單克隆抗體藥物綜述

1、單克隆抗體藥物綜述摘 要：通過淋巴細(xì)胞雜交瘤技術(shù)或基因工程技術(shù)制備單克隆抗體藥物，已經(jīng)成為生物制藥領(lǐng)域的一個(gè)重要方面，由于單克隆抗體藥物專一性強(qiáng)、療效顯著，因此成為近年來(lái)研究的熱點(diǎn)藥物之一。此文就單抗藥物的分類、應(yīng)用進(jìn)行了綜述,并對(duì)其應(yīng)用前景及存在的不足作了概述。關(guān)鍵詞：?jiǎn)慰寺】贵w抗體藥物靶向聯(lián)用自1975年Koeh ler和M ilstein首先報(bào)道利用小鼠雜交瘤細(xì)胞制備單克隆抗體以來(lái),經(jīng)過近30年的發(fā)展，單抗技術(shù)在生命科學(xué)研究及醫(yī)學(xué)實(shí)踐方面作出了杰出的貢獻(xiàn)，已經(jīng)成為了現(xiàn)代生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)的支柱之一。然而，盡管單抗推動(dòng)了生物診斷技術(shù)的革命，但是在將單抗應(yīng)用于人體疾病的治療方面 卻在長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)遲遲沒

2、有進(jìn)展。早期的臨床試驗(yàn)結(jié)果都不盡人意，這是因?yàn)槭笤磫慰箲?yīng)用于人體有許多限制.現(xiàn)今上市的單抗藥物，治療的領(lǐng)域主要集中在腫瘤、自身免疫疾病、器官移植排斥及病毒感染等領(lǐng)域。由于單抗具有明確的作用位點(diǎn)，與靶位點(diǎn)親和力高，而且通過改造的抗體其免疫原性大大減弱，這些因素使得單抗在臨床治療中具有特異性強(qiáng)、見效快、副作用較低等優(yōu)點(diǎn)，因而單抗治療有著廣闊的前景。目前，F(xiàn)DA批準(zhǔn)上市的17個(gè)單抗藥物中即有8個(gè)是用于治療淋巴細(xì)胞腫瘤、乳腺癌及結(jié)直腸癌等，而在開發(fā)階段的單抗也有一半以上是與治療各種癌癥相關(guān)。可以預(yù)見，在未來(lái)幾年來(lái)將有更多的治療性單抗藥物上市，其市場(chǎng)份額將進(jìn)一步擴(kuò)大。目前，單抗類藥物的市場(chǎng)銷售逐年提升的

3、年均增長(zhǎng)幅度在20%以上，表現(xiàn)強(qiáng)勁。用于治療非霍奇金淋巴瘤的單抗藥物R ituxan已成為世界第一的抗腫瘤藥物，2003年銷售為14 .89億美元，2002年為11 . 63億美元，在2002年全球最暢銷前 50位商標(biāo)名處方藥中排名 43位。用于治療關(guān)節(jié)炎的單抗藥物Rem icade, 2002年銷售額為12.97億美元，當(dāng)年全球藥物銷售排名第37位。2000年世界單抗藥物的銷售額為 22 . 05億美元，據(jù)F rost&Sullivan預(yù)測(cè)，至U 2003年銷售額將達(dá)到 47億美元。下面就單克隆抗體藥物的研究進(jìn)展作一綜述。1 單克隆抗體藥物的分類單抗藥物一般分為：治療疾?。ㄓ绕涫悄[瘤

4、）的單抗藥劑、抗腫瘤單抗偶聯(lián)物、治療其他疾病的單抗。單抗藥劑針對(duì)的靶點(diǎn)通常為細(xì)胞表面的疾病相關(guān)抗原或特定的受體。如：最早被美國(guó)FDA批準(zhǔn)用于治療腫瘤的單抗藥物利妥昔單抗；抗腫瘤單抗偶聯(lián)物，或稱免疫偶聯(lián)物（Immu no conjugate）,由單抗與有治療作用的物質(zhì)（如:放射性核素、毒素和藥物等）兩部分構(gòu)成，其中包括放射免疫偶聯(lián)物、免疫毒素、 化學(xué)免疫偶聯(lián)物，此外還有酶結(jié)合單抗偶聯(lián)物、光敏劑結(jié)合單抗偶聯(lián)物等。2 作為腫瘤治療藥劑的單克隆抗體藥物表1概括了近年來(lái)美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市的5個(gè)治療腫瘤的單克隆抗體藥物的基本情況下面具體加以介紹。表1近年美國(guó)準(zhǔn)上市的S個(gè)法療腫病創(chuàng)恥克陳拭休藥物Tab 1C

5、ancer therapeutic tuonoclona arrtibod'appio 隔dl by FDA of USA rwe ndy抗體堀稱商品耶靶點(diǎn)抗體類型適應(yīng)證FDA批淮吋間RjliDii imb杓妥昔空抗Rkuxaiii慢合型IgCiB細(xì)颯;沖巴楠1997Tiafluzumah |1:里珠錄抗HercejpdnIIER-2 m:u嵌合型IgG乳腺癌IWAleiHnzuiinab阿倫珠單抗CanpathCD52人源化IgGEJ細(xì)屯惡忡.片癇2001匚JlUKLlTltlh估妥苛單抗Erbitux炭音型咆口Id伐慣抗AViialinVE人冊(cè)化lufil20042. 1利妥昔單抗

6、在自身免疫性疾病形成過程中,B細(xì)胞起重要作用。CD20是前B細(xì)胞向成熟淋巴細(xì)胞分化過程中表達(dá)的表面抗原,參與調(diào)節(jié) B 細(xì)胞的生長(zhǎng)和分化。利妥昔單抗 （美羅華 ）是一種針對(duì)CD20抗原的人鼠嵌合型單克隆抗體，是第一個(gè)被FDA批準(zhǔn)用于臨床治療的單抗。進(jìn)入人體后可與 CD20 特異性結(jié)合導(dǎo)致 B 細(xì)胞溶解 ,從而抑制 B 細(xì)胞增殖 ,誘導(dǎo)成熟 B 細(xì)胞凋 亡,但不影響原始 B細(xì)胞。它能通過介導(dǎo)抗體依賴的細(xì)胞毒性（ADCC）、補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒性（CDC作用和抗體與CD20分子結(jié)合引起的直接效應(yīng),包括抑制細(xì)胞生長(zhǎng),改變細(xì)胞周期以 及凋亡等方式殺死淋巴瘤細(xì)胞 1 。由于利妥昔單抗藥物可以提高腫瘤細(xì)胞對(duì)化療

7、的敏感性,所以利妥昔單抗藥物的優(yōu)勢(shì)就在于與其他治療藥物及治療方式配合使用。 臨床研究表明美羅華單藥或聯(lián)合化療治療腫瘤 具有良好的療效和安全性 ,但還是存在一定的毒副作用。夏忠軍等 2 進(jìn)行的臨床研究 :34 例 確診惰性淋巴瘤的患者接受含利妥昔的方案化療,結(jié)果總有效率為 92. 3 % ,完全緩解率為60. 0 %。主要不良反應(yīng)為骨髓抑制,其它不良反應(yīng)包括惡心嘔吐、輕度脫發(fā)和肝功能受損等。張曉艷等3 對(duì)4例CD20陽(yáng)性非霍奇金淋巴瘤（NHL）病人進(jìn)行了 5次利妥昔單抗聯(lián)合 自體外周血干細(xì)胞移植（APBSCT）勺治療研究，結(jié)果顯示所有病人均對(duì)利妥昔單抗耐受良好，植入后在811 d內(nèi)達(dá)造血重建，表

8、明利妥昔單抗聯(lián)合 APBSCT臺(tái)療CD20陽(yáng)性NHL是一種 耐受及效果良好的方法。2. 2 曲妥珠單抗曲妥珠單抗為一種針對(duì) HER22/ neu 的重組人源化 IgG 單克隆抗體 ,能特異性識(shí)別 Her22 調(diào)控的細(xì)胞表面蛋白 HER22 ,使其通過內(nèi)吞噬作用離開胞膜進(jìn)入核體內(nèi),抑制其介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) ,從而起到治療腫瘤的作用。美國(guó) FDA 于 1999 年批準(zhǔn)其上市 ,2002 年在我國(guó) 上市。 大量臨床資料證實(shí)曲妥珠單用于乳腺癌的有效率為21 % ,而且它與化療聯(lián)合應(yīng)用明顯提高了生存時(shí)間 4 。據(jù)報(bào)道 ,歐洲曲妥珠單抗輔助治療試驗(yàn)研究了曲妥珠單抗對(duì)HER22 陽(yáng)性伴有或不伴有淋巴結(jié)陽(yáng)性的乳腺

9、癌患者的療效,其中 1 組給予 1 年的曲妥珠單抗治療 ,另1組作為對(duì)照。 曲妥珠單抗治療 1 年組與對(duì)照組相比 ,復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)減少了 46 % ,兩組的整體 生存率無(wú)明顯區(qū)別，說明曲妥珠單抗用于治療輔助化療后的HER22陽(yáng)性乳腺癌患者，明顯延長(zhǎng)了患者的無(wú)病生存期5 。我國(guó)也對(duì)曲妥珠進(jìn)行了臨床研究，沈坤煒等6 對(duì)42例H川A期浸潤(rùn)性乳腺癌患者紫杉醇聯(lián)合曲妥珠單抗治療24周，結(jié)果單用新輔助化療組完全緩解率為 26. 3 % ，在新輔助化療聯(lián)用曲妥珠單抗組為 65. 2 % ，可見 ，對(duì)于 HER22 過表達(dá)的乳 腺癌化療聯(lián)用曲妥珠單抗能顯著提高完全緩解率。2. 3 阿倫珠單抗阿倫珠單抗是人源化、 非

10、結(jié)合型單抗 ，作用靶點(diǎn)為正常與異常 B 淋巴細(xì)胞的 CD52 抗 原,CD52廣泛分布于正常的 B淋巴細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和B淋巴 細(xì)胞及 T 淋巴細(xì)胞瘤細(xì)胞表面 ，在慢性淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞表面尤為豐富。它與帶 CD52 的靶細(xì)胞結(jié)合后 ，通過宿主效應(yīng)子的補(bǔ)體依賴性細(xì)胞毒性（CDC） 、 抗體依賴性細(xì)胞毒性 （ADCC）和細(xì)胞凋亡等機(jī)制導(dǎo)致細(xì)胞死亡。 阿倫珠單抗作為一種作用機(jī)制獨(dú)特的單克隆抗體 ，對(duì)源于 B 和 T 細(xì)胞的各種惡性腫瘤具有很好的治療作用。英國(guó)科學(xué)家應(yīng)用阿倫珠單抗和利妥昔單抗治療復(fù)發(fā)性淋巴瘤患者，結(jié)果總反應(yīng)率為52 % ，其中完全緩解 8 % ，表明聯(lián)合使用阿倫珠

11、單抗和利妥昔單抗是安全可行的。在其它T細(xì)胞惡性腫瘤的治療中：對(duì)22例 川W期皮膚T細(xì)胞淋巴瘤（蕈樣肉芽腫病和 Sezary綜 合征）患者靜脈輸注阿倫珠12周 ，結(jié)果顯示阿倫珠具有非常好的療效 ，總有效率達(dá) 55 %。其中 ，紅皮病患者總有效率達(dá) 69 % ，片狀斑或皮膚腫瘤患者達(dá) 40 %7 。阿倫珠單抗聯(lián)合其他 藥物、 化療等治療腫瘤具有顯著的效果。 但臨床研究表明 ，其還存在一些常見并發(fā)癥，如低血壓、 寒顫、 發(fā)熱、 惡心、 嘔吐、 氣短、 支氣管痙攣、 皮疹、疲乏、 呼吸困難、 頭 痛、 腹瀉、 感染等。2. 4 西妥昔單抗西妥昔單抗為 IgG 1 單克隆抗體 ,是表皮生長(zhǎng)因子受體拮抗劑

12、,可與表達(dá)于正常細(xì)胞和多種腫瘤細(xì)胞表面的表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR特異性結(jié)合，并競(jìng)爭(zhēng)性阻斷 EGF和其他配體,如a 2轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子(TGF 2 a )的結(jié)合。它通過增加細(xì)胞周期抑制因子p27kip使得細(xì)胞周期停留在 G 1期;增加Bax表達(dá)和減少 bcl22表達(dá),誘導(dǎo)癌細(xì)胞的凋亡；它還可減少基質(zhì) 金屬蛋白酶和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF的產(chǎn)生。相關(guān)實(shí)驗(yàn)表明，西妥昔單抗可抑制過度表達(dá)EGFR勺腫瘤細(xì)胞的增殖，但是對(duì)缺乏EGFR表達(dá)的腫瘤細(xì)胞則沒有抗腫瘤效果，還發(fā)現(xiàn)西妥昔與化療聯(lián)用要優(yōu)于單獨(dú)化療 8 。在對(duì)西妥昔單抗聯(lián)合化療的研究中 ，BOAD 試驗(yàn)最為著名。 576 例晚期結(jié)直腸癌 (ACRC)

13、患者中 82 %的 EGFR 過表達(dá)。治療采取兩個(gè)方案，第 1 組用西妥昔單抗聯(lián)合伊立替康治療 ；第 2 組單獨(dú)用西妥昔單抗單藥治療。 西妥昔單抗聯(lián)合伊立替康與單用西妥昔單抗相比，聯(lián)用療效優(yōu)于單一使用 ，有效率分別為 23 %和 11 % ，疾病控制率為 56 %和 32 % ，疾病進(jìn)展中位 時(shí)間為 4. 1 和 1. 5 個(gè)月 ， 中位生存時(shí)間為 8. 6 和 6. 9 個(gè)月 ， 而且西妥昔單抗并沒有增加化療 的副作用。以上臨床實(shí)驗(yàn)顯示：西妥昔單抗能夠克服 ACRC患者對(duì)伊立替康的耐藥性，生存質(zhì) 量明顯提高 9 。西妥昔單抗的毒副作用包括 :痤瘡樣皮疹、 虛弱、 腹痛、 惡心、 嘔吐、 白細(xì)

14、胞減少和過敏反應(yīng)等。 其中痤瘡樣皮疹是最常見的不良反應(yīng) ，皮疹主要分布在臉部和軀 干上部，這可能是由于西妥昔單抗干擾了EGF的表皮生理作用所致10 。2. 5 貝伐單抗貝伐單抗是抗 VEGF的人源化單抗，主要通過中和 VEGF來(lái)阻斷其與內(nèi)皮細(xì)胞上的受體 結(jié)合 ，使得腫瘤細(xì)胞不能得到養(yǎng)分和氧，起到治療腫瘤的作用。 Presta 等11 將鼠抗人 VEGF單克隆抗體 (muMAB VEGF) A. 4. 6. 1 的互補(bǔ)決定區(qū)與人 IgG 1 的恒定區(qū)框架嵌合 ，并對(duì)相應(yīng) 氨基酸殘基加以修飾，最終形成了人鼠嵌合型VEGF單抗，仍然有7 %的氨基酸來(lái)源于鼠抗體。實(shí)驗(yàn)表明 ，貝伐單抗用于治療腫瘤安全有

15、效。鄭航等12 探究貝伐單抗聯(lián)合伊立替康治療轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌的療效 ，90 例患者中給予貝伐單抗聯(lián)合伊立替康治療的一組有效率為43.3 % ，血清腫瘤標(biāo)志物的濃度治療前后有顯著變化。這說明貝伐聯(lián)合伊立替康治療轉(zhuǎn)移性結(jié)腸癌具有更高的疾病控制率。 2005 年美國(guó)臨床腫瘤學(xué)會(huì)年會(huì)上報(bào)道了貝伐單抗的最新研究結(jié) 果 ，采用貝伐單抗聯(lián)合伊立替康和順鉑一線治療轉(zhuǎn)移性胃癌或者胃食管連接部腺癌的患者，治療的不良反應(yīng)除了原有伊立替康和順鉑引起的腎髓抑制、胃腸道反應(yīng)等 ，還有貝伐單抗造成的不良反應(yīng)包括栓塞性疾病、胃穿孔等。3 抗腫瘤單抗偶聯(lián)物3. 1 放射免疫偶聯(lián)物放射免疫治療(RIT是以單克隆抗體為載體，以放射性核

16、素為彈頭，通過抗體特異性結(jié) 合腫瘤細(xì)胞相關(guān)抗原 ，將產(chǎn)生高能射線的放射性核素靶向到腫瘤細(xì)胞 ，實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤的近距離 內(nèi)照射治療。 RIT 利用攜帶放射性核素的單克隆抗體特異地結(jié)合到病灶部位，減少了對(duì)正常組織的損傷。90Y ibri2tumomab是第1個(gè)被FDA批準(zhǔn)應(yīng)用于臨床的放射免疫制劑注要用于復(fù)發(fā)的淋巴瘤患者或?qū)为?dú)應(yīng)用利妥昔單抗療效不佳的患者。3. 2 免疫毒素 免疫毒素是用化學(xué)方法或基因工程方法將腫瘤選擇性單抗與經(jīng)修飾的多肽毒素共價(jià)連 接而成的腫瘤治療藥物。 免疫毒素可與腫瘤細(xì)胞表面受體或與細(xì)胞表面的靶抗原相結(jié)合后內(nèi) 化 ，繼而在胞內(nèi)抑制細(xì)胞蛋白質(zhì)合成，導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞死亡。毒素有很多種，如

17、植物毒素、 細(xì)菌毒素、 動(dòng)物毒素，其中引用最廣泛的是植物毒素中的白喉毒素。美國(guó)FDA已經(jīng)批準(zhǔn)了白喉毒素與白細(xì)胞介素2重組的免疫毒素 ONTAK(DAB3892I L2),用于治療人皮膚 T細(xì)胞淋巴瘤 13214 。3. 3 化學(xué)免疫偶聯(lián)物單抗是藥物良好的靶向性載體,通過藥物分子上特殊的功能基團(tuán)如 : 羥基、 巰基、 氨基等 , 將治療藥物與單抗相連接而組成化學(xué)免疫偶聯(lián)物,避免了藥物對(duì)其他正常組織的毒害作用 ,選擇性地發(fā)揮治療作用。常與單抗進(jìn)行偶聯(lián)的藥物有阿霉素、柔紅霉素、 平陽(yáng)霉素、博安霉素、 絲裂霉素、 新制癌菌素、 氨甲喋呤等。4 單克隆抗體在其他疾病中的應(yīng)用 單克隆抗體藥物不只在腫瘤的治

18、療中取得了很好療效,在其他疾病的治療中也取得了一些療效 ,例如 :奧馬珠單抗 (omalizumab) 通過與游離 IgE 結(jié)合而顯著降低游離 IgE 的水平 , 阻斷 IgE 與肥大細(xì)胞、 嗜堿粒細(xì)胞結(jié)合 , 防止炎癥介質(zhì)的釋放。可顯著改善哮喘病人的癥 狀、 肺功能及生活質(zhì)量 ,減少哮喘惡化的發(fā)作次數(shù) , 減少糖皮質(zhì)激素的用量,使用安全 ,具有很好的耐受性15 °MabO3. 2C1C2在體外能抑制白念珠菌芽管的形成，從而抑制白念珠菌對(duì)上皮細(xì)胞、 內(nèi)皮細(xì)胞的粘附,降低白念珠菌的侵襲力。利妥昔單抗對(duì)類風(fēng)濕和系統(tǒng)性紅斑狼瘡也有很好的治療作用。 英夫利昔單抗對(duì)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者疼痛、 晨

19、僵、 關(guān)節(jié)腫脹 等臨床癥狀減輕程度就可達(dá)60 %。另有研究顯示， 輸注英夫利昔單抗可快速、 顯著緩解頑固性銀屑病、 關(guān)節(jié)炎病人的關(guān)節(jié)和皮損癥狀16 。英利昔單抗對(duì)克羅恩病、潰瘍性結(jié)腸炎、酒精性肝病等消化系統(tǒng)疾病都有較好療效 ，且在推薦的治療范圍內(nèi)安全性良好17 。參考文獻(xiàn)1 馮潔 .介紹幾種抗腫瘤的靶向新藥J . 中國(guó)藥師 ，2006 ，9 (2) :1762178.2 夏忠軍 .含美羅華方案治療 B 細(xì)胞性惰性淋巴瘤 34 例報(bào)告 J .癌癥，2006 ，25 (4) :4902494.3 張曉艷 .利妥昔單抗聯(lián)合自體外周血干細(xì)胞移植治療非霍奇金淋巴瘤 J .中國(guó)新 藥與臨床雜志 ，2006

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