上海交通大學(xué)果蠅雜交實(shí)驗(yàn)方案-下午一組

1、果蠅雜交實(shí)驗(yàn)方案下午一組黃士豪uh亙英李思思許迪i實(shí)驗(yàn)的目的：1.1驗(yàn)證基因伴性遺傳的規(guī)律1. 2驗(yàn)證基因連鎖與交換規(guī)律并計(jì)算重組值2. 實(shí)驗(yàn)材料：2. 1 黑腹果蠅，drosophila me 1 anogas ter果蠅是雙翅目昆蟲(chóng)，屈果蠅屈，約冇2500個(gè)種。通常作遺傳學(xué)實(shí)驗(yàn)材料 的是黑腹果蠅。2. 2黑腹果蠅生活史果蠅的生活周期長(zhǎng)短與溫度冇密切的關(guān)系。一般來(lái)說(shuō)，30°c以上的溫度能使果蠅不育或死亡，低溫能使周期延長(zhǎng)，生活力卜降，飼養(yǎng)杲蠅的最適溫度為20-25 °c o生活周期長(zhǎng)短與飼養(yǎng)溫度的關(guān)系10°c15°c20°c25°c

2、麗幼蟲(chóng)57天48天8天5天幼蟲(chóng)f成蟲(chóng)6天4天果蠅在25°c時(shí)，從卵到成蟲(chóng)需要十天左右，成蟲(chóng)可活26-33天。果蠅的 生活史如下：雌蠅f誠(chéng)數(shù)分裂f卵受精雄蠅f減數(shù)分裂f精子產(chǎn)第一批卵第一批成蟲(chóng)羽化（第八天） （可活2633天）第二次蚊皮（第二天）第一次蚊皮第一批卵孵化（第一天）果蠅?；钪芷诤透麟A段經(jīng)過(guò)的時(shí)間2. 3黑腹果蠅的飼養(yǎng)方法丙酸的作用是抑制霉菌污染，用量參照附表，每200毫升飼料約加1毫升左 右。如無(wú)酵母粉，也可用酵母液代替，但用法不同。若用酵母菌液則在飼料分 裝到培養(yǎng)瓶中以后再加入，每瓶加數(shù)滴。培養(yǎng)果蠅用的飼料瓶可用牛奶瓶，或大、屮型指管，用紗布包的棉花球作瓶 塞。實(shí)驗(yàn)室中保

3、存原種以及雜交實(shí)驗(yàn)以中指管為宜。培養(yǎng)瓶用前要消毒，而后 再裝飼料（每瓶2厘米厚即可），待飼料冷卻后，用酒精棉花擦瓶的內(nèi)壁，然 后插入消毒過(guò)的吸水紙，作幼蟲(chóng)化蛹時(shí)的干燥場(chǎng)所。2. 4研究的性狀及顯隱性伴性遺傳：野生型，紅眼（+ ）突變型，白眼（w）連鎖與交換：野生型，紅眼、氏翅、直剛毛（+、+、+）突變型，白眼、小翅、卷剛毛（ww、mm> snsn）3. 實(shí)驗(yàn)技術(shù)流程3.1親本的純種培養(yǎng)：挑選兩品系雌雄果蠅分別培養(yǎng)8天 t 挑處女蠅3. 2雜交親本的確定麻醉野生型品系，挑出10只雄果蠅，放入突變處女蠅培養(yǎng)瓶中，朵交25°c 培養(yǎng)。雜交組合雌性為突變型，雄性為野生型。3. 3雜交遺

4、傳式3. 3. 1伴性遺傳 本實(shí)驗(yàn)使月18號(hào)號(hào)生型果疑與発合白眼杲疑雜交，其中白眼相對(duì)亍紅眼是隱性性狀, 白眼基因位亍x染色體上。正交反交18$ x w sxvp x$ x 18 £px 乂$紅眼jxwy8白眼lwxw£白眼ix*y 2紅眼fi：x*x*yfi：x+xwxwy:x1mx，x 亠yx vyf2： x fx亠yx衣'$紅眼9紅眼8紅眼8白眼?紅眼傘白眼$紅眼 8白眼1:1:1 : 11:1:1 : 1伴性遺傳圖解3. 3.2三點(diǎn)測(cè)交本實(shí)臉使冋6號(hào)統(tǒng)合白眼、壽剛毛、小翅杲疑與18號(hào)弩生型杲疑雜交，義得b代后吾 自由交死即可獲得具有8種麥型的測(cè)交巳代。白眼、

5、卷剛毛、小翅均為x染色體上的 隱性性濃up 6 號(hào)辛(wnm/wnm) x 18 號(hào) £ (+/y)白卷小紅直fi： 9(+/wsnm)cf(wsnm/y)3.4后代的彳|3. 4. 1伴性遺傳實(shí)驗(yàn)記錄表： 正交：親木1： 親本2： 雜交日期：雜交后代表現(xiàn)f1代果蠅表現(xiàn)型及數(shù)口統(tǒng)計(jì)h期f2代果蠅表現(xiàn)型及數(shù)口雌白眼雌紅眼雄白眼雄紅眼總數(shù)比例1： 2： 雜交日期：雜交后代表現(xiàn)f1代果蠅表現(xiàn)型及數(shù)目統(tǒng)計(jì)f1期f2代果蠅表現(xiàn)型及數(shù)目雌白眼雌紅眼雄白眼雄紅眼總數(shù)比例3. 4. 2連鎖與交換實(shí)驗(yàn)記錄表: 三點(diǎn)測(cè)交結(jié)果統(tǒng)計(jì)：f2表型數(shù)量比例重組發(fā)生在基因w-snsnrmw-m+ + +w sn m

6、+ + mw sn + sn mw + + sn +w + m總計(jì)交換值圖距理論值w-msn-mw-sn并發(fā)率干擾4. 實(shí)驗(yàn)的步驟4. 1親本的純種培養(yǎng)4. 1. 1親本飼養(yǎng)瓶的準(zhǔn)備4.1.2果蠅的麻醉與轉(zhuǎn)瓶4.2雜交1 （伴性遺傳的觀察）4.2. 1雜交用飼養(yǎng)瓶的準(zhǔn)備第一天，將兩個(gè)品系的雌雄果蠅麻醉后進(jìn)行挑選，其中在野生型中挑出 3-4對(duì)，突變型中挑h! 7-8對(duì)，分別培養(yǎng)，25°c培養(yǎng)8天。4. 2. 2親本處女蠅的挑選第九天，7:00,將孵化的突變型成蠅麻醉后分出雌蠅，至另一培養(yǎng)瓶，培 養(yǎng)處女蠅待用。19:00,繼續(xù)挑選雌雄蠅，放入處女蠅培養(yǎng)瓶中，以后每隔12 小時(shí)挑選一次，一

7、直至挑出10只處女果蠅。4. 2. 3雄性果蠅的挑選麻醉野生型品系，挑出10只雄果蠅，放入突變處女蠅培養(yǎng)瓶中，朵交25°c 培養(yǎng)。4. 2. 4 f1代生長(zhǎng)情況的觀察上述雜交果蠅培養(yǎng)8天以后，將親代果蠅麻醉?xiàng)壢?。觀察新長(zhǎng)出的子一代 果蠅性狀，并記錄。4.2.5 f1代性狀的觀察記錄及統(tǒng)計(jì)4.3雜交2 （伴性遺傳的進(jìn)一步觀察以及連鎖與交換的觀察）4. 3.1雜交用飼養(yǎng)瓶的準(zhǔn)備4. 3. 2朵交親本的挑選與轉(zhuǎn)瓶子一代瓶中收集30對(duì)果蠅（不必再挑處女蠅），轉(zhuǎn)移至3個(gè)新的培養(yǎng)瓶屮, 每瓶10對(duì)，25°c繼續(xù)培養(yǎng)。4. 3. 3 f2代生長(zhǎng)情況的觀察8天以后，麻醉子一代果蠅，棄去。新生長(zhǎng)的果蠅是子二代果蠅，觀察性 狀并記錄。4. 3.4 f2代性狀的觀察記錄