氣相色譜法培訓(xùn)PPT課件

1、優(yōu)點(diǎn)優(yōu)點(diǎn)缺點(diǎn)缺點(diǎn)高效能、高選擇性、高靈敏高效能、高選擇性、高靈敏度、用樣量少、分析速度快度、用樣量少、分析速度快及應(yīng)用廣。及應(yīng)用廣。制備高純物質(zhì)，純度高達(dá)制備高純物質(zhì)，純度高達(dá)99.99%一切具有一定揮發(fā)性并對(duì)熱一切具有一定揮發(fā)性并對(duì)熱穩(wěn)定的化合物，包括經(jīng)處理穩(wěn)定的化合物，包括經(jīng)處理后能轉(zhuǎn)化為揮發(fā)性物質(zhì)的不后能轉(zhuǎn)化為揮發(fā)性物質(zhì)的不揮發(fā)性物質(zhì)揮發(fā)性物質(zhì)所有物質(zhì)均需轉(zhuǎn)換為氣態(tài)然所有物質(zhì)均需轉(zhuǎn)換為氣態(tài)然后進(jìn)行分析。后進(jìn)行分析。分子量大，受熱易分解的樣分子量大，受熱易分解的樣品分析比較困難。品分析比較困難。不能分析無(wú)機(jī)物。不能分析無(wú)機(jī)物。3.特點(diǎn)第1頁(yè)/共67頁(yè)4.基本流程 GC主要是利用物質(zhì)的沸點(diǎn)、

2、極性及吸附性質(zhì)的差異來(lái)實(shí)現(xiàn)混合物的分離，其過(guò)程如圖所示。圖1-1 氣相色譜流程示意圖1-高壓氣瓶（載氣源）2-減壓閥 3-氣流調(diào)節(jié)閥 4-凈化干燥管 5-壓力表 6-熱導(dǎo)池 7-進(jìn)樣口 8-色譜柱 9-恒溫箱（虛線內(nèi)）10-皂膜流量計(jì) 11-測(cè)量電橋 12-記錄儀第2頁(yè)/共67頁(yè)4.基本流程 圖中載氣由高壓氣瓶供給，經(jīng)壓力調(diào)節(jié)器降壓，凈化器凈化，又穩(wěn)壓閥調(diào)節(jié)至適宜的流量進(jìn)入色譜柱，待流量、溫度及基線穩(wěn)定后，即可進(jìn)樣。液態(tài)樣品由進(jìn)樣口注入。待分析樣品在汽化室汽化后被惰性氣體（即載氣，也叫流動(dòng)相）帶入色譜柱，柱內(nèi)含有液體或固體流動(dòng)相，由于樣品中各組分的沸點(diǎn)、極性或吸附性能不同，每種組分都傾向于在流

3、動(dòng)相和固定相之間形成分配或吸附平衡。但由于載氣是流動(dòng)的，這種平衡實(shí)際上很難建立起來(lái)，也正是由于載氣的流動(dòng)，使樣品組分在運(yùn)動(dòng)中進(jìn)行反復(fù)多次的分配或吸附/解吸，結(jié)果是在載氣中分配濃度大的組分先流出色譜柱，而在固定相中分配濃度大的組分后流出。當(dāng)組分流出色譜柱后，立即進(jìn)入檢測(cè)器。第3頁(yè)/共67頁(yè)4.基本流程 檢測(cè)器能夠?qū)悠方M分的存在與否轉(zhuǎn)變?yōu)殡娦盘?hào)，而電信號(hào)的大小與被測(cè)組分的量或濃度成比例。將這些信號(hào)放大并記錄下來(lái)時(shí)，就是如圖所示的色譜圖，它包含了色譜的全部原始信息。在沒(méi)有組分流出時(shí)，色譜圖的記錄是檢測(cè)器的本底信號(hào)，即色譜圖的基線。第4頁(yè)/共67頁(yè)4.基本流程氣相色譜流程動(dòng)畫(huà)演示第5頁(yè)/共67頁(yè)第二

4、節(jié) 儀器的基本配置氣相色譜儀1第6頁(yè)/共67頁(yè)氣相色譜儀2島津GC-2010第7頁(yè)/共67頁(yè)氣相色譜儀3Agilent 6890N第8頁(yè)/共67頁(yè)氣相色譜儀4第9頁(yè)/共67頁(yè)氣相色譜儀5第10頁(yè)/共67頁(yè)第二節(jié) 儀器的基本配置一、儀器的基本配置 氣相色譜儀是以氣相色譜法為基礎(chǔ)而設(shè)計(jì)的儀器，以氣相色譜柱為分離基礎(chǔ)，樣品注入進(jìn)樣器后經(jīng)載氣傳送，到達(dá)色譜柱分離，分離后樣品由柱中流出到達(dá)檢測(cè)器并轉(zhuǎn)換成相應(yīng)的電訊號(hào)，然后排空。目前市場(chǎng)上GC儀器型號(hào)繁多，但儀器的基本結(jié)構(gòu)是相似的，即由下面幾部分組成： 氣路系統(tǒng) 包括載氣和輔助氣的氣源以及氣路控制系統(tǒng) 進(jìn)樣系統(tǒng) 分離系統(tǒng) 包括色譜柱、柱箱以及與進(jìn)樣口和檢測(cè)

5、器的接頭 檢測(cè)系統(tǒng) 包括各種檢測(cè)器 記錄系統(tǒng)（數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)）記錄（處理） GC原始數(shù)據(jù)，獲得色譜圖 溫控系統(tǒng) 進(jìn)樣口、柱溫、檢測(cè)器溫度的控制作用是將樣品導(dǎo)入色譜柱，如自動(dòng)進(jìn)樣器、進(jìn)樣閥、各種進(jìn)樣口，以及頂空進(jìn)樣器、吹掃-捕集進(jìn)樣器裂解進(jìn)樣器等。第11頁(yè)/共67頁(yè)二、氣路系統(tǒng)第12頁(yè)/共67頁(yè)1.氣源氣源是為GC儀器提供載氣和或輔助氣體的高壓鋼瓶或氣體發(fā)生器。載氣有氮?dú)狻⒑?、氫氣等，常用氮?dú)饣蚝庾鲚d氣。TCD檢測(cè)器一 般選氫氣做載氣常見(jiàn)輔助氣為空氣和氫氣第13頁(yè)/共67頁(yè)2.氣源的凈化 GC對(duì)各種氣體的純度要求較高。因載氣起傳輸樣品和保護(hù)色譜柱的作用，故作載氣的氮?dú)?、氫氣或氦氣必須達(dá)到99.

6、99%以上，如使用低純度的載氣會(huì)使檢測(cè)器噪聲增大，出現(xiàn)多余峰。輔助氣不純，更會(huì)增大背景噪聲，縮小檢測(cè)器線性范圍，污染檢測(cè)器。因此，實(shí)際工作中要在氣源和儀器之間連接氣體凈化裝置。第14頁(yè)/共67頁(yè)2.氣源的凈化 氣體中的雜質(zhì)主要是一些永久氣體、低分子有機(jī)化合物和水蒸氣，一般采用裝有分子篩（如5A分子篩或13X分子篩）的過(guò)濾器以吸附有機(jī)雜質(zhì)，采用變色硅膠除去水蒸氣。實(shí)際操作中可根據(jù)檢測(cè)器的噪聲水平判斷氣體的純度，如噪聲明顯增大，就要首先檢查氣體純度。要定期更換凈化裝置中填料，分子篩可以重新活化后再使用，活化方法是將分子篩從凈化裝置中取出，置于坩堝中，在馬弗爐內(nèi)加熱到400600，活化46小時(shí)。硅膠

7、變紅時(shí)也要進(jìn)行活化，方法是置烘箱中，140左右加熱2小時(shí)即可。比較簡(jiǎn)單的方法就是在一個(gè)凈化裝置中裝有一半硅膠、一半分子篩，如果硅膠變紅，就可更換全部填料。第15頁(yè)/共67頁(yè)3. 氣體的控制和測(cè)定 為保證色譜定性和定量分析的準(zhǔn)確性和重現(xiàn)性，載氣的流量要求恒定（變化小于1%）,尤其是毛細(xì)管GC中，色譜柱內(nèi)載氣流量一般為13ml/min，如果控制不精確，就會(huì)造成保留時(shí)間的不重現(xiàn)。一般采用減壓閥，穩(wěn)壓閥或穩(wěn)壓閥和穩(wěn)流閥串聯(lián)使用，以控制流速的穩(wěn)定。流速計(jì)用以測(cè)量氣體流速。常用的有轉(zhuǎn)子流量計(jì)和皂膜流量計(jì)等。氣體流速是指單位時(shí)間內(nèi)通過(guò)色譜柱或檢測(cè)器的氣體體積，以ml/min表示。采用23mm內(nèi)徑填充柱用氮?dú)?/p>

8、做載氣時(shí)，流速在3060ml/min現(xiàn)代儀器有電子流量檢測(cè)器和電子壓力控制器（EPC）4. 氣路系統(tǒng)常見(jiàn)問(wèn)題實(shí)際工作中，氣路系統(tǒng)最常出現(xiàn)的問(wèn)題是泄漏，一旦某處發(fā)上泄漏，輕則影響儀器正常工作，重則造成意外事故（如氫氣泄漏就可能引起爆炸），所以要經(jīng)常注意檢漏。第16頁(yè)/共67頁(yè)三、進(jìn)樣系統(tǒng)1. 進(jìn)樣器 把樣品通進(jìn)（引入）色譜柱的元件稱為進(jìn)樣器，其中包括汽化室和進(jìn)樣工具，汽化室的作用是將液體或固體樣品瞬間汽化為蒸汽。進(jìn)樣工具常有定量閥和注射器。第17頁(yè)/共67頁(yè)2.汽化室 樣品進(jìn)入汽化室汽化并用載氣傳入色譜柱，故必須要在一定的穩(wěn)定溫度下工作。其高和低都會(huì)對(duì)樣品汽化和進(jìn)入色譜柱后的分離產(chǎn)生影響，溫度低

9、，樣品汽化不完全，產(chǎn)生伸舌峰，并對(duì)下次試驗(yàn)和本次試驗(yàn)分析數(shù)據(jù)造成影響，溫度太高，會(huì)造成樣品的分解，影響儀器使用壽命，同樣使分析數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確。所以我們?cè)谶x擇進(jìn)樣器（汽化室）溫度時(shí)，一般可比樣品中組分沸點(diǎn)最高的溫度再高3040，但不能高于樣品的分解溫度和儀器最高使用溫度。第18頁(yè)/共67頁(yè)3.常見(jiàn)進(jìn)樣口及其選擇對(duì)于熱穩(wěn)定的樣品，分流/不分流進(jìn)樣口是優(yōu)先的選擇。但對(duì)熱不穩(wěn)定的樣品，或者有易分解組分的樣品，必須考慮進(jìn)樣口溫度的設(shè)置以及汽化室的惰性問(wèn)題。進(jìn)樣口溫度高，或者汽化室表面有活性催化點(diǎn)（如金屬或玻璃表面的金屬離子），就可能引起樣品分解。采用不分流進(jìn)樣時(shí)，更容易發(fā)生樣品降解，使色譜圖上出現(xiàn)更多的風(fēng)，

10、使分析準(zhǔn)確度下降。因此，在保證樣品有效汽化的前提下，進(jìn)樣口溫度低一些有助于防止樣品降解。采用高的分流流量、對(duì)進(jìn)樣口內(nèi)表面進(jìn)行脫活處理，都是防止樣品降解的措施。第19頁(yè)/共67頁(yè)第20頁(yè)/共67頁(yè)表2-1 常見(jiàn)GC進(jìn)樣口和進(jìn)樣技術(shù)進(jìn)樣口和進(jìn)樣技術(shù)進(jìn)樣口和進(jìn)樣技術(shù)特點(diǎn)特點(diǎn)填充柱進(jìn)樣填充柱進(jìn)樣分流不分流進(jìn)樣分流不分流進(jìn)樣頂空進(jìn)樣頂空進(jìn)樣冷柱上進(jìn)樣冷柱上進(jìn)樣程序升溫汽化進(jìn)樣程序升溫汽化進(jìn)樣大體積進(jìn)樣大體積進(jìn)樣 最簡(jiǎn)單的進(jìn)樣口：所有汽化樣品進(jìn)入色譜柱；可接玻璃和最簡(jiǎn)單的進(jìn)樣口：所有汽化樣品進(jìn)入色譜柱；可接玻璃和不銹鋼填充柱，也可接大口徑毛細(xì)管柱直接進(jìn)樣不銹鋼填充柱，也可接大口徑毛細(xì)管柱直接進(jìn)樣 最常用的

11、毛細(xì)管柱進(jìn)樣口：分流進(jìn)樣最為普遍，操作簡(jiǎn)單，最常用的毛細(xì)管柱進(jìn)樣口：分流進(jìn)樣最為普遍，操作簡(jiǎn)單，但有分流歧視和樣品分解的問(wèn)題但有分流歧視和樣品分解的問(wèn)題不分流進(jìn)樣雖然操作稍微不分流進(jìn)樣雖然操作稍微復(fù)雜一些，但分析靈敏度高，常用于痕量分析復(fù)雜一些，但分析靈敏度高，常用于痕量分析 只取復(fù)雜樣品基體上方的氣體部分進(jìn)行分析，有靜態(tài)頂空只取復(fù)雜樣品基體上方的氣體部分進(jìn)行分析，有靜態(tài)頂空和動(dòng)態(tài)頂空（吹掃和動(dòng)態(tài)頂空（吹掃-捕集）之分，適用于環(huán)境分析（如水中有捕集）之分，適用于環(huán)境分析（如水中有機(jī)污染物）、食品分析（如氣味分析）及固體材料中的可揮機(jī)污染物）、食品分析（如氣味分析）及固體材料中的可揮發(fā)物分析等發(fā)

12、物分析等 樣品以液態(tài)形式直接進(jìn)入色譜柱，無(wú)分流歧視問(wèn)題，分析樣品以液態(tài)形式直接進(jìn)入色譜柱，無(wú)分流歧視問(wèn)題，分析精度高，重現(xiàn)性好，尤其適用于沸點(diǎn)范圍寬、或者不穩(wěn)定的精度高，重現(xiàn)性好，尤其適用于沸點(diǎn)范圍寬、或者不穩(wěn)定的樣品，也常用于痕量分析（可進(jìn)行柱上濃縮）樣品，也常用于痕量分析（可進(jìn)行柱上濃縮） 將分流不分流和冷柱上樣結(jié)合起來(lái)，功能多，適用范圍廣，將分流不分流和冷柱上樣結(jié)合起來(lái)，功能多，適用范圍廣，是較為理想的是較為理想的GC進(jìn)樣口進(jìn)樣口 采取程序升溫汽化或冷柱上樣，配合以溶劑放空功能，進(jìn)采取程序升溫汽化或冷柱上樣，配合以溶劑放空功能，進(jìn)樣量可達(dá)幾百微升，甚至更高，可大大提高分析靈敏度，在樣量可

13、達(dá)幾百微升，甚至更高，可大大提高分析靈敏度，在環(huán)境分析中應(yīng)用廣泛，但操作較為復(fù)雜環(huán)境分析中應(yīng)用廣泛，但操作較為復(fù)雜第21頁(yè)/共67頁(yè)表2-1 常見(jiàn)GC進(jìn)樣口和進(jìn)樣技術(shù)（續(xù)）進(jìn)樣口和進(jìn)樣技術(shù)進(jìn)樣口和進(jìn)樣技術(shù)特點(diǎn)特點(diǎn)閥進(jìn)樣閥進(jìn)樣 常用六通閥定量引入氣體或液體樣品，重現(xiàn)性好，容易實(shí)常用六通閥定量引入氣體或液體樣品，重現(xiàn)性好，容易實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化，但樣品對(duì)峰展寬的影響大，常用于永久氣體的分現(xiàn)自動(dòng)化，但樣品對(duì)峰展寬的影響大，常用于永久氣體的分析，以及化工工藝過(guò)程中物料流的監(jiān)測(cè)。析，以及化工工藝過(guò)程中物料流的監(jiān)測(cè)。 裂解進(jìn)樣裂解進(jìn)樣在嚴(yán)格控制的高溫下將不能汽化或部分不能汽化的樣品裂解在嚴(yán)格控制的高溫下將不能汽化

14、或部分不能汽化的樣品裂解成可汽化的小分子化合物，進(jìn)而用成可汽化的小分子化合物，進(jìn)而用GC分析，適用于聚合物分析，適用于聚合物樣品或地礦樣品等。樣品或地礦樣品等。第22頁(yè)/共67頁(yè)4.隔墊和襯管 隔墊：也叫進(jìn)樣口密封墊，隔墊與襯管如圖所示。 隔墊有老化漏氣的問(wèn)題，所以要注意選擇耐高溫的隔墊，并定期檢查是否漏氣，必要時(shí)及時(shí)更換，以保證分析的正常進(jìn)行（如何選擇隔墊，判斷是否漏氣及更換見(jiàn)后維護(hù)章節(jié)）第23頁(yè)/共67頁(yè)4.隔墊和襯管 襯管：多為玻璃或石英材料制成。使用應(yīng)注意如下問(wèn)題： 1）襯管能起到保護(hù)色譜柱的作用。因此，一定要保持襯管干凈，注意及時(shí)清洗和更換。 2）襯管內(nèi)表面的活性點(diǎn)可能導(dǎo)致樣品杯吸附

15、或分解，故要進(jìn)行脫活 處理。因此在分析極性樣品時(shí)，要注意及時(shí)更換襯管或重新硅烷化。 3）襯管中是否要填充填料，要依據(jù)情況而定。一般填少量經(jīng)硅烷化處理石英玻璃毛可防止注射器針尖的歧視作用，加速樣品汽化；還可避免顆粒物質(zhì)堵塞色譜柱。第24頁(yè)/共67頁(yè)5. 手動(dòng)進(jìn)樣與自動(dòng)進(jìn)樣 1）注射速度 注射深度、速度和位置對(duì)峰高、峰面積都有影響。注射速度慢時(shí)會(huì)使樣品的汽化過(guò)程變長(zhǎng)，導(dǎo)致樣品進(jìn)入色譜柱的初始譜帶變寬。注射樣品所用時(shí)間及注射器在汽化室中停留的時(shí)間越短越好。 2）取樣準(zhǔn)確而重現(xiàn) 及取樣量要準(zhǔn)確，抽取樣品的速度要重現(xiàn)，以保證進(jìn)樣的重現(xiàn)性。特別是粘度大的樣品，要避免在注射器中形成氣泡。 3）避免樣品之間的

16、相互干擾 如果進(jìn)樣時(shí)注射器內(nèi)有前一個(gè)樣品的殘留組分，就會(huì)干擾下一個(gè)樣品的分析，帶來(lái)定量誤差，在色譜中這叫記憶效應(yīng)，必須消除。具體辦法是反復(fù)洗針，取樣前先用供試品溶劑洗針至少3次(抽滿針管的2/3，再排出)，再用要分析的供試品洗針至少3次。如果同時(shí)有幾個(gè)樣品進(jìn)行分析，且要交替進(jìn)樣（如用外標(biāo)法分析時(shí)，可能對(duì)標(biāo)樣和實(shí)際樣品交替進(jìn)樣），則最好是每個(gè)樣品各用一個(gè)注射器 。第25頁(yè)/共67頁(yè)5. 手動(dòng)進(jìn)樣與自動(dòng)進(jìn)樣 4）選用合適的注射器 GC分析進(jìn)樣一般不小于1l。如果進(jìn)樣量要控制在1l以下，就應(yīng)采用5l或1l的注射器。但是應(yīng)注意，此類的注射器往往是將樣品抽在針芯內(nèi)，因此觀察不到針管中的液面，故很可能抽入

17、氣泡。取樣時(shí)反復(fù)推拉針芯，以確保針芯內(nèi)沒(méi)有氣泡。 5）減少注射歧視 所謂注射歧視是指進(jìn)樣針插入GC進(jìn)樣口時(shí)，針尖內(nèi)的溶劑和樣品中的易揮發(fā)組分首先開(kāi)始汽化，無(wú)論注射速度多快，不同沸點(diǎn)的組分總是有汽化速度的差異。當(dāng)注射完畢抽出針尖時(shí)，注射器中殘留樣品的組成就與實(shí)際樣品的組成有所不同。如果能保證每次進(jìn)樣的速度嚴(yán)格一致（如使用自動(dòng)進(jìn)樣器），經(jīng)標(biāo)樣校正后，可忽略這一歧視作用。第26頁(yè)/共67頁(yè)四、分離系統(tǒng)分離系統(tǒng)由色譜柱組成，它是色譜儀的核心部件，其作用是分離樣品。色譜柱主要有兩類：填充柱和毛細(xì)管柱。1、填充柱 填充柱由不銹鋼或玻璃材料制成，內(nèi)裝固定相，一般內(nèi)徑為24mm，長(zhǎng)13m。填充柱的形狀有U形和

18、螺旋形兩種。 2、毛細(xì)管柱 毛細(xì)管柱又叫空心柱，分為涂壁，多空層和涂載體空心柱。涂壁空心柱是將固定液均勻涂在內(nèi)徑0.10.5mm的毛細(xì)管內(nèi)壁而成，毛細(xì)管材料可以是不銹鋼，玻璃或石英。毛細(xì)管柱滲透性好，傳質(zhì)阻力小，而且柱子可以做到長(zhǎng)幾十米。與填充柱相比，其分離效率高（理論板數(shù)可達(dá)106）、分析速度快、樣品用量小，但柱容量低、要求檢測(cè)器的靈敏度高，并且制備較難。第27頁(yè)/共67頁(yè)五、檢測(cè)系統(tǒng)氣相色譜檢測(cè)器是把載氣里被分離的各組分的濃度或質(zhì)量轉(zhuǎn)換成電信號(hào)的裝置。目前檢測(cè)器種類多達(dá)數(shù)十種。根據(jù)檢測(cè)原理的不同，可將其分為濃度型檢測(cè)器和質(zhì)量型檢測(cè)器兩種： 1）濃度型檢測(cè)器 測(cè)量的是載氣中某組分濃度瞬間的變

19、化，即檢測(cè)器的響應(yīng)值和組分的濃度成正比。如熱導(dǎo)檢測(cè)器和電子捕獲檢測(cè)器。 2）質(zhì)量型檢測(cè)器 測(cè)量的是載氣中某組分進(jìn)入檢測(cè)器的速度變化，即檢測(cè)器的響應(yīng)值和單位時(shí)間內(nèi)進(jìn)入檢測(cè)器的某組分的量成正比。如火焰離子化檢測(cè)器和火焰光度檢測(cè)器等。氣相色譜檢測(cè)器有：火焰離子化檢測(cè)器（FID）、熱導(dǎo)檢測(cè)器（TCD）、電子俘獲檢測(cè)器（ECD）、火焰光度檢測(cè)器（FPD)、氮磷檢測(cè)器（NPD）光離子化檢測(cè)器（PID）、紅外光譜檢測(cè)器（IRD）和質(zhì)譜檢測(cè)器（MSD）等。在藥物分析中火焰離子化檢測(cè)器（FID）是最常用的檢測(cè)器第28頁(yè)/共67頁(yè)六、記錄系統(tǒng)（數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)）該系統(tǒng)是指樣品經(jīng)色譜柱分離后，各成分按保留時(shí)間不同，順序

20、地隨載氣進(jìn)入檢測(cè)器，檢測(cè)器把進(jìn)入的組分按時(shí)間及濃度或質(zhì)量變化，轉(zhuǎn)化成易于測(cè)量的電信號(hào)，經(jīng)過(guò)必要的放大傳遞給記錄儀或計(jì)算機(jī)，最后得到該樣品的色譜流出曲線及定性和定量信息。第29頁(yè)/共67頁(yè)第三節(jié) 色譜柱 化合物的分離都是由色譜柱來(lái)完成的，因此色譜柱制備/選擇的是否合適、操作條件是否恰當(dāng)，是決定成敗的關(guān)鍵，它是色譜儀中最重要的部分。色譜柱的選擇是確定分析方法的一個(gè)重要步驟。要求選擇的色譜柱既能滿足分離的要求，又能滿足快速定性與定量的目的。 如前所述，氣相色譜柱有兩種，及填充柱和毛細(xì)管柱。一、 填充柱 填充柱是指固定相在內(nèi)徑約為26mm的柱管內(nèi)而成的色譜柱。填充的固定相種類很多，按固定相的物理狀態(tài)，

21、可分為液體固定相和固體固定相兩大類，對(duì)應(yīng)填充柱分為氣-液填充柱和氣-固填充柱。 液體固定相大多為高沸點(diǎn)的有機(jī)化合物，一般呈液態(tài)，稱為固定液。固定液不能直接裝在色譜柱內(nèi)，而是將它涂漬在一種顆粒狀的固體表面上，這種固體顆粒稱為載體（擔(dān)體）。 固體固定相包括固體吸附劑、多孔性聚合物等。第30頁(yè)/共67頁(yè)一、 填充柱 填充柱由于制備簡(jiǎn)單，可供選擇的吸附劑、固定液和載體種類很多，因而具有廣泛的適用性，能解決很多混合樣品的分離分析問(wèn)題，是普遍應(yīng)用的一種氣相色譜柱。 填充柱按柱管管徑粗細(xì)分成一般填充柱和填充毛細(xì)管柱。一般填充柱常用內(nèi)徑為26mm的柱管，由于固定相用量較大，樣品負(fù)荷高，但柱滲透性小、傳質(zhì)阻力大

22、，因此柱效低。（一）氣-液填充柱 1.載體 載體又稱擔(dān)體、固體支持物。它可提供一個(gè)大的惰性固體表面，讓固定液分布在上面，形成一均勻薄層液膜，是固定液具有較大的物質(zhì)交換表面，樣品容易在氣-液（流動(dòng)相-固定相）間建立分配平衡。氣-液色譜的固定相就是由載體和固定液所構(gòu)成的。第31頁(yè)/共67頁(yè)1.載體（1）載體的要求 1）有足夠大的表面積，具有良好的孔穴結(jié)構(gòu)，以使固定液可以均勻分布成一薄膜，但載體的表面積不宜太大，否則猶如吸附劑，易造成峰拖尾。 2）具有化學(xué)惰性，不予任何樣品和固定液起化學(xué)反應(yīng)，不具有吸附性，但對(duì)固定液應(yīng)有良好的浸潤(rùn)性。 3）形狀規(guī)則，大小均勻，具有一定得機(jī)械強(qiáng)度。第32頁(yè)/共67頁(yè)1

23、.載體（2）載體分類第33頁(yè)/共67頁(yè)1.載體（3）載體表面的處理 載體的表面處理即通過(guò)酸洗、堿洗、硅烷化、秞化的方法提高載體的惰性，較少色譜峰的拖尾。 由于載體表面具有硅醇（Si-OH）和硅醚（Si-O-Si）結(jié)構(gòu)，并有少量的金屬（鐵）氧化物（特別是紅色載體）。因此表面存在著氫鍵和酸堿活性作用點(diǎn)，是色譜峰拖尾，柱效和靈敏度下降，保留值改變，定量不準(zhǔn)，因此要進(jìn)行表面處理出去表面活性作用點(diǎn)。酸洗主要是去除載體表面的鐵等金屬氧化物，用于分析酸和酯類化合物；堿洗是去除表面的Al2O3等酸性作用點(diǎn)，用于分析胺類等堿性化合物；硅烷化是用硅烷化試劑盒硅醇、硅醚集團(tuán)反應(yīng)，去除表面的氫鍵結(jié)合力，達(dá)到表面惰性化

24、。第34頁(yè)/共67頁(yè)2.固定液 （1）定義 固定液一般都是一些高沸點(diǎn)的有機(jī)化合物，在操作溫度下為液態(tài)室溫時(shí)為固態(tài)或液態(tài)。（2）要求 在操作溫度下蒸汽壓低，熱穩(wěn)定性好，樣品各組分在其中應(yīng)有足夠的溶解能力，選擇性高，即對(duì)兩個(gè)沸點(diǎn)相同或接近但屬于不同類型化合物有盡可能高的分離能力。（3）分類1）烴類 包括烷烴和芳烴，是極性最弱的一類固定液。 烷烴常用的有角鯊?fù)?、阿皮松等。角鯊?fù)闃O性最小，也成為“標(biāo)準(zhǔn)固定液”適合分離非極性化合物。2）聚硅氧烷類 是目前使用最為廣泛的固定液第35頁(yè)/共67頁(yè)（3）分類3）醇類 一種為長(zhǎng)鏈脂肪酸（十六碳醇及十八碳醇）和多元醇（如甘油、丁四醇、環(huán)己六醇）。另一種為聚二醇，主

25、要指聚乙二醇和聚丙二醇，其中PEG-20M最為常用。4）酯類 分酯與聚酯兩種。其中鄰苯二甲酸二壬酯（DNP）是分析低沸點(diǎn)化合物最常用的固定液。常用的聚酯固定液有丁二酸二乙二醇聚酯（DEGS）和己二酸二乙二醇聚酯（DEGA）等5）其他類固定液2.固定液第36頁(yè)/共67頁(yè)2.固定液（4）固定液的選擇 固定液的選擇取決于樣品的組成。一般按“相似相溶”原則，所謂“相似”意指化學(xué)結(jié)構(gòu)、相對(duì)極性相似，也就是非極性樣品用非極性固定液，而極性樣品用極性固定液。非極性樣品在非極性固定液上按沸點(diǎn)順序被分離，如果是極性與非極性化合物，則同沸點(diǎn)的極性物質(zhì)先洗脫。隨著固定液極性的增加，極性物質(zhì)被保留越來(lái)越長(zhǎng)，非極性物質(zhì)

26、保留時(shí)間越來(lái)越短，最后直到極性物質(zhì)與非極性物質(zhì)的洗脫順序完全顛倒過(guò)來(lái)。如烴類化合物最好用烴類固定液，極性化合物用極性固定液，如醇用聚乙二醇。下表將各類化合物按極性強(qiáng)弱（形成氫鍵的能力）分為5組第37頁(yè)/共67頁(yè)第一組第一組（最強(qiáng)極性（最強(qiáng)極性氫鍵型）氫鍵型）第二組第二組（強(qiáng)極性）（強(qiáng)極性）第三組第三組（中等極性）（中等極性）第四組第四組（弱極性）（弱極性）第五組第五組（非極性）（非極性）水水二醇、甘油等二醇、甘油等氨基醇類氨基醇類羥酸類羥酸類多酚類多酚類二羥酸類二羥酸類脂肪酸類脂肪酸類酚類酚類伯與仲胺類伯與仲胺類肟類（肟類（R2C=N-OH）含含-氫原子的硝基化氫原子的硝基化合物合物含含-氫原

27、子的腈化物氫原子的腈化物氨、氨、HF、肼、肼、HCN酮類酮類醛類醛類酯類酯類叔胺類叔胺類不含不含-氫原子氫原子的硝基化合物的硝基化合物不含不含-氫原子氫原子的腈化物的腈化物二氯甲烷二氯甲烷氯仿氯仿氯乙烷氯乙烷芳香烴類芳香烴類烯烴烯烴l類類飽和碳?xì)浠镲柡吞細(xì)浠顲S2硫醇類硫醇類硫化物類硫化物類不包含在第四不包含在第四組的鹵化碳如組的鹵化碳如CCl4表3-1 各類化合物按極性強(qiáng)弱表第38頁(yè)/共67頁(yè)角鯊?fù)椋⊿Q） 小甲基硅橡膠（SE-30）苯基（50%）甲基聚硅氧烷（OV-17）-氰乙基（25%）甲基聚硅氧烷（XE-60）聚乙二醇20M（PEG-20M）己二酸二乙二醇聚酯（DEGA）丁二酸二乙

28、二醇聚酯（DEGS） 大常見(jiàn)固定液極性順序第39頁(yè)/共67頁(yè)（4）固定液的選擇 1）按極性選擇 對(duì)非極性成分，一般選擇非極性固定液、低沸點(diǎn)的先出柱，高沸點(diǎn)的后出柱。對(duì)中等極性成分，一般選擇中等極性固定液?；景捶悬c(diǎn)順序出峰，對(duì)非典相同的機(jī)型和非極性組分，非極性組分先出柱。對(duì)于強(qiáng)極性組分，選用強(qiáng)極性固定液。樣品組分按極性順序出柱，非極性與弱極性組分先出柱，極性組分后出柱。 2）按化學(xué)官能團(tuán)選擇 當(dāng)選擇的固定液分子所具有的化學(xué)官能團(tuán)與組分分子的化學(xué)官能團(tuán)相同時(shí)，則相互作用力最強(qiáng)，選擇性高。如分析酯類化合物時(shí)，選用酯類或聚酯類固定液；分析醇類化合物時(shí)，可選用聚乙二醇等 3）按主要差別選擇如果樣品中各

29、組分之間主要差別為沸點(diǎn)時(shí)，可選用非極性固定液；主要差別是極性時(shí)，可選用極性固定液第40頁(yè)/共67頁(yè)（4）固定液的選擇 4）使用混合固定液 在分析一些復(fù)雜樣品或異構(gòu)體時(shí)，使用一種固定液難以分離，需要采用混合固定液。3.氣-液填充柱的制備及操作注意事項(xiàng)（1）制備要求填充柱的制備方法，目前尚未完全規(guī)范化，制備方法不盡相同。但均應(yīng)達(dá)到以下幾條基本要求：1）盡可能篩選粒度分布均勻的載體填充；2）盡量使固定液在載體表面涂漬均勻，同時(shí)使殘存的載體表面活性中心全部被固定液覆蓋；3）固定相填料在色譜柱內(nèi)要填充均勻，不允許柱管內(nèi)存在死體積；4）避免載體顆粒破碎。因載體破碎后，未經(jīng)處理或未涂漬的表面暴露出來(lái)，產(chǎn)生吸

30、附，造成拖尾；破碎的細(xì)顆粒導(dǎo)致柱壓增高，降低載氣線速，分析時(shí)間延長(zhǎng)第41頁(yè)/共67頁(yè)（2）固定液的涂漬 根據(jù)固定液選擇合適的溶劑。溶劑對(duì)固定液應(yīng)有足夠的溶解能力，二本身要有適宜的揮發(fā)性。 （3）操作注意事項(xiàng) 1）固定液有商品級(jí)和色譜級(jí)之分，商品級(jí)的填充后需要老化幾天方能使基線平直，推薦用色譜級(jí)； 2）色譜柱安裝要注意方向，接抽氣機(jī)的一側(cè)與檢測(cè)器相連；色譜柱不用時(shí)，兩端應(yīng)密塞，以防止空氣中氧或水汽進(jìn)入色譜柱，提拿時(shí)小心輕放，避免劇烈震動(dòng)，以免固定液液膜破裂。 3）色譜柱長(zhǎng)期使用后，如發(fā)現(xiàn)保留時(shí)間變短，分離效率顯著下降或峰形變寬時(shí)，應(yīng)及時(shí)更換。3.氣-液填充柱的制備及操作注意事項(xiàng)第42頁(yè)/共67頁(yè)

31、4.填充柱的老化（1）老化目的 除去殘留溶劑和易揮發(fā)性物質(zhì)，促使固定液液膜均勻、牢固地附著在載體表面 （3）老化方法 常溫固定液可在使用溫度下老化；使用溫度較高的固定液，可在比其最高使用溫度低2030的條件下，通低流速載氣老化至基線平直。柱子日常使用中積存的高沸物，也可進(jìn)行二次老化。老化時(shí)柱子應(yīng)斷開(kāi)檢測(cè)器以免污染。第43頁(yè)/共67頁(yè)（二）氣-固填充柱 氣-固填充柱是由固體固定相與金屬柱管或玻璃柱管組成 固體固定相可分為吸附劑與高分子微球兩類： （1）吸附劑常見(jiàn)的有活性炭、硅膠、氧化鋁及分子篩四種。多是用于分離永久氣體及低級(jí)烴類，在藥物分析上應(yīng)用不多 （2）高分子多空微球 又稱高分子多空小球。這

32、是一類新型合成有機(jī)固定相。它是苯乙烯和二乙烯苯聚合而成的高聚物。屬于非極性固定相。弱在聚合室引入不同的基團(tuán)，就得到一定機(jī)極性的高聚物。分離機(jī)制，一般認(rèn)為它具有吸附、分配及分子篩三種作用。在藥物分析中應(yīng)用很廣（相對(duì)的）第44頁(yè)/共67頁(yè)二、 毛細(xì)管柱 1.簡(jiǎn)介 氣相色譜毛細(xì)管柱因其高分離能力、高靈敏度、高分析速度等獨(dú)特優(yōu)點(diǎn)而得到迅速發(fā)展。隨著彈性石英交聯(lián)毛細(xì)管柱技術(shù)的日益成熟和性能的不斷完善，已成為分離復(fù)雜多組分混合物、及多項(xiàng)目分析的主要手段，在各領(lǐng)域應(yīng)用中大有取代填充柱的趨勢(shì)?，F(xiàn)在新型氣相色譜儀、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀基本上都是采用毛細(xì)管色譜柱進(jìn)行分離分析。 2.毛細(xì)管柱結(jié)構(gòu)特點(diǎn) 1）不裝填料，

33、阻力小，長(zhǎng)度可達(dá)百米的毛細(xì)管柱，管徑0.2mm0.32mm。2）氣流單途徑通過(guò)柱子，消除了組分在柱中的渦流擴(kuò)散。3）固定液直接涂在管壁上，總柱內(nèi)壁面積較大,涂層很薄，則傳質(zhì)阻力大大降低。4）毛細(xì)管色譜柱柱效高達(dá)每米30004000塊理論塔板，一支長(zhǎng)度100米的毛細(xì)管柱，總的理論塔板數(shù)可達(dá)104106。 第45頁(yè)/共67頁(yè)二、 毛細(xì)管柱 3.毛細(xì)管柱的類型毛細(xì)管柱按其制備方法可分為以下幾種： 涂壁開(kāi)管柱（wall coated opentubular，WCOT柱）：將固定液直接涂敷在管內(nèi)壁上。柱制作相對(duì)簡(jiǎn)單，但柱制備的重現(xiàn)性差、壽命短。多孔層開(kāi)管柱（porous layer open tubul

34、ar，PLOT柱）：在管壁上涂敷一層多孔性吸附劑固體微粒。構(gòu)成毛細(xì)管氣固色譜。主要用于永久氣體和低分子量有機(jī)化合物的分離。載體涂漬開(kāi)管柱（support coated open tubular，SCOT柱）：將非常細(xì)的擔(dān)體微粒粘接在管壁上，再涂固定液。柱效較WCOT柱高，但由于制備復(fù)雜，應(yīng)用不太普遍?；瘜W(xué)鍵合或交聯(lián)柱：將固定液通過(guò)化學(xué)反應(yīng)鍵合在管壁上或交聯(lián)在一起。使柱效和柱壽命進(jìn)一步提高。第46頁(yè)/共67頁(yè) 3.選擇 就常規(guī)分析來(lái)說(shuō)，0.20mm0.32mm內(nèi)徑的毛細(xì)管柱沒(méi)有太大差別，只是在作GC/MS分析時(shí)，內(nèi)徑小的色譜柱在滿足離子源高真空度要求方面更為有利一些。大口徑（0.53mm）是一類

35、特殊的毛細(xì)管柱，它的液膜厚度一般較大（最厚可達(dá)5m）故有較大的柱容量，可以代替填充柱，不僅因?yàn)槠渲萘拷咏畛渲?，可以連接在填充柱進(jìn)樣口采用不分流進(jìn)樣，而且柱效高于填充柱，程序升溫性能也好，故可獲得比填充柱更有效更快速的分離，其定量分析精度安全可以與填充柱相比。 常規(guī)分析中選擇色譜柱主要是考慮固定液的問(wèn)題。WCOT柱常用的固定液有OV-1、SE30、OV-101、SE-51、OV-17、OV-1701,FFAP及PEG-20M等。由于固定液改性及涂漬工藝不同，采用同一固定液的色譜柱在性能上也有區(qū)別。第47頁(yè)/共67頁(yè)常用的不同廠商毛細(xì)管柱牌號(hào)對(duì)照極性極性固定液固定液AgielntJ&W

36、SupelcoAlltechSGEChrompak非極性非極性弱極性弱極性中極性中極性強(qiáng)極性強(qiáng)極性O(shè)V-1SE-30SE-54SE-52OV-5OV-1701OV-17PEC-20MFFAPHP-1Ualtra-1HP-5Ultra-2HP-5HP-17HP-50+HP-20MHP-FFAPDB-1DB-5DB-1701DB-WAXSPB-1SPB-5SPB-7Supelcowax10AT-1AT-5AT-1701AT-50AT-WAXBP-1AC-1BP-5AC-5BP-10AC-10BP-20AC-20CP-SiL5CBCP-SiL8CBCP-SiL19CBCP-SiL24CBCP-Wax

37、52CBCP-Wax54CB第48頁(yè)/共67頁(yè)毛細(xì)管色譜柱牌號(hào)固定相組成對(duì)照HP固定相固定相組成組成極性極性相似固定相相似固定相HP-1HP-5HP1301HP-1701HP-50+HP-INNOWAXHP-WaxHP-FFAP100%二甲基聚硅氧烷二甲基聚硅氧烷(5%)-二苯基（二苯基（95%）二甲基聚硅氧烷二甲基聚硅氧烷(6%)-氰丙苯基（氰丙苯基（94%）-二甲基硅氧烷共聚物二甲基硅氧烷共聚物(14%)-氰丙苯基氰丙苯基（86%）-二甲基硅氧二甲基硅氧烷共聚物烷共聚物(50%)-二苯基二苯基（50%）-二甲基苯基二甲基苯基硅氧烷共聚物硅氧烷共聚物INNO相相TM鍵合鍵合聚乙二醇聚乙二醇鍵

38、合鍵合/交聯(lián)聚乙二醇交聯(lián)聚乙二醇TAP改性聚乙二醇改性聚乙二醇非極性非極性非極性非極性弱至中極弱至中極性性中極性中極性中極性中極性極性極性極性極性極性極性DB-1,SPB-1, CP-SiL5CB,OV-1,SE-30DB-5,SPB-5, CP-SiL8CB,SE-54,SE-52DB-1301,DB624,CP-624DB-1701,SPB-7,SPB-1701,BP-10,OV-1701CP-SiL9CBDB-17,OV-17,SPB-50,SPB2250Carbowax20M,BP-20,CP-Wax52CBDB-WAXetrDB-Wax，Carbowax20MOV-351,SP-10

39、00,第49頁(yè)/共67頁(yè) 3.選擇 通常，一個(gè)常規(guī)實(shí)驗(yàn)室主要購(gòu)置四種毛細(xì)管柱，就可以應(yīng)付90%以上的GC分析任務(wù)。這四種柱子是：OV-1、SE-54、OV-17以及PEG-20M柱。 4. 維護(hù) 每次新安裝色譜柱后，都要在進(jìn)樣前進(jìn)行老化。具體辦法是，先接通載氣，然后將柱溫從60左右以510/min的速率程序升溫到色譜柱的最高使用溫度以下30（如HP-5柱可到280）或者實(shí)際分析操作溫度以上30（如分析用240，老化溫度應(yīng)為270）并在高溫時(shí)保持30到120min，直到所記錄的基線穩(wěn)定為止。如果基線難以穩(wěn)定，重復(fù)老化幾次也可在高溫下恒定更長(zhǎng)時(shí)間。色譜柱使用一段時(shí)間后，柱內(nèi)會(huì)滯留一些高沸點(diǎn)組分，這

40、時(shí)基線可能會(huì)出現(xiàn)波動(dòng)或鬼峰。解決此問(wèn)題辦法也是老化。第50頁(yè)/共67頁(yè)4. 維護(hù) 暫時(shí)不用的色譜柱從儀器上卸下后，柱兩端應(yīng)用一塊硅橡膠堵上，并放在相應(yīng)包裝盒內(nèi)，以防柱頭被污染。每次關(guān)機(jī)前都應(yīng)將柱溫箱溫度降至50以下，然后在關(guān)電源和載氣。如果在溫度高時(shí)切斷載氣，可能會(huì)因?yàn)榭諝猓ㄑ鯕猓U(kuò)散進(jìn)柱管而造成固定液的降解5.色譜柱的修理柱壽命的主要標(biāo)志是固定液流失太多而失去分離能力，柱管堵塞和斷裂也是柱失效的原因。因?yàn)楦叻悬c(diǎn)的極性化合物的吸附而使色譜柱喪失分離能力，可進(jìn)行清洗和修理。具體辦法是先高溫老化柱子，若仍不能恢復(fù)，就卸下柱子，將柱頭截去10cm或更長(zhǎng)（柱頭容易被污染）再裝上柱子測(cè)試。這是常用恢復(fù)措

41、施。如還不起作用，可再反復(fù)注射溶劑清洗，常用的溶劑一次為丙酮、甲苯、乙醇，每次510l。第51頁(yè)/共67頁(yè)第四節(jié) 檢測(cè)器一、 檢測(cè)器的特點(diǎn)與選擇 一個(gè)優(yōu)良（理想）的檢測(cè)器應(yīng)具有以下幾個(gè)性能指標(biāo)： （1）靈敏度高 （2）穩(wěn)定性和重現(xiàn)性好 （3）對(duì)樣品無(wú)損檢測(cè) （4）通用性好 （5）線性響應(yīng)范圍寬 表4-1列出了常用4種檢測(cè)器的性能指標(biāo)第52頁(yè)/共67頁(yè)4-1第53頁(yè)/共67頁(yè)二、 氫火焰離子化檢測(cè)器測(cè)器 （FID：hydrogen flameionization detector）1.特點(diǎn)1） 典型的質(zhì)量型檢測(cè)器，2） 對(duì)有機(jī)化合物具有很高的靈敏度，3）無(wú)機(jī)氣體、水、四氯化碳等含氫少或不含氫的物

42、質(zhì)靈敏度低或不響應(yīng)。4）氫焰檢測(cè)器結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、穩(wěn)定性好、靈敏度高、響應(yīng)迅速等特點(diǎn)。5）比熱導(dǎo)檢測(cè)器的靈敏度高出近3個(gè)數(shù)量級(jí)，檢測(cè)下限可達(dá) 10-12gg-1。第54頁(yè)/共67頁(yè)2.FID操作條件及注意事項(xiàng)1）氣體流速 FID檢測(cè)器需要3種不同的氣體：載氣（氮?dú)饣蚝猓?、燃?xì)猓錃猓┘爸細(xì)猓諝猓?，由于毛?xì)管柱內(nèi)流量太低（常規(guī)柱15ml/min），不能滿足檢測(cè)器最佳操作條件，所以使用毛細(xì)管柱時(shí)要采用輔助氣（尾吹氣），即在色譜柱后增加一路載氣直接進(jìn)入檢測(cè)器，就可以保證檢測(cè)器在高靈敏度狀態(tài)下工作，尾吹氣另外一個(gè)重要作用是消除檢測(cè)器死體積的柱外效應(yīng)。一般情況下，氮?dú)猓ㄎ泊禋?載氣）、空氣和氫氣三者的比

43、例接近或等于1：10：1（如氮?dú)?040ml/min，空氣300400ml/min氫氣3040ml/min）時(shí)，檢測(cè)器靈敏度最高。2）檢測(cè)器溫度溫度對(duì)FID檢測(cè)器的靈敏度和噪聲的影響不顯著，為防止檢測(cè)器被污染，檢測(cè)器的溫度設(shè)置應(yīng)不低于色譜柱實(shí)際工作的最高溫度，一般情況下，檢測(cè)器的溫度應(yīng)不低于150。第55頁(yè)/共67頁(yè)三熱導(dǎo)檢測(cè)器1 .熱導(dǎo)檢測(cè)器的結(jié)構(gòu)池體：一般用不銹鋼制成。熱敏元件：電阻率高、電阻溫度系數(shù)大、且價(jià)廉易加工的鎢絲制成。參考臂：僅允許純載氣通過(guò)，通常連接在進(jìn)樣裝置之前。 測(cè)量臂：需要攜帶被分離組分的載氣流過(guò)，則連接在緊靠近分離柱出口處。第56頁(yè)/共67頁(yè)2.TCD操作條件及注意事項(xiàng)

44、1） 檢測(cè)器溫度和載氣流速的波動(dòng)影響穩(wěn)定性，故必須穩(wěn)定。檢測(cè)器溫度一般設(shè)定與柱溫相同或高于柱溫2） 載氣種類對(duì)TCD的靈敏度較大。原則上講，載氣與被測(cè)物的傳熱系數(shù)之差越大越好，故理想載氣為氦氣。若不需要高靈敏度時(shí)，也可采用氮?dú)狻涞臒釋?dǎo)系數(shù)大，也可作為分析某些品種的載氣，但必須注意通風(fēng)和安全。3）在檢測(cè)器通電之前，一定要確保載氣已經(jīng)通過(guò)了檢測(cè)器，否則，熱絲就可能被燒斷。同時(shí)，關(guān)機(jī)時(shí)一定要先關(guān)檢測(cè)器電源（即關(guān)掉熱絲），然后關(guān)載氣。任何時(shí)候進(jìn)行可能切斷通過(guò)TCD的載氣的操作，都要先關(guān)閉檢測(cè)器電源。）載氣中含有氧氣時(shí)，會(huì)使熱絲壽命縮短，所以，用TCD時(shí)載氣必須徹底去除氧氣，而且不要使用聚四氟乙烯做載

45、氣輸送管，因?yàn)樗鼤?huì)滲透氧。第57頁(yè)/共67頁(yè)四ECD操作條件及注意事項(xiàng)1） ECD是靈敏度最高的氣相色譜檢測(cè)器，放射源一般采用鎳63，ECD的操作溫度一般為250300，通常不低于250采用氚為放射源時(shí)操作溫度不超過(guò)1802） ECD可以采用氮?dú)庾鲚d氣，也可采用含5%甲烷的氬氣作為載氣。ECD對(duì)電負(fù)性成分靈敏度高，故要求載氣純度高，至少99.99%以上，檢測(cè)器的溫度對(duì)響應(yīng)值有較大影響，要求檢測(cè)器的溫度波動(dòng)必須精密控制在（0.10.3）之間，以保證響應(yīng)值的測(cè)量精密度在1%以內(nèi)3）ECD要避免與氧氣或濕氣接觸，否則噪聲會(huì)明顯加大。因此載氣和尾吹都要很好的凈化。）因?yàn)镋CD有放射源，故檢測(cè)器出口一定

46、要用管道連接到室外，最好接到通風(fēng)口。沒(méi)有經(jīng)過(guò)特殊培訓(xùn)的人員，不能打開(kāi)ECD。每6個(gè)月節(jié)能型一次放射性泄漏檢查。第58頁(yè)/共67頁(yè)第五節(jié) 氣相色譜法在藥品檢驗(yàn)中的應(yīng)用一、殘留溶劑測(cè)定法 藥物中的殘留溶劑系指在藥品生產(chǎn)工藝過(guò)程中未能完全去除的藥物生產(chǎn)過(guò)程中使用的有機(jī)揮發(fā)性化合物。由于殘留溶劑沒(méi)有療效，故所有的殘留溶劑應(yīng)盡可能除去，以符合產(chǎn)品規(guī)范、GMP或其它基本的質(zhì)量要求。（一）殘留溶劑的基本特征： 1.特指有機(jī)揮發(fā)性化合物 2.在藥品生產(chǎn)過(guò)程中使用過(guò)； 3.在藥品生產(chǎn)過(guò)程中應(yīng)當(dāng)去除而未除盡。u 藥品中殘留溶劑的特點(diǎn)： 1.種類相對(duì)固定，ICH規(guī)定了69種（共4類） 2.在具體樣品中具有不確定性；

47、 3.殘留量相對(duì)較低，一般在痕量或微量范圍； 4.同一樣品中不同溶劑的殘留量相差較大。第59頁(yè)/共67頁(yè)u 殘留溶劑的質(zhì)控要點(diǎn)： 1.根據(jù)藥品的生產(chǎn)工藝確定檢測(cè)對(duì)象，允許不同的生產(chǎn)企業(yè)采用不同的生產(chǎn)工藝（使用不同的有機(jī)揮發(fā)性化合物）生產(chǎn)相同的藥品。 2.限度實(shí)驗(yàn)，依照中國(guó)藥典2005版對(duì)殘留溶劑的控制，根據(jù)生產(chǎn)工藝，限度與ICH一致或嚴(yán)于ICH的規(guī)定。 3.檢測(cè)方法推薦采用頂空毛細(xì)管氣相色譜法。（二）氣相色譜法測(cè)定殘留溶劑的優(yōu)點(diǎn) 1.分離效率高、速度快； 2.可以采用多種靈敏度高、選擇性好、線性范圍寬的檢測(cè)器，F(xiàn)ID檢測(cè)器具有較高的通用性和較寬的線性范圍；ECD檢測(cè)器對(duì)含有鹵素元素的殘留溶劑，如氯仿具有較高的靈敏度； 3.頂空分析的優(yōu)越性：是一種簡(jiǎn)便、干凈、快速隊(duì)揮發(fā)性組分進(jìn)行萃取的預(yù)處理方法。 第60頁(yè)/共67頁(yè)（三）供試品溶液的制備 樣品溶劑的選擇應(yīng)兼顧藥品的溶解性和被測(cè)定溶劑的溶解性。通常供試品取樣量為0.11g 1.頂空進(jìn)樣系統(tǒng) （1）對(duì)水溶性樣品，采用水做溶劑； （2）當(dāng)藥品不溶于水，但可溶于一定濃度的酸或堿溶液中時(shí)，可采用不揮發(fā)的酸或堿溶液作為溶劑；如果被測(cè)溶劑水溶解性差，可以用合適的有機(jī)溶劑與水以一定的比例混合作為溶劑； （3）對(duì)于非水溶性藥物，可采用二甲基甲酰胺（DMF）、二甲基亞砜（DMSO）或其他適宜溶劑； （4）測(cè)定二甲基