植物生理學試驗考試試題

1、植物生理學實驗考試試題植物生理學實驗考試試題、名詞解釋:I、 標準曲線：用標準溶液制成的曲線。先配制一系列不同濃度的標準溶液，在溶液吸收最大波長下,逐一測定吸光度，然后用坐標紙以溶液濃度為橫坐標，吸光度為縱坐標作圖，若被測物質(zhì) 對光的吸收符合光的吸收定律 ，必然得到一條通過原點的直線，即標準曲線。4、 氮素代謝：氮素及含氮的活體物質(zhì)的同化異化和排泄，總稱為氮素代謝。5、淀粉酶：是水解淀粉和糖原的酶類總稱。6、真空滲入：指將葉片打孔放入注射器中，加水浸沒，排出空氣后用手指堵住前端小 孔，同時把活塞向外抽拉，即可造成減壓而排出組織中的空氣，輕放活塞，水液即進 入組織的方法。7、離心技術：是根據(jù)物質(zhì)

2、顆粒在一個離心場中的沉降行為而發(fā)展起來的。它是分離細胞器和生物分子大分子物質(zhì)必備的手段之一，也是測定某些純品物質(zhì)的部分性質(zhì)的一種方法。8、 電泳：各種生物大分子在一定pH條件下，可以解離成帶電荷的顆粒，這種帶電顆 粒在電場的作用下向相反電極移動的現(xiàn)象稱為電泳。9、同工酶：凡能催化同一種化學反應但其分子結構和帶電性質(zhì)不同的一組酶稱為同工 酶10、遷移率：指帶電顆粒在單位電場強度下的泳動速度。II、 聚丙烯酰胺凝膠：是一種人工合成凝膠，是以丙烯酰胺為單位，由甲叉雙丙烯酰 胺交聯(lián)成的，經(jīng)干燥粉碎或加工成形制成粒狀，控制交聯(lián)劑的用量可制成各種型號的 凝膠。20、 超氧化物歧化酶（SOD）:普遍存在動植

3、物體內(nèi)的一種清除超氧陰離子自由基O2的 酶。21、硝酸還原還原酶：是植物氮素同化的關鍵酶， 它催化植物體內(nèi)的硝酸鹽還原為亞硝 酸。22、誘導酶：又稱適應酶，指植物體內(nèi)本來不含有，但在特定外來物質(zhì)的誘導下誘導生成的酶。如硝酸還原酶可為NO3-所誘導生成。二、填空：1、測定植物可溶性蛋白質(zhì)含量時，繪制標準曲線是標準蛋白質(zhì)濃度為橫坐標，以吸光 值為縱坐標。2、 常用的測定植物可溶性蛋白質(zhì)含量的方法有：Folin-酚試劑法（Lowry 法）、雙縮脲 法、考馬斯亮藍法和紫外吸收法。4、用滴定法測 Vc含量時，若樣品本身帶有顏色，則需先將樣品用草酸處理。5、 測定淀粉酶活性時，3, 5二硝基水楊酸試劑（D

4、NS）的作用是與還原糖顯色生成 棕紅色的 3-氨基-5-硝基水楊酸和終止酶活性。6、在測定淀粉酶的活性時：a淀粉酶不耐_酸_,卩淀粉酶不耐_熱_。7、聚丙烯酰胺凝膠電泳分離過氧化物同工酶實驗中，電泳存在三大效應，分別是濃縮 效應、分子篩效應和電荷效應 。9、用活體法測定硝酸還原酶的材料，取樣前葉子需進行一段時間的光合作用，以積累 光合產(chǎn)物，產(chǎn)生更多 NADH加速硝酸鹽的還原。11、葉綠素吸收光譜有 紅光 和 藍紫光 區(qū)兩個最強吸收區(qū)。12、 類胡蘿卜素吸收光譜最強吸收區(qū)在綠素的作用。13、葉綠素溶液在透射光下呈 邈色，在反射光下呈 暗紅色。15、 水培時要選用黑色容器裝營養(yǎng)，這是為了防止藻類滋

5、生16、常用 水溶液培養(yǎng)法確定植物生長的必需元素。三、選擇A_ 外液濃度變_D_20分鐘后觀察到有紅色色素出現(xiàn),1當植物細胞水勢小于外界溶液水勢時，植物細胞A吸水B失水C小D大2用紅菜苔做植物組織原生質(zhì)透性的觀察時，學生 下面那種處理方式不可能出現(xiàn)這種情況AA清水浸泡B清水煮沸1min C 30 %的醋酸D 70 %酒精3希爾反應實驗常用植物材料為新鮮菠菜，選用菠菜葉出于_B_方面考慮A葉綠素含量高B易于碾磨C營養(yǎng)豐富D顏色漂亮4植物生理實驗時，在碾磨植物材料時經(jīng)常會用的石英砂，其主要作用為A_A增加粗糙度B保護葉綠體或營養(yǎng)物質(zhì)C易于過濾D使溶液分層5植物組織中的水分主要有自由水和束縛水兩種形

6、式存在，有同學通過實驗測定某一植物的自由水和束縛水的比值比較大，可推斷該植物處于AA旺盛生長時期 B衰退狀態(tài)C病蟲危害狀態(tài) D干旱狀態(tài)6蛋白質(zhì)含量的測定常用“考馬斯藍 G-250”方法，其主要原理：考馬斯藍 G-250燃料 在游離狀態(tài)下稱紅色，當它與蛋白質(zhì)結合后呈青色。其結合物在光波_B下吸光值與蛋白質(zhì)含量成正比，故用分光光度計比色法測定A 668nm B 595nm C 250nm D 320nm7在綠豆芽蛋白質(zhì)含量的測定實驗時，實驗儀器用到了離心機，其作用主要為_BA使蛋白質(zhì)與水分離 B使殘渣與浸出液分離C使色素與水分離 D使蛋白質(zhì)與水混合8葉綠素不能溶液以下哪種溶液 _B_A乙醇B水C丙

7、酮D氯仿9環(huán)形層析法分離葉綠體中的各色素，色素種類從里向外的順序為_BA葉綠素a、葉綠素b、葉黃素、胡蘿卜素B葉綠素b、葉綠素a、葉黃素、胡蘿卜素C葉綠素b、葉綠素a、胡蘿卜素、葉黃素D胡蘿卜素、葉黃素、葉綠素b、葉綠素a10紅外線CO分析儀測環(huán)境中CQ的含量具有易操作、高效率等優(yōu)點。當用同一臺儀器 對武生院不同地點進行 CO測定時，發(fā)現(xiàn)林下與餐廳 CO濃度相差不太明顯，據(jù)推測主 要原因為_c_A儀器誤差B人為操作不當 C風的影響D光線的影響11植物的生長發(fā)育需要大量的營養(yǎng)物質(zhì)才能完成，現(xiàn)代無土栽培方法主要通過配制一 定的比例的營養(yǎng)液來培養(yǎng)園藝花卉或農(nóng)作物，而植物缺乏某一種營養(yǎng)元素都會產(chǎn)生不正

8、常的外在表現(xiàn)，我們稱之為“缺素癥”。當我們對海桐枝條進行缺素培養(yǎng)時，同學們發(fā) 現(xiàn)海桐枝條用缺素液培養(yǎng)與完全營養(yǎng)液、純水培養(yǎng)等幾種方法培養(yǎng)，其外在表現(xiàn)上沒有差別，其主要原因有可能是 CA肥料失效B稱量誤差C海桐對缺素不敏感 D光照影響13植物細胞膜對維持細胞的微環(huán)境和正常代謝起著重要作用。在正常情況下細胞膜對物質(zhì)具有選擇透性能力。為了測定植物的抗逆性， 實驗中我們常用不同溫度處理，通過測溶液導電性，來判斷植物對高溫的抗性大小。如果有兩種植物，用相同的溫度處理， 發(fā)現(xiàn)植物a的電導率為1.235，植物b的電導率為0.854，那么那種植物可能更耐高溫 一些 _B_A植物a B植物b14 TTC法測種子

9、生命力，通過溫水浸泡過的健康玉米種子，B不會染色A胚芽B胚乳C胚軸D胚根15植物呼吸強度的測定實驗過程中，用廣口瓶中加入一定量的Ba （OH 2,并懸掛植物材料，則植物材料呼吸放出的CQ被容器中Ba （OH 2所吸收，然后用草酸溶液滴定殘留Ba （OH 2,根據(jù)和空白樣本對比本可以計算出植物的呼吸速率。如果空白滴定所有 草酸量為V0,樣品滴定所用草酸量為 V，有同學做實驗滴定的草酸量 V0為7.4ml，V1為 7.6ml，那么該同學所滴定的結果A正確B錯誤2、進行酶活力測定時：A ）B、酶濃度必須極大于底物濃度D、酶能提高反應的平衡點A、底物濃度必須極大于酶濃度C、與底物濃度無關 4、Foli

10、n-酚試劑法（Lowry法）測定蛋白質(zhì)濃度時，用（B）波長比色，測定光密度值。A、260nm B、650nm C、540nm D、280nm 5、不連續(xù)聚丙烯酰胺凝膠電泳比一般電泳的分辨率高，是因為具有下列哪種效應？（ABC ）A、濃縮效應B、電荷效應 C、分子篩效應 D、粘度效應6硝酸還原酶與亞硝酸還原酶（D）A.都是誘導酶B.硝酸還原酶不是誘導酶，而亞硝酸還原酶是C.都不是誘導酶D.硝酸還原酶是誘導酶，而亞硝酸還原酶不是7、酶的分離提純過程中，不正確的操作是（ C）A、需在低溫下進行，一般在05C之間B、酶制劑制成干粉后可保存于4C冰箱中C、需經(jīng)常使用巰基乙醇以防止酶蛋白二硫鍵發(fā)生還原D、

11、提純時間盡量短8、在提取葉綠素時，研磨葉片時加入少許CaCO3，其目的是（D）A.使研磨更充分 B.加速葉綠素溶解 C.使葉綠素a、b分離D.保護葉綠素10、 一般而言，正常植物葉片的葉綠素與類胡蘿卜素的比值為（B ）A.2:1 B.3:1 C.1 :2 D.1:311、 測定葉綠素總量時，分光光度計選用的波長是（D ）A.663nmB.645nmC.430nm D. 652nm四、問答題1試述植物種子萌發(fā)的三個階段以及各階段的代謝特點？答： 吸脹吸水階段： 為依賴原生質(zhì)膠體吸脹作用的物理吸水階段， 無論種子是否通過 休眠還是有無生命力，均具有此階段；緩慢吸水階段：種子吸水受種皮的束縛，原生

12、質(zhì)的水合度達到飽和， 酶促反應與呼吸作用增強， 貯藏物質(zhì)開始分解， 胚細胞的吸水力 提高；生長吸水階段：在貯藏物質(zhì)加快轉(zhuǎn)化的基礎上，胚根、胚芽中的核酸、蛋白質(zhì) 等原生質(zhì)組分合成加快，細胞吸水加強。當胚根突破種皮后，有氧呼吸增強，種子吸水 與鮮重持續(xù)增加。2、什么叫質(zhì)壁分離現(xiàn)象？研究質(zhì)壁分離有什么意義？答：植物細胞由于液泡失水而使原生質(zhì)體和細胞壁分離的現(xiàn)象稱為質(zhì)壁分離。 在剛發(fā)生 質(zhì)壁分離時， 原生質(zhì)與細胞壁之間若接若離。 稱為初始質(zhì)壁分離。 把已發(fā)生質(zhì)壁分離的 細胞置于水勢較高的溶液和純水中，則細胞外的水分向內(nèi)滲透， 使液泡體積逐漸增大因而原生質(zhì)層與細胞壁相接觸，恢復原來的狀態(tài)，這一現(xiàn)象叫質(zhì)壁

13、分離復原。研究質(zhì)壁分離可以鑒定細胞的死活，活細胞的原生質(zhì)層才具半透膜性質(zhì)， 產(chǎn)生質(zhì)壁分離現(xiàn)象，而死細胞無比現(xiàn)象；可測定細胞水勢，在初始質(zhì)壁分離時，此時細胞的滲透勢就 是水勢（因為此時壓力勢為零） ：還可用以測定原生質(zhì)透性、滲透勢及粘滯性等。3、 小籃子法測定萌發(fā)的小麥種子呼吸強度，以 Ba（OH 2吸收呼吸時放出的 C02種子 重5g,反應進行20分鐘，用0.1N-草酸滴定剩余的Ba （OH 2,用去草酸18ml，空白 滴定用去草酸 20 ml ，計算萌發(fā)小麥種子的呼吸強度。答：小麥種子呼吸強度（鮮重小時）=2.64 （mgCo2/g - FW h）4、農(nóng)諺講“旱長根,水長苗”是什么意思？道理

14、何在？ 答：這是指水分供應狀況對植物根冠比調(diào)節(jié)的一個形象比喻。 植物地上部生長和消耗的 大量水分, 完全依靠根系供應, 土壤有效水的供應量直接影響枝葉的生長, 因此凡是能 增加土壤有效水的措施, 必然有利地上部生長； 而地上部生長旺盛, 消耗耗大量光合產(chǎn) 物,使輸送到根系扔機物減少,又會削弱根系的生長,加之如果水分過多,通氣不良, 也會限制根系活動, 這些都將使根冠比減少。 干旱時,由于根系的水分環(huán)境比地上部好, 根系仍能較好地生長； 而地上部則由于抽水, 枝葉生長明顯受阻, 光合產(chǎn)物就可輸入根 系,有利根系生長,使根冠比增大。所以水稻栽培中,適當落干曬田,可對促進根系生 長,增加根冠比。6、

15、簡述氣孔開閉的主要機理。 答：氣孔開閉取決于保衛(wèi)細胞及其相鄰細胞的水勢變化以及引起這些變化的內(nèi)、外部因素,與晝夜交替有關。在適溫、供水充足的條件下,把植物從黑暗移向光照,保衛(wèi)細胞的滲透勢顯著下降而吸水膨脹，導致氣孔開放。反之，當日間蒸騰過多，供水不足或夜 幕布降臨時，保衛(wèi)細胞因滲透勢上升，失水而縮小，導致氣孔關閉。 氣孔開閉的機理復雜，至少有以下三種假說： （ 1）淀粉糖轉(zhuǎn)化學說，光照時，保衛(wèi) 細胞內(nèi)的葉綠體進行光合作用，消耗C02使細胞內(nèi)PH值升高，促使淀粉在磷酸化酶催化下轉(zhuǎn)變?yōu)?1磷酸葡萄糖，細胞內(nèi)的葡萄糖濃度高，水勢下降，副衛(wèi)細胞的水進入 保衛(wèi)細胞，氣孔便張開。在黑暗中，則變化相反。 （

16、 2）無機離子吸收學說，保衛(wèi)細胞的 滲透系統(tǒng)亦可由鉀離子（K+）所調(diào)節(jié)。光合磷酸化產(chǎn)生 ATF。ATP使細胞質(zhì)膜上的鉀- 氫離子泵作功，保衛(wèi)細胞便可逆著與其周圍表皮細胞之間的離子濃度差而吸收鉀離子， 降低保衛(wèi)細胞水勢，氣孔張開。（ 3）有機酸代謝學說，淀粉與蘋果酸存在著相互消長的關系。氣孔開放時，葡萄糖增加，再經(jīng)過糖酵解等一系列步驟，產(chǎn)生蘋果酸，蘋果酸解 離的H+可與表皮細胞的K+交換，蘋果酸根可平衡保衛(wèi)細胞所吸入的 K+。氣孔關閉時， 此過程可逆轉(zhuǎn)?？傊O果酸與K+在氣孔開閉中起著互相配合的作用。7、呼吸代謝的多條途徑對植物生存有何適應意義？ 答：植物代謝受基因的控制，而代謝（包括過程、產(chǎn)

17、物等）又對基因表達具控制作用， 基因在不同時空的有序即表現(xiàn)為植物的生長發(fā)育過程，高等植物呼吸代謝的多條途徑（不同底物、呼吸途徑、呼吸鏈及末端氧化等）使其能適應變化多端的環(huán)境條件。如植 物遭病菌浸染時，PPP增強，以形成植保素，木質(zhì)素提高其抗病能力，又如水稻根在淹 水缺氧條件下，乙醇酸氧化途徑和與氧親和力高的細胞色素氧化酶活性增強以保持根 的正常生理功能。4. 請介紹 3 種常用的可溶性蛋白質(zhì)的測定方法。答：目前常用的有以下幾種方法：雙縮脲法、Lowry法（Folin-酚試劑法）、Bradford法（考馬斯亮 藍法） 、紫外吸收法。5、簡述斐林酚試劑法測定植物可溶性蛋白質(zhì)的原理。答：Folin-

18、酚試劑法也稱 Lowry法，斐林（Folin） 酚試劑法結合了雙縮豚試劑和酚 試劑與蛋白質(zhì)的反應， 其中包括兩步反應： 第一步是在堿性條件下， 蛋白質(zhì)中的肽鍵與 銅試劑作用生成紫紅色的蛋白質(zhì)一銅 絡合物（雙縮脲反應） ；第二步是此絡合物以及 蛋白質(zhì)中酪氨酸和苯丙氨酸等芳香族氨基酸的殘基使磷鉬酸-磷鎢酸試劑（Folin試劑）還原，產(chǎn)生磷鉬藍和磷鎢藍的深藍色混合物質(zhì)，在一定的條件下，顏色深淺與蛋白含量成正相關。因此，可利用其在 650nm 波長下的特定吸收進行比色測定。6、植物組織可溶性蛋白質(zhì)含量的測定中， 斐林酚試劑法、 考馬斯亮藍法兩種方法各 有何優(yōu)缺點？ 答：斐林酚試劑法其優(yōu)點是：由于加入了

19、Folin-酚試劑后使蛋白質(zhì)肽鍵顯色效果增強，從而減少了因蛋白質(zhì)種類引起的偏差。其靈敏度比雙縮豚法高100 倍。此法操作簡便，適于蛋白質(zhì)含量 較微小的樣品測定。 可檢測的最低蛋白質(zhì)含量達 5ug， 通常 測定范圍5100ug。0.020.50mg/mL蛋白質(zhì)，也可用于酪氨酸和色氨酸的定量測定。 缺點是操作煩瑣，耗時較長，要精確控制操作時間，標準曲線不是嚴格的直線形式，且 專一性差，干擾物質(zhì)（酚類、檸檬酸、 Tris 緩沖液、甘氨酸、糖類、甘油等）較多。 考馬斯亮藍法是靈敏度更高的一種方法，優(yōu)點有：靈敏度高，比lowry法高4倍左右，最低檢 測達 1 5 微克；測定快速、簡便，染色穩(wěn)定；干擾物質(zhì)

20、少。缺點是用于 不同蛋白質(zhì)測定時有較大的偏差；仍有干擾，如 SDS、去污劑、Trit on x100等；標準曲線有輕微的非線性。7、Folin- 酚試劑法測定植物可溶性蛋白質(zhì)時受哪些因素的干擾？答： Folin- 酚試顯色反應是由絡氨酸、 色氨酸和半胱氨酸引起的， 因此樣品中若含有酚 類、檸檬 酸和巰基類化合物均有干擾作用。此外，不同蛋白質(zhì)音絡氨酸、色氨酸含量 的不同而使顯色強度稍有 差異。8、用茚三酮顯色法測定植物組織氨基酸時，加入Vc 的作用是什么？答：由于該反應的第一步是茚三酮的還原，而還原型茚三酮在含氧量高的情況下很容 易再氧化， 對反應有干擾，因此，常在反應體系中加入還原劑，以阻止還

21、原型茚三酮 的再氧化。9、茚三酮顯色法測定植物組織氨基酸時為什么要除去蛋白質(zhì)？用10%乙酸除去蛋白質(zhì)的原理是什么？答：由于蛋白質(zhì)和多肽中的游離氨基酸也會產(chǎn)生同樣反應，因此，對于含大量蛋白質(zhì) 和多肽的樣 品，應先用蛋白質(zhì)沉淀劑將其除去。 常用的蛋白質(zhì)沉淀劑有 10%乙酸、 磺 基水楊酸（SSA）、三氯乙酸（TCA）、過氯酸（PCA ）等，其中以乙酸提取總氨基 酸的效果較好。 原理:1 0%乙酸和蛋白質(zhì)反應 使之沉淀下來（）10、用茚三酮顯色法測定植物組織氨基酸時，為什么要用無氨蒸餾水？答: 氨基酸與茚三酮反應的實質(zhì)是還原型茚三酮與另一分子茚三酮和一分子氨的縮合 脫水反應。 故，若蒸餾水中含有氨將

22、使氨基酸含量增大。帶來誤差。11、測定植物組織中游離氨基酸總量有何生理意義？ 答:測定植物體內(nèi)游離氨基酸含量對研究植物在不同條件下及不同生長發(fā)育時期氮代謝 變化、植物對氮素的吸收、運輸、同化及營養(yǎng)狀況等有重要意義。12、測定淀粉酶活性時，3，5二硝基水楊酸試劑（DNS）的作用是什么？答：淀粉酶水解淀粉生成的麥芽糖，可用3, 5二硝基水楊酸試劑測定。由于麥芽糖能將后者 還原生成3氮基巧-肖基水楊酸的顯色基團，在一定范圍內(nèi)其顏色的深淺與糖 的濃度成正比，故可 求出麥芽糖的含量。13、測定（a+ 3）-淀粉酶總活力時，為什么要將淀粉酶原液稀釋成淀粉酶稀釋液后進 行反應。答：淀粉酶原液主要是用于鈍化3

23、淀粉酶，從而測定 a-淀粉酶的活力。而淀粉酶稀釋液主要是用于測 出（a+ 3 -淀粉酶總活力，從而可得出3淀粉酶的活力。14、測定淀粉酶活性時，為什么要將酶提取液和淀粉溶液分別放在40 C水浴中預保溫？a-淀粉酶的活性40 C水浴中預保答:因為a-淀粉酶的最適溫度在 40 C50C之間，在這一溫度范圍內(nèi)最強， 催化 淀粉的能力最強。 因此， 將酶提取液和淀粉溶液分別放在 溫，有利于淀粉酶活性的測 定，減少誤差15、測定硝酸還原酶活性的離體法和活體各有何特點？答：活體法步驟簡單，適合快速、多組測定，重復性不好，應在4 C離體法步驟復雜 但重復性較好。需要在低溫和 NADH 的條件下進行。16、為

24、什么用活體法測定硝酸還原酶的材料，在取樣前要進行一段時間的光合作用？ 答：因為測定前材料在進行光合作用，會積累能量物質(zhì)，可促進硝酸還原酶的產(chǎn)生。17、活體法測植物體內(nèi)硝酸還原酶活力實驗中，硝酸鹽還原過程為何在黑暗中進行？ 答：硝酸鹽還原過程應在黑暗中進行 ,以防亞硝酸鹽還原為氨。18、活體法測植物體內(nèi)硝酸還原酶活力實驗中，如何判斷真空抽氣的終點？ 答：真空抽氣時，葉片完全軟化沉入杯底，則代表葉片組織間隙的氣體得以全部排除， 那么就是真空抽氣的終點。19、用 2,6-二氯酚靛酚滴定法測定維生素 C 含量時， 為什么強調(diào)滴定時間不超過 2 分 鐘 答：維生素 C 具有很強的還原性，如果滴定時間過長

25、，維生素 C 就會被空氣中的 氧氣氧化，從而 減少維生素 C 的含量，最終影響到維生素 C 含量的測定。20、為什么用 2,6-二氯酚靛酚滴定法測定維生素C 含量時， 要在測定的同時進行 2,6-二氯酚靛酚溶液的標定答：是為了知道此時2,6-D染料的滴定度（每ml染料相當于抗壞血酸的 mg數(shù)）。是因為 2，6-D 染料很不穩(wěn)定，隨著時間的推移，其滴定度一直在變化中，因此只能 現(xiàn)測現(xiàn)用。21. 簡述滴定法測定 Vc 含量的實驗原理。答：還原型抗壞血酸還原染料2，6-二氯靛酚，該染料在酸性中呈紅色，被還原后紅色消失。還原型抗壞血酸還原 2，6-二氯靛酚后，本身被氧化成脫氫抗壞血酸。在沒有雜 質(zhì)干擾

26、時，一定量的樣品提取液還原標準2，6-二氯靛酚的量與樣品中所含維生素C 的量成正比。22. 為了準確測定果蔬的抗壞血酸含量，在測定過程應注意些什么？答：實驗所用的蒸餾水必須是無氨水。濾必須用干燥濾紙。格掌握加入抗壞血 酸的含量。 準曲線應在測定樣品的同時做， 以減少操作及反應條件的誤差。 定要水沸 騰后才能將試管放入加熱， 而且水浴鍋的水位一定要高于試管內(nèi)試劑的高度。 管從沸 水 浴中取出， 一定要冷水迅速冷卻后才能加入乙醇。 （因加熱時形成的紅色還原型茚三 銅， 在冷卻過程被空氣的氧氧化而褪色，而茚三銅和氨基酸的藍紫色反應物仍留著， 并變得更 加明顯。）銅和氨基酸反應生成的顏色在1小時內(nèi)保持

27、穩(wěn)定，所以要抓緊時間比色。 靈敏度在很大程度上與H離子濃度有關，最適 pH4.5，應嚴格控制。23. 簡述 “過氧化物酶同工酶聚丙烯酰胺凝膠電泳 ”實驗中所用的過硫酸銨、 四甲基乙二 胺、蔗糖、 溴酚藍、 H2O2 等試劑的作用是什么？答：過硫酸銨的作用：使丙烯酰胺（Acr）和交聯(lián)劑甲叉丙烯酰胺（Bis）聚合成聚丙烯酰胺凝膠。四甲基乙二胺（TEMED ）的作用：作為丙烯酰胺（Acr）和交聯(lián)劑甲叉丙烯酰胺（Bis）聚合的加速 劑。蔗糖的作用：使同工酶沉在點樣孔底部，防止 同工酶漂浮。 溴酚藍的作用：可以作為電泳進度的指示分子，起指示作用。 H2O2的作用：作為氧化物，使過氧化物酶同工酶催化 H2

28、O2 分解，從而來進行植物過氧化 物酶同工 酶的測定。24. 什么叫同工酶？測定同工酶有什么意義？答：同工酶：能催化同一種化學反應但其分子結構和帶電性質(zhì)不同的一組酶。（由 于同一種酶可分布于多種臟器組織， 它們之中的任何一個發(fā)生病變， 都可引起酶在血清 中 的活力變化。除了少數(shù)組織專一性的酶以外，大多數(shù)血清酶不能特異地反映某個特 定組織的病變。 ）而不同臟器或組織的同工酶譜型不同，當其發(fā)生病變后，釋放到血清 中的各種同工酶的比例也不一致， 所以血清酶的同工酶譜型的改變能精確地反映出患病 的部位和損傷的程度，提高了血清酶 測定在反映組織病變上的專一性。25、聚丙烯酰胺凝膠電泳分離過氧化物同工酶實

29、驗中，電泳結束后如何進行染色？ 電泳完畢，將電泳槽取出，倒去緩沖液，取下凝膠管，放入培養(yǎng)皿中。用一個帶有長針 頭的注射 器，吸滿水，將針頭沿管壁插入，同時慢慢地將注射器中的水推出，并不斷 轉(zhuǎn)動凝膠管，將凝膠管擠 脫出來，也可用洗耳球擠壓。取 0.5ml 聯(lián)苯胺母液 H2O 9.3ml 0.2ml3 H2O2 ，混勻后倒入盛有凝膠 條的培養(yǎng)皿。此時可以看到膠條上出現(xiàn) 藍色或棕褐色環(huán)，即過氧化物酶帶，約十 min 后用自來水沖洗， 這時藍色帶也慢慢 變成棕褐色。26、簡述聚丙烯酰胺凝膠電泳分離蛋白質(zhì)的原理聚丙烯酰胺凝膠由丙烯酰胺和交聯(lián)劑甲叉雙丙烯酰胺在催化劑作用下聚合而成， 具有三 維網(wǎng)狀結構，

30、其網(wǎng)孔大小可由凝膠濃度和交聯(lián)度加以調(diào)節(jié)。 凝膠電泳兼有電荷效應和分 子篩效應。被分離物質(zhì) 由于所載電荷數(shù)量、分子大小和形狀的差異，因此在電泳時產(chǎn) 生不同的泳動速率而相互分離。利用特 異性的顏色反應使待測酶著色，這樣就可在凝 膠中展現(xiàn)出酶譜。過氧化物酶是植物體內(nèi)常見的氧化酶。植物體內(nèi)許多生理代謝過程常與它的活性及其同工酶的種類有關。 利用過氧化物酶能催化 H2O2 把聯(lián)苯 胺氧化成 藍色或棕褐色產(chǎn)物的原理，將經(jīng)過電泳后的凝膠置于有 H2O2 及聯(lián)苯胺的溶液染色， 出現(xiàn)藍色 或棕褐色部位即為過氧化物酶同工酶在凝膠中存在的位置，多條有色帶即構 成過氧化物酶同工酶譜。29、葉綠素a在藍光區(qū)也有吸收峰，

31、能否用這一吸收峰波長進行葉綠素 a的定量分析？ 為什么？不能，因為類胡蘿卜素的最大吸收帶在400500的藍紫光區(qū)，不吸收紅光，為了排除類胡蘿 卜素的干擾，所以選擇葉綠素在紅光區(qū)的最大吸收峰；并且葉綠素的溶液呈綠 色，易與藍紫 光產(chǎn)生遮光效果，混淆實驗效果。31、 為什么提取葉綠素時干材料一定要用 80% 的丙酮， 而新鮮的材料可以用無水丙 酮提取？因為葉綠素分子結構的 “頭部”是親水的，與蛋白質(zhì)結合很牢，需經(jīng)過水解作用才可 被 提取出來。 而干材料中沒有水分， 故提取葉綠素時干材料一定要用 80% 丙酮或 95%乙 醇 提取，而新鮮的材料總含有水分，可以贏無水丙酮或乙醇提取。33、影響呼吸速率

32、測定的因素有哪些？答： 1內(nèi)部因素。不同種類植物的呼吸速率不同,凡是生長快的植物呼吸速率就高，生長慢的呼 吸速率就低；一般旱生植物，生長緩慢，呼吸速率比水生植物低；陰生植 物所處的光強度較弱，呼吸 也較弱，呼吸速率比陽生植物低。同一種植物在不同的生 長發(fā)育時期，呼吸速率也不同，一般在幼苗 期、開花期等生長旺盛期，呼吸速率增高。同一種植物的不同器官，呼吸速率也不同，一般生殖器官 比營養(yǎng)器官高，幼嫩組織器 官比衰老的組織器官高，種子內(nèi)胚的呼吸速率比胚乳高。多年生植物的呼 吸速率還表 現(xiàn)出季節(jié)周期性變化，在溫帶生長的植物，春天呼吸速率最高，夏天略降低，秋天又上 升， 以后一直下降，到冬天降到最低點，

33、這種周期性變化除了外界環(huán)境的影響外，與 植物體的代謝強度、 酶活性及呼吸底物的多寡也有密切關系。2. 外界因素對呼吸速率的影響。 （ 1）溫度：溫度呼吸作用的影響主要表現(xiàn)為溫度對呼 吸酶活性的影響。呼吸速率在一定范圍內(nèi)隨溫度 的增高而增高，達到最高值后，繼續(xù) 增高溫度，呼吸速率反而下降。一般植物在0C以下，呼吸作用很 弱或幾乎停止， 呼吸作用的最適溫度一般在 25C35C之間， 呼吸作用的最高溫度，一般在35C45C。 呼吸作用的最低溫度因植物種類不同有很大差異。呼吸作用的最適溫度總是比 光合作用的最適溫度高。（2）氧氣：氧是有氧呼吸途徑運轉(zhuǎn)的必要因素。從有氧呼吸來看，在氧濃度較低情況下，呼吸

34、速率與 氧濃度成正比，達到氧飽和點以后，則無促 進作用。氧濃度過高或過低都會對植物產(chǎn)生毒害。根系缺 氧會抑制根尖細胞分裂，影 響根系內(nèi)物質(zhì)的運輸，對植物生長發(fā)育造成嚴重危害。（ 3） 二氧化碳 二氧化碳是呼吸作用的最終產(chǎn)物，當外界環(huán)境中二氧化碳濃度增高時，脫羧反應減慢，呼吸作用受到抑制。 一些植物（如豆科） 的種子由于種皮限制 , 使呼吸作用釋放的 CO2 難以釋出， 種皮內(nèi)積聚 起高濃度的 CO2 抑制了呼吸作用，從而導致種子休眠。（4） 水分 植物組織的含水量與呼吸作用有密切的關系。 在一定范圍內(nèi)， 呼吸速率隨組織含水量的增 加而升 高。干燥種子的呼吸作用很微弱，當種子吸水后，呼吸速率迅速

35、增加。因此， 種子含水量是制約種子呼吸作用強弱的重要因素。 對于整體植物來說， 接近萎蔫時， 呼 吸速率有所增加，如萎蔫時間較長，細胞含水量則成為呼吸作用的限制因素。影響呼吸作用的外界因素除了溫度、 氧氣、二氧化碳、水分之外 ,呼吸底物的含量 （如可溶性糖）、 機械損傷、一些礦質(zhì)元素（如磷、鐵、銅等）對呼吸也有顯著影響。此外病原菌感染可 使寄主的線粒體增多 ,多酚氧化酶活性提高，抗氰呼吸和 PPP 途徑增強。 34、在呼吸速率測定中哪些步驟容易出現(xiàn)誤差？應怎樣避免。 1）實驗過程中應該不時輕輕的搖動，使溶液表面的BaCO 薄膜破壞，有利于 CO 的充分吸收 2）實驗過程中還要防止口中呼出的氣體

36、進入瓶內(nèi)3）應該用無 CO 蒸餾水或煮沸過的冷開水洗滌廣口瓶 35、廣口瓶橡皮塞上加一堿石灰管有何作用？37、在 SOD 測定中為什么設照光對照管和暗中空白管？ 設照光對照管為消除日光燈的光質(zhì)差異；暗中空白管用來在測定吸收峰時做空白對照 的。38、影響 SOD 活力測定準確性的主要因素是什么？應如何克服？主要因素是：1試管，所用試管的玻璃質(zhì)量要一樣，包括厚度，直徑，質(zhì)量2光照條件，光照條 件要求一致，即照光時試管放的高度，背景等各外界條件因素要一致39、植物缺鎂和缺鐵表現(xiàn)癥狀有何異同 為什么？ 答：相同點：缺鎂和缺鐵都呈現(xiàn)缺綠癥。 不同點：缺鎂出現(xiàn)的缺綠癥狀首先從下部老 葉上表現(xiàn)出來， 而缺鐵的缺綠癥狀首先從上部新生葉表現(xiàn) 出來。 原因是鎂是參與循環(huán) 的元素，即可再利用元素，而鐵是不參與循環(huán)的元素，即不可再利用元素。40 簡要介紹測定光合速率的三種方法及原理？（1）改良半葉法： 主要是測定單位時間、 單位面積葉片干重的增加量； （2）紅外線 CO2