臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)知識訓(xùn)

1、臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)知識培訓(xùn)1.臨床檢驗(yàn)的定義 臨床檢驗(yàn)是指將病人的血液、體液、分泌物、臨床檢驗(yàn)是指將病人的血液、體液、分泌物、排泄物和脫落物等標(biāo)本，通過目視觀察、物理、排泄物和脫落物等標(biāo)本，通過目視觀察、物理、化學(xué)、儀器或分子生物學(xué)方法檢測，并強(qiáng)調(diào)對化學(xué)、儀器或分子生物學(xué)方法檢測，并強(qiáng)調(diào)對檢驗(yàn)全過程（分析前、分析中、分析后）采取檢驗(yàn)全過程（分析前、分析中、分析后）采取嚴(yán)密質(zhì)量管理措施以確保檢驗(yàn)質(zhì)量；從而為臨嚴(yán)密質(zhì)量管理措施以確保檢驗(yàn)質(zhì)量；從而為臨床對疾病提供診斷和治療提供依據(jù)。床對疾病提供診斷和治療提供依據(jù)。1.1臨床檢驗(yàn)的分類臨床檢驗(yàn)血液尿液細(xì)菌糞便病理 其他凝血臨床化學(xué)血常規(guī)免疫血庫血?dú)夥治鲅?/p>

2、細(xì)胞學(xué)血液檢測血液v 血液是流動在心臟和血管內(nèi)的不透明紅色液體，主要成分為血漿、血細(xì)胞(包括紅細(xì)胞，白細(xì)胞，血小板） 、遺傳物質(zhì)（染色體和基因)。 v 血漿約占血液總量的55%，下層是紅細(xì)胞，兩者交界處還有很薄的白色物質(zhì)，這是白細(xì)胞與血小板。 全血：加入抗凝劑混勻后的均勻體。主要用于血細(xì)胞的分析。血細(xì)胞：紅細(xì)胞（rbc）、白細(xì)胞（wbc）、血小板（plt）。紅細(xì)胞：起運(yùn)輸氧氣和二氧化碳營養(yǎng)作用。正常人紅細(xì)胞的范圍是400500萬/up.偏高：心肺疾病、燒傷、長期生活在高原的人等。偏低：多種貧血，根據(jù)紅細(xì)胞的數(shù)量可分為重度、重度、輕度貧血。 白細(xì)胞：吞噬、抵抗外來侵襲人體病原體，對白細(xì)胞：吞噬、

3、抵抗外來侵襲人體病原體，對人體起到保護(hù)作用。正常人白細(xì)胞的范圍是人體起到保護(hù)作用。正常人白細(xì)胞的范圍是4000400010000/ul10000/ul。細(xì)菌性感染，白細(xì)胞數(shù)值升。細(xì)菌性感染，白細(xì)胞數(shù)值升高；病毒性感染，白細(xì)胞數(shù)值正?；蚪档?。高；病毒性感染，白細(xì)胞數(shù)值正?；蚪档?。 血小板：在止血過程起著重要的作用。正常的血小板：在止血過程起著重要的作用。正常的血小板范圍是血小板范圍是10103030萬萬/up/up 血紅蛋白：也稱作血色素，是紅細(xì)胞的成分，血紅蛋白：也稱作血色素，是紅細(xì)胞的成分，起著運(yùn)輸氧氣和二氧化碳的作用。正常的范圍起著運(yùn)輸氧氣和二氧化碳的作用。正常的范圍110-160110-

4、160克克/ /升升注：注：upup：立方毫米，：立方毫米，ulul：毫升：毫升1.2血液檢驗(yàn)樣品的基本概念靜脈血是最常用的樣品。靜脈血是最常用的樣品。靜脈穿刺抽取血液是最常用的方法。靜脈穿刺抽取血液是最常用的方法。血清：不加抗凝劑，血液凝血清：不加抗凝劑，血液凝固后離心分離的上層淡黃色的固后離心分離的上層淡黃色的液體。供生化、電解質(zhì)、免疫液體。供生化、電解質(zhì)、免疫等檢測用。等檢測用。血漿：加抗凝劑混勻后離心血漿：加抗凝劑混勻后離心分離的上層淡黃色液體。主要分離的上層淡黃色液體。主要供凝血及血?dú)夥治龅葯z測用。供凝血及血?dú)夥治龅葯z測用。血常規(guī)檢查v 血常規(guī)是最一般，最基本的血液檢驗(yàn)。血液由液體和

5、有形細(xì)胞兩大部分組成，血常規(guī)檢驗(yàn)的是血液的細(xì)胞部分。血液有三種不同功能的細(xì)胞紅細(xì)胞(俗稱紅血球)，白細(xì)胞(俗稱白血球)、血小板。通過觀察數(shù)量變化及形態(tài)分布，判斷疾病。是醫(yī)生診斷病情的常用輔助檢查手段之一。 血細(xì)胞分析儀血細(xì)胞分析儀v 檢測方法 ：v 它集三種物理學(xué)檢測技術(shù)于一體，在細(xì)胞處于自然原始的狀態(tài)下對其進(jìn)行多參數(shù)分析。該方法也稱為體積、電導(dǎo)、激光散射血細(xì)胞分析法。 v 此技術(shù)采用在標(biāo)本中首先加入紅細(xì)胞溶血劑溶解掉紅細(xì)胞，然后加入穩(wěn)定劑來中和紅細(xì)胞溶解劑的作用，使白細(xì)胞表面、胞漿和細(xì)胞體積保持穩(wěn)定不變。然后將細(xì)胞推進(jìn)到流動細(xì)胞計(jì)數(shù)池中，接受儀器三種技術(shù)的檢測。 v 儀器優(yōu)點(diǎn) ：v 開關(guān)機(jī)對

6、取樣器微孔和管路進(jìn)行自動清洗，使檢測不受任何污染，使檢測準(zhǔn)確穩(wěn)定。而且是智能雙通道，雙通道檢測，既省時(shí)又準(zhǔn)確 .v 裝有高壓灼熱智能排堵系統(tǒng)和高壓反沖洗系統(tǒng)， 從而使全自動血細(xì)胞分析儀順暢使用。v 儀器內(nèi)置熱敏打印機(jī)，不需要連接電腦，便可完成檢測及報(bào)告單打印。還可以自由選擇報(bào)告單模式。全液晶觸摸屏操作，方便快捷。如果想連接電腦也是可以操作的。 生化檢測2臨床化學(xué)（生化）檢驗(yàn)一、定義 1、生化：生命化學(xué)簡稱。 2、生化分析儀：用于檢測、分析生命化學(xué)物質(zhì)的儀器，給臨床上對疾病的診斷、治療和預(yù)后及健康狀態(tài)提供信息依據(jù)。 生化檢驗(yàn)的常規(guī)項(xiàng)目 通常稱為臨床生化檢驗(yàn)。是采用化學(xué)的方法對臨床標(biāo)本（血清、腦脊

7、液、尿液等）進(jìn)行定性或定量分析，為臨床對疾病的診斷和治療提供依據(jù)。臨床化學(xué)常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目肝功能腎功能血糖血脂心肌酶譜免疫測定血清離子生化檢測的內(nèi)容v 生化全套檢查就是指用生物或化學(xué)的方法來對人進(jìn)行身體檢查，生化全套檢查內(nèi)容包括：肝功能（總蛋白、白蛋白、球蛋白、白球比，總膽紅素、直接、間接膽紅素，轉(zhuǎn)氨酶）；血脂（總膽固醇，甘油三酯，高、低密度脂蛋白，載脂蛋白）；空腹血糖；腎功能（肌酐、尿素氮）；尿酸；乳酸脫氫酶；肌酸肌酶等。 生化全套檢查是對身體進(jìn)行一次全面的檢查和對身體情況的一種了解，有時(shí)也可以檢查出來潛伏的疾病，如肝功能檢查，防止病情突然發(fā)作，及時(shí)進(jìn)行治療。 肝功能檢測v 肝功是通過各種生化試

8、驗(yàn)方法檢測與肝臟功能代謝有關(guān)的各項(xiàng)指標(biāo)、以反映肝臟功能基本狀況。v 肝具有解毒功能、代謝功能、分泌膽汁、免疫防御功能等 v 如果有下列三項(xiàng)以上狀況則需查肝功：v 1、全身倦怠感日趨嚴(yán)重。 v 2、食欲不振，有惡心感覺。 v 3、持續(xù)性微熱，或發(fā)惡寒。 v 4、注意力不容易集中。 v 5、酒量突然減少 v 6、臉色晦暗失去光澤。 v 7、皮膚呈黃疸色、或覺搔癢。 v 8、尿液變?yōu)槠【粕?v 9、頭昏耳鳴。v 10、全身發(fā)黃。 肝功能主要五項(xiàng)指標(biāo)v 1、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（alt）：谷丙轉(zhuǎn)氨酶主要存在于肝細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)中。正常值是040，偏高時(shí)說明肝臟損傷。 v 2、谷草轉(zhuǎn)氨酶（ast）：主要存在于肝細(xì)胞線

9、粒體中。正常值是040，偏高時(shí)說明肝臟受損，可能是由肝臟疾病引起，也有可能是由酗酒、服藥、過度勞累等原因引起。 v 3、總膽紅素（tbil）：包括直接膽紅素和間接膽紅素。正常值是1,717,1umol/l,偏高時(shí)易發(fā)生黃疸癥狀。 v 4、間接膽紅素（ibil）：在肝臟中由間v 接膽紅素轉(zhuǎn)變，從膽管排出。正常值是v 1,713,7umol/l,偏高時(shí)說明肝臟病變v 或膽道受阻。 v 5、直接膽紅素（dbil）：直接膽紅素是v 紅細(xì)胞死亡或破壞時(shí)，有血紅蛋白釋放到v 血液中。正常值是1,77umol/l,偏高時(shí)v 說明肝臟病變或紅細(xì)胞遭破壞。 腎功能檢測v 腎是脊椎動物的一種器官，屬于泌尿系統(tǒng)的一

10、部分，負(fù)責(zé)過濾血液中的雜質(zhì)、維持體液和電解質(zhì)的平衡，最后產(chǎn)生尿液經(jīng)由后續(xù)管道排出體外；同時(shí)也具備內(nèi)分泌的功能以調(diào)節(jié)血壓。在人體中，正常成人具備兩枚腎臟，位于腰部兩側(cè)后方。v 如果有下列三項(xiàng)以上狀況則需查腎功：v （一）眼皮和足踝浮腫； （二）血壓高； v （三）腰腹疼痛； （四）血尿； v （五）蛋白尿； （六）尿路感染； v （七）小便顏色及赤痛； v （八）小便不順； v （九）尿量增多減少及夜尿； v （十）小便排出小沙石。 腎功能主要三項(xiàng)指標(biāo)1、血尿素氮，正常情況：1.86.8mmol/l，增高：急慢性腎炎、重癥腎盂腎炎、各種原因所致的急慢性腎功能障礙，心衰、休克、大量內(nèi)出血、燒傷、失

11、水、腎上腺皮質(zhì)功能減退癥、前列腺肥大、慢性尿路梗阻等。2、血肌酐，正常情況： 88.4159.1mol/l。增加：腎衰、尿毒癥、心衰、巨人癥、肢端肥大癥、水楊酸鹽類治療等。減少：進(jìn)行性肌萎縮，白血病，貧血等 3 、血尿酸，正常情況： 89357mol/l 增加：痛風(fēng)、急慢性白血病、多發(fā)性骨髓瘤、惡性貧血、腎衰、肝衰、紅細(xì)胞增多癥、妊娠反應(yīng)、劇烈活動及高脂肪餐后等。 血脂v 血脂是血漿中的中性脂肪（甘油三酯和膽固醇）和類脂（磷脂、糖脂、固醇、類固醇）的總稱，廣泛存在于人體中。它們是生命細(xì)胞的基礎(chǔ)代謝必需物質(zhì)。v 血脂高癥狀 1.晨起頭暈，不清醒，思維遲鈍 2.蹲著干活氣喘 3.陣發(fā)性視力模糊 血

12、脂的四項(xiàng)檢測v 總膽固醇：2.85 .17mmol/l，總膽固醇的水平主要取決于飲食、體力勞動、環(huán)境、性別和年齡。女性絕經(jīng)后會明顯上升；新生兒期濃度很低，哺乳后很快接近成人水平；隨年齡增長也有增高趨勢。 v 甘油三酯：0 .561.7mmol/l，甘油三脂升高，是動脈粥樣硬化和冠心病的危險(xiǎn)因素。 v 高密度脂蛋白：男性：0 .961.15mmol/l;女性：0 .901 .55mmol/l ，它的影響因素有很多，如年齡、性別、種族、飲食、肥胖、飲酒與吸煙、運(yùn)動、藥物等。 v 低密度脂蛋白：03.1mmol/l 【增高】常見于家族性高膽固醇血癥 血糖v 血清中的糖稱為血糖，絕大多數(shù)情況下都是葡萄

13、糖。體內(nèi)各組織細(xì)胞活動所需的能量大部分來自葡萄糖，所以血糖必須保持一定的水平才能維持體內(nèi)各器官和組織的需要。正常人在空腹血糖濃度為3.616.11mmol/l?？崭寡菨舛瘸^7.0mmol/l稱為高血糖。血糖濃度低于3.61mmol/l稱為低血糖。v 糖尿病典型癥狀“三多一少”：多飲、多食、多尿和體重減輕 生化分析儀v 生化分析儀又常被稱為生化儀，是采用光電比色原理來測量體液中某種特定化學(xué)成分的儀器。 第一代：分光光度計(jì) 利用紫外光、可見光、紅外光和激光燈測定物質(zhì)的吸收光譜，利用此吸收光譜對物質(zhì)進(jìn)行定性定量分析和物質(zhì)結(jié)構(gòu)分析的方 法，稱為分光光度法或分光光度技術(shù)，使用的儀器稱為人分光光度計(jì)。

14、第二代：半自動生化分析儀 半自動分析儀指在分析過程中的部分操作（如加樣、保溫、吸入比色、結(jié)果記錄等某一步驟）需要手工完成，而另一部分操作 則可由儀器自動完成。這類儀器的特點(diǎn)是體積小，結(jié)構(gòu)簡單，靈活性大，即可分開單獨(dú)使用，又可與其他儀器配合使用，價(jià)格便宜。 v 第三代：全自動分析儀 全自動生化分析儀，從加樣至出結(jié)果的全過程完全由儀器自動完成。操作者只需把樣品放在分析儀的特定位置上，選用程序開動儀器即可等取檢驗(yàn)報(bào)告。 全自動生化分析儀（簡稱aca）是根據(jù)光電比色原理來測量體液中某種特定化學(xué)成分的儀器。 由于其測量速度快、準(zhǔn)確性高、消耗試劑量小，現(xiàn)已在各級醫(yī)院、防疫 站、計(jì)劃生育服務(wù)站得到廣泛使用。

15、配合使用可大大提高常規(guī)生化檢驗(yàn) 的效率及收益。 全自動生化分析儀（簡稱aca- automatic clinical analyzer ）： v 光學(xué)系統(tǒng)：是aca的關(guān)鍵部分。 aca的分光系統(tǒng)因其光位置不同有前分光和后分光之分，先進(jìn)的光學(xué)組件在光源與比色杯之間使用了一組透鏡，將原始光源燈投射出的光通過比色杯將光束變成光速 ，這樣，即使比色杯再小，點(diǎn)光束也能通過。點(diǎn)光束通過比色杯后，在經(jīng)這一組還原透鏡（廣差糾正系統(tǒng)），將點(diǎn)光束還原成原始光束，在經(jīng)光柵分成固定的若干種波長（約10種以上波長）。采用光/數(shù)碼信號直接轉(zhuǎn)換技術(shù)即將光路中的光信號直接變成數(shù)碼信號。將電磁波對信號的干擾及信號傳遞過程中的衰

16、減完全消除。同時(shí)，在信號傳輸過程中采用光導(dǎo)纖維，使信號達(dá)到無衰減，測試精度提高近100倍。光路系統(tǒng)的封閉組合，又使得光路無需任何保養(yǎng)，且分光準(zhǔn)確、壽命長。 全自動生化分析儀（簡稱aca） v 恒溫系統(tǒng)：由于生物化學(xué)反應(yīng)時(shí)溫度對反應(yīng)結(jié)果影響很大，故恒溫系統(tǒng)的靈敏度、準(zhǔn)確度直接影響測量結(jié)果。早期的生化儀器采用空氣浴的方法，后來發(fā)展到集干式空氣浴與水浴優(yōu)點(diǎn)于一身的恒溫液循環(huán)間接加溫干式浴。其原理是在比色杯周圍設(shè)計(jì)一恒溫槽，在槽內(nèi)加入一種無味、無污染、不蒸發(fā)、不變質(zhì)的穩(wěn)定恒溫液，恒溫液的容量大，熱穩(wěn)定性好、均勻。在比色杯不直接接觸恒溫液，克服了水浴式恒溫易受污染和空氣浴不均勻、不穩(wěn)定的特點(diǎn)。 全自動生

17、化分析儀（簡稱aca）v 樣品反應(yīng)攪拌技術(shù)和探針技術(shù)：現(xiàn)在流行的攪拌技術(shù)是模仿手工清洗過程的多組攪拌棒組成的攪拌單元，當(dāng)?shù)谝唤M攪拌棒在攪拌樣品/試劑或混合溶液時(shí)，第二組攪拌棒同時(shí)進(jìn)行高速高效的清洗，第三組攪拌棒也同時(shí)進(jìn)行溫水清洗和風(fēng)干過程。在單個(gè)攪拌棒的設(shè)計(jì)上，采用新型螺旋型高速旋轉(zhuǎn)攪拌，旋轉(zhuǎn)方向與螺旋方向相反，從而增加了攪拌的力度，被攪拌液不起泡，減少微泡對光的散射。試劑及樣品探針依照早期電容式傳感的原理，但略加改進(jìn)，增加了血凝塊和蛋白質(zhì)凝塊的報(bào)警，依照報(bào)警級別的重測結(jié)果，減少吸樣誤差，提高測試結(jié)果的可靠性。 全自動生化分析儀（簡稱aca） v 特點(diǎn)v 技術(shù)領(lǐng)先的光路反應(yīng)系統(tǒng) v 高效無憂的

18、自動沖洗系統(tǒng) v 智能靈敏的液位探測系統(tǒng) v 簡易快捷的軟件操作系統(tǒng) v 及時(shí)周到的全國服務(wù)網(wǎng)絡(luò) 全自動生化分析儀（簡稱aca）v 加樣、試劑針 1.加樣針表面一般都經(jīng)過了特氟龍材料處理過，防止在加樣品或試劑過程中表面掛液造成交叉污染。特氟龍：一種有機(jī)溶劑，幾乎不溶于所有的溶劑 ，亦成為了不沾鍋和水管內(nèi)層的理想涂料。 2.具有液位探測功能，可自動檢測試劑瓶內(nèi)試劑余量 3.加樣針試劑針都具有上下防撞功能，防止在誤操作或機(jī)器出現(xiàn)故障的情況下，造成打針現(xiàn)象。全自動生化分析儀（簡稱aca）v 試劑、樣品盤 v 1.試劑盤都具有試劑冷藏功能，這是因?yàn)樵噭┰谑褂眠^程中需要保持在低溫狀態(tài)下。防止因?yàn)闇囟冗^高

19、造成試劑失效影響測試結(jié)果。 v 2. 生化中速度在400速度以上的一般樣品和試劑盤都是分開，這樣提高機(jī)器的測試速度。全自動生化分析儀（簡稱aca）v 反應(yīng)盤 v 反應(yīng)盤是試劑和樣品混勻后反應(yīng)檢測結(jié)果的位置。反應(yīng)杯材質(zhì)目前有2種一是有機(jī)玻璃二是石英玻璃。石英玻璃使用壽命較長但造價(jià)比較昂貴。v 沖洗功能采用8段自動清洗，清洗后都有自動烘干的功能。v 燈泡 v 全自動生化分析儀的光源一般是鹵素?zé)襞荩褂脡勖蠹s是2000個(gè)小時(shí)。 二、生化儀檢驗(yàn)的原理及工作流程： 生化儀的工作原理是根據(jù)手工操作的流程設(shè)計(jì)生化儀的工作原理是根據(jù)手工操作的流程設(shè)計(jì)制造的。檢驗(yàn)?zāi)硞€(gè)生化項(xiàng)目，就是將一定量的樣品制造的。檢驗(yàn)?zāi)?/p>

20、個(gè)生化項(xiàng)目，就是將一定量的樣品和一定量的試劑混合后，在一定的溫度下（和一定量的試劑混合后，在一定的溫度下（3737）條件下進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)后產(chǎn)生顏色，測定其顏色吸光條件下進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)后產(chǎn)生顏色，測定其顏色吸光度（度（a a）的大小，和已知的校準(zhǔn)品（標(biāo)準(zhǔn)）進(jìn)行比對，）的大小，和已知的校準(zhǔn)品（標(biāo)準(zhǔn)）進(jìn)行比對，從而得計(jì)算出樣品的濃度。從而得計(jì)算出樣品的濃度。生化操作流程加樣品加試劑混勻孵育（37）混勻比色計(jì)算結(jié)果或加二試劑填寫報(bào)告單3.3.生化儀的一些基本概念及術(shù)語解釋：生化儀的一些基本概念及術(shù)語解釋：校準(zhǔn)品：是和被檢測樣品（血清）屬同一物質(zhì)，校準(zhǔn)品：是和被檢測樣品（血清）屬同一物質(zhì)，但檢驗(yàn)項(xiàng)目的濃度值

21、是已知的。在測定過程中與但檢驗(yàn)項(xiàng)目的濃度值是已知的。在測定過程中與未知濃度的樣品一同檢測，檢出其吸光度未知濃度的樣品一同檢測，檢出其吸光度a a值后，值后，用來比對計(jì)算被測樣品濃度值，主要是起校準(zhǔn)作用來比對計(jì)算被測樣品濃度值，主要是起校準(zhǔn)作用。用。質(zhì)控品：日常工作中隨樣品一同檢測，記錄其質(zhì)控品：日常工作中隨樣品一同檢測，記錄其結(jié)果變化情況，用于觀察監(jiān)測系統(tǒng)可靠性和穩(wěn)定結(jié)果變化情況，用于觀察監(jiān)測系統(tǒng)可靠性和穩(wěn)定性。性。雙試劑：檢測某個(gè)項(xiàng)目時(shí)，先加入試劑雙試劑：檢測某個(gè)項(xiàng)目時(shí)，先加入試劑，與標(biāo)，與標(biāo)本的干擾物質(zhì)起反應(yīng)，五分鐘后再加入試劑本的干擾物質(zhì)起反應(yīng)，五分鐘后再加入試劑啟啟動真正的測試反應(yīng)，從

22、而使測定結(jié)果更加準(zhǔn)確。動真正的測試反應(yīng)，從而使測定結(jié)果更加準(zhǔn)確。目的是：消除干擾物質(zhì)對檢測的影響，從而使結(jié)目的是：消除干擾物質(zhì)對檢測的影響，從而使結(jié)果更加接近真值。果更加接近真值。結(jié)果準(zhǔn)確性：檢測結(jié)果與真值之間的差異。結(jié)果準(zhǔn)確性：檢測結(jié)果與真值之間的差異。速度：生化儀速度是指每小時(shí)檢測多少個(gè)生化項(xiàng)速度：生化儀速度是指每小時(shí)檢測多少個(gè)生化項(xiàng)目。目。交叉污染：生化儀在加樣過程中或加試劑過程中產(chǎn)生的交叉污染：生化儀在加樣過程中或加試劑過程中產(chǎn)生的攜帶從而對檢測結(jié)果準(zhǔn)確性產(chǎn)生的影響。生化儀的交叉污攜帶從而對檢測結(jié)果準(zhǔn)確性產(chǎn)生的影響。生化儀的交叉污染率一般都小于染率一般都小于0.0.1%。反應(yīng)杯空白：在

23、特定波長時(shí)，光通過蒸餾水為反應(yīng)體系反應(yīng)杯空白：在特定波長時(shí)，光通過蒸餾水為反應(yīng)體系所檢測的吸光度值。一般生化儀在工作之前都要做此項(xiàng)檢所檢測的吸光度值。一般生化儀在工作之前都要做此項(xiàng)檢測以確定測以確定i0 0的值。的值。試劑空白：在特定波長下，光通過相應(yīng)測定項(xiàng)目試劑為試劑空白：在特定波長下，光通過相應(yīng)測定項(xiàng)目試劑為反應(yīng)體系所測吸光度值。反應(yīng)體系所測吸光度值。樣品空白：在特定波長下，光通過樣品和不具備與樣品樣品空白：在特定波長下，光通過樣品和不具備與樣品反應(yīng)的液體為反應(yīng)體系所測的吸光度值。反應(yīng)的液體為反應(yīng)體系所測的吸光度值。 溫度控制：被測樣本和試劑只有在特定溫度下（37）反應(yīng)才能得到可靠的結(jié)果。

24、發(fā)生反應(yīng)時(shí)化學(xué)反應(yīng)對溫度要求很高。溫度不穩(wěn)定的將直接導(dǎo)致結(jié)果不準(zhǔn)確。生化儀采用多方法、高精密控制，使溫度波動0.1. 目前生化儀一般有兩種溫控方式：空氣浴和水浴。 空氣浴就是使用帕爾貼進(jìn)行溫控。 水浴是使用把水加熱進(jìn)行溫控。質(zhì)量控制：在生化儀檢測過程中，為了監(jiān)控整個(gè)檢質(zhì)量控制：在生化儀檢測過程中，為了監(jiān)控整個(gè)檢測系統(tǒng)的穩(wěn)定性和可靠性，發(fā)現(xiàn)和尋找檢測過程中的測系統(tǒng)的穩(wěn)定性和可靠性，發(fā)現(xiàn)和尋找檢測過程中的誤差及產(chǎn)生的原因，確保檢測結(jié)果在允許誤差范圍內(nèi)誤差及產(chǎn)生的原因，確保檢測結(jié)果在允許誤差范圍內(nèi)的一種手段。的一種手段。質(zhì)控方法：對質(zhì)控品連續(xù)檢測質(zhì)控方法：對質(zhì)控品連續(xù)檢測2020次，計(jì)算其平均值，次

25、，計(jì)算其平均值，將此值作為靶。同時(shí)計(jì)算出將此值作為靶。同時(shí)計(jì)算出2020次的標(biāo)準(zhǔn)差（次的標(biāo)準(zhǔn)差（sdsd）和變）和變異系數(shù)（異系數(shù)（co%co%）繪制成質(zhì)控圖。每天在工作時(shí)，質(zhì)控）繪制成質(zhì)控圖。每天在工作時(shí)，質(zhì)控品隨標(biāo)本同時(shí)檢測將其結(jié)果繪制在質(zhì)控圖中，觀察其品隨標(biāo)本同時(shí)檢測將其結(jié)果繪制在質(zhì)控圖中，觀察其與靶值的偏離程度。每天質(zhì)控品的結(jié)果應(yīng)控制在與靶值的偏離程度。每天質(zhì)控品的結(jié)果應(yīng)控制在2sd2sd范圍內(nèi)。范圍內(nèi)。免 疫 檢 測血清免疫學(xué)檢查v 免疫學(xué)檢查是機(jī)體識別“自身”與“非己”抗原，對自身抗體形成天然免疫耐受，對“非己”抗原產(chǎn)生排斥作用的一種生理功能的檢測。正常情況下，這種生理功能對機(jī)體有

26、益，可產(chǎn)生抗感染、抗腫瘤等維持機(jī)體生理平衡和穩(wěn)定的免疫保護(hù)作用。在一定條件下，當(dāng)免疫功能失調(diào)時(shí)，也會對機(jī)體產(chǎn)生有害的反應(yīng)和結(jié)果，如引發(fā)超敏反應(yīng)、自身免疫病和腫瘤等。v 注：病原體侵入人體后，刺激了淋巴細(xì)胞，淋巴細(xì)胞就會產(chǎn)生一種抵抗該病原體的特殊蛋白質(zhì)叫抗體， 引起人體產(chǎn)生抗體的物質(zhì)（如病原體等異物）叫做抗原。 v 主要檢測項(xiàng)目：v 感染疾病檢查 ：甲，乙，丙肝，艾滋等v 病毒標(biāo)志物檢查 ：甲，乙，丙肝抗體，淋病，梅毒v 腫瘤標(biāo)志物檢查 ：癌胚抗原等v 特種蛋白檢查 ：免疫球蛋白，補(bǔ)體等v 5.激素檢查：甲狀腺激素 ，性激素，糖尿病系列如胰島素等 乙肝兩對半v 乙肝兩對半檢查是用來判斷是否感染乙

27、肝，粗略估計(jì)病毒復(fù)制水平的初步檢查，雖然項(xiàng)目少，檢查簡單，但是意義非常重要。乙肝五項(xiàng)檢查分別是：1.表面抗原(hbsag)2.表面抗體(抗hbs)3.抗原(hbeag)4.抗體(抗hbe)5.核心抗體(抗hbc） v 乙肝五項(xiàng)第145項(xiàng)陽性，其余兩項(xiàng)陰性。俗稱乙肝小三陽，說明是急、慢性乙肝，傳染性相對較弱。 v 乙肝五項(xiàng)第135項(xiàng)陽性，其余兩項(xiàng)陰性。俗稱乙肝大三陽，說明是急、慢性乙肝，傳染性相對較強(qiáng)。 v 乙肝五項(xiàng)第25項(xiàng)陽性，其余三項(xiàng)陰性。說明是接種了乙肝疫苗以后，或是乙肝病毒感染后已康復(fù)，已有免疫力。 v 乙肝五項(xiàng)全陰說明過去和現(xiàn)在未感染過乙肝，無抗體 酶 標(biāo) 儀v 1.酶標(biāo)儀的定義v 酶

28、標(biāo)儀即酶聯(lián)免疫檢測儀(elisa reader)是酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)的專用儀器. 主要應(yīng)用于酶聯(lián)免疫吸附檢測反應(yīng)中檢測吸光度值，其用途主要應(yīng)用于elisa試劑的測定，廣泛用于各種實(shí)驗(yàn)室，包括臨床實(shí)驗(yàn)室。應(yīng)用范圍:血液學(xué)檢驗(yàn)、免疫學(xué)檢驗(yàn)、腫癌免疫學(xué)檢測、傳染病免疫學(xué)檢驗(yàn)、優(yōu)生優(yōu)育功能檢測 、基因檢驗(yàn)及獸殘、農(nóng)殘檢驗(yàn)項(xiàng)目等。v 酶聯(lián)免疫吸附劑測定法，簡稱酶聯(lián)免疫法，或者elisa法。v 它的中心就是讓抗體與酶復(fù)合物結(jié)合，然后通過顯色來檢測。v 生活中常見的有如乙肝二對半、人類免疫缺陷病毒抗體（即愛滋?。┑臋z測 檢測原理: v 使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。v 使抗原或抗體與某

29、種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測定時(shí)，把受檢標(biāo)本（測定其中的抗體或抗原）和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開，最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩a(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺來進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化頻率很高，故可極大地放大反應(yīng)效果，從而使測定方法達(dá)到很高的敏感度。檢測步驟v編輯elisa用血清來檢測，首先血液要經(jīng)過至少半個(gè)小時(shí)的凝集，然后取血清。將酶復(fù)

30、合物用稀釋液稀釋后，加血清及陰性、陽性對照，還有就是質(zhì)控品（這是嚴(yán)格的要求，它的范圍必須在質(zhì)控范圍內(nèi)）。經(jīng)過一個(gè)小時(shí)的孵育，然后洗板，加底物，半個(gè)小時(shí)避光反應(yīng)后加終止液即完成反應(yīng)部分，然后就是讀數(shù)。由數(shù)值來判斷結(jié)果的陰性或陽性。微孔板酶標(biāo)試劑盒 酶標(biāo)的分類：酶標(biāo)儀有單通道和多通道兩種酶標(biāo)的分類：酶標(biāo)儀有單通道和多通道兩種類型，單通道又分為自動型和手動型兩種。類型，單通道又分為自動型和手動型兩種。在單通道酶標(biāo)儀的基礎(chǔ)上，又發(fā)展了多通道、在單通道酶標(biāo)儀的基礎(chǔ)上，又發(fā)展了多通道、全自動型酶標(biāo)儀。多通道酶標(biāo)儀一般都是自全自動型酶標(biāo)儀。多通道酶標(biāo)儀一般都是自動型的，它設(shè)有多個(gè)光束和多個(gè)光電檢測器。動型的

31、，它設(shè)有多個(gè)光束和多個(gè)光電檢測器。如如8 8 通道的儀器，設(shè)有通道的儀器，設(shè)有8 8 條光束（或條光束（或8 8 個(gè)光個(gè)光源）、源）、8 8 個(gè)檢測器和個(gè)檢測器和8 8 個(gè)放大器個(gè)放大器 電源指示燈：儀器開機(jī)后，該指示燈點(diǎn)亮。 觸摸顯示屏：顯示程序界面，用筆點(diǎn)擊可進(jìn)行各類操作。 酶標(biāo)板蓋板：塑料蓋板，可以阻擋灰塵進(jìn)入酶標(biāo)板和儀器內(nèi)部。微孔板微孔板 : :是一種用來盛裝待測樣本的透明是一種用來盛裝待測樣本的透明塑料板，板上有多排小孔，如有塑料板，板上有多排小孔，如有40 40 孔板、孔板、55 55 孔板和孔板和96 96 孔板等多種規(guī)格。每個(gè)小孔孔板等多種規(guī)格。每個(gè)小孔可以盛放零點(diǎn)幾毫升的溶液。根據(jù)儀器的可以盛放零點(diǎn)幾毫升的溶液。根據(jù)儀器的不同，既