藥物分析實驗報告

1、阿司匹林的質(zhì)量分析1 實驗?zāi)康?1. 掌握阿司匹林鑒定試驗的原理及與藥物結(jié)構(gòu)的關(guān)系； 2. 掌握本實驗中藥物特殊雜質(zhì)的來源和檢查原理； 3. 掌握阿司匹林分析的條件及要點2 實驗原理 1.藥物 本品為白色片，遇濕氣易變質(zhì)。本品含阿司匹林應(yīng)為標(biāo)示量的95.0%105.0%。  2.原理： 鑒別 三氯化鐵反應(yīng):水楊酸及其鹽在中性或弱酸性條件下，與三氯化鐵試液反應(yīng)，生成紫 堇色配位化合物。阿司匹林加熱水解生成水楊酸，可用三氯化鐵反應(yīng)鑒別。 水解反應(yīng):阿司匹林與碳酸鈉試液加熱，酯健水解，得水楊酸鈉和醋酸鈉，加過量稀 硫酸酸化后，生成白色水楊酸沉淀，并發(fā)生醋酸的臭氣，因此可用水解反應(yīng)鑒別。 檢

2、查 阿司匹林中游離水楊酸的檢查 a. 雜質(zhì)來源 游離水楊酸為阿司匹林生產(chǎn)中未反應(yīng)的原料或貯存過程中的水解產(chǎn)物。 b. 檢查方法 阿司匹林無游離酚羥基，不與高鐵鹽溶液作用，而水楊酸則可與之反應(yīng)生 成紫堇色，此種方法稱之對照法，極為靈敏，可檢出1ug 的游離水楊酸。3. 干燥失重測定法（1） 定義：系指藥品在規(guī)定的條件下，經(jīng)干燥后所減失的量，以百分率表示。主要指水分，也包括其它揮發(fā)性物質(zhì)。（2） 干燥失重測定法(中國藥典 2010 年版二部附錄 L)有烘箱干燥法、恒溫減壓干燥法及干燥器干燥法，后者又分常壓、減壓兩種。 1） 常壓恒溫干燥法：適用于受熱較穩(wěn)定的藥物。將供試品置相同條件下已干燥恒重的扁

3、形稱瓶中，于烘箱內(nèi)在規(guī)定溫度下干燥至恒重（兩次干燥或熾灼后的重量差異在0.3mg以下），從減失的重量和取樣量計算供試品的干燥失重。干燥溫度一般為105。2）干燥劑干燥法：適用于受熱分解且易揮發(fā)的供試品。將供試品置干燥器中，利用干燥器內(nèi)的干燥劑吸收水分至恒重。常用的有硅膠、硫酸和五氧化二磷。 3）減壓干燥法：適用于熔點低、受熱不穩(wěn)定及難趕除水分的藥物。在減壓條件下，可降低干燥溫度和縮短干燥時間。減壓后的壓力在2.67kPa(20mmHg)以下。 恒溫減壓干燥法烘箱干燥法干燥器干燥法4. 熾灼殘渣檢查藥品（多為有機(jī)化合物）經(jīng)高溫加熱分解或揮發(fā)后遺留下不揮發(fā)的無機(jī)物，經(jīng)加硫酸并熾灼（700800）后

4、生成金屬氧化物或其硫酸鹽即為熾灼殘渣。高溫爐3 實驗儀器與試劑儀器 高效液相色譜儀，1025ml 注射器，0.8um 微孔 濾膜，容量瓶，移液管，漏斗，扁形稱量瓶，烘箱 最高溫度 300，控溫精度±1， 干燥器(普通) ，分析天平 感量 0.1mg，高溫爐，坩堝，坩堝鉗等。剩余儀器如下圖所示。試劑 1. 三氯化鐵試液 取三氯化鐵9g，加水使溶解成100ml，既得。 2. 碳酸鈉試液 取一水合碳酸鈉12.5g 或無水碳酸鈉10.5g，加水使溶解成100ml，既得。 3.稀硫酸 取硫酸57ml，加水稀釋至1000ml，既得。本液含硫酸應(yīng)為9.5%10.5%。 阿司匹林、硫酸（分析純）4

5、實驗步驟（一）性狀本品為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；無臭或微帶醋酸臭，味微酸；遇濕氣即緩緩水解。本品在乙醇中易溶，在三氯甲烷或乙醚中溶解，在水或無水乙醚中微溶；在氫氧化鈉溶液或碳酸鈉溶液中溶解，但同時分解。（二） 鑒別（1）取本品約0.1g，加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫堇色。（2）取本品約0.5g，加碳酸鈉試液10ml，煮沸2分鐘后，放冷，加過量的稀硫酸，即析出白色沉淀，并發(fā)生醋酸的臭氣。（3）本品的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜（藥品紅外光譜集5圖）一致。（三）檢查（1）溶液的澄清度取本品0.50g，加溫?zé)嶂良s45的碳酸鈉試液10ml溶解后，溶液應(yīng)澄清。（2）游離水

6、楊酸取本品約0.1g，精密稱定，置10ml量瓶中，加1%冰醋酸甲醇溶液適量，振搖使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液（臨用新制）；取水楊酸對照品約10mg，精密稱定，置100ml量瓶中，加1%冰醋酸甲醇溶液適量使溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取5ml，置50ml量瓶中，用1%冰醋酸甲醇溶液稀釋至刻度，搖勻，作為對照品溶液。照高效液相色譜法（2010年版藥典二部附錄 D）試驗。用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈四氫呋喃冰醋酸水（20：5：5：70）為流動相；檢測波長為303nm。理論板數(shù)按水楊酸峰計算不低于5000，阿司匹林峰與水楊酸峰的分離度應(yīng)符合要求。立即精密量取供試品溶

7、液、對照品溶液各10l，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。供試品溶液色譜圖中如有與水楊酸峰保留時間一致的色譜峰，按外標(biāo)法以峰面積計算，不得過0.1%。（3） 干燥失重 1.稱取供試品 取供試品，混合均勻(如為較大的結(jié)晶，應(yīng)先迅速搗碎使成 2mm 以下的小粒) 。分取約 1g 或該藥品項下所規(guī)定的重量，置與供試品同樣條件下干燥至恒重的扁形稱量瓶中(供試品平鋪厚度不可超過 5mm，如為疏松物質(zhì)，厚度不可超過 10mm) ，精密稱定。 干燥失重在 1.0%以下的品種可只做一份， 1.0%以上的品種應(yīng)做平行試驗兩份。2. 干燥 除另有規(guī)定外，照各該藥品項下規(guī)定的條件干燥。干燥時，應(yīng)將瓶蓋取下，置稱量瓶旁

8、或?qū)⑵可w半開。取出時須將稱量瓶蓋好。3. 稱重 用干燥器干燥的供試品，干燥后取出即可稱定重量。 置烘箱或恒溫減壓干燥箱內(nèi)干燥的供試品，應(yīng)在干燥后取出置干燥器中放冷至室溫(一般約需 3060 分鐘) ，再稱定重量。 4. 恒重 稱定后的供試品按(5.4.25.4.3)操作，直至恒重。5. 記錄與計算 記錄干燥時的溫度、壓力，干燥劑的種類，干燥和放冷至室溫的時間，稱量及恒重數(shù)據(jù)、計算和結(jié)果(如做平行試驗兩份者，取其平均值)等。 式中:W1為供試品的重量(g) ; W2為稱量瓶恒重的重量(g) ; W3為(稱量瓶+供試品)恒重的重量(g).6.干燥至恒重，除另有規(guī)定外，系指連續(xù)兩次干燥后的重量差異在

9、 0.3mg 以下的重量。干燥失重過程中的第二次及以后多次稱重，均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)干燥 1 小時后進(jìn)行。(4)熾灼殘渣1.空坩堝恒重取坩堝置于高溫爐內(nèi)，將蓋子斜蓋在坩堝上，經(jīng) 700-800熾灼約 60 分鐘，關(guān)閉電源，將爐門稍打開，待爐溫降至約 400取出坩堝，移置干燥器內(nèi)并蓋 上蓋子，放冷至室溫(一般需 3060 分鐘)，精密稱定坩堝重量。再在上述條件下熾灼 約30 分鐘，取出，置干燥器內(nèi)，放冷至室溫(與上次放冷時間相同)，稱量，直至恒重， 備用。以上熾灼操作也可借助煤氣燈進(jìn)行。2. 稱取供試品取供試品 1.0-2.0g 或各該藥品項下規(guī)定的重量，置已熾灼至恒重 的坩堝內(nèi)，精密稱定。3.

10、 炭化將盛有供試品的坩堝斜置電爐或煤氣燈上緩緩灼燒(避免供試品驟然膨脹 而逸出)，熾灼至供試品全部炭化呈黑色，并不冒濃煙，放冷至室溫，“炭化”操作應(yīng)在 通風(fēng)柜內(nèi)進(jìn)行。 4. 灰化除另有規(guī)定外，滴加硫酸 0.5-1.0ml，使炭化物全部濕潤，繼續(xù)在電爐或 煤氣燈上加熱至硫酸蒸氣除盡，白煙完全消失(以上操作應(yīng)在通風(fēng)柜內(nèi)進(jìn)行)， 將坩堝 移置高溫爐內(nèi)，蓋子斜蓋于坩堝上，在700800熾灼約60 分鐘，使供試品完全灰化。 5. 恒重按操作方法 1自“取出坩堝稍冷片刻”起，依法操作，直至恒重。以 上熾灼操作也可借助煤氣燈進(jìn)行。5 注意事項（一）干燥失重1.由于原料藥的含量測定，根據(jù)藥典“凡例”的規(guī)定，應(yīng)

11、取未經(jīng)干燥的供試品進(jìn)行試驗，測定后再按干燥品(或無水物)計算，因而干燥失重的數(shù)據(jù)將直接影響含量測定;當(dāng)供試品具有引濕性時，宜將含量測定與干燥失重的取樣放在同一時間進(jìn)行。 2 .供試品如未達(dá)規(guī)定的干燥濕度即融化時，應(yīng)先將供試品于較低的溫度下干燥至大部分水分除去后，再按規(guī)定條件干燥。 3. 設(shè)定烘箱的溫度時，應(yīng)注意加熱溫度有沖高現(xiàn)象(尤其干燥溫度較低時) ，必要時可先設(shè)定至略低于規(guī)定的溫度，待溫度穩(wěn)定后再調(diào)高至規(guī)定溫度。也可借助程序升溫方法。4. 減壓干燥，除另有規(guī)定外，壓力應(yīng)在 2.67kPa(20mmHg)以下，并宜選用單層玻璃蓋稱量瓶， 如用雙層中空的玻璃蓋稱量瓶， 減壓時， 稱量瓶蓋切勿放

12、入減壓干燥箱 (器)內(nèi)，應(yīng)放另一普通干燥器內(nèi)。減壓干燥箱(器)內(nèi)部為負(fù)壓，開啟前應(yīng)緩緩旋開進(jìn)氣閥，使干燥空氣進(jìn)入，并避免氣流吹散供試品。5. 初次使用新的減壓干燥器時，宜先將外部用較厚的布包好，再行減壓，以防破碎傷人。6. 恒溫減壓干燥時，除另有規(guī)定外，溫度應(yīng)為 60。裝有供試品的稱量瓶應(yīng)盡量置于溫度計部位，以避免因箱內(nèi)溫度不均勻造成的誤差。7. 干燥失重測定，往往幾個供試品同時進(jìn)行，因此稱量瓶宜先用適宜的方法編碼標(biāo)記，以免混淆;稱量瓶放入干燥箱的位置，以及取出冷卻、稱重的順序，應(yīng)先后一致， 則較易獲得恒重。8. 稱定扁形稱量瓶和供試品以及干燥后的恒重，均應(yīng)準(zhǔn)確至 0.1mg 位。 (2) 熾灼殘渣1. 供試品的取量應(yīng)根據(jù)熾灼殘渣限度來決定，一般規(guī)定熾灼殘渣限度為0.10.2%， 應(yīng)使熾灼殘渣的量在1-2mg 之間，故供試