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1、骨髓骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞間充質(zhì)干細(xì)胞一BMSCs概念二BMSCs微觀結(jié)構(gòu)三BMSCs分離、培養(yǎng)、鑒別2021-11-23一五四 BMSCs分化BMSCs運(yùn)用2021-11-232021-11-232021-11-23骨骨髓髓黃骨髓黃骨髓紅骨髓紅骨髓血竇血竇造血組織造血組織造血干細(xì)胞造血干細(xì)胞骨基質(zhì)細(xì)胞(骨基質(zhì)細(xì)胞(間充質(zhì)干細(xì)胞間充質(zhì)干細(xì)胞)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone mesenchymal (bone mesenchymal stem cellsstem cells,BMSCs) BMSCs) 是在骨髓中發(fā)現(xiàn)是在骨髓中發(fā)現(xiàn)的一種起源于胚胎中胚層,具有自我的一種起源于胚胎中胚層,具有

2、自我復(fù)制和多向分化潛能的非造血干細(xì)胞復(fù)制和多向分化潛能的非造血干細(xì)胞。BMSCs對(duì)骨髓造血干細(xì)胞起支持、誘導(dǎo)作用。2021-11-23骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的基本概念是上世骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的基本概念是上世紀(jì)紀(jì)7070年代,年代,F(xiàn)riedensteinFriedenstein等在做全骨等在做全骨髓培養(yǎng)時(shí)報(bào)道了骨髓中有骨髓多能基髓培養(yǎng)時(shí)報(bào)道了骨髓中有骨髓多能基質(zhì)干細(xì)胞。質(zhì)干細(xì)胞。由于呈成纖維細(xì)胞樣外觀也被稱為集由于呈成纖維細(xì)胞樣外觀也被稱為集落形成單位成纖維細(xì)胞落形成單位成纖維細(xì)胞(clony (clony forming units fibroblastsforming units fibrobla

3、sts,CFU-F)CFU-F)或骨髓基質(zhì)細(xì)胞或骨髓基質(zhì)細(xì)胞(bone mesenchymal (bone mesenchymal stem cells BMSCs)stem cells BMSCs)。2021-11-23BMSCsBMSCs有粗細(xì)不均的胞質(zhì)突起有粗細(xì)不均的胞質(zhì)突起, ,透射電透射電鏡下胞質(zhì)中有豐富的細(xì)胞器鏡下胞質(zhì)中有豐富的細(xì)胞器, ,如核糖體、如核糖體、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、分泌小泡、線粒體等,粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、分泌小泡、線粒體等,細(xì)胞表面可見微絨毛突起細(xì)胞表面可見微絨毛突起, ,表明該細(xì)胞表明該細(xì)胞具有較強(qiáng)的蛋白質(zhì)合成能力具有較強(qiáng)的蛋白質(zhì)合成能力, ,是其能夠是其能夠分泌許多生長(zhǎng)因子,維持

4、自身生長(zhǎng)分分泌許多生長(zhǎng)因子,維持自身生長(zhǎng)分化,支持造血干細(xì)胞造血的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)?;?,支持造血干細(xì)胞造血的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)。2021-11-23相鄰細(xì)胞間還可見到一些細(xì)胞膜局部相鄰細(xì)胞間還可見到一些細(xì)胞膜局部電子密度增高、細(xì)胞膜內(nèi)顆粒相互融電子密度增高、細(xì)胞膜內(nèi)顆粒相互融合的縫隙連接??p隙連接可加強(qiáng)相鄰合的縫隙連接??p隙連接可加強(qiáng)相鄰細(xì)胞的連接細(xì)胞的連接, ,但更重要的是細(xì)胞的一種但更重要的是細(xì)胞的一種通訊結(jié)構(gòu)通訊結(jié)構(gòu), ,有利于細(xì)胞間信息傳遞,與有利于細(xì)胞間信息傳遞,與細(xì)胞分泌、增殖、分化相關(guān)。細(xì)胞分泌、增殖、分化相關(guān)。2021-11-23目前用于分離目前用于分離BMSCsBMSCs的方法主要有密度的方法

5、主要有密度梯度離心法、貼壁篩選法、流式細(xì)胞梯度離心法、貼壁篩選法、流式細(xì)胞儀分離法和磁珠分選法。儀分離法和磁珠分選法。流式細(xì)胞儀和磁珠分選法雖然可獲得流式細(xì)胞儀和磁珠分選法雖然可獲得較純的細(xì)胞,但是費(fèi)用昂貴、操作復(fù)較純的細(xì)胞,但是費(fèi)用昂貴、操作復(fù)雜、不適合臨床應(yīng)用。雜、不適合臨床應(yīng)用。2021-11-23BMSCsBMSCs的培養(yǎng)方法有二維培養(yǎng)(極低密的培養(yǎng)方法有二維培養(yǎng)(極低密度傳代培養(yǎng),低氧張力下培養(yǎng)度傳代培養(yǎng),低氧張力下培養(yǎng)) ) 、三維培養(yǎng)、靜止性細(xì)胞培養(yǎng)、三維培養(yǎng)、靜止性細(xì)胞培養(yǎng)、 動(dòng)力性動(dòng)力性細(xì)胞培養(yǎng)等。細(xì)胞培養(yǎng)等。2021-11-23BMSCsBMSCs沒有特異性的抗原表型,對(duì)沒

6、有特異性的抗原表型,對(duì)其鑒定還沒有直接的方法。其鑒定還沒有直接的方法。2021-11-23對(duì)對(duì)BMSCsBMSCs進(jìn)行進(jìn)行傳代培養(yǎng)時(shí)可傳傳代培養(yǎng)時(shí)可傳2525代,擴(kuò)代,擴(kuò)增增5050倍以上。倍以上。 對(duì)細(xì)胞周期研究發(fā)現(xiàn),對(duì)細(xì)胞周期研究發(fā)現(xiàn),絕大部分細(xì)胞處于絕大部分細(xì)胞處于GOGOG1G1期。這提示期。這提示其有高分化能力其有高分化能力。骨髓中所含的少量多能骨髓中所含的少量多能MSCsMSCs是多種細(xì)是多種細(xì)胞的前體細(xì)胞。其在不同的誘導(dǎo)條件胞的前體細(xì)胞。其在不同的誘導(dǎo)條件下下, , 能向成骨細(xì)胞、成軟骨細(xì)胞、成能向成骨細(xì)胞、成軟骨細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、脂肪細(xì)胞等中胚層組織細(xì)纖維細(xì)胞、脂肪細(xì)胞等中胚層組織細(xì)胞分化。胞分化。2021-11-232021-11-23隨著細(xì)胞學(xué)和組織工程學(xué)的發(fā)展,利用BMSCs的多向分化性及其可在體外表達(dá)多種外

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