《藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)》PPT課件

1、藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)Experiment of Experiment of PharmacologyPharmacology廈門大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系廈門大學(xué)醫(yī)學(xué)院藥學(xué)系Toxication and Detoxication of Organophosphates內(nèi)容引見內(nèi)容引見一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊?、?shí)驗(yàn)?zāi)康腅xperiment purpose)察看有機(jī)磷酸酯類的中毒的察看有機(jī)磷酸酯類的中毒的表現(xiàn)。表現(xiàn)。2.察看挽救藥阿托品察看挽救藥阿托品(atropine)、碘解磷定、碘解磷定(PAM)的挽救作用效果，比較兩的挽救作用效果，比較兩種藥物作用的特點(diǎn)。種藥物作用的特點(diǎn)。全血膽堿酯酶活力測(cè)定原理全血膽堿酯酶活

2、力測(cè)定原理血樣中膽堿酯酶能催化乙酰膽堿水解為乙酸和膽堿。血樣中膽堿酯酶能催化乙酰膽堿水解為乙酸和膽堿。在一定量的血液中參與一定量的乙酰膽堿，經(jīng)過(guò)一在一定量的血液中參與一定量的乙酰膽堿，經(jīng)過(guò)一定反響時(shí)間后，測(cè)定剩余的乙酰膽堿含量，即可計(jì)定反響時(shí)間后，測(cè)定剩余的乙酰膽堿含量，即可計(jì)算出被水解乙酰膽堿的量，從而推算出血樣中膽堿算出被水解乙酰膽堿的量，從而推算出血樣中膽堿酯酶的活力。酯酶的活力。剩余乙酰膽堿含量測(cè)定原理剩余乙酰膽堿含量測(cè)定原理乙酰膽堿可與羥胺反響生成羥肟乙酰膽堿可與羥胺反響生成羥肟酸，后者在酸性條件下可與酸，后者在酸性條件下可與Fe構(gòu)成羥肟酸鐵絡(luò)合物，該絡(luò)構(gòu)成羥肟酸鐵絡(luò)合物，該絡(luò)合物呈

3、紅棕色，在合物呈紅棕色，在525nm波長(zhǎng)有波長(zhǎng)有較強(qiáng)吸收峰，經(jīng)過(guò)比色法即可算較強(qiáng)吸收峰，經(jīng)過(guò)比色法即可算出乙酰膽堿的含量。出乙酰膽堿的含量。 三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物三、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物Experiment animal家兔，體重家兔，體重2.53.0kg。 兔固定箱、測(cè)瞳尺、注射器、兔耳夾、脫脂棉球、臺(tái)兔固定箱、測(cè)瞳尺、注射器、兔耳夾、脫脂棉球、臺(tái)秤、分光光度計(jì)、恒溫水浴箱、試管及試管夾、加樣秤、分光光度計(jì)、恒溫水浴箱、試管及試管夾、加樣器、濾紙；器、濾紙；5%敵百蟲敵百蟲(depterex)溶液、溶液、0.1%硫酸阿托品溶液、硫酸阿托品溶液、2.5%碘解磷定溶液。碘解磷定溶液。1. 取安康家兔，稱體重，察看并

4、記錄各組家兔的取安康家兔，稱體重，察看并記錄各組家兔的活動(dòng)情況：呼吸、瞳孔大小、唾液分泌、大小便、活動(dòng)情況：呼吸、瞳孔大小、唾液分泌、大小便、肌張力及有無(wú)肌肉震顫，采血。肌張力及有無(wú)肌肉震顫，采血。2. 耳緣靜脈給予耳緣靜脈給予depterex(1.5ml/kg), 給藥后親密給藥后親密察看上述目的的變化并記錄。待察看上述目的的變化并記錄。待M樣、樣、N樣中毒病樣中毒病癥 均 較 明 顯 時(shí) ， 采 血 ； 給 予 耳 緣 靜 脈 注 射癥 均 較 明 顯 時(shí) ， 采 血 ； 給 予 耳 緣 靜 脈 注 射atropine(1ml/kg)或或PAM-CL(2ml/kg)，察看中毒病，察看中毒病

5、癥有何變化，采血。癥有何變化，采血。3.測(cè)定膽堿酯酶活性測(cè)定膽堿酯酶活性試劑（試劑（mlml） 對(duì)照管對(duì)照管 測(cè)定管測(cè)定管 1 2 31 2 34 4中毒前中毒前 5 5中毒后中毒后 6 6解救后解救后磷酸鹽緩沖液磷酸鹽緩沖液 1.0 0.85 1.0 0.85 0.85 0.851.0 0.85 1.0 0.85 0.85 0.85血樣血樣 0 0.15 0 0.15 0.15 0.150 0.15 0 0.15 0.15 0.153737水浴水浴3-5min3-5min乙酰膽堿底物乙酰膽堿底物 0 0 1.0 1.0 1.0 1.00 0 1.0 1.0 1.0 1.0蒸餾水蒸餾水 1.0

6、 1.0 0 0 0 01.0 1.0 0 0 0 03737水浴水浴40min40min堿性羥胺溶液堿性羥胺溶液 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.04.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.04N4N鹽酸鹽酸 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.02.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0三氯化鐵溶液三氯化鐵溶液 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.02.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0六、本卷須知六、本卷須知Cautions1、察看呼吸、瞳孔、唾液及肌張力的方法。、察看呼吸、瞳孔、唾液及肌張力的方法。2、采血方法。、采血方法。3、耳緣靜脈注射方法

7、，敵百蟲刺激性大，固定、耳緣靜脈注射方法，敵百蟲刺激性大，固定 好家兔頭部；好家兔頭部；PAM注射宜緩慢。注射宜緩慢。4、參與試劑量要準(zhǔn)確，尤其是血樣及乙酰膽堿。、參與試劑量要準(zhǔn)確，尤其是血樣及乙酰膽堿。5、堿性羥胺于運(yùn)用前、堿性羥胺于運(yùn)用前20分現(xiàn)配。分現(xiàn)配。6、比色杯運(yùn)用方法。、比色杯運(yùn)用方法。七、討論七、討論Discussion1、阿托品挽救有機(jī)磷酸酯中毒機(jī)制。、阿托品挽救有機(jī)磷酸酯中毒機(jī)制。2、解磷定挽救有機(jī)磷酸酯中毒機(jī)制。、解磷定挽救有機(jī)磷酸酯中毒機(jī)制。3、兩種藥物挽救敵百蟲中毒各有什么特點(diǎn)？、兩種藥物挽救敵百蟲中毒各有什么特點(diǎn)？如何挽救療效好？如何挽救療效好？4、運(yùn)用、運(yùn)用atropine 和和PAM 挽救后，家兔全血挽救后，家兔全血AChE 活性有何變化？活性有何變化？ M受體阻斷藥受體阻斷藥-阿托品阿托品解毒作用及原理解毒作用及原理 阿托品能競(jìng)爭(zhēng)性阻斷阿托品能競(jìng)爭(zhēng)性阻斷M受體，迅速解除受體，迅速解除M樣病癥和體征；樣病癥和體征；解除部分中樞神經(jīng)系統(tǒng)中毒病