環(huán)境監(jiān)測(cè)管理規(guī)程要點(diǎn)

1、吉林省通化振國(guó)藥業(yè)有限公司文件編號(hào)：SMP QA-JK-004捱梟惘內(nèi)容：1起草依據(jù)1.1 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子的測(cè)試方法 （GB/T16292-2010）。1.2 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）浮游菌的測(cè)試方法 （GB/T16293-2010）。1.3 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）沉降菌的測(cè)試方法 （GB/T16294-2010）。1.4 藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（2010年修訂）1.5 藥品GMP旨南無菌藥品2術(shù)語和定義2.1 沉降菌：用GB/T16294 2010標(biāo)準(zhǔn)提及的方法收集空氣中的活微生物粒子， 通過專門的培養(yǎng)基，在適宜的生長(zhǎng)條

2、件下繁殖到可見的菌落數(shù)。2.2 沉降菌菌落數(shù)：規(guī)定時(shí)間內(nèi)每個(gè)平板培養(yǎng)皿收集到空氣中沉降菌的數(shù)目， 以個(gè)/皿表示。2.3 潔凈室（區(qū)）：對(duì)塵粒及微生物污染規(guī)定需進(jìn)行環(huán)境控制的房間或區(qū)域。 其建筑結(jié)構(gòu)，裝備及其使用均具有減少對(duì)該區(qū)域內(nèi)污染源的介入、產(chǎn)生和滯留的 功能。其他相關(guān)參數(shù)諸如：溫度、濕度、壓力也有必要控制。2.4 局部空氣凈化：僅使室內(nèi)工作區(qū)域或特定的局部空間的空氣中懸浮粒子濃 度達(dá)到規(guī)定的空氣潔凈度級(jí)別的方式。2.5 單向流：沿單一方向呈平行流線并且與氣流方向垂直的斷面上風(fēng)速均勻的 氣流。與水平面垂直的叫垂直單向流，與水平面平行的叫水平單向流。2.6 非單向流：具有多個(gè)通路循環(huán)特性或氣流

3、方向不平行的氣流。2.7 懸浮粒子：用于空氣潔凈度分級(jí)的空氣懸浮粒子尺寸范圍在0.1 pm-1000pm的固體和液體粒子。對(duì)于懸浮粒子計(jì)數(shù)測(cè)量?jī)x，一個(gè)微粒球的面積或體積 產(chǎn)生一個(gè)響應(yīng)值，不同的響應(yīng)值等價(jià)于不同的微粒直徑。2.8 潔凈度：潔凈環(huán)境內(nèi)單位體積空氣中含大于或等于某一粒子的統(tǒng)計(jì)數(shù)量來 區(qū)分的潔凈程度。2.9 置信上限：從正態(tài)分布抽樣得到的實(shí)際均值按給定的置信度（此處為95%計(jì)算得到的估計(jì)上限將大于此實(shí)際均值，則稱計(jì)算得到的這一均值估計(jì)上限為置 信上限。2.10 空態(tài)：潔凈區(qū)（室）在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)已安裝完畢且功能完備的情況 下，但是沒有生產(chǎn)設(shè)備、原材料或人員的狀態(tài)。2.11 靜態(tài)2.1

4、1.1 靜態(tài)a:潔凈區(qū)（室）在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)已安裝完畢且功能完備的情 況下，生產(chǎn)工藝設(shè)備已安裝、潔凈區(qū)（室）內(nèi)沒有生產(chǎn)人員怕狀態(tài)。2.11.2 靜態(tài)b:潔凈區(qū)（室）在生產(chǎn)操作全部結(jié)束，生產(chǎn)操作人員撤離現(xiàn)場(chǎng) 并經(jīng)過20min自凈后。2.12 動(dòng)態(tài)：潔凈區(qū)（室）已處于正常生產(chǎn)狀態(tài)，設(shè)備在指定的方式下進(jìn)行， 并且有指定的人員按照規(guī)范操作。2.13 潔凈工作臺(tái)：一種工作臺(tái)或者與之類似的一個(gè)封閉圍擋工作區(qū)。其特點(diǎn) 是自身能夠供給經(jīng)過過濾的空氣或氣體，按氣流形式分為垂直單向流工作臺(tái)、水 平單向流工作臺(tái)等。3監(jiān)測(cè)項(xiàng)目3.1 潔凈室的壓差測(cè)定3.1.1 監(jiān)測(cè)儀器：壓差計(jì)3.1.2 監(jiān)測(cè)人員：質(zhì)量管理部監(jiān)控員

5、3.1.3 監(jiān)測(cè)要求（1）潔凈度級(jí)別要求高的潔凈室（區(qū)）對(duì)相鄰的空氣潔凈度級(jí)別低的潔凈室 （區(qū)）一般要求是相對(duì)正壓。（2）潔凈區(qū)與非潔凈區(qū)之間、不同等級(jí)潔凈區(qū)之間的正壓差大于10Pa；（3）相同等級(jí)不同功能的操作問之間應(yīng)保持適當(dāng)壓差梯度，以防止污染和交 叉污染。（4）產(chǎn)生粉塵的操作間與相鄰房間之間保持相對(duì)負(fù)壓，壓差大于5Pa。3.1.4 監(jiān)測(cè)頻次：在生產(chǎn)過程中每日監(jiān)控二次，填寫“壓差檢查記錄”（SMP SC-WS-001-02。3.2 潔凈室內(nèi)溫濕度的測(cè)定3.2.1 . 監(jiān)測(cè)儀器：溫濕度計(jì)3.2.2 監(jiān)測(cè)人員：質(zhì)量管理部監(jiān)控員。3.2.3 監(jiān)測(cè)要求：潔凈室（區(qū)）的溫度和相對(duì)濕度應(yīng)與其生產(chǎn)及工藝

6、相適 應(yīng)，除有特殊規(guī)定外，溫度控制在1826C,相對(duì)濕度控制在45%-65尤問為宜。3.2.4 監(jiān)測(cè)頻次：在生產(chǎn)過程中每日監(jiān)控二次，填寫“溫度、濕度檢查記錄”（SMP SC-WS-001-0D。3.3 懸浮粒子監(jiān)控3.3.1 監(jiān)測(cè)儀器：塵埃粒子計(jì)數(shù)器3.3.2 監(jiān)測(cè)人員：化驗(yàn)室化驗(yàn)員、設(shè)備動(dòng)力部管理員3.3.3 測(cè)試條件：在測(cè)試之前，要對(duì)潔凈區(qū)（室）相關(guān)參數(shù)進(jìn)行預(yù)先測(cè)試， 這類測(cè)試將會(huì)提供測(cè)試懸浮粒子的環(huán)境條件，例如：這種預(yù)先測(cè)試或可包括：3.3.3.1 溫度和濕度的測(cè)試。潔凈區(qū)（室）的溫度和相對(duì)濕度應(yīng)與其生產(chǎn)及工 藝要求相適應(yīng)（無特殊要求時(shí)，溫度在 18c26C,相對(duì)濕度在45%-65勵(lì)宜）

7、， 同時(shí)應(yīng)滿足測(cè)試儀器的使用范圍。3.3.3.2 室內(nèi)送風(fēng)量或風(fēng)速的測(cè)試，或壓差的測(cè)試。3.3.3.3 高效過濾器的泄漏測(cè)試。3.3.4 測(cè)試狀態(tài)3.3.4.1 空態(tài)、靜態(tài)和動(dòng)態(tài)三種狀態(tài)均可進(jìn)行測(cè)試。3.3.4.2 空態(tài)或靜態(tài)測(cè)試時(shí)，室內(nèi)測(cè)試人員不得多于2人。3.3.4.3 測(cè)試報(bào)告中應(yīng)標(biāo)明測(cè)試時(shí)所采用的狀態(tài)和室內(nèi)的測(cè)試人員數(shù)。3.3.5 測(cè)試時(shí)間3.3.5.1 在空態(tài)或靜態(tài)a測(cè)試時(shí)，對(duì)單向流潔凈室（區(qū)）而言，測(cè)試宜在凈 化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間不少于10min后開始。對(duì)非單項(xiàng)流潔凈室（區(qū)），測(cè)試宜在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間不少于30min后開始。在靜態(tài)b時(shí)測(cè)試時(shí)，對(duì)單向流潔凈室（區(qū)）而

8、言，測(cè)試宜在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間不少于10min后開始。對(duì)非單項(xiàng)流潔凈室（區(qū)），測(cè)試官在生產(chǎn)操作人員撤離現(xiàn)場(chǎng)并經(jīng)過20min自凈后開始。3.3.5.2 在動(dòng)態(tài)測(cè)試時(shí)，則須記錄生產(chǎn)開始時(shí)間以及測(cè)試時(shí)間。3.3.6 懸浮粒子計(jì)數(shù)3.3.6.1 采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置在空態(tài)或靜態(tài)測(cè)試時(shí)，懸浮粒子采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置應(yīng)力求均勻，并不得少于最少采樣點(diǎn)數(shù)目，采樣點(diǎn)布置規(guī)則如下圖:注：為采樣點(diǎn)在動(dòng)態(tài)測(cè)試時(shí)，懸浮粒子采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品的生產(chǎn)及工藝關(guān)鍵 操作區(qū)設(shè)置。3.3.6.1.1 最少采樣點(diǎn)數(shù)目方法一測(cè)試采樣點(diǎn)數(shù)目：N L=V A式中：N L-最少采樣點(diǎn)（四舍五入為整數(shù)）；A-潔凈室或被控潔凈區(qū)

9、的面積,單位為平方米（m2）A級(jí)區(qū)動(dòng)態(tài)測(cè)試按風(fēng)險(xiǎn)分析確定關(guān)鍵監(jiān)測(cè)點(diǎn)。3.3.6.1.2 采樣點(diǎn)的位置采樣點(diǎn)一般在離地面0.8m高度的水平面上均勻布置，采樣點(diǎn)多于5點(diǎn)時(shí)，也 可以在離地面0.81.5m高度的區(qū)域內(nèi)分層布置，但每層不少于 5點(diǎn)。3.3.6.2 采樣點(diǎn)的限定對(duì)任何小潔凈室（區(qū)）或局部空氣凈化區(qū)域，采樣點(diǎn)的數(shù)目不得少于2個(gè)，總采樣次數(shù)不得少于5次。每個(gè)采樣點(diǎn)的采樣次數(shù)可以多于 1次，且不同采樣點(diǎn) 的采樣次數(shù)可以不同。3.3.6.3 每次采樣量：每個(gè)采樣點(diǎn)每次采集的空氣量，保證最大粒徑的粒子能檢測(cè)出至少20個(gè)粒子。每個(gè)采樣點(diǎn)的每次采樣量Vs用下式確定：20Vs= X 100Cn - m式

10、中：Vs-每個(gè)采樣點(diǎn)每次最少采樣量，用升表示。Cn m-為相關(guān)等級(jí)規(guī)定的最大被考慮粒徑之等級(jí)限值20-當(dāng)粒子濃度處于該等級(jí)限值時(shí)，可被檢測(cè)到的粒子數(shù)。確認(rèn)A/B級(jí)時(shí)，每個(gè)采樣點(diǎn)的采樣量不少于 1立方米，C、D級(jí)每個(gè)采樣點(diǎn) 的采樣量至少為2升。3.3.7 具體方法見“塵埃粒子測(cè)試操作規(guī)程"（SOP QC-JT-005）3.3.8 監(jiān)控要求：含塵量見表1各級(jí)別空氣懸浮粒子的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定表1：各級(jí)別空氣懸浮粒子的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定潔凈度級(jí)別懸浮粒子最大允許數(shù)/立方米靜態(tài)動(dòng)態(tài)>0.5 a m>5.0 pm>0.5 pm>5.0 pmA352020352020B352029352 0

11、002 900C352 0002 9003 520 00029 000D3 520 00029 000不作規(guī)定不作規(guī)定3.3.9采樣注意事項(xiàng)1.1.1.1 對(duì)于單項(xiàng)流潔凈室（區(qū)）,粒子計(jì)數(shù)器的采樣管口應(yīng)正對(duì)氣流方向； 對(duì)于非單向流潔凈室（區(qū)），粒子計(jì)數(shù)器的采樣管口宜向上。1.1.1.2 布置采樣點(diǎn)時(shí)，應(yīng)盡量避開回風(fēng)口。1.1.1.3 采樣時(shí)，測(cè)試人員應(yīng)在采樣口的下風(fēng)側(cè)，并盡量少活動(dòng)。1.1.1.4 采樣完畢后，宜對(duì)塵埃粒子計(jì)數(shù)器進(jìn)行自凈。1.1.1.5 應(yīng)采取一切措施防止采樣過程的污染。3.3.10 監(jiān)測(cè)頻次：a）A、C級(jí)潔凈室（區(qū)）每生產(chǎn)周期前進(jìn)行靜態(tài)監(jiān)測(cè)，生產(chǎn)時(shí)，A級(jí)區(qū)在線監(jiān)測(cè)動(dòng)態(tài)，C級(jí)潔

12、凈室（區(qū)）灌封間、稀配間、稱量間每周 1次進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，其它 C級(jí)潔凈室（區(qū)）每月進(jìn)行 1次動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)；并填寫“懸浮粒子監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)記錄” （SOP QC-JT-005-01）和“懸浮粒子監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)報(bào)告單” （SOP QC-JT-005-02）。b）生產(chǎn)操作全部結(jié)束，操作人員撤出生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)并經(jīng)1520分鐘自凈后，潔凈區(qū)的懸浮粒子應(yīng)達(dá)到“靜態(tài)”標(biāo)準(zhǔn)。c）D級(jí)潔凈室（區(qū)）每月靜態(tài)監(jiān)測(cè)一次，并填寫“懸浮粒子監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)記錄” （SOP QC-JT-005-01）和“懸浮粒子監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)報(bào)告單” （SOP QC-JT-005-02）。3.3.11 結(jié)果評(píng)定a）每個(gè)采樣點(diǎn)的平均粒子濃度必須不大于規(guī)定的級(jí)別界限。b）全部采

13、樣點(diǎn)的粒子濃度平均值的95%8信上限必須不大于規(guī)定的級(jí)別界限。3.4 沉降菌監(jiān)測(cè)捱梟惘本測(cè)試方法采用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng) 基平皿，經(jīng)若干時(shí)間，在適宜的生長(zhǎng)條件下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，以平 板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內(nèi)的活微生物數(shù)，并以此來評(píng)定潔凈室（區(qū)） 的潔凈度。3.4.1 監(jiān)測(cè)儀器設(shè)備：高壓消毒鍋、電熱恒溫干燥箱、包溫培養(yǎng)箱、培養(yǎng)皿、性關(guān)官1口加分。3.4.1.1 培養(yǎng)皿：一般采用 ？90mrK 15mn格的培養(yǎng)皿。3.4.1.2 培養(yǎng)基：大豆酪蛋白瓊酯培養(yǎng)基（TSA或沙氏培養(yǎng)基（SDA3.4.1.3 恒溫培養(yǎng)箱、高壓消毒鍋、電熱恒溫干燥箱：

14、必須定期進(jìn)行校驗(yàn)。3.4.2 監(jiān)測(cè)人員：化驗(yàn)室化驗(yàn)員、車間監(jiān)控員3.4.3 測(cè)試條件：在測(cè)試之前，要對(duì)潔凈區(qū)（室）相關(guān)參數(shù)進(jìn)行預(yù)先測(cè)試，這類測(cè)試將會(huì)提供測(cè)試沉降菌的環(huán)境條件，例如：這種預(yù)先測(cè)試或可包括：3.4.3.1 溫度和濕度的測(cè)試。潔凈區(qū)（室）的溫度和相對(duì)濕度應(yīng)與其生產(chǎn)及工 藝要求相適應(yīng)（無特殊要求時(shí)，溫度在 18c26C,相對(duì)濕度在45%-65%；宜）， 同時(shí)應(yīng)滿足測(cè)試儀器的使用范圍。3.4.3.2 室內(nèi)送風(fēng)量或風(fēng)速的測(cè)試，或壓差的測(cè)試。3.4.3.3 高效過濾器的泄漏測(cè)試。3.4.4 測(cè)試狀態(tài)3.4.4.1 靜態(tài)和動(dòng)態(tài)兩種狀態(tài)均可進(jìn)行測(cè)試。3.4.4.2 靜態(tài)測(cè)試時(shí)，室內(nèi)測(cè)試人員不得多

15、于2人。3.4.4.3 沉降菌測(cè)試前，被測(cè)潔凈室（區(qū)）由使用決定是否需要預(yù)先消毒。3.4.4.4 測(cè)試報(bào)告中應(yīng)標(biāo)明測(cè)試時(shí)所采用的狀態(tài)和室內(nèi)的測(cè)試人員數(shù)。3.4.5 測(cè)試時(shí)間3.4.5.1 在空態(tài)或靜態(tài)a測(cè)試時(shí)，對(duì)單向流潔凈室（區(qū)）而言，測(cè)試宜在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間不少于10min后開始。對(duì)非單項(xiàng)流潔凈室（區(qū)），測(cè)試宜在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間不少于30min后開始。在靜態(tài)b時(shí)測(cè)試時(shí)，對(duì)單向流潔凈室（區(qū)）而言，測(cè)試宜在凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間不少于 10min后開始。對(duì)非單項(xiàng)流潔凈室（區(qū)），測(cè)試官在生產(chǎn)操作人員撤離現(xiàn)場(chǎng)并經(jīng)過20min自凈后開始。3.4.5.2 在動(dòng)態(tài)測(cè)試時(shí)，則須

16、記錄生產(chǎn)開始時(shí)間以及測(cè)試時(shí)間。3.4.6 采樣點(diǎn)數(shù)目及其布置：采樣點(diǎn)的位置可以同懸浮粒子測(cè)試點(diǎn)。3.4.7 最少培養(yǎng)皿數(shù)在滿足最少采樣點(diǎn)數(shù)目的同時(shí)，還宜滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)，見表 2表2:最少培養(yǎng)皿數(shù)潔凈度級(jí)別最少培養(yǎng)皿數(shù)（？90mmA14B14C21D23.4.8 采樣次數(shù)每個(gè)采樣點(diǎn)一般采樣一次。3.4.9 采樣注意事項(xiàng)3.4.9.1 對(duì)于單項(xiàng)流潔凈室（區(qū)）,粒子計(jì)數(shù)器的采樣管口應(yīng)正對(duì)氣流方向； 對(duì)于非單向流潔凈室（區(qū)），粒子計(jì)數(shù)器的采樣管口宜向上。3.4.9.2 布置采樣點(diǎn)時(shí)，應(yīng)盡量避開回風(fēng)口。3.4.9.3 采樣時(shí)，測(cè)試人員應(yīng)在采樣口的下風(fēng)側(cè)，并盡量少活動(dòng)。3.4.9.4 應(yīng)采取一切措施防止

17、采樣過程的污染和其他可能對(duì)樣本的污染。3.4.9.5 培養(yǎng)皿在用于檢測(cè)時(shí)，為避免培養(yǎng)皿運(yùn)輸或搬運(yùn)過程造成的影響，宜同時(shí)進(jìn)行對(duì)照試驗(yàn)，每次或每個(gè)區(qū)域取 1個(gè)對(duì)照皿，與采樣皿同法操作但不需 要暴露采樣，然后與采樣后的培養(yǎng)皿（TSAlE SDA 一起放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，結(jié)果 應(yīng)無菌落生長(zhǎng)。3.4.10 采樣方法將已制備好的培養(yǎng)皿按采樣點(diǎn)的布置要求放置，打開培養(yǎng)皿蓋，可使用多個(gè)培 養(yǎng)皿連續(xù)進(jìn)行監(jiān)測(cè)，使培養(yǎng)基表面暴露 4h（灌裝時(shí)間不足4h,應(yīng)與灌裝時(shí)間一致），捱梟惘再將培養(yǎng)皿蓋蓋上后倒置。3.4.11 培養(yǎng)a）全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。b）采用大豆酪蛋白瓊酯培養(yǎng)基（TSA配制的培養(yǎng)

18、皿經(jīng)采樣后，在30C.35c培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時(shí)間不少于48h。（非最終滅菌產(chǎn)品培養(yǎng)時(shí)間不少于 72h。若長(zhǎng)菌， 需進(jìn)行種屬鑒定。）采用沙氏培養(yǎng)基（SDA配制的培養(yǎng)皿經(jīng)采樣后，在 20C25C 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時(shí)間不少于5天。c）每批培養(yǎng)基應(yīng)有對(duì)照試驗(yàn)，檢驗(yàn)培養(yǎng)基本身是否污染?？擅颗x定3只培養(yǎng)皿作對(duì)照培養(yǎng)。具體方法見“沉降菌測(cè)試檢驗(yàn)操作規(guī)程”（SOP QC-JT-006）3.4.12 菌落計(jì)數(shù)：具體方法見“沉降菌測(cè)試檢驗(yàn)操作規(guī)程” （SOPQC-JT-006）a） 用肉眼直接計(jì)數(shù)，標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì)，然后用5M0倍放大鏡檢查，有否遺漏。b）若培養(yǎng)皿上有2個(gè)或2個(gè)以上的菌落重疊，可分辨時(shí)仍以

19、2個(gè)或2個(gè)以上 菌落計(jì)數(shù)。具體方法見“沉降菌測(cè)試檢驗(yàn)操作規(guī)程”（SOP QC-JT-006）3.4.13 注意事項(xiàng)3.4.13.1 測(cè)試用具要作滅菌處理，以確保測(cè)試的可靠性、正確性。3.4.13.2 采取一切措施防止人為對(duì)樣本的污染。3.4.13.3 對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細(xì)的記錄。3.4.13.4 由于細(xì)菌種類繁多，差別大，計(jì)數(shù)時(shí)一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或 正面仔細(xì)觀察，不要漏計(jì)培養(yǎng)皿邊緣生長(zhǎng)的菌落，并須注意細(xì)菌菌落與培養(yǎng)基沉淀 物的區(qū)別，必要時(shí)用顯微鏡鑒別。3.4.13.5 采樣前應(yīng)仔細(xì)檢查每個(gè)培養(yǎng)皿的質(zhì)量，如發(fā)現(xiàn)變質(zhì)、破損或污染的應(yīng)剔除。3.4.14 沉降菌監(jiān)控標(biāo)準(zhǔn)表3潔凈區(qū)微

20、生物監(jiān)測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)（最大允許數(shù)）級(jí)別浮游菌 cfu/m3沉降菌（490mm表面微生物（動(dòng)態(tài)）接觸碟（帕5mm cfu / 碟5指手套cfu /手套動(dòng)態(tài)靜態(tài)動(dòng)態(tài)cfu /4h靜態(tài)cfu /0.5hA級(jí)<1<1<1<1<1<1B級(jí)10-5155C級(jí)10010050325-D級(jí)2002001001050-3.4.15結(jié)果評(píng)定度a） 潔凈室（區(qū)）內(nèi)的每皿菌落數(shù)必須低于所選定的評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)。b）若某潔凈室（區(qū)）的任何一皿菌落數(shù)超過評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，則必須對(duì)此區(qū)域先進(jìn) 行消毒，然后重新采樣兩次，測(cè)試結(jié)果均須合格。3.4.16 監(jiān)測(cè)頻次：3.4.16.1 沉降菌A級(jí)區(qū)每批次監(jiān)測(cè)，C級(jí)潔凈

21、室（區(qū)）（灌封間、稀配問、稱量問）每周 1次 動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，其它C級(jí)潔凈室（區(qū)）及D級(jí)潔凈室（區(qū)）每月1次動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)。并填 寫“沉降菌監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)記錄”（SOP QC-JT-006-01 ）和“沉降菌監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)報(bào)告單”（SOP QC-JT-006-02）。3.5 浮游菌監(jiān)測(cè)本方法采用計(jì)數(shù)濃度法，即通過收集懸游在空氣中的生物性粒子于專門的培 養(yǎng)基（選擇能證實(shí)其能夠支持微生物生長(zhǎng)的培養(yǎng)基），經(jīng)若干時(shí)間和適宜的生長(zhǎng)條 件下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計(jì)數(shù)，以判定該潔凈室的微生物濃度。3.5.1 監(jiān)測(cè)儀器設(shè)備：浮游菌采樣器、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、恒溫培養(yǎng)箱。3.5.1.1 浮游菌采樣器官采用撞擊法機(jī)理的采樣器。3.5.1.

22、2 測(cè)試要點(diǎn)a） 校驗(yàn)：必須按照測(cè)試儀器的檢定周期，定期對(duì)儀器作檢定。使用校驗(yàn)合格， 且在使用有效期內(nèi)的儀器。b） 測(cè)試儀器在未進(jìn)入被測(cè)區(qū)域時(shí)，先清潔表面。c）使用測(cè)試儀器時(shí)應(yīng)嚴(yán)格按照儀器說明書操作。發(fā)梟惘 儀器開機(jī)，預(yù)熱至穩(wěn)定后，方可按儀器說明書的規(guī)定對(duì)儀器進(jìn)行校正，同時(shí)檢查采樣量流量，并根據(jù)采樣量設(shè)定采樣時(shí)間。 采樣口必須用便于消毒及化學(xué)性能穩(wěn)定的材料制造。 采樣管嚴(yán)禁滲漏，內(nèi)壁應(yīng)光滑。 采樣管的長(zhǎng)度應(yīng)根據(jù)測(cè)點(diǎn)的高度定，盡量減少?gòu)澢?.1.1.3 培養(yǎng)皿a）狹縫式采樣器一般采用4 90m彌15mn格的培養(yǎng)皿?？筛鶕?jù)所選用的采樣器選擇合適的培養(yǎng)皿。b）離心式采樣器采用專用的固形培養(yǎng)條。1.

23、1.1.4 培養(yǎng)基大豆酪蛋白瓊酯培養(yǎng)基（TSA或沙氏培養(yǎng)基（SDA或其他用戶認(rèn)可并經(jīng)驗(yàn)證 了的培養(yǎng)基。1.1.1.5 恒溫培養(yǎng)箱必須定期對(duì)恒溫培養(yǎng)箱進(jìn)行校驗(yàn)。3.5.2 監(jiān)測(cè)人員：化驗(yàn)室化驗(yàn)員、車間監(jiān)控員3.5.3 測(cè)試步驟3.5.3.1 測(cè)試前儀器、培養(yǎng)皿表面必須嚴(yán)格消毒。a）采樣器進(jìn)入被測(cè)房間前先用消毒房間的消毒劑滅菌，用于 A級(jí)潔凈室的采 樣器官預(yù)先放在被測(cè)房間內(nèi)。b）用消毒劑擦凈培養(yǎng)皿的外表面。c）采樣前，先用消毒劑清洗采樣器的頂蓋、轉(zhuǎn)盤以及罩子的內(nèi)外面，采樣結(jié)束，再用消毒劑輕輕噴射罩子的內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤。d）采樣口及采樣管，使用前必須高溫滅菌。如用消毒劑對(duì)采樣管的外壁及內(nèi)壁進(jìn)行消毒時(shí)，應(yīng)將

24、管中的殘留液倒掉并晾干。e）采樣者應(yīng)穿戴與被測(cè)潔凈區(qū)域相應(yīng)的工作服，在轉(zhuǎn)盤上放入或調(diào)換培養(yǎng)皿前，雙手用消毒劑消毒。3.5.3.2 狹縫式采樣器的采樣程序捱梟相a) 儀器經(jīng)消毒后先不放入培養(yǎng)皿，開動(dòng)真空泵抽氣，使儀器中的殘余消毒劑蒸發(fā)，時(shí)間不少于5min,并調(diào)好流量、轉(zhuǎn)盤轉(zhuǎn)速。b) 關(guān)閉真空泵，放入培養(yǎng)皿，蓋上蓋子后調(diào)節(jié)采樣器縫隙高度。c) 置采樣口于采樣點(diǎn)后，依次開啟采樣器、真空泵，轉(zhuǎn)動(dòng)定時(shí)器，根據(jù)采樣量設(shè)定采樣時(shí)間。1.1.1.3 培養(yǎng)a) 全部采樣結(jié)束后，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。b) 采用大豆酪蛋白瓊酯培養(yǎng)基配制的培養(yǎng)皿經(jīng)采樣后，在 30c-35C培養(yǎng)箱 中培養(yǎng)，時(shí)間不少于2d。采

25、用沙氏培養(yǎng)基配制的培養(yǎng)皿經(jīng)采樣后，在 20c 025c 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，時(shí)間不少于5doc) 每批培養(yǎng)基應(yīng)有對(duì)照試驗(yàn)，檢驗(yàn)培養(yǎng)基本身是否污染?？擅颗x定3只培養(yǎng)皿作對(duì)照培養(yǎng)。d) 菌落計(jì)數(shù)：用肉眼直接計(jì)數(shù)、標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì)，然后用 510倍放大鏡檢查，有否遺漏；若平板上有2個(gè)或2個(gè)以上的菌落重疊，可分辨時(shí)仍以 2個(gè)或2個(gè)以上菌落計(jì)數(shù)。1.1.1.4 注意事項(xiàng)a) 使用前應(yīng)仔細(xì)檢查每個(gè)培養(yǎng)皿的質(zhì)量，培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿有變質(zhì)、破損或污染的不能使用。b) 采取一切措施防止采樣管的污染和其他人為對(duì)樣本的污染。c) 對(duì)培養(yǎng)基、培養(yǎng)條件及其他參數(shù)作詳細(xì)的記錄。d) 由于細(xì)菌種類繁多，差別甚大，計(jì)數(shù)時(shí)一般

26、用透射光于培養(yǎng)皿背面或正面仔細(xì)觀察，不要漏計(jì)培養(yǎng)皿邊緣生長(zhǎng)的菌落，并須注意細(xì)菌菌落或培養(yǎng)基沉淀物的 區(qū)別，必要時(shí)用顯微鏡鑒別。3.5.4 測(cè)試狀態(tài)a)浮游菌測(cè)試前，被測(cè)試潔凈室(或潔凈區(qū))的溫、濕度必須達(dá)到規(guī)定的要求，靜壓差、換氣次數(shù)、空氣流速必須控制在規(guī)定值內(nèi)。b）浮游菌測(cè)試前，被測(cè)試潔凈室（潔凈區(qū)）已經(jīng)過消毒。c）測(cè)試狀態(tài)有靜態(tài)和動(dòng)態(tài)兩種，測(cè)試狀態(tài)的選擇必須符合生產(chǎn)的要求，并應(yīng) 在報(bào)告中注明測(cè)試狀態(tài)。3.5.5 測(cè)試人員a） 測(cè)試共員必須穿戴符合環(huán)境級(jí)別的工作服。b） 靜態(tài)測(cè)試時(shí)，室內(nèi)測(cè)試人員不得多于 2人。3.5.6 測(cè)試時(shí)間a）在空態(tài)或靜態(tài)a測(cè)試時(shí)，對(duì)單向流潔凈室（區(qū)）而言，測(cè)試宜在凈

27、化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間不少于10min后開始，對(duì)非單向流潔凈室（區(qū)），測(cè)試官在 凈化空氣調(diào)節(jié)系統(tǒng)正常運(yùn)行時(shí)間不少于30min后開始。在靜態(tài)b測(cè)試時(shí)，對(duì)單向流潔凈室（區(qū)），測(cè)試官在生產(chǎn)操作人員撤離現(xiàn)場(chǎng)并經(jīng)過10min自凈后開始，對(duì)非單向流潔凈室（區(qū)），測(cè)試官在生產(chǎn)操作人員撤離現(xiàn)場(chǎng)并經(jīng)過 20min自凈后開始， b）在動(dòng)態(tài)測(cè)試時(shí)，則須記錄生產(chǎn)開始的時(shí)間以及測(cè)試時(shí)間。3.5.7 浮游菌采樣點(diǎn)數(shù)量及其布置a） 最少采樣點(diǎn)數(shù)目表4浮游菌最少采樣點(diǎn)數(shù)目回積m潔凈度級(jí)別A BCD<102-322>10 Y 20422>2040822>40-<1001642>10020

28、040103>200、< 40080206>400-<10001604013>1000入 <2000>20004008001002003263注：對(duì)于A、B級(jí)單向流潔凈室（區(qū)），包括A、B級(jí)潔凈工作臺(tái)，面積指的是送 風(fēng)口表面積；對(duì)于C級(jí)以上的非單向流潔凈室（區(qū)），指的是房間而積。2）日常監(jiān)測(cè)的采樣點(diǎn)數(shù)目由生產(chǎn)工藝的關(guān)鍵操作點(diǎn)來確定。b） 采樣點(diǎn)的位置 采樣點(diǎn)位置同懸浮粒子測(cè)試點(diǎn)。 工作區(qū)測(cè)點(diǎn)位置離地 0.8m、1.5m左右（略高于工作面）。 送風(fēng)口測(cè)點(diǎn)位置離開送風(fēng)面 30cm左右。 可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動(dòng)范圍處增加測(cè)點(diǎn)。3.5.8 最小采樣量采樣量

29、根據(jù)日常檢測(cè)及環(huán)境驗(yàn)證定，每次最小采樣量見表6表5浮游菌最小采樣量潔凈度級(jí)別采樣量L/次A B1000C500D1003.5.9 采樣次數(shù)每個(gè)采樣點(diǎn)一般采樣一次3.5.10 采樣注意事項(xiàng)a） 對(duì)于單向流或送風(fēng)口 ，采樣器采樣管朝向應(yīng)正對(duì)氣流方向； 對(duì)于非單向流，采樣管口向上。b） 布置采樣點(diǎn)時(shí)，至少應(yīng)盡量避開塵粒較集中的回風(fēng)口。C）采樣時(shí)，測(cè)試人員應(yīng)站在采樣口的下風(fēng)側(cè)，并盡量少走動(dòng)。d ）應(yīng)采取一切措施防止采樣過程的污染和其他可能對(duì)樣本的污染。e ）培養(yǎng)皿在用于檢測(cè)時(shí)，為避免培養(yǎng)皿運(yùn)輸或搬動(dòng)過程造成的影響，宜同時(shí) 進(jìn)行陰性對(duì)照試驗(yàn)，每次或每個(gè)區(qū)域取1個(gè)對(duì)照皿，與采樣皿同法操作但不需暴露 采樣，

30、然后與采樣后的培養(yǎng)皿一起放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，結(jié)果應(yīng)無菌落生長(zhǎng)。3.5.11 結(jié)果計(jì)算3.5.11.1 用計(jì)數(shù)方法得出各個(gè)培養(yǎng)皿的菌落數(shù)。3.5.11.2 每個(gè)測(cè)點(diǎn)的浮游菌平均濃度的計(jì)算，見下式：菌落數(shù)平均濃度（個(gè)/m3）=采樣量3.5.12 結(jié)果評(píng)定用浮游菌平均濃度判斷潔凈室（區(qū)）空氣中的微生物。a）每個(gè)測(cè)點(diǎn)的浮游菌平均濃度必須低于所選定的評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)中關(guān)于細(xì)菌濃度的 界限。b）若某測(cè)點(diǎn)的浮游菌平均濃度超過評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)，則必須對(duì)此區(qū)域先行消毒，然 后重新采樣兩次，兩次測(cè)試結(jié)果必須合格。3.5.13 監(jiān)測(cè)頻次：A級(jí)區(qū)每批次監(jiān)測(cè)，C級(jí)潔凈室（區(qū)）（灌封間、稀配問、稱量問）每周 1次 動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，其它C級(jí)潔凈室

31、（區(qū)）及D級(jí)潔凈室（區(qū)）每月1次動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)。并填 寫“浮游菌監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)記錄”（SOP QC-JT-007-01 ）和“浮游菌監(jiān)測(cè)檢驗(yàn)報(bào)告單”（SOP QC-JT-007-02）。3.6 表面微生物3.6.1 基本監(jiān)測(cè)方法包括接觸碟、擦拭法及表面沖洗法。3.6.1.1 接觸碟法適用于對(duì)平整的規(guī)則性表面進(jìn)行取樣監(jiān)測(cè)。通常碟子是50mnfi徑的，取樣面積一般約25 cm 2。3.6.1.1.1 取樣：取樣時(shí)打開碟蓋，無菌培養(yǎng)基表面與取樣面直接接觸，均勻 按壓接觸碟底板，確保全部瓊脂表面與取樣點(diǎn)表面均勻充分接觸，接觸約 5秒鐘， 再蓋上碟蓋。3.6.1.1.2 取樣后，應(yīng)立即用75%酉精噴灑被取樣表面，以除去殘留瓊脂。3.6.1.1.3 培養(yǎng)：收好的營(yíng)養(yǎng)瓊脂接觸碟在 3035c培養(yǎng)3天。3.6.1.2 擦拭法用于對(duì)不規(guī)則表面（尤其是設(shè)備表面）進(jìn)行取樣。拭子通常為棉簽，在取樣 前應(yīng)先行濕潤(rùn)（通常為無菌生理氯化鈉溶液或 0.1%的蛋白凍溶液約5ml）,取樣時(shí)， 握住拭子柄，以