在職研究生分子生物學(xué)部分課后思考題

1、基因組學(xué)與后基因組學(xué)說(shuō)明人的基因組成或結(jié)構(gòu)變化所引起的相關(guān)疾病。要求：1、特定某個(gè)基因名稱、定位、大小及組成等基本特征。2、基因組成或結(jié)構(gòu)變化的過程、結(jié)果和表型。細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)1、請(qǐng)敘述肝細(xì)胞對(duì)胰高血糖素或腎上腺素的反應(yīng)過程。舉胰高血糖素的例子：胰高血糖素與受體結(jié)合受體蛋白分子發(fā)生構(gòu)象上變化受體與G蛋白s亞基結(jié)合亞基與GDP親和力下降 與 GTP親和力增加，GTP置換GDP-亞基變構(gòu)，與、分離，同時(shí)與受體分離（G蛋白至功能狀態(tài)）-活化的G蛋白與AC結(jié)合，激活之-AC催 化 ATP分解形成cAMP（第二信使）cAMP活 化cAMP依賴性蛋白激 酶A（PKA）使靶蛋白磷酸化-肝細(xì)胞糖原分解、糖異生、

2、減少對(duì)葡萄糖的利用。2、細(xì)胞膜在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的過程中起到怎樣的作用？細(xì)胞通過位于胞膜或胞內(nèi)的受體感受胞外信息分子的刺激，經(jīng)復(fù)雜的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)的轉(zhuǎn)換而影響其生物學(xué)功能，這一過程稱為細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，這是細(xì)胞對(duì)外界刺激做出應(yīng)答反應(yīng)的基本生物學(xué)方式。其中，水溶性信息分子如肽類激素、生長(zhǎng)因子及某些脂溶性信息分子(如前列腺素)等，不能穿過細(xì)胞膜，需通過與膜表面的特殊受體相結(jié)合才能激活細(xì)胞內(nèi)信息分子，經(jīng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的級(jí)聯(lián)反應(yīng)將細(xì)胞外信息傳遞至胞漿或核內(nèi)，調(diào)節(jié)靶細(xì)胞功能，這一過程稱為跨膜信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。其過程包括：胞外信號(hào)被質(zhì)膜上的特異性受體蛋白識(shí)別，受體被活化；通過胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)物(蛋白激酶，第二信使等) 的相互作用傳

3、遞信號(hào)；信號(hào)導(dǎo)致效應(yīng)物蛋白的活化，引發(fā)細(xì)胞應(yīng)答(如激活核內(nèi)轉(zhuǎn)錄因子，調(diào)節(jié)基因表達(dá))。脂溶性信息分子如類固醇激素和甲狀腺素等能穿過細(xì)胞膜，與位于胞漿或核內(nèi)的受體結(jié)合，激活的受體作為轉(zhuǎn)錄因子，改變靶基因的轉(zhuǎn)錄活性，從而誘發(fā)細(xì)胞特定的應(yīng)答反應(yīng)。細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)異常與疾病細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)異常：是指由于信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白量或結(jié)構(gòu)的改變，導(dǎo)致信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的過強(qiáng)或過弱，并由此引起細(xì)胞增殖、分化、凋亡或機(jī)能代謝的改變。受體的缺陷重癥肌無(wú)力（myadstheniagravis）：􀂄患者體內(nèi)產(chǎn)生了抗乙酰膽堿受體的抗體􀂄抗體與乙酰膽堿受體結(jié)合，封閉乙酰膽堿，并促使乙酰膽堿受體的分解𙦦

4、8;患者體內(nèi)受體的數(shù)目明顯減少􀂄通過乙酰膽堿受體進(jìn)行的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程障礙，而出現(xiàn)病癥。G蛋白功能異常􀂄霍亂：霍亂弧菌附于小腸粘膜進(jìn)行繁殖而引起的急性腹瀉􀂄霍亂弧菌產(chǎn)生的霍亂毒素，可與Gs的亞基結(jié)合􀂄亞基喪失了GTP酶活力，不能將GTP水解成GDP􀂄Gs處于不可逆激活狀態(tài),不斷刺激AC生成cAMP,胞漿中的cAMP含量可增加至正常的100倍以上􀂄導(dǎo)致小腸上皮細(xì)胞膜蛋白構(gòu)型改變，大量氯離子和水分子持續(xù)轉(zhuǎn)運(yùn)入腸腔，引起嚴(yán)重腹瀉和脫水。肢端肥大癥和巨人癥􀂄垂體腺瘤：分泌生長(zhǎng)激素（

5、GH）過多􀂄編碼Gs的基因突變（3040%）：Gs的精氨酸201被半胱氨酸或組氨酸取代; 或谷氨酰胺227被精氨酸或亮氨酸取代􀂄突變抑制了GTP酶活性，使Gs處于持續(xù)激活狀態(tài)，cAMP含量增多，垂體細(xì)胞生長(zhǎng)和分泌功能活躍。先天性腎源性尿崩癥(CNDI)遺傳性疾病主要癥狀：腎臟集合管對(duì)抗利尿激素不起反應(yīng)而致尿濃縮障礙，出現(xiàn)多飲、多尿和尿比重降低?；疾〉膵雰旱哪I臟缺乏產(chǎn)生終尿的能力，他們會(huì)遭受到嚴(yán)重的脫水。慢性的的脫水會(huì)引發(fā)智障礙、生長(zhǎng)遲緩、甚至是死亡.1、試述外源基因在原核體系中的表達(dá)需要具備的條件，及影響外源基因表達(dá)的因素。條件：編碼區(qū)不含插入序列；（mRN

6、A-cDNA） 位于啟動(dòng)子下游，方向一致，原有的讀碼框不變； 含起始密碼子、終止密碼子； 轉(zhuǎn)錄出的mRNA必須有SD序列，調(diào)整SD序列與第一個(gè)AUG間的距離（因?yàn)闀?huì)對(duì)轉(zhuǎn)譯效率有影響）； 產(chǎn)物比較穩(wěn)定（如：融合蛋白、信號(hào)肽）； 選擇系統(tǒng)偏好的簡(jiǎn)并密碼。 影響因素：?jiǎn)?dòng)子的強(qiáng)弱（主要因素） 基因的劑量 RNA轉(zhuǎn)譯效率（SD互補(bǔ)、AUG-SD距離及序列、AUG前后核苷酸序列的適宜性） 密碼子 表達(dá)產(chǎn)物的大小 產(chǎn)物的穩(wěn)定性 2、蛋白質(zhì)的分離純化技術(shù)依據(jù)蛋白質(zhì)的性質(zhì)分為哪幾大類，請(qǐng)列舉其中的一類，談?wù)勊脑砑皯?yīng)用。分類n溶解度差別：如：硫酸銨沉淀法 n分子大小不同：透析、超過濾、離心、凝膠過濾（分子篩

7、層析）n蛋白質(zhì)分子帶電性質(zhì)不同：電泳、離子交換層析 n蛋白質(zhì)吸附性質(zhì)不同 ：根據(jù)蛋白質(zhì)吸附性質(zhì)不同的分離方法。原理：利用不同的蛋白質(zhì)被吸附劑吸附的強(qiáng)弱不同，在洗脫中吸附弱的物質(zhì)先被洗脫，吸附強(qiáng)的后被洗脫。吸附劑無(wú)機(jī)（活性炭、硅膠、氧化鋁）有機(jī)（淀粉、聚酰胺凝膠、纖維素）。類型：吸附柱層析、吸附薄層層析。應(yīng)用：可用于純化生命物質(zhì)、分離蛋白質(zhì)亞基、濃縮溶液等。n蛋白質(zhì)的特異性配體 3、以人GM-CSF為例，寫出獲得該基因工程重組蛋白純品的流程。技術(shù)路線-表達(dá)載體的構(gòu)建、 外源基因片段的分離-表達(dá)性重組體的構(gòu)建-轉(zhuǎn)化宿主菌-誘導(dǎo)表 達(dá)-表達(dá)產(chǎn)物的鑒定-表達(dá)產(chǎn)物的分離-對(duì)粒細(xì)胞作用的體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)。 引物

8、設(shè)計(jì)-表達(dá)載體 1.GM- CSF 全基因 PCR 擴(kuò)增 提取正常人外周血粒細(xì)胞總 RNA，GM- CSF 全基因的獲得，以該總 RNA 為模板，用寶生物公 司的 BeaBEST 反轉(zhuǎn)錄試劑盒進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄。以該反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板，加入引物 P1，P2 進(jìn)行 第一次 PCR。 GM- CSF 基因的獲得以 GM- CSF 全基因經(jīng)純化的 PCR 產(chǎn)物為模板， 加入引物 P1， P2，再次 PCR GM- CSF 基因，產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳鑒定。 2.含腸激酶位點(diǎn)的 pThioHisA- - sTRAIL表達(dá)載體的構(gòu)建 純化后的 GM- CSF PCR 產(chǎn)物用 BamHI、EcoRI 雙酶切。質(zhì)粒 p

9、ThioHisA 用同樣的酶雙酶切， 膠回收酶切片段，T4 DNA 連接酶分別連接經(jīng)雙酶切的片段 GM- CSF 和質(zhì)粒載體，轉(zhuǎn)化宿主 菌 BL21，篩選陽(yáng)性克隆。小提質(zhì)粒，酶切鑒定重組子，并對(duì)重組子進(jìn)行測(cè)序分析。 3. 誘導(dǎo)表達(dá) GM- CSF 在大腸桿菌 BL21 中的誘導(dǎo)表達(dá)。3.0 mmol/LIPTG 誘導(dǎo) 6-8 h，表達(dá)達(dá)到高峰，經(jīng) 薄層掃描目的蛋白約占菌體總蛋白的 39 左右。表達(dá)產(chǎn)物部分可溶，其余形成包涵體。融 合表達(dá)產(chǎn)物 SDS- PAGE 表觀分子量為 32000 Dalton 左右（實(shí)際分子量為 35608.21Dalton）。 4.GM- CSF 融合蛋白的制備 工程

10、菌的培養(yǎng)： 挑取陽(yáng)性克隆， 接種于 200mL 含 100 g/mL 氨芐青霉素的 LB 培養(yǎng)基中， 37 培養(yǎng)過夜。然后以 10-20 的接種量擴(kuò)大培養(yǎng)，IPTG 誘導(dǎo)。超聲破碎菌體離心收獲的菌體 按 0.2g/mL 重懸于 A 液(20mmol/L Tris-HCl pH8.0，0.2mol/L NaCl，5mmol/L 咪唑)，浴 中超聲破碎。12,000rpm/min 離心 15min，分別取上清和沉淀進(jìn)行 SDS-PAGE 分析目的蛋白 以可溶性還是以包涵體形式存在。 5.sTRAIL 融合蛋白的純化 融合表達(dá)載體pThioHisA在硫氧還蛋白融和段帶有組氨酸標(biāo)簽，用Ni2+固相化的

11、Chelating Sepharose Fast Flow填料進(jìn)行親和層析。將可溶性表達(dá)產(chǎn)物（超聲破碎菌體的離心上清）與親和柱結(jié)合，用2倍柱床體積以上的A液過柱，至基線平穩(wěn)；用B液 (A液中加入咪唑至終濃度為50mmol/L) 梯度洗脫510個(gè)柱體積，用AKATA Explore進(jìn)行檢測(cè)，收集各洗脫峰。6.sTRAIL融合蛋白的腸激酶切割及純化。7.sTRAIL融合蛋白及非融合蛋白的 Western Blot檢測(cè)。RNAi的機(jī)制及應(yīng)用基因表達(dá)的調(diào)控1、 什么是基因表達(dá)？試述基因表達(dá)的特點(diǎn)及其調(diào)控對(duì)生物體的重要性?；虮磉_(dá)(gene expression)是指細(xì)胞在生命過程中，把儲(chǔ)存在DNA順序

12、中遺傳信息經(jīng)過轉(zhuǎn)錄和翻譯，轉(zhuǎn)變成具有生物活性的蛋白質(zhì)分子。 特點(diǎn)：1）.組織特異性（tissue specificity）不同組織細(xì)胞中不僅表 達(dá)的基因數(shù)量不同，而且基因表達(dá)的強(qiáng)度和種類也各不相同；2）.階段特異 性（stage specificity）細(xì)胞分化發(fā)育的不同時(shí)期，基因表達(dá)的情況不同；3）. 與環(huán)境相適應(yīng) 當(dāng)周圍的營(yíng)養(yǎng)、濕度、酸度及個(gè)體條件變化時(shí)，生物體就要改 變自身的基因表達(dá)狀況， 以調(diào)整體內(nèi)執(zhí)行和相應(yīng)功能的蛋白質(zhì)的種類、 數(shù)量， 從而改變自身的代謝活動(dòng)度以適應(yīng)環(huán)境。 對(duì)生物體的重要性：適應(yīng)環(huán)境、維持生長(zhǎng)、增殖和維持個(gè)體發(fā)育與分化。 生物的基因表達(dá)不是雜亂無(wú)章的，而是受

13、著精密精確調(diào)控的。生命的遺傳信 息是生物生存所必須的，而且遺傳信息的表達(dá)調(diào)控也是生命本質(zhì)所在。2、 真核生物中，基因的表達(dá)受不同水平的調(diào)控，請(qǐng)列舉其中三種。 A.轉(zhuǎn)錄前調(diào)控 ： 基因丟失； （原生動(dòng)物、線蟲、昆蟲和甲殼類動(dòng)物） 轉(zhuǎn)錄前調(diào)控，非洲爪蟾的卵母細(xì)胞中原有的 rRNA 基因約 500bp，卵裂期和 胚胎期需要大量的 rRNA ， 基因會(huì)大量復(fù)制 rRNA， 使拷貝數(shù)達(dá)到 200 萬(wàn)倍， 擴(kuò) 增 約 4000 倍 。 基 因 擴(kuò) 增 （ gene amplification ） 基 因 重 排 （ gene ； rearrangement） 。 DNA 的 甲 基 化 （ DN

14、A methylation ） 組 蛋 白 修 飾 （ Histone modification） B 轉(zhuǎn)錄水平的調(diào)控：轉(zhuǎn)錄調(diào)控是通過各種調(diào)控元件相互作用來(lái)實(shí)現(xiàn)的， 調(diào)控元件主要包括順式作用元件和反式作用因子。 C 轉(zhuǎn)錄后調(diào)控：hnRNA 的選擇性加工運(yùn)輸；mRNA 前體的選擇性剪接 RNA 編輯； RNAi D.翻譯調(diào)控：翻譯因子的磷酸化調(diào)控；mRNA 穩(wěn)定性調(diào)控 E.翻譯后調(diào)控蛋白質(zhì)修飾3、 為什么說(shuō)轉(zhuǎn)錄起始的調(diào)控是基因表達(dá)調(diào)控的中心環(huán)節(jié)？因?yàn)榛虮磉_(dá)是通過轉(zhuǎn)錄和翻譯，將 DNA 上的遺傳信息轉(zhuǎn)變?yōu)?RNA 和蛋白質(zhì)的過程，所以轉(zhuǎn) 錄是基因表達(dá)的第一步，尤其是轉(zhuǎn)錄起始階段。轉(zhuǎn)錄起始受到嚴(yán)格

15、的控制，轉(zhuǎn)錄起始的重要元件是 啟動(dòng)子，它必須與 RNA 聚合酶準(zhǔn)確地結(jié)合才有活性。此處，這個(gè)過程還將受到一系列轉(zhuǎn)錄因子的相 互作用，這些轉(zhuǎn)錄因子決定著靶因基因轉(zhuǎn)錄的速度和數(shù)量。因?yàn)槭潜磉_(dá)的初始階段，可以避免那些 不需要的轉(zhuǎn)錄所造成的資源浪費(fèi)。4、 例舉說(shuō)明DNA甲基化與腫瘤的關(guān)系。 通常 DNA 的正常甲基化與正常胚胎發(fā)育生長(zhǎng)等有關(guān)，影響基因表達(dá)， 調(diào)節(jié)染色質(zhì)結(jié)構(gòu)，與 DNA 損傷和修復(fù)過程有密切的關(guān)系。還參與了 DNA 復(fù)制和包裝及 DNA 片段的轉(zhuǎn)移等。 腫瘤的甲基化狀態(tài)改變包括基因組整 體甲基化水平降低、正常非甲基化 CpG 島的高甲基化和維持甲基化模式酶 的調(diào)節(jié)失控。 DNA

16、 的甲基化修飾通過改變基因的表達(dá)， 參與了細(xì)胞的生長(zhǎng)、 發(fā)育過程及 X 染色體失活等的調(diào)控。在細(xì)胞正常發(fā)育基因表達(dá)模式以及基 因組穩(wěn)定性中起著至關(guān)重要的作用。一旦異常，在胚胎時(shí)期，基因組范圍 的 DNA 甲基化模式異常會(huì)導(dǎo)致胚胎死亡。 而在成體中異常甲基化則意味著 疾病，告別是腫瘤的發(fā)生。癌基因甲基化被激活，抑癌基因高甲基化被沉 默。表觀遺傳學(xué)1、 簡(jiǎn)述CRISPR/Cas-9的基本原理及優(yōu)點(diǎn)（與傳統(tǒng)的基于同源重組的胚胎干細(xì)胞基因敲出相比較）。2、 為何在篩選靶基因敲除的胚胎干細(xì)胞時(shí)還需經(jīng)歷陰性篩選過程？簡(jiǎn)述更昔洛韋（Ganciclovir）在胚胎干細(xì)胞陰性篩選中的作用機(jī)制。細(xì)胞凋亡1、

17、60; 什么是細(xì)胞凋亡？2、   細(xì)胞凋亡有哪兩條主要的途徑？ 1、 原癌基因活化的機(jī)制。1） 點(diǎn)突變：放射線或化學(xué)致癌物引起的基因單個(gè)堿基改變。2）基因擴(kuò)增：細(xì)胞通過增加基因拷貝數(shù)，使表達(dá)產(chǎn)物增多的過程。3）DNA重排：同一染色體上基因的重新排列組合。4）染色體異位：不同染色體斷裂后重新連接不正確，如IgH基因轉(zhuǎn)錄活化部位和bcl2基因相連。5）病毒基因啟動(dòng)子及增強(qiáng)子的插入。2、 P53基因的作用機(jī)制。p53 的兩大功能：使細(xì)胞在 G1 期停滯。當(dāng) DNA 損傷后，p53 首先誘導(dǎo)細(xì)胞進(jìn)入 G1 期，抑制 細(xì)胞增殖，直至損傷的 DNA 修復(fù)。一旦 DNA 不能被修復(fù)，p5

18、3 就會(huì)活化那些誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的 基因轉(zhuǎn)錄，使細(xì)胞發(fā)生凋亡。 3、 腫瘤基因診斷的基本策略。4、 基因診斷的基本策略。1）、檢測(cè)已知的能產(chǎn)生某種特定功能蛋白的基因。這些基因根據(jù)其特定功能已被克隆，并被定位在染色體上，基因序列亦被測(cè)定，致病時(shí)的基因改變亦較清楚。2）、檢測(cè)與某種遺傳標(biāo)志連鎖的致病基因。遺傳連鎖同一染色體相鄰的二個(gè)或二個(gè)以上的基因或限制性酶切位點(diǎn)，由于位置十分靠近，在遺傳時(shí)分離幾率很低，常一起遺傳-稱連鎖。染色體遺傳連鎖圖用限制性內(nèi)切酶酶切位點(diǎn)作遺傳標(biāo)志，定位與之相連鎖的正常基因與致病基因，建立相應(yīng)的遺傳連鎖圖譜。定位性克隆根據(jù)遺傳連鎖圖進(jìn)行定位性克隆。比較正常和異常基因的差別，可找

19、出導(dǎo)致遺傳病的分子缺陷。定位性克隆策略是當(dāng)前基因診斷的重要基礎(chǔ)。3）、檢測(cè)表型克隆基因。針對(duì)多基因?。ㄈ纾褐囟确逝?、哮喘、高血壓、癲癇、精神病、多種自身免疫性疾?。１硇涂寺〖夹g(shù)是將有關(guān)表型與基因結(jié)構(gòu)結(jié)合，直接分離該表型的相關(guān)基因，并對(duì)疾病相關(guān)的一組基因進(jìn)行克隆，然后用作多種探針，來(lái)診斷多基因遺傳病。方法：1、DD-RT-PCR：分析正常和異?；蚪M尋找兩者之間的差異序列。2、基因組錯(cuò)配篩選技術(shù)：尋找兩者的全同序列，分離、鑒定與疾病相關(guān)的基因，確定導(dǎo)致疾病的分子缺陷。5、 腫瘤基因治療的基本策略。 抑癌基因?qū)氚┘?xì)胞、癌基因失活或表達(dá)水平下調(diào)-阻斷癌細(xì)胞繁殖。提高機(jī)體免疫力基因?qū)朊庖呦到y(tǒng)-提

20、高免疫力。靶向治療：（分子靶向治療的靶點(diǎn)是針對(duì)腫瘤細(xì)胞的惡性表型分子，作用于促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)、存活的特異性細(xì)胞受體、信號(hào)傳導(dǎo)等通道，新生血管形成和細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)，實(shí)現(xiàn)抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)或促進(jìn)凋亡的抗腫瘤作用。）6、 基因治療的基本程序。方法：1、體外法（ex vivo): 將受體細(xì)胞在體外培養(yǎng)，轉(zhuǎn)入外源基因，經(jīng)適當(dāng)選擇系統(tǒng)，將重組的受體細(xì) 胞回輸患者體內(nèi)，以改善癥狀。（普遍采用）2、體內(nèi)法(in vivo): 直接將外源基因?qū)塍w內(nèi)有關(guān)的組織器官,使其進(jìn)入相應(yīng)的細(xì)胞并轉(zhuǎn)錄、表達(dá)而發(fā)揮治療作用?；境绦颍哼x擇目的基因-選擇基因載體-選擇靶細(xì)胞-基因轉(zhuǎn)移-外源基因表達(dá)及檢測(cè)-回輸體內(nèi)。 治療基因的來(lái)源：

21、1）、野生型基因： -單基因缺陷遺傳病基因-反義核酸封閉活化的原癌基因-轉(zhuǎn)入相關(guān)的抑癌基因，抑制腫瘤。2）、重組DNA和分子克隆技術(shù)，人工合成特異基因。 分類： 1）、病毒載體（反轉(zhuǎn)錄病毒、腺病毒、腺相關(guān)病毒）。優(yōu)點(diǎn)：多數(shù)病毒可感染特異細(xì)胞，不易降解， RNA病毒能整合到宿主染色體，表達(dá)水平高等。2）、非病毒載體 （裸DNA、脂質(zhì)體）。優(yōu)點(diǎn)： 大量生產(chǎn)，毒性小，低免疫性缺點(diǎn)：效率低。 基因治療的受體細(xì)胞有：體細(xì)胞（骨髓細(xì)胞、皮膚成纖維細(xì)胞、肝細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、肌細(xì)胞）、生殖細(xì)胞。 基因的導(dǎo)入方式有兩種：間接體內(nèi)療法、直接體內(nèi)療法。 外源基因表達(dá)的檢測(cè)：方法： （目的基因和標(biāo)記基因的表達(dá)）原位

22、雜交、 Nouthern雜交、 RNA點(diǎn)雜交（檢測(cè)mRNA的轉(zhuǎn)錄）；免疫組化染色（檢測(cè)基因翻譯出的蛋白質(zhì))。 將治療性基因修飾的細(xì)胞通過不同方式回輸入體內(nèi)，以發(fā)揮治療效果。線粒體1、 結(jié)合你的專業(yè)，論述線粒體與醫(yī)學(xué)的關(guān)系。線粒體是營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)最終徹底氧化分解的場(chǎng)所,線粒體還是合成嘧啶、血紅素、鐵硫簇等的場(chǎng)所,線粒體與細(xì)胞代謝、免疫、老化、凋亡、自噬等的信號(hào)途徑密切相關(guān)。線粒體異常與遺 傳異質(zhì)的眾多疾病相關(guān)聯(lián)，累及各種器官系統(tǒng)，各個(gè)年齡段，幾乎覆蓋整個(gè)醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。線粒 體與自由基損傷、細(xì)胞死亡、衰老、代謝病、神經(jīng)肌肉退行、心血管病、創(chuàng)傷、腫瘤、肥胖、 糖尿病等的關(guān)系已成為研究熱點(diǎn)。線粒體失調(diào)與氧化損傷

23、、代謝病和老年病密切相關(guān)，天然 線粒體營(yíng)養(yǎng)素和藥物可有效發(fā)揮預(yù)防和治療作用。 線粒體保留的少量細(xì)菌和病毒祖先成分對(duì) 抗生素敏感（如線粒體翻譯對(duì)氨基糖甙類和四環(huán)素敏感）。線粒體與運(yùn)動(dòng)、營(yíng)養(yǎng)和藥物的更 多關(guān)系還有待深入研究。分子水平出現(xiàn)問題也能導(dǎo)致疾病， 線粒體與衰老有關(guān)。 2、 線粒體遺傳有哪些特點(diǎn)？線粒體擁有獨(dú)特的基因組及復(fù)制、 轉(zhuǎn)錄和翻譯系統(tǒng)。 線粒體 DNA 是遺傳系統(tǒng)極度簡(jiǎn)化的杰作。 僅 16.5kb 的人 mtDNA 僅編碼 2 種 rRNA、 22 種 tRNA 和 13 種肽。 線粒體遺傳特點(diǎn)： 半自主性、 高突變率、遺傳密碼特殊、母系遺傳、遺傳瓶頸、閾值效應(yīng)、累加效應(yīng)。線粒體擁有

24、特有的 DNA 聚合酶、RNA 聚合酶和核糖體。使用簡(jiǎn)化版遺傳密碼表，因類群而異，通常沒有 1 度和 3 度簡(jiǎn)并密碼子，有 4 個(gè)終止密碼子。線粒體 DNA 是嚴(yán)格母系遺傳。精子線粒體不能進(jìn)入卵 子，即使偶爾進(jìn)入，也會(huì)被降解。因此，動(dòng)物體的 mtDNA 只來(lái)源于卵細(xì)胞。創(chuàng)傷愈合1、 簡(jiǎn)述創(chuàng)傷修復(fù)的基本過程及每個(gè)過程的標(biāo)志性細(xì)胞行為學(xué)事件。1） 止血期：血管收縮和血凝塊形成，血凝塊含有大量的促炎癥細(xì)胞因子和生長(zhǎng)因子，為細(xì)胞遷移提供臨時(shí)基架2） 炎癥期：炎癥是機(jī)體應(yīng)對(duì)損傷最迅速、有效的原初反應(yīng)，是保證組織正常修復(fù)和功能重建的關(guān)鍵，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)至創(chuàng)傷區(qū)域（炎癥期標(biāo)志性特征）3） 增殖期：活化的巨噬細(xì)

25、胞吞噬、殺滅病原微生物、清除組織殘骸、誘導(dǎo)中性粒細(xì)胞凋亡。巨噬細(xì)胞歷經(jīng)表型轉(zhuǎn)變，成為修復(fù)型，分泌PDGF、TGF-、VEGF、FGF等大量生長(zhǎng)因子。角化細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移并增殖，血管新生，細(xì)胞外基質(zhì)合成。表皮重建、肉芽組織（增殖期標(biāo)志性特征）4） 重塑期：創(chuàng)傷激活的過程逐漸平息或停止；肉芽組織向正常結(jié)締組織轉(zhuǎn)變：細(xì)胞外基質(zhì)成分改變，I型膠原蛋白取代III型膠原蛋白；創(chuàng)區(qū)的內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和肌成纖維細(xì)胞等不同類型的細(xì)胞經(jīng)歷程序性凋亡而逐漸消失；大量膠原纖維、細(xì)胞外基質(zhì)蛋白組成的非細(xì)胞性疤痕組織修復(fù)創(chuàng)傷區(qū)域 2、簡(jiǎn)述TGF-受體的激活，及其下游經(jīng)典信號(hào)通路的活化。TGF-信號(hào)傳導(dǎo)通路是一個(gè) 包含眾多成員的多功能細(xì)胞因子大家族,根據(jù)配體分子激活的不同的下游特異性通路可以分為TGF-/Activin/Nodal和BMP/GDF/MIS 兩個(gè)亞家族通路。該信號(hào)通路的激活首先是TGF-s配體分子與受