富血小板纖維蛋白與膠原膜修復(fù)牙齦缺損創(chuàng)面的能力匯編

1、中國組織工程研究第20卷第16期2016-04-15出版Chinese Journal of Tissue Engineering Research April 15, 2016Vol.20, No.16WWW.CRTER.org2340P.O. Box 10002, Shenyang110180 www.CRTER.org研究原著富血小板纖維蛋白與膠原膜修復(fù)牙齦缺損創(chuàng)面的能力董露1，肖瓊2,楊琴秋3，孫勇1,陳紅亮1r解放軍成都軍區(qū)機(jī)關(guān)醫(yī)院口腔科，四川省成都市 院管理有限公司九龍坡口腔醫(yī)院，重慶市400000 ；3遂寧市第一人民醫(yī)院口腔科，四川省遂寧市引用本文：董露，肖瓊，楊琴秋，孫勇，陳紅

2、亮.富血小板纖維蛋白與膠原膜修復(fù)牙齦缺損創(chuàng)面的能力J.中國組織工程研究,2016，20(16):2340-2346.DOI: 10.3969/j.issn.2095-4344.2016.16.008ORCID: 0000-0002-6840-1447(董露)文章快速閱讀:文題釋義：富血小板纖維蛋白：由自體外周血不加任何生物制劑離心獲取的富含大量白細(xì)胞和血小板纖維蛋白生物 材料，可加速軟組織的愈合。牙齦：牙齦是附著在牙頸和牙槽突部分的黏附組織，呈粉紅色，有光澤，質(zhì)堅(jiān)韌。牙齦邊緣稱為齦緣，正常呈月芽形。齦緣與牙頸之間的小溝稱齦溝，正常齦溝深1.0-2.0 mm。兩鄰牙之間的牙齦突起稱齦乳突。也叫齒

3、齦，指包住齒頸的黏膜組織，粉紅色，內(nèi)有很多血管和神經(jīng)。摘要背景：前期實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)富血小板纖維蛋白具有良好的誘導(dǎo)牙齦軟組織修復(fù)再生的能力。目的：觀察富血小板纖維蛋白膜與膠原膜對(duì)牙齦軟組織愈合的影響，評(píng)價(jià)富血小板纖維蛋白膜誘導(dǎo)牙齦軟組織缺損修復(fù)再生的能力。方法：選因各種原因需要拔除前磨牙或磨牙同期進(jìn)行位點(diǎn)保存的患者22 例(前磨牙 2 顆，磨牙 20 顆),隨機(jī)分為 2 組，22 個(gè)軟組織缺損區(qū)域，拔牙窩內(nèi)植入Bio-Oss ,表面覆蓋富血小板纖維蛋白膜或海奧膠原膜。通過追蹤植入 Bio-Oss 后牙齦創(chuàng)面的愈合時(shí)間和植入Bio-Oss 后 1，2 周的創(chuàng)面愈合率，評(píng)價(jià)富血小板纖維蛋白促進(jìn)牙齦組織愈

4、合的能力。結(jié)果與結(jié)論：富血小板纖維蛋白組愈合時(shí)間為(12.17 +2.25) d，膠原膜組愈合時(shí)間為(17.30 i2.58) d ； 植入 Bio-Oss 后 1, 2 周富血小板纖維蛋白組愈合率明顯高于膠原膜組。結(jié)果說明，相同時(shí)間節(jié)點(diǎn)時(shí) 富血小板纖維蛋白促進(jìn)牙齦軟組織的愈合能力明顯優(yōu)于膠原膜，達(dá)到相同愈合狀態(tài)時(shí)富血小板纖維蛋白組所需時(shí)間明顯短于膠原膜組。關(guān)鍵詞：生物材料；材料相容性；富血小板纖維蛋白；脫細(xì)胞真皮基質(zhì)；牙齦軟組織缺損；創(chuàng)面愈合主題詞：牙齦；軟組織損傷；傷口愈合；組織工程基金資助：610041 ；2重慶拜博口腔醫(yī)629000)富血小板纖維蛋白與膠原膜對(duì)牙齦缺損創(chuàng)面愈合的比較拔除

5、前磨牙或磨牙患者隨機(jī)分為 2 組拔牙窩內(nèi)植入Bio-Oss ；一組表面覆蓋富血小板纖維蛋白 膜； 一組表面覆蓋海奧 膠原膜1,2 周后評(píng)價(jià): 2組患者牙齦 創(chuàng)面的愈合時(shí) 間及愈合率=2 組比較結(jié)論： 同等時(shí)間節(jié)點(diǎn)富血小 板纖維蛋白促愈合能 力優(yōu)于膠原膜；愈合 狀態(tài)相同時(shí)富血小板 纖維蛋白組時(shí)間短于 膠原膜組董露，女，1986年生， 四川省西昌市人， 漢族，醫(yī)師，目前就職于涼山彝 族自治州第一人民醫(yī)院 口腔科，主要從事口腔種 植修復(fù)研究。通訊作者：孫勇，主任醫(yī) 師，教授，碩士生導(dǎo)師， 解放軍成都軍區(qū)機(jī)關(guān)醫(yī) 院口腔科，四川省成都市610041中圖分類號(hào):R318文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A文章編號(hào):2095-4

6、344(2016)16-02340-07稿件接受：2016-01-29http:/WWW.董露，等.富血小板纖維蛋白與膠原膜修復(fù)牙齦缺損創(chuàng)面的能力ISSN 2095-4344 CN 21-1581/R CODEN: ZLKHAH2341成都軍區(qū)“十二五”科研面上項(xiàng)目(C14050)董露，等.富血小板纖維蛋白與膠原膜修復(fù)牙齦缺損創(chuàng)面的能力.CRTER.org2346P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.orgDong Lu, Physicia n, Department of Stomatology, AuthorityHospit

7、al of Chen gdu MilitaryRegion of PLA, Chengdu610041, Sichuan Provin ce,ChinaPlatelet-rich fibri nversus collage n membra ne in the repair of gin gival defects123111Dong Lu , Xiao Qiong , Yang Qin-qiu , Sun Yong , Chen Hong-liang( Department of Stomatology,Authority Hospital of Chengdu Military Regio

8、n of PLA, Chengdu 610041, Sichuan Province, China;2Jiulongpo Dental Hospital of Chongqing Bybo Dental Hospital Administrative Limited Company,Chongqing 400000, China;Department of Stomatology, the First Peoples Hospital of Suining City,Suining 629000, Sichuan Province, China)Corresp onding author: S

9、unYong, Chief physicia n, Mastersupervisor, Professor,Departme nt of Stomatology,AuthorityHospital of Chen gdu MilitaryRegion of PLA,Chengdu 610041, SichuanProvin ce, ChinaAbstractBACKGROUND:Previous studies have found that platelet-rich fibrin has a good ability to induce gingivalsoft tissue repair

10、 and regeneration.OBJECTIVE: To observe the effects of platelet-rich fibrinversus collagen membrane on gingival softtissue healing, and to evaluate the ability of platelet-rich fibrin to repair gingival defects.METHODS: Twenty-two patients (2 premolar teeth and 20 molars) scheduled for premolar or m

11、olar removal or ridgepreservation due to various reasons were selected and randomized into two groups.Bio-Oss was implanted into the extraction socket followed by covering with platelet-rich fibrin or collagen membrane.Healing time and healing rate of gingival defects were detected to evaluate the a

12、bility of platelet-rich fibrin to promotegingival tissue healing at 1-2 weeks after Bio-Oss implantation.RESULTS AND CONCLUSION:The healing time was (12.172.25) days in the platelet-rich fibrin groupand (17.30.58) days in the collagen group. The healing rate of the platelet-rich fibrin group was not

13、ablyhigher than that in the collagen membrane group at 1 and 2 weeks after Bio-Oss implantation. These findings indicatethat platelet-rich fibrin is better than collagen membrane to improve the healing of gingival soft tissues with a shorterhealing time.Subject headings:Gingiva; Soft Tissue Injuries

14、; Wound Healing; Tissue EngineeringFunding: the Twelfth-Five Year ” Scientific Research Projects of the Chengdu Military Region, No. C14050Cite this article:Dong L, Xiao Q, Yang QQ, Sun Y, Chen HL. Platelet-rich fibrin versus collagenmembrane in the repair of gingival defects. Zhongguo Zuzhi Gongche

15、ng Yanjiu. 2016;20(16):2340-2346.0 弓 I 言 In troduct ion種植牙被譽(yù)為人類的“第三副牙”，已被廣泛應(yīng)用于牙列缺損或牙列缺失患者的修復(fù)，隨著材料學(xué)和種 植體表面處理技術(shù)的不斷發(fā)展，良好的骨整合不再是判 斷種植成功的唯一標(biāo)準(zhǔn)，種植義齒修復(fù)的美學(xué)效果和頸 部良好的生物封閉也是其效果評(píng)價(jià)的重要指標(biāo)2。牙齦軟組織高質(zhì)量的愈合是種植外科技術(shù)成功的 前提：位點(diǎn)保存術(shù)中牙齦軟組織的愈合為下方骨再生提 供一個(gè)密閉無菌的微環(huán)境，促進(jìn)骨的非感染愈合從而形 成豐滿的牙槽嵴；種植后牙齦軟組織的愈合，能有效防 止種植體頸部的暴露和細(xì)菌的侵入，為種植體骨結(jié)合與 骨整合提供

16、良好的條件；修復(fù)時(shí)形成健康的牙齦袖口， 有助于在形態(tài)上達(dá)到種植美學(xué)修復(fù)的效果；種植體周圍 穩(wěn)定的牙齦組織和良好的生物封閉減少種植體周圍炎 的發(fā)生并維持種植體周圍組織的健康。由上可見牙齦的 質(zhì)量和穩(wěn)定性影響著整個(gè)種植和修復(fù)過程，種植位點(diǎn)高 質(zhì)量的牙齦軟組織是種植后達(dá)到較好美學(xué)效果的重要 基礎(chǔ)。拔牙、創(chuàng)傷、腫瘤等常造成口腔局部軟組織缺損， 臨床上常采用頰側(cè)滑行粘骨膜瓣、游離粘骨膜瓣移植等傳統(tǒng)關(guān)閉創(chuàng)面，但組織有限且易破壞術(shù)區(qū)周圍的解剖形 態(tài)，如前庭溝變淺，牙間乳頭、附著齦、膜齦聯(lián)合線的 形態(tài)位置的改變，甚至影響術(shù)區(qū)周圍牙齦軟組織的穩(wěn)定 性導(dǎo)致修復(fù)后種植體周圍炎的發(fā)生3。近年來脫細(xì)胞真皮基質(zhì)用于口腔黏

17、膜缺損的修復(fù) 中，它作為受植區(qū)的細(xì)胞支架引導(dǎo)細(xì)胞生長和上皮血管 化，促進(jìn)組織的修復(fù)再生4。但脫細(xì)胞真皮基質(zhì)在引導(dǎo)骨再生技術(shù)中的應(yīng)用發(fā)現(xiàn)許多影響局部牙齦軟組織愈 合的問題：脫細(xì)胞真皮基質(zhì)具有一定厚度，覆蓋骨替 代材料表面增加局部牙齦軟組織瓣的張力致使創(chuàng)面難 以關(guān)閉，在唾液的作用下加速對(duì)暴露膜的降解吸收呵，早期喪失了屏障功能，不利于創(chuàng)口的愈合。實(shí)驗(yàn)證實(shí) 脫細(xì)胞真皮基質(zhì)在引導(dǎo)骨再生術(shù)中可引起的非創(chuàng)傷、非張力、非感染的局部免疫反應(yīng)6-7,這種局部免疫反應(yīng)易 傷口延遲愈合，增加了引導(dǎo)骨再生技術(shù)的應(yīng)用風(fēng)險(xiǎn)。 來源于異種或異體的脫細(xì)胞真皮基質(zhì)存在著倫理學(xué)、疾病傳播、創(chuàng)口局部免疫反應(yīng)等問題?；谏鲜鲆幌盗袉?

18、題的出現(xiàn)，尋找具有引導(dǎo)牙齦軟組織再生能力，避免生 物安全性風(fēng)險(xiǎn)董露，等.富血小板纖維蛋白與膠原膜修復(fù)牙齦缺損創(chuàng)面的能力ISSN 2095-4344 CN 21-1581/R CODEN: ZLKHAH2341且具有一定抗感染能力的生物活性再生 平臺(tái)的材料是具有臨床價(jià)值的。隨后，2000 年法國學(xué)者ChouKroun 首次發(fā)現(xiàn)富血小板纖維蛋白并將其成功用 于口腔頜面外科手術(shù) 。富血小板纖維蛋白富含多種生 長因子9，其源于自身組織，不含任何人工制劑，無全 身或局部免疫反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)，有一定的機(jī)械強(qiáng)度和黏結(jié)性 能10，含有全血中 97%的血小板和大于 50%的白細(xì)胞, 應(yīng)該被認(rèn)為具有生物活性的誘導(dǎo)基質(zhì)，

19、在臨床上各個(gè)領(lǐng) 域應(yīng)得到廣泛應(yīng)用11。目前國內(nèi)外關(guān)于富血小板纖維蛋 白的超微結(jié)構(gòu)、組成成分、體外誘導(dǎo)細(xì)胞增殖分化的能 力研究報(bào)道較多，對(duì)富血小板纖維蛋白的結(jié)構(gòu)、成分、促進(jìn)骨組織修復(fù)再生效果均有較深的認(rèn)識(shí)和理解。此次 研究將富血小板纖維蛋白與膠原膜作對(duì)比，觀察其誘導(dǎo) 牙齦軟組織的愈合情況，評(píng)價(jià)富血小板纖維蛋白誘導(dǎo)牙 齦軟組織缺損修復(fù)再生的能力。1對(duì)象和方法Subjects and methods1.1設(shè)計(jì)隨機(jī)對(duì)照觀察實(shí)驗(yàn)。1.2時(shí)間及地點(diǎn)2013 年 8 月至 2014 年 12 月到成都軍區(qū)種植修復(fù)臨床專科中心完成。1.3對(duì)象 選擇 2013 年 8 月至 2014 年 12 月到成都軍區(qū)種植

20、修復(fù)臨床?？浦行木驮\，因各種原因需要拔除前磨 牙或磨牙同期進(jìn)行位點(diǎn)保存的患者22 例，男 16 例，女 6例，年齡 24- 70 歲，平均年齡為(47.7 3.1)歲。按隨機(jī)數(shù) 字化表隨機(jī)分為 2 組：富血小板纖維蛋白組和膠原膜組。納入標(biāo)準(zhǔn):擬行種植修復(fù)，需要拔除的前磨牙或磨 牙位點(diǎn)，拔牙位點(diǎn)及周圍軟組織無急、慢性炎癥，牙槽 窩側(cè)壁均存，鄰牙無炎癥，松動(dòng)度 10 支/do1.4材料 Bio-Oss 骨替代材料購自瑞士 Geistlich Pharma AG公司， 海奧口腔修復(fù)膜購自煙臺(tái)正海生物技 術(shù)有限公司； 3shapeTRIOS 掃描儀購自丹麥 3shape 公司；HZK 型萬分之一電子分

21、析天平購自美國HZ 公司；PC-02 型離心機(jī)和富血小板纖維蛋白成型處理工具盒購 自發(fā)法國 Nice 公司等。1.5方法1.5.1膠原膜組修復(fù)方法多根牙術(shù)前半小時(shí)分牙，口內(nèi)含漱 0.03%復(fù)方氯己定含漱液 2-5 min，對(duì)口腔周圍皮 膚及口腔進(jìn)行消毒，鋪巾，齦溝內(nèi)切口，分離牙齦，微 創(chuàng)拔除患牙，刮盡肉芽組織，甲硝唑及生理鹽水交替沖洗，窩洞內(nèi)植入 Bio-Oss 骨替代材料，平齊于牙槽嵴頂， 表面覆蓋海奧膠原膜，3shape TRIOS 掃描儀口內(nèi)術(shù)區(qū)光學(xué)取模待用，嚴(yán)密縫合，見圖 1o1.5.2富血小板纖維蛋白膜組修復(fù)方法拔牙及牙槽窩的處理同膠原膜組，Bio-Oss 骨替代材料表面覆蓋富血小

22、板纖維蛋白雙層膜(富血小板纖維蛋白組)，3shapeTRIOS 掃描儀口內(nèi)術(shù)區(qū)光學(xué)取模待用，嚴(yán)密縫合，見圖 2o1.5.3富血小板纖維蛋白的制備拔牙前 5 min 一次性采血針采集患者肘靜脈血9 mL 置于無抗凝劑的真空采血管，立即放入富血小板纖維蛋白離心機(jī)中，以2700 r/min X12 min 離心后，得到介于頂部少細(xì)胞漿 液層和底部的紅細(xì)胞層之間為富血小板纖維蛋白凝膠 層，超凈工作臺(tái)棄上清液取出富血小板纖維蛋白凝膠， 修剪過多的紅細(xì)胞層，置于富血小板纖維蛋白成型處理 工具盒中制備成膜并浸泡于滲岀液中待用13，見圖 3o主要觀察指標(biāo)術(shù)后患者每日復(fù)診，記錄創(chuàng)面愈合的時(shí)間；分別在位點(diǎn)保存術(shù)中

23、縫合前和術(shù)后1，2 周3shape TRIOS 掃描儀口內(nèi)光學(xué)取模記錄創(chuàng)面缺損情況。愈合時(shí)間：傷口無紅腫、滲岀，肉芽組織生長覆蓋創(chuàng)面為愈合標(biāo)準(zhǔn)14，達(dá)到此標(biāo)準(zhǔn)所需時(shí)間。愈合率：術(shù)中縫合前、術(shù)后 1 周和 2 周 3shape TRIOS掃描儀記錄患者位點(diǎn)保存術(shù)區(qū)的牙齦軟組織缺損情況； 將掃描模型上的軟組織缺損邊緣描繪在透明膠片上，并裁剪成形，萬分之一的電子分析天平稱質(zhì)量，通過透明 膠片的質(zhì)量反映創(chuàng)面面積的大??；按公式計(jì)算創(chuàng)面愈合率：愈合率=(初始創(chuàng)面缺損面積-未愈合創(chuàng)面面積)/初始 創(chuàng)面缺損面積15，見圖 4o統(tǒng)計(jì)學(xué)分析收集創(chuàng)面愈合時(shí)間和計(jì)算術(shù)后 1，2 周的創(chuàng)面愈合率所得數(shù)據(jù)采用 SPSS

24、17.0 統(tǒng)計(jì)分析，采用兩 個(gè)隨機(jī)獨(dú)立樣本的 t 檢驗(yàn)，P 0.05 為差異有顯著性意義。2 結(jié)果 Results參與者數(shù)量分析納入患者 22 例，分為 2 組，治療董露，等.富血小板纖維蛋白與膠原膜修復(fù)牙齦缺損創(chuàng)面的能力.CRTER.org2346P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org過程無脫失，全部進(jìn)入結(jié)果分析。董露，等.富血小板纖維蛋白與膠原膜修復(fù)牙齦缺損創(chuàng)面的能力ISSN 2095-4344 CN 21-1581/R CODEN: ZLKHAH2341兩組患者基線資料比較見表 1。創(chuàng)面的愈合時(shí)間兩組創(chuàng)面愈合時(shí)間結(jié)果顯示：膠原膜組的愈合

25、時(shí)間明顯長于富血小板纖維蛋白組，差異有顯著性意義(P 0.05)，見表 2。創(chuàng)面愈合率由于兩組在術(shù)后 3 周時(shí)創(chuàng)面大部分愈合，比較兩組術(shù)后 1，2 周的愈合率，結(jié)果顯示：富血 小板纖維蛋白組的愈合率在術(shù)后第1，2 周均高于膠原膜組，且差異有顯著性意義(P 0.05)，見表 3。不良反應(yīng)兩組患者均未發(fā)生炎癥、免疫反應(yīng)等局部及全身反應(yīng)。3討論 Discussi on由于拔牙創(chuàng)軟組織的缺損，常導(dǎo)致術(shù)區(qū)傷口關(guān)閉困 難，從而降低了早期即刻種植修復(fù)和引導(dǎo)骨再生的成功 率16。位點(diǎn)保存術(shù)后創(chuàng)面的愈合形成密閉的空間利于下 方骨替代材料的代謝和新生骨的形成，如何加快創(chuàng)面愈 合的速度和提高愈合質(zhì)量是臨床醫(yī)生不斷追

26、求的目標(biāo)。 富血小板纖維蛋白是不添加任何生物制劑離心自體外 周血得到的含有大量白細(xì)胞和血小板纖維蛋白材料17。2009 年 Simonpieri 等18-19將富血小板纖維蛋白作為生 物材料可為手術(shù)部位提供保護(hù)，加速頜面軟組織黏膜的 愈合，加快移植材料的整合重組，與本實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致。3.1愈合指標(biāo)的選擇及測量方法的選擇創(chuàng)面愈合指標(biāo)可客觀準(zhǔn)確評(píng)價(jià)創(chuàng)面治療方案促進(jìn)愈合的能力。目前 對(duì)創(chuàng)面愈合的評(píng)價(jià)指標(biāo)多種多樣，包括創(chuàng)面愈合率、創(chuàng) 面愈合時(shí)間、組織病理學(xué)分析、巨噬細(xì)胞定量分析、羥 脯氨酸含量測定、細(xì)胞增殖情況、細(xì)胞 DNA 含量和細(xì)胞 周期分析、轉(zhuǎn)化生長因子a水平、 細(xì)胞因子的水平等20愈合率是評(píng)價(jià)創(chuàng)

27、面愈合的直接指標(biāo)，操作簡單方便，創(chuàng) 面愈合時(shí)間是傳統(tǒng)的評(píng)價(jià)指標(biāo)，依靠肉眼觀察即可做成 判斷，其他的指標(biāo)均需取得創(chuàng)面組織經(jīng)過組織學(xué)檢測對(duì) 相應(yīng)的指標(biāo)定量后才能對(duì)創(chuàng)面的愈合進(jìn)行評(píng)價(jià)，考慮到 研究對(duì)象的特殊性，此次試驗(yàn)選擇了直接而有效的創(chuàng)面 愈合時(shí)間和創(chuàng)面愈合率作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，無需對(duì)患者帶來 創(chuàng)傷即可對(duì)創(chuàng)面的愈合進(jìn)行直觀的評(píng)價(jià)?？谇粌?nèi)軟組織缺損面積的測量一直是困擾臨床醫(yī) 師的一大難題。最初記錄口腔創(chuàng)面缺損面積是通過游標(biāo) 卡尺等測量工具的直接測量，但由于創(chuàng)面的形狀不規(guī)則 和口腔空間的限制，嚴(yán)重影響測量的準(zhǔn)確性。后來學(xué)者 通過印模材料獲取口腔研究模型，對(duì)組織缺損邊緣輪廓 描繪記錄缺損面積于透明薄膜上計(jì)算后

28、得到軟組織缺 損面積，但印模擠壓引起創(chuàng)面變形損傷口腔黏膜，創(chuàng)面邊緣的記錄模糊等干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。隨著數(shù)字化時(shí)代的到來，提岀創(chuàng)面放置標(biāo)準(zhǔn)網(wǎng)格模板的拍攝圖片通過計(jì)算機(jī) 軟件計(jì)算得到軟組織缺損面積21，但拍攝過程中的角度不同會(huì)明顯影響測量結(jié)果。試驗(yàn)采用 3shape TRIOS 掃描儀記錄創(chuàng)面缺損情 況，能快速精確的數(shù)字化口腔印模，所得圖像呈彩色逼 真，能很好的記錄軟組織缺損形態(tài)位置，很大程度上減 少了常規(guī)測量技術(shù)帶來的誤差。3shape TRIOS 掃描儀將超快光學(xué)切割技術(shù)與共聚焦顯微技術(shù)結(jié)合，實(shí)現(xiàn)每秒可拍攝 3 000 幅口腔內(nèi)的二維圖像，并實(shí)時(shí)創(chuàng)建三維數(shù) 字印模圖像。研究將此技術(shù)結(jié)合透明膠片記錄軟

29、組織缺 損的輪廓，通過稱質(zhì)量計(jì)算出牙齦軟組織缺損的面積， 為后期觀察術(shù)后 1，2周創(chuàng)面愈合率提供技術(shù)支持。3.2創(chuàng)面愈合率觀察時(shí)間點(diǎn)的選擇創(chuàng)面愈合的 3 個(gè)階段：創(chuàng)傷開始到傷后 3-6 d 為炎癥期；創(chuàng)傷后的 4-14 d 為增生期；傷后 8 d 到 1 年為塑形期。富血小板纖維蛋白 的制備過程中緩慢聚合形成的纖維蛋白三維立體網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)類似于自然凝血形成的結(jié)構(gòu)，其結(jié)構(gòu)中累積了多種生 長因子和細(xì)胞因子，使體外實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)富血小板纖維蛋白 在 7 d 時(shí)轉(zhuǎn)移生長因子B1 的釋放量達(dá)到峰值，14 d 時(shí)血小板衍生生長因子的釋放量達(dá)到峰值22-23。轉(zhuǎn)移生長因子B1和血小板衍生生長因子是促進(jìn)軟組織愈合的重

30、要生長因子。綜合考慮以上兩個(gè)因素，作者選擇觀察愈 合率的時(shí)間點(diǎn)為術(shù)后1 周和 2 周。患者術(shù)后 1 周拆除縫線后測量可避免縫線張力干擾創(chuàng)面缺損面積的測量。3.3影響創(chuàng)面愈合率和愈合時(shí)間的因素試驗(yàn)觀察發(fā)現(xiàn)：富血小板纖維蛋白組的愈合時(shí)間為(12.17 戈.25) d，膠原膜組的愈合時(shí)間為(17.30 .58) d，兩組比較差異有 統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P 0.05);術(shù)后 1 周、2 周時(shí)富血小板纖維蛋 白組的創(chuàng)面愈合率高于膠原膜膜組， 且有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P 0.05);術(shù)后 1 周富血小板纖維蛋白組的愈合率為 (67.13 .05)%，膠原膜組的愈合率為 (42.23 .19)% ; 術(shù)后 2 周富血小板纖

31、維蛋白組創(chuàng)面愈合率高達(dá)(98.23 士3.45)%，而膠原膜組為(79.54 .57)%，差異有顯著性 意義。di Lauro 等24將富血小板纖維蛋白用于治療牙齦 增生的病例中發(fā)現(xiàn)富血小板纖維蛋白可提高和促進(jìn)牙齦愈合，和此次試驗(yàn)的結(jié)果一致。作者認(rèn)為此次試驗(yàn)結(jié) 果與下列因素相關(guān)：3.3.1 創(chuàng)面的初始缺損面積大小牙齦組織缺損的面積越大，愈合所需時(shí)間越長，同一時(shí)間節(jié)點(diǎn)愈合率降低。董露，等.富血小板纖維蛋白與膠原膜修復(fù)牙齦缺損創(chuàng)面的能力.CRTER.org2346P.O. Box 10002, Shenyang 110180 www.CRTER.org本實(shí)驗(yàn)收集到的22 例患者，術(shù)中測量牙齦軟組織

32、缺損面積均5 mrm 5 mm，對(duì)應(yīng)的透明膠片的質(zhì)量0.007 75 g，但兩個(gè)組的創(chuàng)面缺損的大小在兩組中分布 不均衡。富血小板纖維蛋白組創(chuàng)面的初始缺損面積對(duì)應(yīng) 的透明膠片的質(zhì)量（s）范圍是 0.007 9 g -0.031 2 g，平均 質(zhì)量為 0.015 9 g ;膠原膜組的質(zhì)量（s）范圍是 0.008 0 g -0.024 8 g，平均質(zhì)量為0.015 4 g。但富血小板纖維 蛋白組透明膠片質(zhì)量（s） s 0.010 0 g 約有 43.75%，s 0.015 0 g 約有37.5% ;而膠原膜組在 3 個(gè)范圍內(nèi)的構(gòu)成比依次為 14.28%，35.72%，50%。由上可見膠原膜組 s 0

33、.015 0 g 的例數(shù)的百分比高于富血小板纖維蛋白組，研究者認(rèn)為 這一因素可降低膠原膜組的創(chuàng)面愈合率和延遲創(chuàng)面愈 合時(shí)間。3.3.2富血小板纖維蛋白誘導(dǎo)牙齦組織愈合能力優(yōu)于 膠原膜Choukroun 等25-26認(rèn)為富血小板纖維蛋白促 進(jìn)軟組織愈合的作用基于纖維蛋白的三維立體網(wǎng)狀結(jié) 構(gòu)和生長因子。主要表現(xiàn)為：首先，纖維蛋白是血管化 的天然基質(zhì)，它為內(nèi)皮細(xì)胞的遷移，增殖，表型改變提 供場所，使創(chuàng)面大量新生血管的形成，與創(chuàng)面自然形成 的纖維蛋白凝塊相比，富血小板纖維蛋白中含有高濃度 的細(xì)胞因子如堿性成纖維細(xì)胞因子、血管內(nèi)皮生長因 子、血小板衍生生長因子，隨著溶解緩慢釋放作用于創(chuàng) 面進(jìn)一步促進(jìn)血管

34、化；其次，富血小板纖維蛋白通過影 響上皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞的代謝從而引導(dǎo)創(chuàng)面組織覆 蓋。創(chuàng)面邊緣的上皮細(xì)胞因損傷而失去極性遷移損傷處 的基底部位定植到纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中，在纖維蛋白、 纖維蛋白原，血小板衍生生長因子，轉(zhuǎn)化生長因子的作 用下上皮細(xì)胞大量合成整合素avft3成纖維細(xì)胞在整合素avB的作用下遷移到纖維蛋白網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)中增殖； 最后，纖維蛋白是免疫反應(yīng)的天然引物。纖維蛋白和纖 維蛋白原的代謝產(chǎn)物可引導(dǎo)中心粒細(xì)胞的遷移和膜表 面 CD11C/CD18 受體的表達(dá)，受體的表達(dá)利于中性粒細(xì) 胞與內(nèi)皮細(xì)胞、纖維蛋白的結(jié)合，中心粒細(xì)胞的趨化， 富血小板纖維蛋白中可釋放大量的趨化因子促進(jìn)巨噬 細(xì)胞、中性

35、粒細(xì)胞、單核細(xì)胞的趨化，清理創(chuàng)面對(duì)創(chuàng)面 的炎癥反應(yīng)有積極作用27。而膠原膜通過為上皮細(xì)胞定 植提供平臺(tái)，為血管化提供支架，促進(jìn)創(chuàng)面上皮化和血 管化以達(dá)到創(chuàng)面愈合。研究者認(rèn)為在創(chuàng)面愈合中富血小板纖維蛋白比海 奧膠原膜具有的優(yōu)勢(shì)在于富血小板纖維蛋白可持續(xù)釋 放促進(jìn)細(xì)胞增殖分化的多種細(xì)胞因子和無免疫原性，從而可觀察到富血小板纖維蛋白促進(jìn)創(chuàng)面愈合能力優(yōu)于 膠原膜。3.3.3年齡差別試驗(yàn)中觀察到同一組別年齡較大的患者創(chuàng)面的愈合時(shí)間較年輕患者的創(chuàng)面愈合時(shí)間長，隨著年齡的增加，創(chuàng)傷修復(fù)愈合的能力低降28。3.3.4吸煙 吸煙損害牙齦健康，煙霧中尼古丁等對(duì)牙齦細(xì)胞有毒性作用，損傷牙齦上皮細(xì)胞的DNA,可降低成

36、纖維細(xì)胞的遷移速度從而減緩損傷的愈合29，作者此次試驗(yàn)中膠原膜組吸煙患者較多，可延緩牙齦軟組織缺損的愈合。目前， 富血小板纖維蛋白已廣泛應(yīng)用在口腔種植、骨再生、創(chuàng)傷治療等領(lǐng)域，近年來許多學(xué)者重視對(duì)富血 小板纖維蛋白誘導(dǎo)軟組織愈合的研究，大多細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)將發(fā)現(xiàn)富血小板纖維蛋白具有很強(qiáng)誘導(dǎo)牙齦 軟組織愈合的能力。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)富血小板纖維蛋白膜修復(fù) 牙齦軟組織時(shí)其操作性、臨床效果、上皮形式均優(yōu)于膠 原膜30。隨著科學(xué)技術(shù)提高，富血小板纖維蛋白將會(huì)應(yīng) 用到更多更廣的領(lǐng)域中。致謝：感謝四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院？四川省人民醫(yī)院藥物安 全評(píng)價(jià)中心病理室和解放軍成都軍區(qū)機(jī)關(guān)醫(yī)院口腔科的老 師們對(duì)本實(shí)驗(yàn)給予的技術(shù)支持

37、和指導(dǎo)意見。作者貢獻(xiàn)：孫勇教授、陳紅亮、董露精心設(shè)計(jì)了本實(shí) 驗(yàn)；董露進(jìn)行了資料收集、實(shí)驗(yàn)評(píng)估和成文；孫勇教授、 陳紅亮審校；楊琴秋和肖瓊等幫助資料收集。利益沖突：所有作者共同認(rèn)可文章無相關(guān)利益沖突。倫理問題：試驗(yàn)方案已經(jīng)患者知情同意。文章查重：文章岀版前已經(jīng)過 CNKI 反剽竊文獻(xiàn)檢測 系統(tǒng)進(jìn)行 3 次查重。文章外審：本刊實(shí)行雙盲外審制度，文章經(jīng)國內(nèi)小同 行外審專家審核，符合本刊發(fā)稿宗旨。作者聲明：文章第一作者對(duì)研究和撰寫的論文中出現(xiàn) 的不端行為承擔(dān)責(zé)任。論文中涉及的原始圖片、數(shù)據(jù)（包括 計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)庫）記錄及樣本已按照有關(guān)規(guī)定保存、分享和銷 毀，可接受核查。文章版權(quán):文章岀版前雜志已與全體作者

38、授權(quán)人簽署 了版權(quán)相關(guān)協(xié)議。4參考文獻(xiàn)Referen ces1楊姝.BLB 種植體修復(fù)義齒安全性觀察：即刻種植與延期種植的對(duì)比J.中國組織工程研究，2015,19（34）:5453-5457.Yeung SC. Biological basis for soft tissue management inimplant dentistry. Aust Dent J.2008,53 Suppl 1:S39-S42.董露，肖瓊，孫勇.口腔軟組織缺損修復(fù)的研究進(jìn)展J.西南國防醫(yī)藥,2015,25(2):218-220.董露，等.富血小板纖維蛋白與膠原膜修復(fù)牙齦缺損創(chuàng)面的能力WWW.CRTER.orgI

39、SSN 2095-4344 CN 21-1581/R CODEN: ZLKHAH2345圖1膠原膜組臨床病例模型的建立Figure 1 Establishment of a clinical casemodel of collagen membrane圖注：圖A示拔除D6患牙并清理牙槽窩；圖B示D6拔牙窩內(nèi)植入Bio-Oss;圖C示Bio-Oss表面覆蓋海奧膠原生物膜。Figure 2 Establishment of a clinical case model of platelet-richfibrin membrane圖注：圖A示A7拔牙后并清理牙槽窩；圖B示A7拔牙窩內(nèi)植入Bio-Os

40、s;圖C示A7 Bio-Oss表面覆蓋富血小板纖維蛋白膜。圖3富血小板纖維蛋白的制作Figure 3 Production of platelet-rich fibrin圖注：圖A示全血離心后分為3層；圖B示富血小板纖維蛋白凝膠；圖C示富血小板纖維蛋白膜。表 2 兩組患者牙齦軟組織缺損的愈合時(shí)間(Xis)Table 2 Wound healing time of two groups組別愈合天數(shù)(d)富血小板纖維蛋白組12.17 +2.25a膠原膜組17.30 +2.58表注：與膠原膜組比較，aP 0.05)表 3 兩組患者牙齦軟組織缺損術(shù)后1 , 2 周創(chuàng)面愈合率(x ,%)Table 3

41、Wound healing rates of two groups at 1 and 2 weeks postoperation組別1周2周富血小板纖維蛋白組67.136.05a98.233.45a膠原膜組42.236.1979.543.57表注：與膠原膜組比較，aP 0.05。居國平，侯德強(qiáng)，趙健.異種脫細(xì)胞真皮基質(zhì)修復(fù)膜在口腔黏膜淺層缺損修復(fù)中的臨床應(yīng)用J.中華腫瘤防治雜志,2014,21(23):1920-1921.李玲慰，胡曉文，李斯日古楞，等.異種脫細(xì)胞真皮基質(zhì)修復(fù)骨引導(dǎo)再生術(shù)后軟組織缺損的臨床觀察J.中國口腔種植學(xué)雜志,2010,15(2):80-84.圖2富血小板纖維蛋白膜組臨床

42、病例模型的建.立圖4 3shape TRIOS掃描儀記錄創(chuàng)面缺損情況Figure 4 Application of 3shape TRIOS to record conditions about wound defects圖注：圖A示術(shù)中膠原膜覆蓋后軟組織缺損記錄；圖B示膠原膜組術(shù)后1周創(chuàng)面軟組織缺損記錄；圖C示膠原膜組術(shù)后2周創(chuàng)面軟組 織缺損記錄；圖D示術(shù)中富血小板纖維蛋白膜覆蓋后軟組織缺損記錄；圖E示富血小板纖維蛋白組術(shù)后1周創(chuàng)面軟組織缺損記錄；圖F示富血小板纖維蛋白組術(shù)后2周創(chuàng)面軟組織缺損記錄。董露，等.富血小板纖維蛋白與膠原膜修復(fù)牙齦缺損創(chuàng)面的能力.CRTER.org2346P.O.

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