第17章 色譜分析概論

1、第十七章第十七章 色譜分析法概論色譜分析法概論 chromatography色譜法是最重要的分離技術(shù)，篇幅約占書的三分之一色譜法是最重要的分離技術(shù)，篇幅約占書的三分之一 色譜法概述 色譜過程和術(shù)語 色譜法基本理論 基本類型色譜的分離機(jī)制 一、色譜法（一、色譜法（chromatograph）的起源和發(fā)展）的起源和發(fā)展 11906年由俄國植物學(xué)家Tsweet創(chuàng)立 植物色素分離植物色素分離見圖示 2、1931年胡蘿卜素異構(gòu)體的分離 3、3040年代TLC、PC平板色譜法的出現(xiàn) 4、40年代瑞典科學(xué)家Tiselius等在分配液相色譜、 吸附色譜和電泳領(lǐng)域取得了成果 5、50年代英國Martin和Syn

2、ge建立GC色譜 6、60年代GC-MS聯(lián)用 7、70年代HPLC崛起圖示固定相固定相CaCO3顆粒顆粒流動(dòng)相流動(dòng)相石油醚石油醚 色譜柱色譜柱玻璃柱玻璃柱植物色素混合物Chroma + to + graph2現(xiàn)在：一種重要的分離、分析技術(shù) 分離混合物各組分并加以分析 固定相固定相除了固體，還可以是液體除了固體，還可以是液體 流動(dòng)相流動(dòng)相液體或氣體液體或氣體 色譜柱色譜柱各種材質(zhì)和尺寸各種材質(zhì)和尺寸 被分離組分被分離組分不再僅局限于有色物質(zhì)不再僅局限于有色物質(zhì)色譜學(xué)的重要作用色譜學(xué)的重要作用 應(yīng)用的科學(xué)領(lǐng)域：生命科學(xué)、材料科學(xué)、環(huán)境科學(xué)等應(yīng)用的科學(xué)領(lǐng)域：生命科學(xué)、材料科學(xué)、環(huán)境科學(xué)等 藥學(xué)：藥學(xué)

3、： 1 1、教材內(nèi)容多，約占全書的三分之一。、教材內(nèi)容多，約占全書的三分之一。 2 2、藥學(xué)各個(gè)專業(yè)都會(huì)用到色譜分析法、藥學(xué)各個(gè)專業(yè)都會(huì)用到色譜分析法 藥典藥典 20052005年版年版 20002000年版年版 部部 藥品藥品 19671967種種 16991699種種 HPLCHPLC分析分析 848848種種 567567種種 3 3、考研、考研 大綜合包括大綜合包括分析分析、有機(jī)、生理、生化、有機(jī)、生理、生化 其中分析其中分析7575分約近一半是色譜內(nèi)容分約近一半是色譜內(nèi)容定義：利用各組分物理化學(xué)性質(zhì)的不同，在流動(dòng)相流定義：利用各組分物理化學(xué)性質(zhì)的不同，在流動(dòng)相流 經(jīng)固定相時(shí)，由于各組

4、分在兩相間的吸附、分經(jīng)固定相時(shí)，由于各組分在兩相間的吸附、分 配或其它親和力的差異而產(chǎn)生不同速度的移配或其它親和力的差異而產(chǎn)生不同速度的移 動(dòng)，最終達(dá)到分離的目的。動(dòng)，最終達(dá)到分離的目的。圖例圖例分離基礎(chǔ)：差速遷移分離基礎(chǔ)：差速遷移 (例例:賽跑賽跑)目的：多組分分離，實(shí)現(xiàn)定性定量分析目的：多組分分離，實(shí)現(xiàn)定性定量分析圖示分離機(jī)制：分離機(jī)制： 各組分與流動(dòng)相分子爭奪吸附劑表面活性中心 利用吸附劑對(duì)不同組分的吸附能力差異而實(shí)現(xiàn)分離吸附解吸再吸附再解吸無數(shù)次洗脫分開碳酸鈣碳酸鈣吸附劑吸附劑石油醚石油醚流動(dòng)相流動(dòng)相色素三、色譜法分類：三、色譜法分類： 1按兩相的態(tài)分：按兩相的態(tài)分：Mobile ph

5、ase stationary phase Liquid Solid L-S色譜色譜 LC Liquid Liquid L-L色譜色譜 Gas Solid G-S色譜色譜 GC Gas Liquid G-L色譜色譜 2按固定相的固定方式分：按固定相的固定方式分：吸附色譜：吸附色譜：利用物理吸附性能的差異（固定相固體）absorption chromatography L-S（液固吸附法）（液固吸附法） G-S （氣固吸附法）（氣固吸附法） 分配色譜：分配色譜：利用分配系數(shù)的不同（固定相液體）partition chromatography L-L（液液分配附法）（液液分配附法） G-L（氣液分配

6、附法）（氣液分配附法） 離子交換色譜：離子交換色譜：ion exchange chromatography size exclusion chromatography3按分離機(jī)制分：按分離機(jī)制分： 色譜法簡單分類色譜法簡單分類色譜法色譜法GSC液相色譜法液相色譜法 （LC）柱色柱色譜法譜法平面色平面色譜法譜法毛細(xì)管電泳法毛細(xì)管電泳法 （CE）LLCLSCIECSEC紙色紙色譜法譜法薄層色譜法薄層色譜法（TLC）LLCLLCLSC氣相色譜法氣相色譜法（GC）柱色柱色譜法譜法GLC超臨界流體色譜法超臨界流體色譜法 （SFC）優(yōu)點(diǎn)：優(yōu)點(diǎn)：“三高”、“一快”、“一廣”缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：一、色譜過程二、基本術(shù)

7、語1、流出曲線和色譜峰2、基線、噪音和漂移3、峰寬柱效參數(shù)4、峰高和峰面積定量參數(shù)5、保留值定性參數(shù)6、分配系數(shù)和容量因子相平衡參數(shù)7、分離因子和分離度分離參數(shù)8、等溫線色譜過程：指物質(zhì)分子（被分離組分分離組分）在相對(duì)運(yùn)動(dòng)的 兩相（流動(dòng)相流動(dòng)相和固定相固定相）中的“分配”平衡過程以吸附色譜為例見圖示色譜過程： 吸附 解吸再吸附 再解吸 反復(fù)多次洗脫被測(cè)組分分配系數(shù)不同 差速遷移 分離圖示 吸附能力弱的組分先流出 吸附能力強(qiáng)的組分后流出 組分的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)微小差異 與固定相作用差異 隨流動(dòng)相移動(dòng)的速度不等 差速遷移 色譜分離。 流出曲線（色譜圖流出曲線（色譜圖 chromagtogram）：電信號(hào)

8、強(qiáng) 度隨時(shí)間變化曲線 色譜峰色譜峰(peak)：流出曲線上突起部分 base line, noise and drift基線基線：僅有流動(dòng)相通過檢測(cè)器時(shí)產(chǎn)生 的信號(hào)曲線。反映檢測(cè)器噪音 隨時(shí)間變化的曲線 （穩(wěn)定平直直線）噪音噪音：儀器本身所固有的，以噪音 帶表示（儀器越好，噪音越?。┢破疲夯€向某個(gè)方向穩(wěn)定移動(dòng) （儀器未穩(wěn)定造成）峰寬峰寬W：色譜峰兩側(cè)拐點(diǎn)切 線與基線相交的截距標(biāo)準(zhǔn)差標(biāo)準(zhǔn)差：為正態(tài)分布曲線兩拐點(diǎn)間距離的一半。對(duì)應(yīng) 0.607h處峰寬的一半 注：小，峰窄，柱效高半峰寬半峰寬W1/2：峰高一半處所對(duì)應(yīng)的峰寬355. 221W4W21699. 1WW 峰高(peak height

9、；h)：組分在柱后出現(xiàn)濃度 極大時(shí)的檢測(cè)信號(hào)，即色譜峰頂至基線的距離。 峰面積(peak area；A)：色譜曲線與基線間包圍的面積。 保留時(shí)間保留時(shí)間 retention time, tR：從進(jìn)樣開始到組分出現(xiàn)濃度極大點(diǎn)時(shí)所需時(shí)間，即組分通過色譜柱所需要的時(shí)間 死時(shí)間死時(shí)間dead time, t0：不被固定相滯留組分的保留時(shí)間，相當(dāng)于流動(dòng)相到達(dá)檢測(cè)器所需要的時(shí)間 調(diào)整保留時(shí)間調(diào)整保留時(shí)間tR：組分由于和固定相作用，比不作用的組分在柱種多停留的時(shí)間，即組分在固定相中滯留的時(shí)間。等于組分的保留時(shí)間與死時(shí)間之差值0tttRR表示組分在色譜固定相內(nèi)滯留狀態(tài)的參數(shù)表示組分在色譜固定相內(nèi)滯留狀態(tài)的參數(shù)

10、（1）時(shí)間表示的保留值）時(shí)間表示的保留值圖示續(xù)前保留體積保留體積VR：從進(jìn)樣開始到組分出現(xiàn)濃度極大點(diǎn)時(shí)所需要的 流動(dòng)相的體積。 VR與tR和Fc（流動(dòng)相流速mL/min）的關(guān)系 死體積死體積V0：由進(jìn)樣器至檢測(cè)器的流路中未被固定相占有的空間 體積。包括從進(jìn)樣器到色譜柱導(dǎo)管的體積、固定相的孔隙及顆 粒間隙、 柱出口導(dǎo)管及檢測(cè)器內(nèi)腔體積的總和。cRRFtVCRcRFtFV1無關(guān)；為定值，與注：310VVVVmCFtV00差，峰形，色譜峰擴(kuò)展0V（2）用體積表示的保留值）用體積表示的保留值續(xù)前調(diào)整保留體積調(diào)整保留體積VR：保留體積與死體積之差，即組分 停留在固定相時(shí)所消耗流動(dòng)相的體積CRRRFtVV

11、V0cRcRFtFV1無關(guān)；與注：V0 和 Vm、t0 和 tm 的區(qū)別V0 ：由進(jìn)樣器至檢測(cè)器的流路中未被固定相占有的空間體積 ； 流定相充滿死體積所需的時(shí)間為t0 。 Vm ：平衡時(shí)流動(dòng)相在色譜柱中占有的體積，流動(dòng)相經(jīng)過色譜柱所需時(shí)間用tm 表示。 Vm V0，tm t0 的物理意義有區(qū)別。在多數(shù)情況下，可忽略導(dǎo)管和檢測(cè)器內(nèi)腔的容積，Vm 和 V0視為近似相等。mSCCK 1）分配系數(shù)）分配系數(shù)K（partition coefficient , 平衡常數(shù)） 定義：指在一定溫度和壓力下，組分在色譜柱中達(dá)分配 平衡后，在固定相與流動(dòng)相中的濃度比2）容量因子）容量因子（capacity fact

12、or, 容量比，分配比）k： 定義：在平衡狀態(tài)下，組分在固定相與流動(dòng)相中的質(zhì)量比相當(dāng)于組分被固定相滯留的時(shí)間和流動(dòng)相通過系統(tǒng)所需時(shí)間比msmmssmsVVKVCVCWWk000tttttkRR長注：Rtk)1 (0mSRVVKtt容易獲得，用的更多k)1 (0kttR)1 (0mSRVVKtt 組分組分 吸附力吸附力 Cs K tR VR B 強(qiáng)強(qiáng) 大大 大大 長長 大大 A 弱弱 小小 小小 短短 小小3 3）保留行為和分配系數(shù)關(guān)系）保留行為和分配系數(shù)關(guān)系（P442）色譜過程方程：應(yīng)選擇合適分離條件使得難分離的組分K不等)1 (0msBBRVVKtt)1 (0msAARVVKtt)(0BAm

13、sBRARRKKVVtttt0RBAtKK例：分離A、B兩組分（1）分離因子分離因子（分配系數(shù)比或選擇性系數(shù)） 定義：定義：兩種物質(zhì)調(diào)整保留值之比121212RRttkkKK分離因子1是色譜分離的必需條件22112WWttRRR峰寬和之半）保留值之差（峰頂間距)2(21) 1 (21122112)(177. 1)(2WWttWWttRRRRR（2）分離度（）分離度（resolution, R）：衡量分離條件優(yōu)劣的參數(shù) 定義：定義：相臨兩組分間峰頂間距離是峰底寬平均值的幾倍討論討論 設(shè)色譜峰為正常峰，W1W2= 4 完全未分開定量分析前提）完全分離基本分離0 . 1(65 . 140 . 1Rt

14、RtRRR定義：指一定溫度下，組分在兩相中分配達(dá)平衡時(shí)，在兩相 中的濃度關(guān)系曲線，即cs對(duì)cm的關(guān)系曲線 圖示圖示(1) 線性等溫線線性等溫線（理想）（理想）對(duì)稱峰對(duì)稱峰(2)非線性等溫線非線性等溫線 凸形凸形拖尾峰拖尾峰（常見）（常見） 凹形凹形前沿峰前沿峰固定相表面活性吸附中心未達(dá)飽和，K一定，與溶質(zhì)濃度無關(guān)固定相表面吸附中心活性不均，溶質(zhì)分子先占據(jù)強(qiáng)吸附中心再占據(jù)弱吸附中心，K隨著溶質(zhì)濃度的增加而減小 溶質(zhì)與固定相作用，改變其表面性質(zhì)，K隨著溶質(zhì)濃度的增加而增加 低濃度為低濃度為正常峰正常峰對(duì)稱因子對(duì)稱因子：（拖尾因子）：（拖尾因子）fs在0.951.05之間fs小于0.95fs大于1.

15、05ABAAWfhs2205. 03）對(duì)稱因子）對(duì)稱因子(symmetry factor) 衡量色譜峰對(duì)稱性衡量色譜峰對(duì)稱性一、色譜過程二、基本術(shù)語 1、流出曲線和色譜峰 2、基線、噪音和漂移u3、峰寬柱效參數(shù)u4、峰高和峰面積定量參數(shù)u5、保留值定性參數(shù)u6、分配系數(shù)和容量因子相平衡參數(shù)u7、分離因子和分離度分離參數(shù) 8、等溫線第三節(jié)第三節(jié) 色譜法基本理論色譜法基本理論 21RR21RR)(22/ )(1212WWttWWttR要使要使R R大，必須：大，必須：1 1、t tR R大大- - k k大大-熱力學(xué)熱力學(xué)2 2、W W小小-峰展寬小峰展寬小-動(dòng)力學(xué)動(dòng)力學(xué)分離度：分離度： 色譜理論

16、包括兩方面色譜理論包括兩方面:熱力學(xué)理論：熱力學(xué)理論：研究分配研究分配(分離分離)過程，塔板理論（過程，塔板理論（plate theory）動(dòng)力學(xué)理論：動(dòng)力學(xué)理論：研究各種動(dòng)力學(xué)因素對(duì)峰展寬的影響，速率理研究各種動(dòng)力學(xué)因素對(duì)峰展寬的影響，速率理 論（論（rate theory）。）。一、塔板理論一、塔板理論 plate theory 始于馬?。∕artin）和辛格（Synge）提出的塔板模型。 分餾塔：在塔板上多次氣液平衡，按沸點(diǎn)不同而分離。色譜柱每個(gè)色譜柱每個(gè)H H高度內(nèi)有一塊塔板，共有若高度內(nèi)有一塊塔板，共有若干塊塔板。組分在每塊塔板兩相間分配干塊塔板。組分在每塊塔板兩相間分配達(dá)平衡，達(dá)平

17、衡，K K小的先出柱。多次分配平衡，小的先出柱。多次分配平衡，K K有微小差異組分仍可獲較好分離有微小差異組分仍可獲較好分離假想假想：1柱的組成為多個(gè)連續(xù)、等距塔板，每塔板內(nèi)組分分配瞬間達(dá) 平衡（H理論塔板高度）2流動(dòng)相間歇式進(jìn)入色譜柱，每次進(jìn)一個(gè)塔板體積3樣品和載氣均加在第1號(hào)塔板上，沿柱方向縱向擴(kuò)散忽略4分配系數(shù)在各塔板上是常數(shù)結(jié)果：當(dāng)塔板數(shù)很大時(shí)，組分色譜流出曲線為趨于正態(tài)分布理理nLH22212)(16)(54. 5)(WtWttnRRR理L ：柱長色譜柱效參數(shù)，但柱壓和分析時(shí)間一定，；，分離能力，柱效一定，討論：理理理理理理理nLHnHLHnLn1不同；組分不同則與所用組分有關(guān)，選用

18、注：計(jì)算理理nn一致無量綱，上下單位必須理n2)(Refftn 有效理論塔板數(shù)和有效理論塔板高度 理論塔板數(shù)和理論塔板高度neffneffnLH實(shí)的反映柱效扣除了死時(shí)間，更能真和注：effeffHn塔板理論的貢獻(xiàn)：塔板理論的貢獻(xiàn)：從熱力學(xué)角度從熱力學(xué)角度 解釋了色譜流出曲線的形狀和濃度極大點(diǎn)的位置 提出了評(píng)價(jià)柱效高低的n和H的計(jì)算式 須在給定條件，指定組分測(cè)定時(shí)才有意義缺點(diǎn)：缺點(diǎn)：HLWtWttnRRR22212)(16)(54. 5)(理1.柱效不能表示被分離組分的實(shí)際分離效果。2.塔板理論無法解釋同一色譜柱在不同流動(dòng)相流速下柱效不同的 結(jié)果，無法指出影響柱效的因素及提高柱效的途徑。練習(xí)例：

19、例： GC法，法，柱長為2m，固定相5%的OV-17、柱溫為1250C，記錄紙速度為2.0cm/min的色譜條件下，測(cè)定萘的保留時(shí)間為2.35min，半峰寬為0.20cm，求理論塔板數(shù)和板高。若用甲烷測(cè)得死時(shí)間為0.20min，求有效理論塔板數(shù)和板高。（見書上P444例）解：32101 . 3)0 . 220. 035. 2(54. 5nmmH65. 0101 . 320003mmHeff77. 0106 . 22000332106 . 2)0 . 220. 015. 2(54. 5effnmmtR15. 220. 035. 2二、速率理論二、速率理論 rate theoryrate theo

20、ry塔板理論成功處塔板理論成功處： 解釋了色譜流出曲線的形狀和濃度極大值對(duì)應(yīng)的tR 評(píng)價(jià)柱效（n，）塔板理論存在問題塔板理論存在問題:1）做出了四個(gè)與實(shí)際不相符的假設(shè) 忽略了組分在兩相中傳質(zhì)和擴(kuò)散的動(dòng)力學(xué)過程2）只定性給出塔板高度的概念，卻無法解釋板高的 影響因素3）排除了一個(gè)重要參數(shù)流動(dòng)相的線速度u， 因而無法解釋柱效與流速關(guān)系 更無法提出降低板高的途徑速率理論速率理論影響柱效因素 19561956年，荷蘭學(xué)者范第姆特年，荷蘭學(xué)者范第姆特(Van Deemter(Van Deemter) )提出了色譜過程動(dòng)提出了色譜過程動(dòng)力學(xué)理論力學(xué)理論速率理論。速率理論。塔板高度渦流擴(kuò)散項(xiàng)縱向擴(kuò)散項(xiàng)傳質(zhì)阻

21、抗項(xiàng)H = A + B/u + Cu 吸收了塔板理論的有效成果H，并從動(dòng)力學(xué)角度較好地解釋了影響柱效的因素u載氣線速度，cm/suBAHCuu/項(xiàng)可忽略，最佳uCAHBuu項(xiàng)可忽略，最佳CBuCuBdudHop2BCAH2min（測(cè)定）前提下和較短在保證足夠大最佳utRR高，峰越尖銳，柱效，一定，三個(gè)常數(shù)注：nHuH = A + B/u + Cu)/(scmtLum產(chǎn)生原因：產(chǎn)生原因：載氣攜樣品進(jìn)柱，遇到來自固定相顆粒的阻力路徑不同渦流擴(kuò)散cmdpA單位2注：注：顆粒太小，柱壓過高且不易填充均勻 空心毛細(xì)管柱（0.10.5mm），A=0，n理較高渦流擴(kuò)散系數(shù) ：填充不規(guī)則因子，：填充不規(guī)則因子

22、，填充技術(shù)和填料顆粒形狀決定。d dp p：填料：填料 ( (固定相固定相) ) 顆粒的平均直徑顆粒的平均直徑 dp小，A??；但dp太小，和柱阻大。產(chǎn)生原因：產(chǎn)生原因： 峰在固定相中被流動(dòng)相推動(dòng)向前、展開兩邊濃度差scmDBg/22單位擴(kuò)散的阻礙反映固定相顆粒對(duì)分子）擴(kuò)散阻礙因子（111空心毛細(xì)管柱填充柱溫度等影響受載氣的種類和粘度、數(shù)（常數(shù)）組分在載氣中的擴(kuò)散系gD縱向擴(kuò)散系數(shù)注注：為降低縱向擴(kuò)散，宜控制較高線速度，選用分子 量較大的載氣和較低的柱溫 選擇載氣原則選擇載氣原則：兼顧分析時(shí)間和減小縱向擴(kuò)散 u 較小時(shí)，選M較大的N2氣（粘度大） u 較大時(shí)，選M較小的H2氣，He氣（粘度?。〣

23、 B的影響因素的影響因素： gDB uBBDMTuBug/）（或柱效，nHMTDTDgg或產(chǎn)生原因：產(chǎn)生原因：樣品在氣液兩相分配，樣品未及溶解就被帶走，從而造成峰擴(kuò)張影響因素：影響因素：傳質(zhì)阻抗系數(shù)sDdfkkCCCClllg單位22)1 (32固定液液膜厚度df系數(shù)組分在固定液中的擴(kuò)散lDllDdfC2TDl2)1 (kkCl 傳質(zhì)：溶解、擴(kuò)散、轉(zhuǎn)移的過程傳質(zhì)阻抗：影響傳質(zhì)過程的阻力 討論：討論： 注：注：固定液應(yīng)完全覆蓋載體表面，不可以太薄，否則柱子 壽命短，k太??； T不可以超過固定液最佳使用溫度lDTdf柱效，nHuCCl最佳可用53;102kkCklC C的影響因素的影響因素： 2分

24、離度計(jì)算式分離度計(jì)算式)2(21)1(21122112)(177. 1)(2WWttWWttRRRRR前提前提定義式基礎(chǔ)上，相鄰兩組分的n一致（假設(shè)）22114kknR柱效項(xiàng)柱選擇項(xiàng)柱容量項(xiàng)1分離度定義式分離度定義式 2124RRRtttnR3分離度補(bǔ)充公式分離度補(bǔ)充公式主要取決于色譜柱性能及載氣流速21221LLRR注：柱長過長，柱阻增大22114kknRuCuBAH/理理HLnnR因?yàn)镠Ln 已知LRLRH2或的條件下在不改變塔板高度221)(54. 5WtnR理影響色譜峰的寬窄例：兩組分在1m長柱子上的R=0.75，問多長柱子可以使它們完全分離？解：解：2121LLRR215 . 175

25、. 0LmL42 討論：討論：v 增加柱效是提高分離度的一個(gè)直接有效手段v 提高柱效、改善分離的途徑：增加柱長；降低板高v 根據(jù)速率理論，降低板高、提高柱效的方法是： 1）采用粒度較小、均勻填充的固定相（A項(xiàng) ） 2）分配色譜應(yīng)控制固定液液膜厚度（C項(xiàng) ） 3）適宜的操作條件：載氣的性質(zhì)和流速，柱溫等（B項(xiàng)） 選用分子量較大、線速度較小的載氣N2氣， 控制較低的柱溫主要受固定相和載氣性質(zhì)，以及柱溫影響，無法分離01R的影響都很大微小變化對(duì)R一倍R2 . 11 . 122114kknRmsCCK 121212RRttkkKK影響峰的間距1R因?yàn)镽，1續(xù)前討論：討論： v 增大柱選擇性是改善分離度

26、的最有力手段最有力手段v 氣相色譜中，柱選擇性取決于固定相性質(zhì)和柱溫 選擇合適的固定相使與不同組分的作用產(chǎn)生差別 才能實(shí)現(xiàn)分離 一般說，降低柱溫可以增大柱的選擇性00Rk，峰擴(kuò)張，的影響對(duì)時(shí)RtRk變慢時(shí)，Rkk5RtRkk很少，時(shí)，1022114kknR影響峰位0ttkR主要受固定相種類和用量、載氣，以及柱溫影響msVVKk kkR1Rkkk，1討論：討論： 綜合考慮分離度、分離時(shí)間和峰檢測(cè)幾項(xiàng)因素 控制k的最佳范圍 25 GC中，增加固定液用量和降低柱溫可以增加 k練習(xí)如何根據(jù)具體情況改進(jìn)分離度？如何根據(jù)具體情況改進(jìn)分離度？（一）吸附色譜法（二）分配色譜法（三）離子交換色譜法（四）空間排阻色譜法對(duì)于不同的分離機(jī)理，K的含義不同。 吸附色譜 吸附系數(shù) 分配色譜 分配系數(shù) 離子交換色譜 離子交換系數(shù) 統(tǒng)稱K 分子排阻色譜 分子排阻系數(shù)要求要求： 固定相吸附劑（硅膠或AL2O3） 具表面活性吸附中心分離機(jī)制分離機(jī)制：見圖示吸附系數(shù)吸附系數(shù)mmaanamnmaaVXSXYXYXK的濃度為溶質(zhì)分子在流動(dòng)相中面的濃度為溶質(zhì)分子在吸附劑表maXX為