生物技術制藥知識點總結(1)

1、生物技術制藥知識點綱要生物技術制藥:采用現(xiàn)代生物技術，借助某些微生物、植物、動物生產藥品。生物技術藥物一般來說，采用dna重組技術或其他生物新技術研制的蛋白質或核酸類藥物。生物藥物：生物技術藥物是重組產品概念在醫(yī)藥領域的擴大應用，并與天然藥物.微生物藥物.海洋藥物和生物制品一起歸類為生物藥物。生物技術：基因工程、細胞工程、酶工程、發(fā)酵工程、生化工程、蛋白質工程、抗體工程等?；蚬こ淌巧锛夹g的核心和關鍵，是主導技術；細胞工程是生物技術的基礎；酶工程是生物技術的條件；發(fā)酵工程是生物技術獲得最終產品的手段。生物技術：從廣義角度來看，是人類對生物資源（包括微生物、植物、動物）的利用、改造并為人類服務

2、的技術。第三代生物技術是海洋生物技術我國科學家承擔了人類基因組計劃1%的測序工作現(xiàn)代生物技術包括:重組dna技術細胞和原生質體融合技術酶和細胞的固定化技術植物脫毒和快速繁殖技術動物和植物細胞的大量培養(yǎng)技術動物胚胎工程技術現(xiàn)代微生物發(fā)酵技術現(xiàn)代生物反應工程和分離工程技術蛋白質工程技術海洋生物技術現(xiàn)代生物技術的發(fā)展趨勢主要體現(xiàn)在下列幾個方面：基因操作技術日新月異，不斷完善。新技術、新方法一經產生便迅速地通過商業(yè)渠道出售專項技術，并在市場上加以應用?；蚬こ趟幬锖鸵呙绲难芯亢烷_發(fā)突發(fā)猛進。新的生物治療制劑的產業(yè)化前景十分光明，21世紀整個醫(yī)藥工業(yè)將面臨全面的更新改造。轉基因植物和動物取得重大突破現(xiàn)代

3、生物技術在農業(yè)上的廣泛應用將給農業(yè)和畜牧業(yè)生產帶來新的飛躍。闡明生物體基因組及其編碼蛋白質的結構與功能是當今生命科學發(fā)展的一個主流方向，基因治療取得重大進展，有可能革新整個疾病的預防和治療領域。蛋白質工程是基因工程的發(fā)展，它將分子生物學、結構生物學、計算機技術結合起來，形成一門高度綜合的學科。信息技術的飛躍發(fā)展?jié)B透到生命科學領域中，形成形成引人注目、用途廣泛的生物信息學。生物技術藥物的特性是什么？生物技術藥物的特征是：（1）分子結構復雜（2）具有種屬差異特異性（3）治療針對性強.療效高（4）穩(wěn)定性差（5）免疫原性（6）基因穩(wěn)定性（7）體內半衰期短（8）受體效應（9）多效應和網絡效應（10）檢驗

4、特殊性生物技術發(fā)展的不同階段的技術特征和代表產品（1）傳統(tǒng)生物技術的技術特征是釀造技術，所得產品的結構較為簡單，屬于微生物的初級代謝產物。代表產品如酒.醋.乙醇，乳酸，檸檬酸等。（2）近代生物技術階段的技術特征是微生物發(fā)酵技術，所得產品的類型多，不但有菌體的初級代謝產物.次級代謝產物，還有生物轉化和酶反應等的產品，生產技術要求高.規(guī)模巨大，技術發(fā)展速度快。代表產品有青霉素，鏈霉素，紅霉素等抗生素，氨基酸，工業(yè)酶制劑等。（3）現(xiàn)代生物技術階段的技術特征是dna重組技術。所得的產品結構復雜，治療針對性強，療效高，不足之處是穩(wěn)定性差，分離純化工藝更復雜。代表產品有胰島素，干擾素和疫苗等。新型生物反應

5、器有:1.氣升式生物反應器2.流化床式生物反應器3.固定床式生物反應器4.袋式或膜式生物反應器5.中空纖維生物反應器生物技術藥物分類1.重組dna技術制造的多肽、蛋白類藥物2.基因藥物，包括基因治療藥、基因疫苗、反義藥物、核酶3.來自動、植物、微生物的天然藥物4.合成與半合成的生物藥物按照醫(yī)學用途分類：1.治療藥物，治療疾病是生物藥物的主要功能。2.診斷藥物，具有速度快、靈敏度高、特異性強的特點。3.預防藥物，對于許多傳染性疾病來說，預防比治療更重要。生物技術藥物的特性1.分子結構復雜2.具有種屬特異性3.治療針對性強，療效高4.穩(wěn)定性差5.基因穩(wěn)定性6.免疫原性7.體內t1/2短8.受體效應

6、9.多效性和網絡性效應10.檢驗的特殊性生物技術制藥的特征1.高技術：高知識人才，高技術手段2.高投入：13億美元/藥3.長周期：810年/藥4.高風險：成功率510%5.高收益：回報率10倍生物技術制藥分為哪些類型？生物技術制藥分為四大類：（1）應用重組dna技術(包 括基因工程技術.蛋白質工程技術)制造的基因重組多肽，蛋白質類治療劑。（2）基因藥物，如基因治療劑，基因疫苗，反義藥物和核酶等（3）來自動物.植物和微生物的天然生物藥物（4）合成與部分合成的生物藥物生物技術在制藥中有那些應用?答案：生物技術應用于制藥工業(yè)可大量生產廉價的防治人類重大疾病及疑難癥的新型藥物，具體體現(xiàn)在以下幾個方面：

7、（1）基因工程制藥，利用基因工程技術可生產出具有生理活性的肽類和蛋白質類藥物，基因工程疫苗和抗體，還可建立更有效的藥物篩選模型，改良現(xiàn)有發(fā)酵菌種，改進生產工藝，提供更準確的診斷技術和更有效的治療技術等。隨著基因技術的發(fā)展，應用前景會更廣闊。（2）細胞工程和酶工程制藥該技術的發(fā)展為現(xiàn)代制藥技術提供了更強大的技術手段，使人類可控制或干預生物體初次生代謝產物和生物轉化等過程，使動植物能更有效的滿足人類健康方面的需求。（3）發(fā)酵工程制藥發(fā)酵工程制藥的發(fā)展主要體現(xiàn)在對傳統(tǒng)工藝的改進，新藥的研制和高效菌株的篩選和改造等。第一節(jié) 基因的概念與特性一、基因的概念:dna分子中含有特定遺傳信息的一段核苷酸序列,

8、是遺傳物質的最小功能單位。二、基因的一般特性：基因可自我復制，基因決定蛋白質結構，基因可突變。 基因按功能分為：結構基因 調控基因三、dna的結構與性能dna的結構：四種核苷酸（a t c g）連接一級結構、dna二級結構（，），雙螺旋結構。dna的性質與功能:吸收光譜260電場中泳動變性、復性、雜交第二節(jié) dna的復制與表達二、基因表達轉錄：在rna聚合酶的催化下以dna為模板合成mrna的過程。2.翻譯：以mrna為模板,trna作為運載工具,將活化的氨基酸在核糖體上合成蛋白質的過程。(1)分為三個階段：起始延長終止(2)翻譯后的肽鏈加工:羥基化糖基化磷酸化乙?；诙?基因工程制藥第一節(jié)

9、 概 述醫(yī)用活性蛋白和多肽類包括：免役性蛋白，如各種抗原和單克隆抗體。細胞因子，如各種干擾素、白細胞介素、集落刺激生長因子、表皮生長因子及凝血因子。激素，如胰島素、生長激素、心鈉素。酶類，如尿激酶、鏈激酶、葡激酶、組織型纖維蛋白溶酶原激活劑及超氧化物岐化酶等?；蚬こ碳夹g生產藥品的優(yōu)點1.利用基因工程技術可大量生產過去難以獲得的生理活性蛋白和多肽（如胰島素、干擾素、細胞因子等），為臨床使用建立有效的保障。2.可以提供足夠數(shù)量的生理活性物質，以便對其生理、生化和結構進行深入的研究，從而擴大這些物質的應用范圍。3.利用基因工程可以發(fā)現(xiàn)挖掘更多的內源性生理活性物質。4.內源生理活性物質在作為藥物使用

10、時，存在不足之處，可以通過基因工程和蛋白質工程進行改造。5.利用基因工程技術可獲得新型化合物，擴大藥物篩選來源。第二節(jié) 基因工程藥物生產的過程基因工程技術是將重組對象的目的基因插入載體，拼接后轉入新的宿主細胞，構建成工程菌 (或細胞），實現(xiàn)遺傳物質的重新組合，并使目的基因在工程菌內進行復制和表達的技術?；蚬こ趟幬铮合抵赶却_定對某種疾病具有預防和治療作用的蛋白質，然后將控制該蛋白合成過程的基因分離、純化或進行人工合成，利用重組dna技術加以改造，最后將該基因放入可以大量生產的受體細胞中不斷繁殖，并能進行大規(guī)模生產具有預防和治療這種疾病的蛋白質，通過這種方法生產的新型藥物稱為基因工程藥物?；蚬?/p>

11、程藥物制藥的主要程序（步驟）目的基因的克隆構建dan重組體dan重組體轉入宿主菌構建工程菌工程菌發(fā)酵表達產物的分離純化產品的檢驗等基因工程藥物制藥的主要程序獲得目的基因組建重組質粒構建工程菌（或細胞）培養(yǎng)工程菌 產物分離純化除菌過濾半成品檢定成品檢定包裝基因工程的單元操作順序是酶切，連接，轉化，篩選，驗證 闡述基因工程藥物研制有那些主要過程？答案：（1）基因工程藥物的生產必須首先獲得目的基因，然后用限制性內切酶和連接酶將所需目的基因插入適當?shù)妮d體質?；蚴删w中并轉入大腸桿菌或其他宿主菌（細胞），以便大量復制目的基因。對目的基因要進行限制性內切酶和核苷酸序列分析。（2）目的基因獲得后，

12、最重要的就是使目的基因表達。基因的表達系統(tǒng)有原核生物系統(tǒng)和真核生物化的難易。將目的基因與表達載體重組，轉入合適表達系統(tǒng)，獲得穩(wěn)定高效表達的基因工程菌（細胞）。（3）建立適于目的基因高效表達的發(fā)酵工藝，以便獲得較高產量的目的基因表達產物。（4）建立起一系列相應的分離純化、質量控制、產品保存等技術。第三節(jié) 目的基因的獲得克隆真核基因常用方法：逆轉錄法和化學合成法。1、 逆轉錄法 ：逆轉錄法就是先分離純化目的基因的 mrna，再反轉錄成 cdna，然后進行 cdna 的克隆表達。 mrna的純化 cdna第一鏈的合成 cdna第二鏈的合成 cdna的克隆 將重組體導入宿主細胞： cdna文庫的鑒定：

13、抗性基因失活法、噬菌斑顏色改變法 目的cdna克隆的分離和鑒定：核酸探針雜交法、免疫反應鑒定法三、化學合成法 ：較小的蛋白質或多肽的編碼基因可以用化學合成法合成。必須知道目的基因的核苷酸順序或目的蛋白質的氨基酸順序。再按相應的密碼子推導出dna的核甘酸序列。用化學法合成目的基因dna不同部位的兩條鏈的寡核苷酸短片段，再退火成為兩端形成粘性末端的dna雙鏈片段，然后將這些雙鏈片段按正確的次序進行退火使連接成較長的dna片段，再用連接酶連接成完整的基因。人工化學合成基因的限制有： 不能合成太長的基因 目前 dna 合成儀所合成的寡核苷酸片段僅為 5060 bp，因此只適用于克隆小分子肽的基因。遺傳

14、密碼的簡并使選擇密碼子困難，用氨基酸順序推測核苷酸序列，得到的結果可能與天然基因不完全一致，易造成中性突變。費用高。四、基因篩選的新方法1.編碼序列富集法2.島嶼獲救pcr法3.動物雜交法4.功能克隆法5.構建cdna文庫6.差異顯示技術的應用五、對已發(fā)現(xiàn)基因的改造應用基因修飾技術和點突變技術提高目的基因表達產物的穩(wěn)定性、t1/2、提高表達量，降低毒性或免疫原性。第四節(jié) 基因表達基因表達是指結構基因在生物體中的轉錄、翻譯以及所有加工過程。基因高效表達研究是指外源基因在某種細胞中的表達活動，即剪切下外源基因片段，拼接到另一個基因表達體系中，使其能獲得原生物活性又可高產的表達產物。最佳的基因表達體

15、系：;目的基因的表達產量高;表達產物穩(wěn)定;生物活性高和表達產物容易分離純化一、宿主細胞的選擇適合目的基因表達的宿主細胞應滿足以下要求:1.容易獲得較高濃度的細胞；2.能利用易得廉價原料；3.不致病、不產生內毒素；4.發(fā)熱量低、需氧低、適當?shù)陌l(fā)酵溫度和細胞形態(tài)；5容易進行代謝調控；6.容易進行dna重組技術操作；7.產物的產量、產率高，產物容易提取純化。宿主細胞分為兩大類：第一類為原核細胞：常用有大腸桿菌、枯草芽胞桿菌、鏈霉菌等；第二類為真核細胞：常用有酵母、絲狀真菌、哺乳動物細胞等。二、大腸桿菌中的基因表達載體 ：是基因工程的目的和基本手段，是選用合適的載體把供體dna（外源基因）運載到受體細

16、胞內，從而復制擴增大量的目的dna分子或轉錄表達為相應的產物。基因工程載體分為：克隆載體,轉錄載體,表達載體;dna(克隆載體）dna(轉錄載體）rna蛋白質（表達載體）原核細胞的基因組特點：染色質為環(huán)狀雙股dna分子 具有操縱子結構 結構基因多為單拷貝 特定區(qū)域分布特異dna順序，因此外源dna分子可以插入原核細胞dna復制體系的特定區(qū)段基因克隆載體1）定義：基因克隆載體是一類能夠承載外源基因并將其帶入受體細胞得以穩(wěn)定維持的dna分子。2）目前經常使用的載體，有質粒和病毒兩類。各種不同的載體，盡管分子量大小、結構和用途上存在著較大的差異，但是作為載體，它們應該具備一些共同的特性?；蚬こ炭寺?/p>

17、載體的特點：具有復制子有單一限制內切酶切位點或多克隆位點有選擇性遺傳標記如抗藥基因拷貝數(shù)高生物安全性好質粒的分類按復制型式嚴緊型 松弛型按基因轉移性傳遞性質粒 非傳遞性質粒按遺傳性狀產物分類:抗生素抗性限制酶、修飾酶系統(tǒng)真核基因在原核細胞中表達載體必須具備條件載體能夠獨立復制。載體本身是一個復制子，具有復制起點。應具有靈活的克隆位點和方便的篩選標記，以利于外源基因的克隆鑒定和篩選。應具有很強的啟動子，能為大腸桿菌rna聚合酶所識別。應具有阻遏子，使啟動子受到控制，只有當誘導時才能進行轉錄。應具有很強的終止子，只轉錄克隆的基因，所產生的mrna較為穩(wěn)定。所產生的mrna必須具有翻譯的起始信號au

18、g和sd序列，以便轉錄后順利翻譯?；蚬こ趟幬镅兄朴心切┲饕^程？（1）基因工程藥物的生產必須首先獲得目的基因，然后用限制性內切酶和連接酶將所需目的基因插入適當?shù)妮d體質?；蚴删w中并轉入大腸桿菌或其他宿主菌（細胞），以便大量復制目的基因。對目的基因要進行限制性內切酶和核苷酸序列分析。（2）目的基因獲得后，最重要的就是使目的基因表達?；虻谋磉_系統(tǒng)有原核生物系統(tǒng)和真核生物化的難易。將目的基因與表達載體重組，轉入合適表達系統(tǒng)，獲得穩(wěn)定高效表達的基因工程菌（細胞）。（3）建立適于目的基因高效表達的發(fā)酵工藝，以便獲得較高產量的目的基因表達產物。（4）建立起一系列相應的分離純化、質量控制、產品保存等技術

19、。 影響目的基因在大腸桿菌中表達的因素外源基因的拷貝數(shù)：外源基因是克隆到載體上的，因此載體在宿主菌種的拷貝數(shù)就直接關系到外源基因的拷貝數(shù)。外源基因的表達效率啟動子的強弱核糖體接合位點的有效性sd序列和起始密碼atg的間距密碼子組成表達產物的穩(wěn)定性：組建融合基因，產生融合蛋白；利用大腸桿菌的信號肽或某些真核多肽中自身的信號肽，把真核基因產物搬動到胞漿周質的空隙中；采用位點特異性突變的方法，改變真核蛋白質中二硫鍵的位置，從而增加蛋白質的穩(wěn)定性；采用蛋白酶缺陷型大腸桿菌，有可能減弱表達產物的降解。細胞代謝負荷：工程菌的培養(yǎng)條件：外源基因的高水平表達，不僅涉及宿主、載體和克隆基因三者之間的相互關系，而

20、且與其所處的環(huán)境條件息息相關，必須優(yōu)化基因工程菌的培養(yǎng)條件，進一步提高基因表達水平。表達用的酵母菌應滿足哪些條件？答：表達用的酵母宿主菌應具備菌體生長力強.菌體內蛋白酶要較弱.菌株性能穩(wěn)定. 分泌能力強?；蚬こ趟拗骶鷳獫M足那些要求？目前應用最廣泛的宿主菌有哪些？（1）容易獲得較高濃度的細胞；（2）能利用廉價易得的原料；（3）不致病、不產生內毒素；（4）發(fā)熱量低，需氧低，適當?shù)陌l(fā)酵溫度和細胞形態(tài)；（5）容易進行代謝調控；（6）容易進行dna重組技術操作；（7）產物的產量、產率高，產物容易提取。宿主菌可分兩大類：1）原核細胞：大腸桿菌、枯草芽孢桿菌、鏈霉菌；2）真核細胞：酵母菌、絲狀真菌、哺乳動

21、物細胞。表達載體須具備哪些條件？常用載體有哪些？（1）能夠在宿主細胞中復制并穩(wěn)定地保存。（2）具多個限制酶切點，但每種切口最好只有1個，以便與外源基因連接。（3）具有某些標記基因，便于進行篩選。（4）所產生的mrna必須有翻譯的起始信號。（5）具有很強的啟動子。（6）有很強的終止子。（7）常用載體有：1、細菌細胞的質粒。2、噬菌體載體。第五節(jié) 基因工程菌生長代謝的特點一、菌體的生長與能量的關系碳源物質是組成培養(yǎng)基的主要成分。碳源物質為細胞提供能量，當菌體生長所需能量大于菌體有氧代謝提供的能量時，菌體會產生乙酸，導致培養(yǎng)基的ph值下降，從而影響菌體的生長。提高ph，可減少乙酸的抑制作用。分批培養(yǎng)

22、中選擇不同的碳源，連續(xù)培養(yǎng)中控制稀釋速率等都能一定范圍內控制菌體的生長，從而控制乙酸的產生，減少它的抑制作用。加入甲硫氨酸和酵母提取物都能減少乙酸的產生。大腸桿菌中克隆攜帶氧能力的vhb蛋白的基因可提高菌體生長速率。采用磷酸乙?；溉毕葜曜鳛樗拗骷毎?，阻止乙酸產生，可提高產量。二、菌體生長與前體供應的關系在基礎培養(yǎng)基中加入氨基酸（小分子前體）能使菌體比生長率提高，蛋白合成增加?；蚬こ叹|粒的表達需與宿主細胞競爭共同的前體和催化結構，致工程菌生長速率降低。質粒存在對菌體代謝的影響：中等拷貝質粒（56拷貝）的工程菌中與前體合成有關的酶增加，這些酶的基因大多受終產物的反饋調節(jié)。如：三羧酸循環(huán)關鍵酶

23、、天冬氨酸轉?；傅?。高拷貝質粒的工程菌（240拷貝）中，生長速率和菌體總蛋白合成均減少。這與工程菌大量前體被利用引起前體不足，從而產生“嚴緊反應”有關?！皣谰o反應”是當氨酰trna不足時,核糖體在密碼子上停留,并合成被稱為魔點的ppgpp的結果。第六節(jié) 基因工程菌的不穩(wěn)定性質粒不穩(wěn)定 基因工程菌在傳代（25代以上）過程中常出現(xiàn)的現(xiàn)象。分裂不穩(wěn)定：指工程菌分裂時出現(xiàn)一定比例不含質粒子代菌的現(xiàn)象。結構不穩(wěn)定：指外源基因從質粒上丟失或堿基重排、缺失所致工程菌性能的改變常見分裂不穩(wěn)定的兩個因素：含質粒菌產生不含質粒子代菌的頻率（質粒丟失率）；這兩種菌（含質粒菌和不含質粒菌）比生長速率差異的大小。二、

24、提高質粒穩(wěn)定性的方法1.合適的宿主：宿主菌2.合適的載體:質?？截悢?shù)3.選擇壓力：抗生素4.分階段控制培養(yǎng)：先使菌體生長至一定密度； 再誘導外源基因的表達5.控制培養(yǎng)條件：溫度、ph值、培養(yǎng)基組分、溶氧6.固定化：卡拉膠第八節(jié) 重組工程菌的培養(yǎng)一、基因工程菌的培養(yǎng)方式：1分批培養(yǎng)；2補料分批培養(yǎng)；3連續(xù)培養(yǎng)；4透析培養(yǎng)；5固定化培養(yǎng)2. 補料分批培養(yǎng) 是將種子接入發(fā)酵反應器中進行培養(yǎng),經過一段時間后間歇或連續(xù)地補加新鮮培養(yǎng)基（溶氧控制、流加補料），使菌體進一步生長的方法。良好的生長環(huán)境，延長對數(shù)生長期，獲得高密度菌體。對發(fā)酵影響較大的幾個因素有：培養(yǎng)基的影響接種量的影響溫度的影響溶解氧的影響誘

25、導時機的影響誘導表達程序的影響7.ph的影響接種量是指移入的種子液體積和培養(yǎng)液體積的比例。最佳化的工藝是獲得（七最）:最快周期、最高產量、最好質量、最低消耗、最大安全性、最周全的廢物處理效果和最低失敗率。第九節(jié) 高密度發(fā)酵高密度發(fā)酵：培養(yǎng)液中工程菌的菌體濃度在50g dcw/l（細胞干重/l）以上，最高200g dcw/l高密度發(fā)酵特點 ：菌體高密度，總表達量高；生物反應器體積小；單位體積生產能力高；生產周期短，分離成本小基因工程菌的高密度發(fā)酵過程中，目前普遍采用（ ）作為發(fā)酵培養(yǎng)基的碳源。影響高密度發(fā)酵的因素1.培養(yǎng)基：c源、n源種類和含量；c:n含量比值；微量元素；無機鹽（磷影響表達質粒的

26、復制速率）2.溶氧濃度：空氣分離系統(tǒng)提高氧分壓；透明顫菌血紅蛋白基因克隆到菌體中，提高氧傳質能力；菌體與小球藻混合培養(yǎng)，藻細胞光合作用產氧供菌體呼吸。3.ph值：大腸桿菌產酸、co2必須加堿調節(jié)ph值4.溫度：控制菌體生長，溫控誘導表達（誘導時機和持續(xù)時間，對數(shù)生長期，2min）5.代謝副產物： c源物質供應超過三羧酸循環(huán)或電子傳遞鏈能力，產生乙酸，抑制菌體生長和蛋白表達。采取流加補料法，或加入甘氨酸、甲硫氨酸抑制乙酸生成。二、實現(xiàn)高密度發(fā)酵的方法1.發(fā)酵條件的改進（1）培養(yǎng)基的選擇：（2）建立流加式培養(yǎng)方式；（3）提高供氧能力2.構建產乙酸能力低的工程化宿主菌（1）阻斷乙酸生產的主要途徑：（

27、2）對碳代謝流進行分流：（3）限制進入糖酵解途徑的碳代謝流；（4）引入血紅蛋白基因。3.構建蛋白水解酶活力低的工程化宿主菌基因工程菌的發(fā)酵與傳統(tǒng)的微生物發(fā)酵有什么不同？簡單分析其溫度對發(fā)酵的影響。第十節(jié)基因工程藥物的分離純化離子交換層析：是依據(jù)流動相中的組分離子與交換劑上的平衡離子進行可逆交換時結合力大小的差別而進行分離的一種層析方法。疏水層析：是利用蛋白質表面的疏水區(qū)域和固定相上疏水基團之間的相互作用力差異，對蛋白組分進行分離的層析方法。疏水層析的基本原理？蛋白質表面多由親水基團組成，也有一些疏水性較強的疏水區(qū)。 在高鹽濃度時，蛋白質表面疏水部位的水化層被破壞，暴露出疏水部位，疏水作用增強，與固定相上的疏水基團產生疏水性作用而被吸附；鹽濃度降低時蛋白質疏水作用減弱，目的蛋白質被逐步洗脫下來。親和層析的基本原理？通過將具有親和力的兩個分子