也會影響實驗結(jié)果。菊花的組織菊花的組織培養(yǎng)，一般選擇培養(yǎng)，一般選擇未開花植株的莖上部新萌生未開花植株的莖上部新萌生的側(cè)枝。的側(cè)枝。外植體的年齡：外植體的年齡：幼嫩的植物組織幼嫩的植物組織外植體的大?。和庵搀w的大小：大小適中大小適中外植體所在的部位：外植體所在的部位：莖尖，根尖等莖尖，根尖等外植體的外觀形態(tài)：外植體的外觀形態(tài)：表面相對光滑，容易表面相對光滑，容易消毒；消毒；2.2.離體的植物組織

4、和細(xì)胞，對營養(yǎng)、環(huán)境等條件的要求離體的植物組織和細(xì)胞，對營養(yǎng)、環(huán)境等條件的要求相對特殊，需要配制適宜的培養(yǎng)基。相對特殊，需要配制適宜的培養(yǎng)基。常用的一種培養(yǎng)常用的一種培養(yǎng)基是基是MSMS培養(yǎng)基培養(yǎng)基。 MSMS固體培養(yǎng)基成分及比例固體培養(yǎng)基成分及比例答案：答案：此時的組織或細(xì)胞為離體的，即細(xì)胞所生此時的組織或細(xì)胞為離體的，即細(xì)胞所生活的環(huán)境為液體有機(jī)物營養(yǎng)環(huán)境，而不是能體現(xiàn)活的環(huán)境為液體有機(jī)物營養(yǎng)環(huán)境，而不是能體現(xiàn)其整個植物體的光能自養(yǎng)其整個植物體的光能自養(yǎng)答案：答案：在培養(yǎng)過程中，是脫分化、再分化的過在培養(yǎng)過程中，是脫分化、再分化的過程，隨著芽和根的形成，就具有了自養(yǎng)的能力，程，隨著芽和根的

5、形成，就具有了自養(yǎng)的能力，是由細(xì)胞到一個個體的演變過程是由細(xì)胞到一個個體的演變過程思考：高等植物是光能自養(yǎng)型生物，為什么在植思考：高等植物是光能自養(yǎng)型生物，為什么在植物組織培養(yǎng)過程中還需要提供有機(jī)物培養(yǎng)基？物組織培養(yǎng)過程中還需要提供有機(jī)物培養(yǎng)基？思考：培養(yǎng)過程中為什么需要進(jìn)行光照？思考：培養(yǎng)過程中為什么需要進(jìn)行光照？植物激素濃度、使用的先后順序以及用量的植物激素濃度、使用的先后順序以及用量的比例等，會影響實驗結(jié)果。比例等，會影響實驗結(jié)果。 按照不同的順序按照不同的順序使用這兩類激素，會得到不同的實驗結(jié)果。使用這兩類激素，會得到不同的實驗結(jié)果。除了上述因素外，除了上述因素外，PHPH、溫度、光照

6、等條件、溫度、光照等條件也很重要。也很重要。不同的植物對各種條件的要求往往不同的植物對各種條件的要求往往不同。進(jìn)行菊花的組織培養(yǎng)，一般將不同。進(jìn)行菊花的組織培養(yǎng)，一般將PHPH值控制值控制在在5.85.8左右，溫度控制在左右，溫度控制在18-2218-22，并且每日用，并且每日用日光燈照射日光燈照射12h12h。閱讀課文，思考以下問題閱讀課文，思考以下問題2、你認(rèn)為組織培養(yǎng)過程中，成功的關(guān)鍵、你認(rèn)為組織培養(yǎng)過程中，成功的關(guān)鍵有哪些？這些步驟的適宜條件是什么？有哪些？這些步驟的適宜條件是什么？組織的脫分化及愈傷組織的再分化。組織的脫分化及愈傷組織的再分化。植物組織培養(yǎng)過程中，影響植物細(xì)胞植物組織

7、培養(yǎng)過程中，影響植物細(xì)胞脫分化、再分化的最重要因素是植物激素，脫分化、再分化的最重要因素是植物激素，細(xì)胞分裂素與生長素之間的濃度比可以調(diào)細(xì)胞分裂素與生長素之間的濃度比可以調(diào)控植株組培過程中芽和根的形成?？刂仓杲M培過程中芽和根的形成。 生長素生長素/細(xì)胞分裂素細(xì)胞分裂素高高 有利于根的分化、抑制芽的形成有利于根的分化、抑制芽的形成低低 有利于芽的分化、抑制根的形成有利于芽的分化、抑制根的形成同常規(guī)的無性繁殖方法相比，組織培養(yǎng)快速同常規(guī)的無性繁殖方法相比，組織培養(yǎng)快速繁殖法主要具有以下優(yōu)點：繁殖法主要具有以下優(yōu)點：（1 1）快速。）快速。采用常規(guī)的方法如分株法，一棵花采用常規(guī)的方法如分株法，一棵花

8、卉一年一般只能生產(chǎn)幾株或幾十株，但用組卉一年一般只能生產(chǎn)幾株或幾十株，但用組織培養(yǎng)的方法則每年可以繁殖出幾萬甚至數(shù)織培養(yǎng)的方法則每年可以繁殖出幾萬甚至數(shù)百萬的小植株。百萬的小植株。（2 2）周年生產(chǎn)。）周年生產(chǎn)?；ɑ芙M織培養(yǎng)快速繁殖是在實花卉組織培養(yǎng)快速繁殖是在實驗室中進(jìn)行，因條件可控，所以不受季節(jié)限驗室中進(jìn)行，因條件可控，所以不受季節(jié)限制，可以全年進(jìn)行連續(xù)生產(chǎn)。而常規(guī)的無性制，可以全年進(jìn)行連續(xù)生產(chǎn)。而常規(guī)的無性繁殖則受季節(jié)限制，只能在花卉生長季節(jié)進(jìn)繁殖則受季節(jié)限制，只能在花卉生長季節(jié)進(jìn)行繁殖。行繁殖。組織培養(yǎng)與常規(guī)繁殖相比優(yōu)點眾多組織培養(yǎng)與常規(guī)繁殖相比優(yōu)點眾多（3 3）經(jīng)濟(jì)效益高。）經(jīng)濟(jì)效益

9、高?；ɑ芙M織培養(yǎng)快速繁殖所花卉組織培養(yǎng)快速繁殖所需要的空間小，在一個需要的空間小，在一個200200平方米的培養(yǎng)室平方米的培養(yǎng)室內(nèi)一年可生產(chǎn)試管苗上百萬株。如按每株內(nèi)一年可生產(chǎn)試管苗上百萬株。如按每株1 1元計算，每年產(chǎn)值上百萬元。元計算，每年產(chǎn)值上百萬元。（4 4）以組織培養(yǎng)繁殖的種苗與母株有著相同）以組織培養(yǎng)繁殖的種苗與母株有著相同的遺傳基因。的遺傳基因。所以使用這項技術(shù)可讓優(yōu)良所以使用這項技術(shù)可讓優(yōu)良的品種不斷地延續(xù)。的品種不斷地延續(xù)。組織培養(yǎng)與常規(guī)繁殖相比優(yōu)點眾多組織培養(yǎng)與常規(guī)繁殖相比優(yōu)點眾多轉(zhuǎn)基因植物的培育，轉(zhuǎn)基因植物的培育，1 1、植物快速繁殖、植物快速繁殖制備制備MSMS固體固體

10、培養(yǎng)基培養(yǎng)基外植體消毒外植體消毒接種接種培養(yǎng)培養(yǎng)栽培栽培移栽移栽沖洗沖洗70%酒精酒精無菌水沖無菌水沖洗洗氯化汞氯化汞無菌水沖洗至無菌水沖洗至少三次之上少三次之上1 1、培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）、培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）2 2、外植體的消毒（酒精、氯化汞）、外植體的消毒（酒精、氯化汞）3 3、接種的無菌操作（酒精、酒精、接種的無菌操作（酒精、酒精燈燈灼燒）灼燒）4 4、無菌箱中的培養(yǎng)；、無菌箱中的培養(yǎng)；5 5、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時間。段時間。在整個操作過程中，是如何來實現(xiàn)無菌環(huán)境的？在整個操作過程中，是如何來實現(xiàn)無菌環(huán)境的？植物組織培養(yǎng)過程示意圖植物組織培養(yǎng)過程示意圖 上面的示意圖中還有什么地方不夠上面的示意圖中還有什么地方不夠完善的？完善的？沒有進(jìn)行滅菌處理，試管也沒有做沒有進(jìn)行滅菌處理，試管也沒有做密