毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定保健食品中大蒜素含量

1、毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定保健食品中大蒜素含量【摘要】目的建立氣相色譜法測(cè)定保健食品中大蒜素含量 的檢測(cè)方法。方法采用正交試驗(yàn)法，對(duì)保健食品中大蒜素的 提取條件進(jìn)行了優(yōu)化，并采用氣相色譜法測(cè)定其含量。結(jié)果 正交結(jié)果表明，選取提取時(shí)間30min,料液比1: 4,提取次 數(shù)2次為最佳提取條件。大蒜素的檢測(cè)濃度在 0. 0591-0. 3546mgml-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系，平均回 收率為96.11%, rsd=1. 39%o用本法測(cè)得保健食品中大蒜素 的含量為0. 3757mgg-1。結(jié)論采用氣相色譜法測(cè)定保健食 品中大蒜素含量，該方法簡(jiǎn)便快速，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可作為 該保健食品中大蒜素含量的測(cè)定方法

2、。【關(guān)鍵詞】大蒜素；毛細(xì)管氣相色譜法大蒜(garlic)為百合科蔥屬植物蒜的鱗莖，性溫味辣, 具有抗菌、消炎、祛風(fēng)止痢功效，它的藥用價(jià)值主要在于大 蒜素(allicin) lo大蒜素具有廣泛的藥理活性，如抗腫 瘤、降低膽固醇、抗血小板聚集、預(yù)防心血管疾病、降血壓、 抗氧化、護(hù)肝等等2-3。近年來(lái)，隨著大蒜類(lèi)保健食品的 開(kāi)發(fā)利用，國(guó)內(nèi)外對(duì)大蒜素的研究也越來(lái)越深入，大蒜素含 量已成為評(píng)價(jià)該類(lèi)保健食品功效成分的重要指標(biāo)。本文采用 毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定保健食品中大蒜素的含量。1材料與試劑kq-500e型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）； agilenthp6890n氣相色譜儀（agilent公司

3、），附氫火焰離 子化檢測(cè)器（fid）o保健食品（自制）；大蒜素標(biāo)準(zhǔn)品（以c6h10s3計(jì)，含 量為88. 4%,中國(guó)食品藥品檢定研究院）；苯乙酮（天津市大 茂化學(xué)試劑廠）；無(wú)水乙醇、甲醇、正己烷（天津市富宇精 細(xì)化工有限公司）；丙酮（上海試劑總廠）；實(shí)驗(yàn)所用試劑均 為分析純。2方法與結(jié)果2. 1 色譜條件色譜條件：hp-55%phenylmethylsiloxane 毛細(xì)管柱（30. 0mx320 umx0. 25 um）；進(jìn)樣口溫度：250°c； 檢測(cè)器溫度：250°c；升溫程序：50°c保持lmin, 40°c min-1 升至140°c,

4、再以25°c - min-1升至200°c,保持2min；分 流比：10： 1；進(jìn)樣量：0.4ulo在此條件下分別吸取標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣液進(jìn)樣，得到大蒜 素標(biāo)準(zhǔn)品及保健食品的氣相色譜圖，見(jiàn)圖lo以色譜峰保留 時(shí)間定性、峰面積內(nèi)標(biāo)法定量。2. 2溶液的制備2. 2. 1苯乙酮內(nèi)標(biāo)溶液的配制精密稱(chēng)取苯乙酮0.1041g 于looml容量瓶中，用無(wú)水乙醇：正己烷（體積比4： 1） 4 溶解配制成1.041mg-ml-l的內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液，靜置過(guò)夜，備用。2. 2.2對(duì)照品溶液的配制精密稱(chēng)取大蒜素標(biāo)準(zhǔn)品 0. 0591g于loml容量瓶中（按c6h10s3計(jì)，精確到0. ooolg）, 用無(wú)

5、水乙醇：正己烷（體積比4:1）定容,配制成5. 91mg ml-1 的對(duì)照品儲(chǔ)備液。2. 3提取條件的確定2. 3.1正交實(shí)驗(yàn)考察保健食品中大蒜素的最佳提取條件 影響保健食品中大蒜素提取率的因素主要有提取時(shí)間、提取 溫度、料液比等5,下面以提取時(shí)間（a）、料液比（b）、 提取次數(shù)（c）三個(gè)因素作為考察因素，選用l9 （34）正交 表進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以確定最佳提取條件。因素水平見(jiàn)表1。采用spss軟件對(duì)正交結(jié)果進(jìn)行方差分析，a1b2c1為最 佳提取條件，即提取時(shí)間為30min,料液比1： 4,提取2次 為保健食品中大蒜素的最佳提取條件。2. 3.2供試品溶液的制備6-7精密稱(chēng)取供試品 4. 0050g

6、,根據(jù)上述優(yōu)化的條件提取，離心得到提取液置25ml 容量瓶中，再加入l.oml內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液，定容，即得供試品溶 液。2. 4標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精密量取對(duì)照品儲(chǔ)備溶液0. 1、0. 2、 0.3、0.4、0.5、0. 6ml,分別置于10ml容量瓶中，再分別 精密加入l.oml內(nèi)標(biāo)儲(chǔ)備液，用無(wú)水乙醇：正己烷（體積比 4： 1）定容，搖勻。按“2.1”項(xiàng)下色譜條件測(cè)定，進(jìn)樣量 0.4ul （n=6）,測(cè)定大蒜素和苯乙酮的峰面積，得回歸方程: y=0. 1617x+0. 0379 , r=0. 99995 ,表明大蒜素的濃度在 0. 0591-0. 3546mg ml-1范圍內(nèi)，大蒜素和苯乙酮的濃度之 比

7、(c/cs)與大蒜素和苯乙酮的峰面積之比(a/as)呈良好 的線性關(guān)系，標(biāo)準(zhǔn)曲線見(jiàn)圖2。2. 5方法學(xué)考察按“2. 1”項(xiàng)下色譜條件，精密吸取同一 濃度對(duì)照品工作液，連續(xù)進(jìn)樣6次，結(jié)果求得rsd=1.89%, 可說(shuō)明該方法精密度良好。精密吸取供試品溶液，連續(xù)進(jìn)樣 5次，求得rsd=2. 47%,說(shuō)明重復(fù)性良好；分別在0、0.5、 1.0、1.5、2. oh內(nèi)進(jìn)樣,求得rsd=o. 39%,說(shuō)明該溶液至少 在2. oh內(nèi)穩(wěn)定。精密量取已知質(zhì)量濃度的供試品溶液l.oml五份于10ml 容量瓶中，再分別加入0. lml對(duì)照品儲(chǔ)備液和l.oml內(nèi)標(biāo)儲(chǔ) 備液，定容，依法測(cè)定含量，求得平均回收率為96.

8、11%, rsd=1. 39%o2. 6樣品含量測(cè)定精密吸取供試品溶液，按“2. 1”項(xiàng)下 色譜條件，進(jìn)樣5次，測(cè)定大蒜素與苯乙酮的峰面積，按標(biāo) 準(zhǔn)曲線方程計(jì)算樣品中大蒜素的含量。測(cè)得數(shù)據(jù)見(jiàn)表2。3結(jié)論采用正交法優(yōu)選出該保健食品中大蒜素的最佳提取條 件，并用毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定其含量，平均回收率為 96.11%,結(jié)果表明該方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、靈敏高，為保 健食品中大蒜素的含量測(cè)定研究提供了理論及技術(shù)參考。參考文獻(xiàn)1 李聃，高藝文大蒜素的研究概況j 科技信息.2 劉永忠，龔千峰，魏學(xué)鑫，大蒜揮發(fā)油主要成分 的藥理作用研究進(jìn)展j.江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1998, 13 (1)： 34-38.3 曹慶穗，徐為民，嚴(yán)建民，等大蒜的功能成分及 其保健功效j.江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2004, (6)： 134-136.4 朱曉琳，馬永建毛細(xì)管色譜法檢測(cè)大蒜及大蒜制 品中功效成分的方法研究j 中國(guó)衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2005, 15 (9)： 1095-1096.5 徐麗紅，王建清，張巧艷等.保健食品中大蒜素色 譜檢測(cè)方法的研究j.分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2010