cau10ProteinProcessingandTranslocation

1、第十章第十章 蛋白質(zhì)翻譯后的加工與轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白質(zhì)翻譯后的加工與轉(zhuǎn)運(yùn)Chapter 10 The Post-translation Processing and Translocation本章的主要內(nèi)容本章的主要內(nèi)容:1. 蛋白質(zhì)翻譯后的加工方式蛋白質(zhì)翻譯后的加工方式;2. 蛋白質(zhì)翻譯后的轉(zhuǎn)運(yùn)與定位。蛋白質(zhì)翻譯后的轉(zhuǎn)運(yùn)與定位。什么是蛋白質(zhì)？什么是蛋白質(zhì)？ 第一節(jié)第一節(jié) 蛋白質(zhì)翻譯后的加工蛋白質(zhì)翻譯后的加工 由一定數(shù)量和種類的氨基酸，按照特由一定數(shù)量和種類的氨基酸，按照特定的排列順序，通過羧基與氨基縮合形成定的排列順序，通過羧基與氨基縮合形成的肽鍵連接在一起，形成多肽鏈。由一條的肽鍵連接在一起，形成多

2、肽鏈。由一條或幾條多肽鏈經(jīng)進(jìn)一步折疊、盤曲、纏繞或幾條多肽鏈經(jīng)進(jìn)一步折疊、盤曲、纏繞而形成的具有一定空間結(jié)構(gòu)和生物功能的而形成的具有一定空間結(jié)構(gòu)和生物功能的生物大分子。生物大分子。蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次：蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次：一級(jí)一級(jí) 二級(jí)二級(jí) 三級(jí)三級(jí) 四級(jí)結(jié)構(gòu)四級(jí)結(jié)構(gòu)超二級(jí)結(jié)構(gòu)超二級(jí)結(jié)構(gòu)結(jié)構(gòu)域結(jié)構(gòu)域3D Structure 蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)是指多肽鏈中的氨基酸蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)是指多肽鏈中的氨基酸的排列順序。一級(jí)結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)層次體的排列順序。一級(jí)結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)層次體系的基礎(chǔ)，它是決定更高層次結(jié)構(gòu)的主要因系的基礎(chǔ)，它是決定更高層次結(jié)構(gòu)的主要因素，也就是一級(jí)結(jié)構(gòu)決定高級(jí)結(jié)構(gòu)。這是蛋素，也就是一級(jí)結(jié)構(gòu)決定

3、高級(jí)結(jié)構(gòu)。這是蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)組織的基本原理。白質(zhì)結(jié)構(gòu)組織的基本原理。 蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)組織的基本原理：蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)組織的基本原理： 體外蛋白質(zhì)變性：體外蛋白質(zhì)變性： 天然態(tài)（折疊態(tài)）天然態(tài)（折疊態(tài)） 變性態(tài)（伸展態(tài)）變性態(tài)（伸展態(tài)） 體外蛋白質(zhì)的復(fù)性體外蛋白質(zhì)的復(fù)性: U I N變性因素變性因素 快快 慢慢一、蛋白質(zhì)的折疊一、蛋白質(zhì)的折疊 （一）體外蛋白質(zhì)折疊的機(jī)制（一）體外蛋白質(zhì)折疊的機(jī)制 體外蛋白質(zhì)的折疊可能是始于體外蛋白質(zhì)的折疊可能是始于疏水坍塌（疏水坍塌（hydrophobic collapse），或始于，或始于轉(zhuǎn)角（轉(zhuǎn)角（turn），或始于，或始于共價(jià)鍵相互作用共價(jià)鍵相互作用（如二硫鍵的形成）。

4、（如二硫鍵的形成）。 在折疊早期，可能這三種方式聯(lián)合起作用。之后，可能沿在折疊早期，可能這三種方式聯(lián)合起作用。之后，可能沿著有限的多途徑形成中間態(tài)（熔球態(tài)）。這個(gè)過程是快速的。著有限的多途徑形成中間態(tài)（熔球態(tài)）。這個(gè)過程是快速的。最后再由中間態(tài)進(jìn)入天然態(tài)，此過程比較慢，是折疊反應(yīng)的限最后再由中間態(tài)進(jìn)入天然態(tài)，此過程比較慢，是折疊反應(yīng)的限速步驟。速步驟。溶劑中的水分子對(duì)蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的作用：溶劑中的水分子對(duì)蛋白質(zhì)空間結(jié)構(gòu)的作用： 1）結(jié)合在蛋白質(zhì)分子表面的水分子，具有穩(wěn)定）結(jié)合在蛋白質(zhì)分子表面的水分子，具有穩(wěn)定表面?zhèn)孺湹臉?gòu)象和表面二級(jí)結(jié)構(gòu)片段的作用；表面?zhèn)孺湹臉?gòu)象和表面二級(jí)結(jié)構(gòu)片段的作用； 2）

5、結(jié)合在蛋白質(zhì)分子內(nèi)部的少量水分子，不僅）結(jié)合在蛋白質(zhì)分子內(nèi)部的少量水分子，不僅有助于局部結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定，還可直接參與蛋白質(zhì)的功能有助于局部結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定，還可直接參與蛋白質(zhì)的功能作用；作用； 3）環(huán)境中的水有助于蛋白質(zhì)的折疊和三維結(jié)構(gòu)）環(huán)境中的水有助于蛋白質(zhì)的折疊和三維結(jié)構(gòu)的形成。的形成。（二）體內(nèi)蛋白質(zhì)的折疊（二）體內(nèi)蛋白質(zhì)的折疊 體內(nèi)環(huán)境復(fù)雜；需要體內(nèi)環(huán)境復(fù)雜；需要助折疊蛋白助折疊蛋白（folding helper）的參與，從而降低）的參與，從而降低了折疊的錯(cuò)誤，提高了效率了折疊的錯(cuò)誤，提高了效率(95%)；在翻譯結(jié)束之前即開始（在翻譯結(jié)束之前即開始（鄒氏學(xué)說鄒氏學(xué)說）。）。助折疊蛋白：助折疊蛋白

6、： 1. 酶酶 ：蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶；肽酰脯氨酰順反異構(gòu)酶。蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶；肽酰脯氨酰順反異構(gòu)酶。與新生肽鏈的折疊密切相關(guān)，加速蛋白質(zhì)折疊過程。與新生肽鏈的折疊密切相關(guān)，加速蛋白質(zhì)折疊過程。 2. 分子伴侶：分子伴侶：細(xì)胞內(nèi)幫助新生肽鏈正確組裝，成為成熟細(xì)胞內(nèi)幫助新生肽鏈正確組裝，成為成熟蛋白質(zhì)，而本身卻不是最終功能蛋白質(zhì)分子的組成成分的分蛋白質(zhì)，而本身卻不是最終功能蛋白質(zhì)分子的組成成分的分子，都稱為分子伴侶子，都稱為分子伴侶（molecular chaperone）。）。 Figure 8.5 Chaperone families have eukaryotic and bacteria

7、l counterparts (named in parentheses)脅迫脅迫-70（stress-70）家族：）家族： 分子伴侶蛋白：分子伴侶蛋白：脅迫脅迫 70（stress 70 ）家族；分子伴侶）家族；分子伴侶（chaperonin）家族。廣泛存在于原核和真核生物細(xì)胞中。）家族。廣泛存在于原核和真核生物細(xì)胞中。Figure 8.6 DnaJ assists the binding of DnaK (Hsp70), which assists the folding of nascent proteins. ATP hydrolysis drives conformational c

8、hange. GrpE displaces the ADP; this causes the chaperones to be released. Multiple cycles of association and dissociation may occur during the folding of a substrate protein。分子伴侶分子伴侶（chaperonin）家族：）家族：Figure 8.8 GroEL forms an oligomer of two rings, each comprising a hollow cylinder made of 7 subuni

9、ts.Figure 8.9 Two rings of GroEL associate back to back to form a hollow cylinder. GroES forms a dome that covers the central cavity on one side. Protein substrates bind to the cavity in the distal ring.二、蛋白質(zhì)的修飾二、蛋白質(zhì)的修飾 （一）末端氨基的脫甲?；停ㄒ唬┠┒税被拿摷柞；蚇 N端蛋氨酸的切除端蛋氨酸的切除 對(duì)起始氨基酸的修飾。對(duì)起始氨基酸的修飾。 （二）多肽鏈的水解斷裂（二）多

10、肽鏈的水解斷裂: : 胰島素的修飾過程。胰島素的修飾過程。PreproPrepro-insulin -insulin Pro-insulinPro-insulin insulin insulin Pre-peptide(24AA)C-peptide圖圖5. 人胰島素原的分子結(jié)構(gòu)模式圖人胰島素原的分子結(jié)構(gòu)模式圖Fig.5 Sketch of the Structure of Human Proinsulin圖圖6. 由胰島素原轉(zhuǎn)變?yōu)橐葝u素的產(chǎn)物由胰島素原轉(zhuǎn)變?yōu)橐葝u素的產(chǎn)物Fig.6 Proinsulin Changing into Insulin胰蛋白酶原的激活胰蛋白酶原的激活 （三）氨基酸側(cè)鏈

11、的修飾（三）氨基酸側(cè)鏈的修飾 二硫鍵的形成；羥化作用；氨基酸殘基的交聯(lián)；羧化作用；二硫鍵的形成；羥化作用；氨基酸殘基的交聯(lián)；羧化作用；甲基化等。詳細(xì)內(nèi)容參見下甲基化等。詳細(xì)內(nèi)容參見下表表。 （四）糖基化（四）糖基化 生成糖蛋白，膜蛋白和分泌蛋白多為糖蛋白。生成糖蛋白，膜蛋白和分泌蛋白多為糖蛋白。 （五）脂類對(duì)蛋白質(zhì)的共價(jià)修飾（五）脂類對(duì)蛋白質(zhì)的共價(jià)修飾 (1)(1)在翻譯中，連接肉豆寇酸于在翻譯中，連接肉豆寇酸于N-N-端甘氨酸；端甘氨酸； (2)(2)在翻譯后，以脂酰在翻譯后，以脂酰-CoA-CoA為供體為供體, ,脂肪酸與半胱氨酸、絲脂肪酸與半胱氨酸、絲氨酸或蘇氨酸側(cè)鏈酯化；氨酸或蘇氨酸側(cè)

12、鏈酯化； (3)(3)在翻譯后，通過乙醇胺將糖基在翻譯后，通過乙醇胺將糖基- -磷脂?；〈迹字；〈迹℅PIGPI）連）連接于多肽前體的接近接于多肽前體的接近C C端的氨基酸殘基上，生成與膜結(jié)合的端的氨基酸殘基上，生成與膜結(jié)合的GPI-GPI-錨定蛋白（錨定蛋白（GPI-anchored proteinGPI-anchored protein）。）。 表表. 蛋白質(zhì)生物合成中氨基酸殘基的修飾蛋白質(zhì)生物合成中氨基酸殘基的修飾氨基酸氨基酸 修飾方式修飾方式精氨酸精氨酸 ADP 核糖基化；氨基未端甲基化核糖基化；氨基未端甲基化天冬酰胺天冬酰胺 ADP 核糖基化；核糖基化；糖基化糖基化；氨基未端

13、甲基化；氨基未端甲基化； 羥化作用羥化作用天冬氨酸天冬氨酸 在在GPI 錨錠蛋白中以酰胺連接于乙醇胺；錨錠蛋白中以酰胺連接于乙醇胺； 羥化作用羥化作用半胱氨酸半胱氨酸 二硫鍵形成；脂肪?；饔枚蜴I形成；脂肪?；饔霉劝彼峁劝彼?羥基化作用；甲基化作用羥基化作用；甲基化作用谷氨酰胺谷氨酰胺 賴氨酸氨基交聯(lián)；氨基末端甲基化；內(nèi)部環(huán)化成氨基末端焦谷氨酸賴氨酸氨基交聯(lián)；氨基末端甲基化；內(nèi)部環(huán)化成氨基末端焦谷氨酸甘氨酸甘氨酸 轉(zhuǎn)變成羥基未端酰胺；氨基未端的肉豆寇?；D(zhuǎn)變成羥基未端酰胺；氨基未端的肉豆寇?；M氨酸組氨酸 形成白喉酰胺（形成白喉酰胺（dipbthamide），），ADP 核糖基化；氨基末端

14、甲基化核糖基化；氨基末端甲基化賴氨酸賴氨酸 羥化作用后羥化作用后5 羥賴氨酸糖基化；交聯(lián)形成；乙?；饔昧u賴氨酸糖基化；交聯(lián)形成；乙?；饔眉琢虬彼峒琢虬彼?氨基未端甲酰基團(tuán)脫甲?；饔?；氨基未端甲基化氨基未端甲?；鶊F(tuán)脫甲?；饔?；氨基未端甲基化苯丙氨酸苯丙氨酸 氨基未端甲基化氨基未端甲基化脯氨酸脯氨酸 羥化作用形成羥化作用形成3 或或4 羥脯氨酸；氨基未端甲基化羥脯氨酸；氨基未端甲基化絲氨酸絲氨酸 磷酸化磷酸化；糖基化糖基化；脂肪酰化；在；脂肪?；?；在tRNA水平上硒代半胱氨酸的形成水平上硒代半胱氨酸的形成蘇氨酸蘇氨酸 磷酸化磷酸化；糖基化糖基化；脂肪?；饔茫恢觉；饔美野彼崂野彼?磷酸

15、化磷酸化；哺乳動(dòng)物；哺乳動(dòng)物 微管蛋白中羥基未端殘基的交換微管蛋白中羥基未端殘基的交換 （六）（六） ADP ADP核糖基化：核糖基化：細(xì)胞核內(nèi)組蛋白。細(xì)胞核內(nèi)組蛋白。 （七）乙?；ㄆ撸┮阴；?乙?；毡榇嬖谟谠撕驼婧松镏幸阴；毡榇嬖谟谠撕驼婧松镏?。有。有二種二種: :(1)(1)由結(jié)合于核糖體的乙?；D(zhuǎn)移酶催化，將乙酰由結(jié)合于核糖體的乙酰基轉(zhuǎn)移酶催化，將乙酰CoACoA的乙酰基轉(zhuǎn)移至正在合成的多肽鏈上；（的乙酰基轉(zhuǎn)移至正在合成的多肽鏈上；（2 2）翻譯后由細(xì)胞質(zhì)）翻譯后由細(xì)胞質(zhì)的酶催化發(fā)生乙?；５拿复呋l(fā)生乙?；?（八）磷酸化（八）磷酸化 酶、受體、介質(zhì)及調(diào)節(jié)因子等蛋白質(zhì)的普

16、酶、受體、介質(zhì)及調(diào)節(jié)因子等蛋白質(zhì)的普遍修飾方式。在細(xì)胞生長(zhǎng)和代謝調(diào)節(jié)中有重要功能。發(fā)生在翻遍修飾方式。在細(xì)胞生長(zhǎng)和代謝調(diào)節(jié)中有重要功能。發(fā)生在翻譯后，由各種蛋白激酶催化進(jìn)行。譯后，由各種蛋白激酶催化進(jìn)行。 （九）（九）C C 端酰胺基的引入端酰胺基的引入 （十）酪氨基的硫酸化（十）酪氨基的硫酸化 真核生物蛋白質(zhì)的酪氨酸硫酸化。真核生物蛋白質(zhì)的酪氨酸硫酸化。 Protein translocation describes the movement of a protein across a membrane. This occurs across the membranes of organel

17、les in eukaryotes, or across the plasma membrane in bacteria. Each membrane across which proteins are translocated has a channel specialized for the purpose. Two types of Ribosome in cells：Free ribosome and membrannous ribosome. The leader of a protein is a short N-terminal sequence responsible for

18、initiating passage into or through a membrane. Signal sequences are most often leaders that are located at the N-terminus. N-terminal signal sequences are usually cleaved off the protein during the insertion process. 第二節(jié)第二節(jié) 蛋白質(zhì)的跨膜運(yùn)輸與定位蛋白質(zhì)的跨膜運(yùn)輸與定位 Figure 8.1 Proteins that are localized post-translati

19、onally are released into the cytosol after synthesis on free ribosomes. Proteins that are localized cotranslationally associate with the ER membrane during synthesis. 一、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)位的途徑一、蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)位的途徑1. 共翻譯轉(zhuǎn)位共翻譯轉(zhuǎn)位（co-translational translocation） Proteins that are localized cotranslationally associate with the ER

20、 membrane during synthesis, so their ribosomes are membrane-bound. The proteins pass into the endoplasmic reticulum, along to the Golgi, and then through the plasma membrane, unless they have signals that cause retention at one of the steps on the pathway. They may also be directed to other organell

21、es, such as endosomes or lysosomes. 2. 翻譯后轉(zhuǎn)位（翻譯后轉(zhuǎn)位（post-translational translocation ） Proteins that are localized post-translationally are released into the cytosol after synthesis on free ribosomes. Some have signals for targeting to organelles such as the nucleus or mitochondria. Figure 8.3 Membra

22、ne-bound ribosomes have proteins with N-terminal sequences that enter the ER during synthesis. The proteins may flow through to the plasma membrane or may be diverted to other destinations by specific signals.（一）（一）Co-translational translocation1. 進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)The signal recognition particle (SRP) is a

23、 ribonucleo-protein complex that recognizes and binds to signal sequences during translation and guides the ribosome to the translocation channel. SRPs from different organisms may have different compositions, but all contain related proteins and RNAs. Function: It can bind to the signal sequence of

24、 a nascent secretory protein. And it can bind to a protein (the SRP receptor) located in the membrane. Signal-SRP binding causes protein synthesis to pause. But protein synthesis resumes when the SRP binds to the SRP receptor in the membrane. Signal peptidase is an enzyme within the membrane of the

25、ER that specifically removes the signal sequences from proteins as they are translocated. Analogous activities are present in bacteria, archae-bacteria, and in each organelle in a eukaryotic cell into which proteins are targeted and translocated by means of removable targeting sequences. Signal pept

26、idase is one component of a larger protein complex. Function: The signal sequence is cleaved from the translocating protein by the signal peptidase located on the inside face of the membrane. 2. 蛋白質(zhì)在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的滯留蛋白質(zhì)在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的滯留 進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔的蛋白質(zhì)一部分滯留在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)，但大多進(jìn)入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔的蛋白質(zhì)一部分滯留在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)，但大多數(shù)蛋白質(zhì)則在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔內(nèi)被加工，然后轉(zhuǎn)入高爾基體，最終數(shù)蛋白質(zhì)則在內(nèi)質(zhì)

27、網(wǎng)腔內(nèi)被加工，然后轉(zhuǎn)入高爾基體，最終轉(zhuǎn)送到細(xì)胞的其它位置，或是由胞泌作用被排出細(xì)胞外。轉(zhuǎn)送到細(xì)胞的其它位置，或是由胞泌作用被排出細(xì)胞外。 如果某些分泌蛋白不具有正確的空間構(gòu)象，肽鏈不能通如果某些分泌蛋白不具有正確的空間構(gòu)象，肽鏈不能通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，被滯留后通過反向轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)被降解。過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，被滯留后通過反向轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)被降解。 在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的蛋白質(zhì)有一部分插入到膜內(nèi)，成為膜的整在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的蛋白質(zhì)有一部分插入到膜內(nèi)，成為膜的整合蛋白（合蛋白（integralmembrane protein）。這些肽鏈有一段錨定）。這些肽鏈有一段錨定（anchor）序列，作為終止轉(zhuǎn)移信號(hào)（）序列，作為終止轉(zhuǎn)移信號(hào)

28、（stop-transfer signal）。）。它由一些疏水性氨基酸組成。它的作用是使肽鏈插在膜上，它由一些疏水性氨基酸組成。它的作用是使肽鏈插在膜上，而不會(huì)整條越過去。而不會(huì)整條越過去。 膜上的蛋白有膜上的蛋白有2個(gè)類型：個(gè)類型：I型是型是N端在內(nèi)側(cè)，端在內(nèi)側(cè)，C端在外側(cè)端在外側(cè)（細(xì)胞質(zhì)一側(cè)）；（細(xì)胞質(zhì)一側(cè)）；型則相反，型則相反，C端在內(nèi)側(cè)，端在內(nèi)側(cè)，N端在外側(cè)。大端在外側(cè)。大部分膜蛋白屬于部分膜蛋白屬于型，只有少數(shù)屬于型，只有少數(shù)屬于型。型。3. 蛋白質(zhì)在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的加工蛋白質(zhì)在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的加工 在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的蛋白質(zhì)發(fā)生兩種重要變化：折疊和糖基化修在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的蛋白質(zhì)發(fā)生兩種重要變化：折疊和糖基

29、化修飾；修飾與折疊是相聯(lián)系的。重鏈結(jié)合蛋白飾；修飾與折疊是相聯(lián)系的。重鏈結(jié)合蛋白Bip參與了折疊過參與了折疊過程。程。 蛋白質(zhì)的糖基化是在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體內(nèi)進(jìn)行的。糖基化蛋白質(zhì)的糖基化是在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和高爾基體內(nèi)進(jìn)行的。糖基化包括下列步驟：包括下列步驟： （1）在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的膜上有一種高度疏水性的脂質(zhì)長(zhǎng)萜醇）在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的膜上有一種高度疏水性的脂質(zhì)長(zhǎng)萜醇（lipid dolichol），它以焦磷酸基連接），它以焦磷酸基連接2個(gè)個(gè)N 乙酰葡萄糖胺，乙酰葡萄糖胺，9個(gè)甘露糖和個(gè)甘露糖和3個(gè)葡萄糖殘基。個(gè)葡萄糖殘基。 （2）在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的糖基轉(zhuǎn)移酶催化下，將上述糖基轉(zhuǎn)移）在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的糖基轉(zhuǎn)移酶催化下，將上述糖基

30、轉(zhuǎn)移至膜上的多肽鏈中的至膜上的多肽鏈中的天冬酰胺殘基天冬酰胺殘基上，形成上，形成N 糖苷鍵連接的糖苷鍵連接的糖蛋白，其糖基暴露于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔。糖蛋白，其糖基暴露于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔。 （3）在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的糖苷酶作用下，依次切除）在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)內(nèi)的糖苷酶作用下，依次切除3個(gè)葡萄糖殘個(gè)葡萄糖殘基和基和14個(gè)甘露糖殘基。個(gè)甘露糖殘基。 （4）以后將生成的糖蛋白轉(zhuǎn)移至高爾基體，并在其中由甘）以后將生成的糖蛋白轉(zhuǎn)移至高爾基體，并在其中由甘露糖苷酶再切除幾個(gè)甘露糖殘基，連接上露糖苷酶再切除幾個(gè)甘露糖殘基，連接上N 乙酰葡萄糖胺、乙酰葡萄糖胺、半乳糖、唾液酸等，完成糖基化，生成復(fù)合糖蛋白。半乳糖、唾液酸等，完成糖基化，生成復(fù)合糖

31、蛋白。4蛋白質(zhì)的定位和分泌蛋白質(zhì)的定位和分泌 蛋白質(zhì)進(jìn)入高爾基體后，便分別被運(yùn)送至不同的目的地，蛋白質(zhì)進(jìn)入高爾基體后，便分別被運(yùn)送至不同的目的地，如溶酶體、質(zhì)膜或分泌出細(xì)胞外。如溶酶體、質(zhì)膜或分泌出細(xì)胞外。 蛋白質(zhì)通過膜小泡（蛋白質(zhì)通過膜小泡（vesicle）的作用，在其中被運(yùn)送的。）的作用，在其中被運(yùn)送的。共有兩類：共有兩類： （1）小泡由一種未知的蛋白做外殼，負(fù)責(zé)由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)）小泡由一種未知的蛋白做外殼，負(fù)責(zé)由內(nèi)質(zhì)網(wǎng)高高爾基體爾基體質(zhì)膜的運(yùn)送，稱為質(zhì)膜的運(yùn)送，稱為組成分泌組成分泌（constitutive secretion） （2）外殼蛋白是網(wǎng)格蛋白（）外殼蛋白是網(wǎng)格蛋白（clathrin）

32、，稱為），稱為分泌小泡分泌小泡（secretory vesicles），由高爾基體的反式側(cè)將蛋白質(zhì)通過），由高爾基體的反式側(cè)將蛋白質(zhì)通過胞吐作用（胞吐作用（endocytosis）分泌出去。）分泌出去。 Figure 25.8 Proteins are transported in coated vesicles. Constitutive (bulk flow) transport from ER through the Golgi takes place by COP-coated vesicles. Clathrin-coated vesicles are used for both r

33、egulated exocytosis and endocytosis.（二）蛋白質(zhì)的翻譯后轉(zhuǎn)位（二）蛋白質(zhì)的翻譯后轉(zhuǎn)位 1蛋白質(zhì)進(jìn)入線粒體蛋白質(zhì)進(jìn)入線粒體Figure 8.13 TOM proteins form receptor complex(es) that are needed for translocation across the mitochondrial outer membrane.Figure 8.14 Tim proteins form the complex for translocation across the mitochondrial inner membraneFigure 8.16 A translocating protein may be transferred directly from TOM to Tim22-54.2蛋白質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞核蛋白質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞核There are 3000 pore complexes on the nuclear envelope of an animal cell.Fig. Nuclear pores appear as annular structures by electron m