實驗八微生物的生理生化反應(yīng)-實驗九微生物的生理生化實驗

1、何偉 200604一、實驗?zāi)康囊?、實驗?zāi)康膚 微生物代謝與其他生物代謝有著許多相似之處，也有不同之處。微生物代謝重要持征之一，就是代謝類型的多樣性。即使同屬化能異養(yǎng)菌中的不同微生物，它們分解生物大分子的能力，分解利用含碳化合物、含氮化合物的途徑和產(chǎn)生代謝產(chǎn)物也各不相同等等。w 由于微生物代謝類型多樣性，使得微生物在自然界的物質(zhì)循環(huán)中起著重要作用，同時也為人類開發(fā)利用微生物資源提供更多的機會與途徑。w 此外，微生物代謝類型多樣性具體表現(xiàn)在生化反應(yīng)的多樣性，因此人們在微生物的分類鑒定工作中，常利用其生化反應(yīng)作為重要依據(jù)。二、實驗器材w 培養(yǎng)基：油脂培養(yǎng)基、淀粉培養(yǎng)基、明膠培養(yǎng)基、糖發(fā)酵培養(yǎng)基（葡萄

2、糖、乳糖）、w 菌種：大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、枯草桿菌、普通變形桿菌、綠膿桿菌、產(chǎn)氣腸桿菌三、實驗原理和步驟w 大分子水解實驗不同微生物分解利用生物大分子能力各有不同。只有那些能夠產(chǎn)生并分泌跑外酶的微生物才能利用大分子有機物。油脂水解、淀粉水解、明膠液化脂肪酶、 淀粉酶、 蛋白酶w 糖發(fā)酵實驗糖發(fā)酵實驗細(xì)菌在分解糖或醇(如葡萄糖、乳糖、蔗糖、甘露醇、甘油)的能力有很大的差異。有些細(xì)菌發(fā)醇某種糖后產(chǎn)生各種有機酸(如乳酸、醋酸、甲酸、琥珀酸)及各種氣體(如氫、甲烷、二氧化碳)。有的細(xì)菌只產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。酸的產(chǎn)生可利用指示劑來指示。在配制培養(yǎng)基時可預(yù)先加入溴甲酚紫【pH 5(黃)pH7(紫)】。當(dāng)細(xì)菌

3、發(fā)酵糖產(chǎn)酸時，可使培養(yǎng)基由紫色變?yōu)辄S色。氣體的產(chǎn)生可由糖發(fā)酵管中倒置的杜氏小管中有元氣泡來證明。w IMViC反應(yīng)：反應(yīng)：w 吲哚實驗吲哚實驗w 甲基紅實驗甲基紅實驗w V.P.實驗實驗w 檸檬酸鹽實驗檸檬酸鹽實驗w H2S實驗實驗實驗名稱實驗名稱培養(yǎng)基培養(yǎng)基菌種菌種接種接種方式方式現(xiàn)象現(xiàn)象大分大分子水子水解實解實驗驗油脂水解 油脂培養(yǎng)基金黃葡、枯草平板水解出現(xiàn)紅色斑點淀粉水解 淀粉培養(yǎng)基枯草、大腸平板加入碘液后出現(xiàn)透明水解圈明膠液化 明膠培養(yǎng)基大腸、枯草、綠膿穿刺沿穿刺接種的痕跡進行明膠的液化水解糖發(fā)糖發(fā)酵實酵實驗驗葡萄糖發(fā)酵葡萄糖發(fā)酵培養(yǎng)基大腸、變形試管顏色變化、有氣泡積聚乳糖發(fā)酵 乳糖發(fā)酵培養(yǎng)基大腸、變形試管同上IMViC反反應(yīng)應(yīng)吲哚實驗 蛋白胨水培養(yǎng)基大腸、產(chǎn)氣試管產(chǎn)生紅色玫瑰吲哚甲基紅實驗葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基大腸、產(chǎn)氣試管丙酮酸分解為小分子酸，使得培養(yǎng)基顏色變紅V.P實驗葡萄糖蛋白胨水培養(yǎng)基大腸、產(chǎn)氣試管丙酮酸不分解，氧化后與-萘酚形成紅色檸檬酸鹽實驗檸檬酸鹽培