葛根素對2型糖尿病大鼠的膀胱保護(hù)作用

1、葛根素對2型糖尿病大鼠的膀胱保護(hù)作用曾祥建萬芙蓉馮建華鄧麗萍樂有為（深圳市龍崗中心醫(yī)院518116）【摘要】目的研究葛根素對糖尿病大鼠的膀胱保護(hù)作用。方法sd大鼠分為正 常對照組、糖尿病組、糖尿病大鼠葛根素干預(yù)組三組。以高糖高脂飲食及小劑量 連麻佐菌素（30mg/kg）制備2型糖尿病大鼠模型。16周后光鏡下觀察膀胱逼 尿肌在常規(guī)he染色和石蠟切片明膠鍍銀染色的改變。結(jié)果 糖尿病組大鼠與正 常對照組差異明顯，治療組較糖尿病組明顯下降。結(jié)論 在2型糖尿病大鼠中， 葛根素具有保護(hù)膀胱逼尿肌功能?！娟P(guān)鍵詞】糖尿病糖尿病膀胱病葛根素【中圖分類號】r965【文獻(xiàn)標(biāo)識碼】a【文章編號2095-1752 （

2、2012 ） 15-0027-02 糖尿病膀胱?。╠iabetic cystopathy, dcp）亦稱為糖尿病神經(jīng)原性膀胱（diabetic neurogenic bladder, dnb）是糖尿病引起的泌尿系統(tǒng)一種嚴(yán)重并發(fā)癥。 dcp是糖尿病患者的常見病發(fā)癥，其發(fā)病率約為25%85%lo dcp的發(fā)病率 與患者的年齡及性別沒有直接關(guān)系，發(fā)病率隨著糖尿病疾病的病程延長而增加, 糖尿病患者10年病程大約有25%的發(fā)牛率，超過25年的則發(fā)病率大于50%2o dcp膀胱結(jié)構(gòu)的改變以及神經(jīng)病變是目前公認(rèn)的dcp病因，因此通過葛根素作用 于實(shí)驗(yàn)性糖尿病大鼠，研究經(jīng)過葛根素治療后糖尿病大鼠膀胱逼尿肌形態(tài)

3、的變化 情況，為防治糖尿病膀胱病尋求一種良好的途徑。1材料與方法1.1材料1.1.1實(shí)驗(yàn)大鼠sprague dawley （sd）雌性大鼠40只（暨南大學(xué)醫(yī)學(xué)院 動物中心提供），體重200g-250g,經(jīng)12： 12h光照和黑暗循環(huán)以及充足的水和食 物適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后用于實(shí)驗(yàn)。1.1.2標(biāo)準(zhǔn)大鼠飼料、高糖高脂飼料（提供公司沈陽嘉乾程牛物科技）；鏈嫌佐菌素（stz）（提供公司sigma公司）。1.2方法1.2.1 t2dm大鼠模型的建立及實(shí)驗(yàn)分組sd雌性大鼠40只經(jīng)12： 12h 光照和黑暗循環(huán)以及充足的水和食物適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后隨機(jī)分為正常對照組（16 只）、糖尿病組（24只）。正常對照組喂養(yǎng)標(biāo)

4、準(zhǔn)大鼠飼料，糖尿病組喂養(yǎng)高糖高脂 飼料（其中含蔗糖10%,熟豬油15%,膽固醇2%,膽酸0.25%）,喂養(yǎng)4周后糖 尿病組空腹18-24小時(shí)腹腔注射小劑量鏈月尿佐菌素（stz）30mg/kg（用前以ph4.4 0.1mol/l檸檬酸檸檬酸鈉緩沖液配成0.75%的濃度），正常對照組僅注射檸檬酸 檸檬酸鈉緩沖液。注射stz后的第4周，選擇空腹血糖大于正常大鼠空腹血糖 +3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差，口腆島素敏感性降低者確定為t2dm大鼠納入實(shí)驗(yàn)。對照組給普 通飼料，腹腔內(nèi)注射等體積的枸椽酸緩沖液。連續(xù)4周尾靜脈血葡萄糖濃度 >167mmol/l,模型成功24只。在模型成功的ii型糖尿病大鼠中隨機(jī)再分為

5、 糖尿病無干預(yù)組（12只），葛根素干預(yù)組（12只），葛根索按80mg/kg每日腹腔 注射1次。對照組正常飼料喂養(yǎng)。16周后制備逼尿肌標(biāo)本進(jìn)行光鏡觀測。1.3標(biāo)本的收集與處理大鼠分別于糖尿病組大鼠的實(shí)驗(yàn)終體重和空腹 血糖值。處死后測量膀胱濕垂，并用膀胱濕重與相應(yīng)人鼠體重的比值作為膀胱相 對重量。1.4標(biāo)本的制備及觀察方法常規(guī)蘇木素伊紅（he）染色、常規(guī)石蠟切片 明膠鍍銀染色，在低倍鏡和高倍鏡下觀察蘇木素伊紅（he）染色下膀胱粘膜、固有 層及膀胱肌層異同。常規(guī)觀察，實(shí)驗(yàn)組與對照組對照觀察。石蠟切片明膠鍍銀染 色中觀察神經(jīng)纖維的改變情況。1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理結(jié)果應(yīng)用spss13.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)分析

6、，以均值 ±標(biāo)準(zhǔn)差（x-±s）表示，組間比較應(yīng)用方差分析。2結(jié)果2.1.1蘇木素伊紅（he）染色正常組：低倍鏡下對照組可見膀胱粘膜皺襲明顯，上皮移行細(xì)胞排列均 勻，核圓形位于細(xì)胞中央，一般分為23層，固有層血管神經(jīng)多見，肌層增厚, 可見縱形肌，環(huán)形肌，平滑肌橫斷以及縱行切斷的肌束排列整齊。肌束之間結(jié)構(gòu) 緊密，間隙可見大量結(jié)締組織。少許紊亂，肌束體積增加外形飽滿。肌束間隙明 顯增寬，間隙間可見少量膠原纖維。糖尿病組以上所述形態(tài)改變較治療組明顯變 重，膀胱粘膜皺嬖較前明顯減少，上皮細(xì)胞厚度減小，固有層血管減少、膠原增 加，逼尿肌基底層明顯變薄，逼尿肌肌束

7、排列較紊亂，肌束外形明顯體積。肌束 之間間隙加大，間隙間血管神經(jīng)減少，肌束間膠原纖維增多。2.1.2石蠟切片明膠鍍銀染色在石蠟切片明膠鍍銀染色中神經(jīng)末梢為黑色，神經(jīng)膠質(zhì)纖維為藍(lán)黑色。 對照組大鼠粘膜下、肌間中染成黑色和藍(lán)黑色的神經(jīng)纖維多見。治療組人鼠膀胱 標(biāo)本顯示肌肉間神經(jīng)纖維也減少。糖尿病組逼尿肌肌束間隙間神經(jīng)纖維較對照組 及治療組明顯減少，細(xì)小的神經(jīng)纖維少見。2.2對照組與糖尿病大鼠組不同吋段的體重、膀胱濕重和血糖值相應(yīng) 時(shí)間糖尿病大鼠比正常組及膀胱膀胱重量增加明顯(p<0.01),而且膀胱相對重量 增加更顯著(p<0.01)o見表表對照組與糖尿病大鼠組不同時(shí)段的體重、膀胱濕重

8、和血糖值*同一時(shí)間對照組與糖尿病大鼠組有顯著性差異p<0.013討論糖尿病神經(jīng)原性膀胱是糖尿病常見的并發(fā)癥之一。被認(rèn)為是代謝紊亂, 神經(jīng)缺血等多種因素綜合作用的所致。糖尿病神經(jīng)系統(tǒng)并發(fā)癥的原因與胰島素缺 乏和血糖代謝紊亂有關(guān)，營養(yǎng)神經(jīng)的小血管改變及神經(jīng)本身改變可引起本病。糖 尿病周圍神經(jīng)病變中，微血管受損及血流動力學(xué)異常造成的神經(jīng)組織缺血、缺氧 所致神經(jīng)組織損害是主要原因之一 3。葛根素是從豆科多年生落葉藤木植物的 干燥根中提取的中成藥，能逆轉(zhuǎn)胰島素抵抗、抗血小板聚集、擴(kuò)張血管、疏通微 循環(huán)，改善周圍神經(jīng)及環(huán)境的缺血缺氧癥狀，提高神經(jīng)傳導(dǎo)速度。葛根素還可用 于糖尿病的降糖治療，許多治療糖

9、尿病的中成藥組方中均含有葛根素成分，并取 得了好的療效4。本試驗(yàn)中給予葛根素治療后，治療組逼尿肌肌束間隙間神經(jīng) 纖維較對照組及明顯增加，與對照組接近。而糖尿病組中神經(jīng)纖維少見，且膀胱 逼尿肌形態(tài)較治療組及對照組也存明顯差異。隨著葛根素生物學(xué)作用的機(jī)制的繼 續(xù)深入研究，將為葛根素防治糖尿病膀胱病及其它相關(guān)疾病提供可靠的科學(xué)依據(jù)。參考文獻(xiàn)李維仁，丁國富,王勤章糖尿病膀胱病變的研究進(jìn)展國際泌尿系統(tǒng)雜志,2007,27(6):517-520.2 frimodt-moller c. diabetic cystopathy epidemiology and related disorders. ann inte