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1、第二章第二章 培養(yǎng)基培養(yǎng)基 培養(yǎng)基是培養(yǎng)植物組織的基質(zhì),是植物組織和培養(yǎng)基是培養(yǎng)植物組織的基質(zhì),是植物組織和細(xì)胞在離開(kāi)母體的條件下生存和生長(zhǎng)發(fā)育所需細(xì)胞在離開(kāi)母體的條件下生存和生長(zhǎng)發(fā)育所需要的物質(zhì)來(lái)源。要的物質(zhì)來(lái)源。 培養(yǎng)基的成分決定著植物細(xì)胞和組織的生長(zhǎng)狀培養(yǎng)基的成分決定著植物細(xì)胞和組織的生長(zhǎng)狀況和發(fā)育的方向。況和發(fā)育的方向。 不同的植物和不同的培養(yǎng)目的需要選用不同的不同的植物和不同的培養(yǎng)目的需要選用不同的培養(yǎng)基以取得特定的培養(yǎng)效果。培養(yǎng)基以取得特定的培養(yǎng)效果。第二章第二章 培養(yǎng)基培養(yǎng)基* *無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng) * *有機(jī)營(yíng)養(yǎng)有機(jī)營(yíng)養(yǎng) * *生理活性物質(zhì)生理活性物質(zhì) * *其他添加物其他添加物
2、 * *水水第一節(jié)第一節(jié) 無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分 無(wú)機(jī)元素以無(wú)機(jī)鹽的形式加入到培養(yǎng)基中,在培無(wú)機(jī)元素以無(wú)機(jī)鹽的形式加入到培養(yǎng)基中,在培養(yǎng)基中為離子狀態(tài),植物細(xì)胞組織吸收的是離子養(yǎng)基中為離子狀態(tài),植物細(xì)胞組織吸收的是離子狀態(tài)的元素。狀態(tài)的元素。 無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分包括大量元素?zé)o機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分包括大量元素氮、磷、鉀、鈣、鎂、氮、磷、鉀、鈣、鎂、硫硫六種和微量元素六種和微量元素鐵、硼、錳、銅、鋅、鉬、鈷鐵、硼、錳、銅、鋅、鉬、鈷等七種。等七種。 除了這些之外,有些培養(yǎng)基配方也含有其他元素,除了這些之外,有些培養(yǎng)基配方也含有其他元素,但這些元素的作用還不清楚,也可能是不必要的。但這些元素的作用還不清楚,也可能
3、是不必要的。第一節(jié)第一節(jié) 無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分 在培養(yǎng)基中最重要的無(wú)機(jī)成分是在培養(yǎng)基中最重要的無(wú)機(jī)成分是N N,無(wú)機(jī)氮的供應(yīng)有兩種形式,無(wú)機(jī)氮的供應(yīng)有兩種形式,一種是一種是硝酸鹽硝酸鹽,另一種是,另一種是銨鹽銨鹽。 當(dāng)作為唯一的氮源時(shí),硝酸鹽的作用要比銨鹽好得多。但在當(dāng)作為唯一的氮源時(shí),硝酸鹽的作用要比銨鹽好得多。但在單獨(dú)使用硝酸鹽時(shí),培養(yǎng)基的單獨(dú)使用硝酸鹽時(shí),培養(yǎng)基的pHpH值會(huì)向堿性方向漂移,在培值會(huì)向堿性方向漂移,在培養(yǎng)基中同時(shí)養(yǎng)基中同時(shí)加入銨鹽可以起到緩沖的作用加入銨鹽可以起到緩沖的作用。 培養(yǎng)基中硝態(tài)氮和銨態(tài)氮的比例和相對(duì)量的多少對(duì)培養(yǎng)結(jié)果培養(yǎng)基中硝態(tài)氮和銨態(tài)氮的比例和相對(duì)量的多
4、少對(duì)培養(yǎng)結(jié)果影響十分明顯。影響十分明顯。MSMS和和N6N6是兩種不同類(lèi)型的培養(yǎng)基是兩種不同類(lèi)型的培養(yǎng)基,前者含有,前者含有較高濃度和比例的銨態(tài)氮,后者含有高濃度的硝態(tài)氮和低比較高濃度和比例的銨態(tài)氮,后者含有高濃度的硝態(tài)氮和低比例的銨態(tài)氮,兩者的培養(yǎng)效果常常不同。例的銨態(tài)氮,兩者的培養(yǎng)效果常常不同。第一節(jié)第一節(jié) 無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分 1 1、無(wú)機(jī)大量元素、無(wú)機(jī)大量元素 其他無(wú)機(jī)大量元素其他無(wú)機(jī)大量元素P P和和K K以磷酸鉀或磷酸二氫鉀以磷酸鉀或磷酸二氫鉀的化合物的化合物加入,加入,MgMg以硫酸鎂以硫酸鎂的形態(tài)加入,的形態(tài)加入,S S以硫酸氨以硫酸氨的形式加入,的形式加入,CaCa以氯化
5、鈣以氯化鈣的形式加入。這些元素的需要量明顯沒(méi)有的形式加入。這些元素的需要量明顯沒(méi)有N N的需要量大,而且加入量往往是過(guò)剩的。的需要量大,而且加入量往往是過(guò)剩的。 在一般培養(yǎng)基中,在一般培養(yǎng)基中,含含N N鹽鹽的總量在每升的總量在每升2000-30002000-3000毫克之毫克之間,間,含含CaCa或或MgMg的鹽的鹽的量在每升的量在每升100100至至400400之間。之間。第一節(jié)第一節(jié) 無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分 2 2、無(wú)機(jī)微量成分、無(wú)機(jī)微量成分 微量元素中微量元素中硼、錳、鋅和鐵硼、錳、鋅和鐵的需求量比較大,在每升的需求量比較大,在每升30-10030-100毫克的范圍內(nèi);毫克的范圍內(nèi);
6、銅、鈷和鉬銅、鈷和鉬的需求量很少,在的需求量很少,在1 1毫克或以下的范圍。毫克或以下的范圍。 有些培養(yǎng)基的微量成分元素種類(lèi)比較少。由于某些微量有些培養(yǎng)基的微量成分元素種類(lèi)比較少。由于某些微量元素的需求量的確很微少,除了精確的營(yíng)養(yǎng)成分研究,元素的需求量的確很微少,除了精確的營(yíng)養(yǎng)成分研究,采用特別高純度的試劑進(jìn)行液體培養(yǎng)之外,完全可以從采用特別高純度的試劑進(jìn)行液體培養(yǎng)之外,完全可以從水、試劑、特別是瓊脂中混入的水、試劑、特別是瓊脂中混入的雜質(zhì)中吸收雜質(zhì)中吸收而滿足生長(zhǎng)而滿足生長(zhǎng)發(fā)育的需要。發(fā)育的需要。第一節(jié)第一節(jié) 無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分 2 2、無(wú)機(jī)微量元素、無(wú)機(jī)微量元素 在微量元素中,鐵是一
7、種需求量相對(duì)較大但容易在微量元素中,鐵是一種需求量相對(duì)較大但容易沉淀,較難被吸收的元素?,F(xiàn)在通常采用乙二胺沉淀,較難被吸收的元素?,F(xiàn)在通常采用乙二胺四乙酸(四乙酸(EDTAEDTA)的鈉鹽加以)的鈉鹽加以螯合保護(hù)螯合保護(hù),以保證鐵,以保證鐵元素的有效性。元素的有效性。 絕大多數(shù)培養(yǎng)基都含有碘的化合物碘化鉀,但碘絕大多數(shù)培養(yǎng)基都含有碘的化合物碘化鉀,但碘的必要性還沒(méi)有得到證明。的必要性還沒(méi)有得到證明。第二章第二章 培養(yǎng)基培養(yǎng)基* *無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng) * *有機(jī)營(yíng)養(yǎng)有機(jī)營(yíng)養(yǎng) * *生理活性物質(zhì)生理活性物質(zhì) * *其他添加物其他添加物 * *水水第二節(jié)第二節(jié) 有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分 1 1、糖類(lèi)、
8、糖類(lèi) 在培養(yǎng)條件下,離體的植物細(xì)胞不能進(jìn)行有效的光合作用在培養(yǎng)條件下,離體的植物細(xì)胞不能進(jìn)行有效的光合作用生成碳水化合物,生成碳水化合物,由自養(yǎng)生物變成異養(yǎng)生物由自養(yǎng)生物變成異養(yǎng)生物,生長(zhǎng)發(fā)育所,生長(zhǎng)發(fā)育所需要的碳源只能從培養(yǎng)基中吸收。因此,可以被細(xì)胞吸收需要的碳源只能從培養(yǎng)基中吸收。因此,可以被細(xì)胞吸收利用的糖類(lèi)碳水化合物是培養(yǎng)基的必要成分。利用的糖類(lèi)碳水化合物是培養(yǎng)基的必要成分。 蔗糖是培養(yǎng)基中最常用的碳源。實(shí)際上,由于培養(yǎng)基滅菌蔗糖是培養(yǎng)基中最常用的碳源。實(shí)際上,由于培養(yǎng)基滅菌采用了高溫高壓的條件,加入到培養(yǎng)基中的蔗糖有相當(dāng)一采用了高溫高壓的條件,加入到培養(yǎng)基中的蔗糖有相當(dāng)一部分發(fā)生了部
9、分發(fā)生了水解反應(yīng)水解反應(yīng),轉(zhuǎn)化成了葡萄糖和果糖。,轉(zhuǎn)化成了葡萄糖和果糖。 第二節(jié)第二節(jié) 有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分 1 1、糖類(lèi)、糖類(lèi) 培養(yǎng)基中蔗糖的常用濃度是培養(yǎng)基中蔗糖的常用濃度是2-5%2-5%。蔗糖除了作。蔗糖除了作為碳源外,還起著調(diào)節(jié)培養(yǎng)基為碳源外,還起著調(diào)節(jié)培養(yǎng)基滲透壓滲透壓的作用。的作用。 根的器官培養(yǎng)采用較低濃度的蔗糖。根的器官培養(yǎng)采用較低濃度的蔗糖。 幼胚培養(yǎng)采用高濃度的蔗糖。幼胚培養(yǎng)采用高濃度的蔗糖。 花藥培養(yǎng)采用高濃度的蔗糖?;ㄋ幣囵B(yǎng)采用高濃度的蔗糖。第二節(jié)第二節(jié) 有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分 2, 2, 氨基酸類(lèi)氨基酸類(lèi) 氨基酸類(lèi)在組織培養(yǎng)中并不是必要的,但有時(shí)在氨基酸類(lèi)在組
10、織培養(yǎng)中并不是必要的,但有時(shí)在培養(yǎng)基中加入某些特定的氨基酸可以取得明顯有培養(yǎng)基中加入某些特定的氨基酸可以取得明顯有益的效果。益的效果。 常用的氨基酸有脯氨酸、甘氨酸、谷氨酸、天冬常用的氨基酸有脯氨酸、甘氨酸、谷氨酸、天冬氨酸和色氨酸等。氨酸和色氨酸等。 1000-1500mg/l1000-1500mg/l的脯氨酸有促進(jìn)水稻愈傷組織增的脯氨酸有促進(jìn)水稻愈傷組織增殖以及改良愈傷組織質(zhì)量的顯著作用。殖以及改良愈傷組織質(zhì)量的顯著作用。 2000mg/l2000mg/l的脯氨酸能大幅度提高大豆不定芽的形的脯氨酸能大幅度提高大豆不定芽的形成和有利于不定芽的生長(zhǎng)。成和有利于不定芽的生長(zhǎng)。第二節(jié)第二節(jié) 有機(jī)營(yíng)
11、養(yǎng)成分有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分 2, 2, 氨基酸類(lèi)氨基酸類(lèi) 一種特殊的培養(yǎng)基一種特殊的培養(yǎng)基:完全不采用無(wú)機(jī)態(tài)氮,僅采:完全不采用無(wú)機(jī)態(tài)氮,僅采用甘氨酸,精氨酸,天冬氨酸,谷氨酰胺和色氨用甘氨酸,精氨酸,天冬氨酸,谷氨酰胺和色氨酸的有機(jī)氮為唯一氮源的培養(yǎng)基,叫酸的有機(jī)氮為唯一氮源的培養(yǎng)基,叫AAAA培養(yǎng)基,培養(yǎng)基,這可以說(shuō)是一種非常特別的培養(yǎng)基。這可以說(shuō)是一種非常特別的培養(yǎng)基。 AAAA培養(yǎng)基在有些情況下可以促進(jìn)懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞培養(yǎng)基在有些情況下可以促進(jìn)懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞團(tuán)的分散,成為禾本科作物懸浮培養(yǎng)細(xì)胞游離原團(tuán)的分散,成為禾本科作物懸浮培養(yǎng)細(xì)胞游離原生質(zhì)體時(shí)較常采用的培養(yǎng)基。生質(zhì)體時(shí)較常采用的培養(yǎng)基。第二
12、節(jié)第二節(jié) 有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分有機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分 3 3,其它,其它 包括多種的天然有機(jī)物質(zhì)以及加工品,最常用的有椰子包括多種的天然有機(jī)物質(zhì)以及加工品,最常用的有椰子汁汁(CW,CM)(CW,CM)、水解蛋白或蛋白胨、水解蛋白或蛋白胨(peptone)(peptone)、此外還有人、此外還有人用玉米胚乳浸出物、麥芽浸出物、酵母浸出物、番茄汁、用玉米胚乳浸出物、麥芽浸出物、酵母浸出物、番茄汁、香蕉汁等等。香蕉汁等等。 雖然這些物質(zhì)往往對(duì)培養(yǎng)起著重要的促進(jìn)作用,但因?yàn)殡m然這些物質(zhì)往往對(duì)培養(yǎng)起著重要的促進(jìn)作用,但因?yàn)樵牧虾图庸し椒ǖ牟煌?,使用效果有可能不穩(wěn)定、是原材料和加工方法的不同,使用效果有可能不穩(wěn)定、是造
13、成實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差、效果不穩(wěn)定的主要原因。造成實(shí)驗(yàn)重復(fù)性差、效果不穩(wěn)定的主要原因。 不采用天然物質(zhì)的成分一定的培養(yǎng)基稱(chēng)為不采用天然物質(zhì)的成分一定的培養(yǎng)基稱(chēng)為完全合成培養(yǎng)完全合成培養(yǎng)基基。幾種天然有機(jī)物質(zhì)的制備方法幾種天然有機(jī)物質(zhì)的制備方法 番茄:番茄:擠壓后取得汁液,直接加入培養(yǎng)基,調(diào)擠壓后取得汁液,直接加入培養(yǎng)基,調(diào)節(jié)酸堿度后滅菌。節(jié)酸堿度后滅菌。 馬鈴薯:馬鈴薯:切成邊長(zhǎng)約切成邊長(zhǎng)約6mm6mm的小塊后加水煮沸的小塊后加水煮沸15-15-2020分鐘,取汁液加入培養(yǎng)基,然后調(diào)整酸堿度,分鐘,取汁液加入培養(yǎng)基,然后調(diào)整酸堿度,再行滅菌。再行滅菌。 香蕉:香蕉:壓爛成泥漿狀后全部加入到培養(yǎng)基中,壓
14、爛成泥漿狀后全部加入到培養(yǎng)基中,調(diào)整酸堿度后滅菌。調(diào)整酸堿度后滅菌。 椰子水:椰子水:直接加熱至直接加熱至8080度以上,然后冷卻至常度以上,然后冷卻至常溫,再用溫,再用3 3層紗布過(guò)濾除去變性凝固的蛋白質(zhì)層紗布過(guò)濾除去變性凝固的蛋白質(zhì)成分。加入到培養(yǎng)基后,調(diào)整酸堿度滅菌。成分。加入到培養(yǎng)基后,調(diào)整酸堿度滅菌。第二章第二章 培養(yǎng)基培養(yǎng)基* *無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng) * *有機(jī)營(yíng)養(yǎng)有機(jī)營(yíng)養(yǎng) * *生理活性物質(zhì)生理活性物質(zhì) * *其他添加物其他添加物 * *水水第三節(jié)第三節(jié) 生理活性物質(zhì)生理活性物質(zhì) 生理活性物質(zhì)生理活性物質(zhì)(physiologically active (physiologically
15、 active elements)elements)在培養(yǎng)基中的濃度一般在十萬(wàn)分之在培養(yǎng)基中的濃度一般在十萬(wàn)分之一至千萬(wàn)分之一,具有提高細(xì)胞活力或改變細(xì)一至千萬(wàn)分之一,具有提高細(xì)胞活力或改變細(xì)胞的發(fā)育模式的作用,和一般的營(yíng)養(yǎng)成分有本胞的發(fā)育模式的作用,和一般的營(yíng)養(yǎng)成分有本質(zhì)上的不同。質(zhì)上的不同。 生理活性物質(zhì)一般包括植物激素和維生素生理活性物質(zhì)一般包括植物激素和維生素(vitamin)(vitamin)兩大類(lèi)別。兩大類(lèi)別。第三節(jié)第三節(jié) 生理活性物質(zhì)生理活性物質(zhì) 1 1、植物激素、植物激素 植物激素也稱(chēng)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)。一般將天然的植物激素植物激素也稱(chēng)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)。一般將天然的植物激素稱(chēng)為荷
16、爾蒙(稱(chēng)為荷爾蒙(hormonehormone),而將人工合成的稱(chēng)為生長(zhǎng)調(diào)節(jié)),而將人工合成的稱(chēng)為生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑(劑(growth regulatorgrowth regulator)。)。 植物激素不僅具有促進(jìn)細(xì)胞組織的生長(zhǎng)的一般作用,還能植物激素不僅具有促進(jìn)細(xì)胞組織的生長(zhǎng)的一般作用,還能誘導(dǎo)培養(yǎng)細(xì)胞組織的誘導(dǎo)培養(yǎng)細(xì)胞組織的脫分化脫分化和器官和器官分化分化,以達(dá)到一定的培,以達(dá)到一定的培養(yǎng)目的。養(yǎng)目的。 目前,在植物體中發(fā)現(xiàn)的五類(lèi)激素,都已在植物組織培養(yǎng)目前,在植物體中發(fā)現(xiàn)的五類(lèi)激素,都已在植物組織培養(yǎng)中得到不同程度的應(yīng)用。激素的使用使很多植物種類(lèi)的組中得到不同程度的應(yīng)用。激素的使用使很多植物種
17、類(lèi)的組織細(xì)胞培養(yǎng)成為可能??椉?xì)胞培養(yǎng)成為可能。 分化、脫分化和再分化的概念 分化(分化(differentiationdifferentiation):遺傳上相同的細(xì)胞在結(jié)構(gòu)和):遺傳上相同的細(xì)胞在結(jié)構(gòu)和功能上變得不同的有序過(guò)程。功能上變得不同的有序過(guò)程。 脫分化(脫分化(dedifferentiationdedifferentiation): : 一個(gè)成熟的細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)橐粋€(gè)成熟的細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)并形成未分化的愈傷組織的現(xiàn)象。分生狀態(tài)并形成未分化的愈傷組織的現(xiàn)象。 再分化再分化 (redifferentiationredifferentiation): : 脫分化后的分生細(xì)胞脫分化后的分生細(xì)胞
18、(愈傷組織)在特定條件下發(fā)育成新的器官甚至完整植株(愈傷組織)在特定條件下發(fā)育成新的器官甚至完整植株(植株再生,(植株再生,Plant regenerationPlant regeneration)的過(guò)程。)的過(guò)程。 這些過(guò)程受內(nèi)源或外源的植物激素的直接調(diào)控,而本質(zhì)上這些過(guò)程受內(nèi)源或外源的植物激素的直接調(diào)控,而本質(zhì)上則是基因按一定順序選擇性地表達(dá)或關(guān)閉的結(jié)果。則是基因按一定順序選擇性地表達(dá)或關(guān)閉的結(jié)果。 胡蘿卜根部組織的脫分化再分化水稻愈傷組織再分化植物激素的特征 非營(yíng)養(yǎng)物質(zhì);非營(yíng)養(yǎng)物質(zhì); 以微小劑量起作用,作用效果往往很復(fù)雜,常常以微小劑量起作用,作用效果往往很復(fù)雜,常常因濃度、植物物種和器
19、官組織的不同而有顯著的因濃度、植物物種和器官組織的不同而有顯著的差別;差別; 作用機(jī)理是激發(fā)某種反應(yīng),一般認(rèn)為是通過(guò)誘導(dǎo)作用機(jī)理是激發(fā)某種反應(yīng),一般認(rèn)為是通過(guò)誘導(dǎo)基因表達(dá)或信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)來(lái)調(diào)控或啟動(dòng)生理代謝過(guò)程?;虮磉_(dá)或信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)來(lái)調(diào)控或啟動(dòng)生理代謝過(guò)程。第三節(jié)第三節(jié) 生理活性物質(zhì)生理活性物質(zhì) 1 1、植物激素、植物激素 1 1 )生長(zhǎng)素)生長(zhǎng)素 (auxin)(auxin) 天然存在的生長(zhǎng)素主要是吲哚乙酸天然存在的生長(zhǎng)素主要是吲哚乙酸(IAA)(IAA)和少量的吲哚和少量的吲哚丁酸丁酸(indole butyric acid, IBA)(indole butyric acid, IBA)。 在組織
20、培養(yǎng)中,應(yīng)用更多的是人工合成的具有吲哚乙在組織培養(yǎng)中,應(yīng)用更多的是人工合成的具有吲哚乙酸類(lèi)似功能的化合物,主要包括:酸類(lèi)似功能的化合物,主要包括:萘乙酸萘乙酸(naphthalene acetic acid, NAAnaphthalene acetic acid, NAA);二氯苯氧乙酸,;二氯苯氧乙酸,(2,4-dichlorophenoxyacetic acid, 2,4-D2,4-dichlorophenoxyacetic acid, 2,4-D););三氯苯氧乙三氯苯氧乙酸(酸(2,4,5-T2,4,5-T)等。)等。 這些化學(xué)合成的生長(zhǎng)素類(lèi)物質(zhì)不僅價(jià)格便宜,而且比這些化學(xué)合成的生長(zhǎng)素
21、類(lèi)物質(zhì)不僅價(jià)格便宜,而且比吲哚乙酸的光穩(wěn)定性和熱穩(wěn)定性好。吲哚乙酸的光穩(wěn)定性和熱穩(wěn)定性好。第三節(jié)第三節(jié) 生理活性物質(zhì)生理活性物質(zhì) 1 1、植物激素、植物激素 1 1)生長(zhǎng)素)生長(zhǎng)素 2,4-D2,4-D和和2,4,5-T2,4,5-T的作用力度較強(qiáng),一般用于的作用力度較強(qiáng),一般用于誘導(dǎo)組織脫分誘導(dǎo)組織脫分化化和促進(jìn)愈傷組織的增殖。和促進(jìn)愈傷組織的增殖。 NAANAA的作用效果介于的作用效果介于IBAIBA和和2,4-D2,4-D之間,和之間,和2,4-D2,4-D明顯不同的明顯不同的一個(gè)特點(diǎn)是不像一個(gè)特點(diǎn)是不像2,4-D2,4-D那樣強(qiáng)烈地抑制葉綠素的形成。那樣強(qiáng)烈地抑制葉綠素的形成。 NAA
22、NAA在組織培養(yǎng)中主要用于在組織培養(yǎng)中主要用于促進(jìn)根的形成和配合細(xì)胞分裂促進(jìn)根的形成和配合細(xì)胞分裂素使用素使用,提高培養(yǎng)物的活力。,提高培養(yǎng)物的活力。 生長(zhǎng)素的使用濃度一般在生長(zhǎng)素的使用濃度一般在0.1-10 mg/l0.1-10 mg/l。第三節(jié)第三節(jié) 生理活性物質(zhì)生理活性物質(zhì) 1 1、植物激素、植物激素 2 2)細(xì)胞分裂素)細(xì)胞分裂素 (cytokinincytokinin) 天然存在的主要是玉米素(天然存在的主要是玉米素(ZeatinZeatin)。)。 天然的細(xì)胞分裂天然的細(xì)胞分裂素其熱穩(wěn)定性都比較差,價(jià)格也特別昂貴。在組培中更素其熱穩(wěn)定性都比較差,價(jià)格也特別昂貴。在組培中更經(jīng)常使用的
23、是人工合成的細(xì)胞分裂素。人工合成的分裂經(jīng)常使用的是人工合成的細(xì)胞分裂素。人工合成的分裂素主要包括:素主要包括: 激動(dòng)素(俗名動(dòng)力精,激動(dòng)素(俗名動(dòng)力精,KinetinKinetin,略稱(chēng),略稱(chēng)KtKt,化學(xué)名稱(chēng):,化學(xué)名稱(chēng):6-6-糠基氨基嘌呤,糠基氨基嘌呤, 6-furfurylaminopurine6-furfurylaminopurine,);,);芐基腺芐基腺嘌呤(嘌呤(6-benzyladenine, 6-BA6-benzyladenine, 6-BA,也稱(chēng),也稱(chēng)6-6-芐氨基嘌呤芐氨基嘌呤(6-benzylaminopurine, 6-BAP6-benzylaminopurine,
24、 6-BAP););噻苯隆(噻苯?。∟-N-苯基苯基- -N-1,2,3-N-1,2,3-噻二唑噻二唑-5-5-脲,脲, thidiazuron, TDZ)thidiazuron, TDZ)。第三節(jié)第三節(jié) 生理活性物質(zhì)生理活性物質(zhì) 1 1、植物激素、植物激素 2 2)細(xì)胞分裂素)細(xì)胞分裂素 (cytokinincytokinin) KtKt一般是配合一般是配合2,4-D2,4-D在在誘導(dǎo)愈傷組織誘導(dǎo)愈傷組織中使用中使用; ; BABA一般是在一般是在誘導(dǎo)不定芽誘導(dǎo)不定芽時(shí)單獨(dú)或配合時(shí)單獨(dú)或配合NAANAA使用使用; ; TDZTDZ一般情況下一般情況下作用最強(qiáng)烈作用最強(qiáng)烈,純品價(jià)格高,通,純品
25、價(jià)格高,通常是在常是在BABA作用效果不理想時(shí)才使用。作用效果不理想時(shí)才使用。第三節(jié)第三節(jié) 生理活性物質(zhì)生理活性物質(zhì) 1 1、植物激素、植物激素 3)赤霉素(gibberellic acid) 天然赤霉素,加上合成的一共有好幾十種,而最有代表性,天然赤霉素,加上合成的一共有好幾十種,而最有代表性,研究得較多的是其中赤霉酸研究得較多的是其中赤霉酸( (赤霉素赤霉素A A3 3或或GAGA3 3) )。 使用赤霉素的效果和目的主要有:使用赤霉素的效果和目的主要有: 緩解細(xì)胞分裂素對(duì)莖部伸長(zhǎng)的抑制作用;緩解細(xì)胞分裂素對(duì)莖部伸長(zhǎng)的抑制作用; 用于果樹(shù)的胚珠培養(yǎng),以促進(jìn)胚胎發(fā)育;用于果樹(shù)的胚珠培養(yǎng),以促
26、進(jìn)胚胎發(fā)育; 用于草莓和馬鈴薯等的莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)培養(yǎng);用于草莓和馬鈴薯等的莖尖生長(zhǎng)點(diǎn)培養(yǎng); 用于促進(jìn)椰菜花的愈傷組織再分化。用于促進(jìn)椰菜花的愈傷組織再分化。第三節(jié)第三節(jié) 生理活性物質(zhì)生理活性物質(zhì) 1 1、植物激素、植物激素 4 4) 脫落酸脫落酸 (abscisic acidabscisic acid,ABAABA) 脫落酸是在前世紀(jì)脫落酸是在前世紀(jì)6060年代才被發(fā)現(xiàn)的,在化學(xué)結(jié)構(gòu)上和赤年代才被發(fā)現(xiàn)的,在化學(xué)結(jié)構(gòu)上和赤霉素同屬于萜烯類(lèi)化合物。脫落酸有順?lè)磧煞N異構(gòu)體,霉素同屬于萜烯類(lèi)化合物。脫落酸有順?lè)磧煞N異構(gòu)體,反式異構(gòu)體的生理活性很低。反式異構(gòu)體的生理活性很低。 脫落酸在組織培養(yǎng)方面的作用有:
27、脫落酸在組織培養(yǎng)方面的作用有: A A,抑制未成熟胚的過(guò)早萌發(fā),促進(jìn)胚胎的正常發(fā)育;,抑制未成熟胚的過(guò)早萌發(fā),促進(jìn)胚胎的正常發(fā)育;B B,促進(jìn)番茄,番薯,煙草和水稻的植株再分化;,促進(jìn)番茄,番薯,煙草和水稻的植株再分化;C C,在人工種子的制備中使用脫落酸防止胚胎的過(guò)早萌發(fā)或,在人工種子的制備中使用脫落酸防止胚胎的過(guò)早萌發(fā)或包埋的芽體的過(guò)早萌動(dòng)。包埋的芽體的過(guò)早萌動(dòng)。第三節(jié)第三節(jié) 生理活性物質(zhì)生理活性物質(zhì) 1 1、植物激素、植物激素 5 5)乙烯()乙烯(EthyleneEthylene) 在五類(lèi)植物激素中,乙烯是被確認(rèn)得最遲的,也是唯一的一在五類(lèi)植物激素中,乙烯是被確認(rèn)得最遲的,也是唯一的一
28、種氣態(tài)激素。乙烯在組培中的應(yīng)用例子很少,但在密封的種氣態(tài)激素。乙烯在組培中的應(yīng)用例子很少,但在密封的培養(yǎng)容器內(nèi)幾乎都可以檢測(cè)到乙烯的存在,證明培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)容器內(nèi)幾乎都可以檢測(cè)到乙烯的存在,證明培養(yǎng)細(xì)胞組織都或多或少地產(chǎn)生乙烯。組織都或多或少地產(chǎn)生乙烯。 油菜等十字花科植物的離體培養(yǎng)物則受到其本身產(chǎn)生油菜等十字花科植物的離體培養(yǎng)物則受到其本身產(chǎn)生的乙烯的顯著抑制,添加硝酸銀(的乙烯的顯著抑制,添加硝酸銀(2-10 mg/l2-10 mg/l)可以有效地)可以有效地促進(jìn)培養(yǎng)物的增殖和生長(zhǎng)。促進(jìn)培養(yǎng)物的增殖和生長(zhǎng)。第三節(jié)第三節(jié) 生理活性物質(zhì)生理活性物質(zhì) 2 2、維生素類(lèi)和類(lèi)維生素、維生素類(lèi)和類(lèi)維生素
29、 大多數(shù)培養(yǎng)的細(xì)胞都能合成所有必需的維生素,但在數(shù)量大多數(shù)培養(yǎng)的細(xì)胞都能合成所有必需的維生素,但在數(shù)量上往往不夠,在培養(yǎng)基中加入一定量的某些維生素可以上往往不夠,在培養(yǎng)基中加入一定量的某些維生素可以有效地促進(jìn)細(xì)胞組織的生長(zhǎng)和增殖有效地促進(jìn)細(xì)胞組織的生長(zhǎng)和增殖, ,有時(shí)還對(duì)培養(yǎng)成功與有時(shí)還對(duì)培養(yǎng)成功與否起著決定性的作用。否起著決定性的作用。 常用的維生素有硫胺素常用的維生素有硫胺素( (維生素維生素B1, thiamine-HCl),B1, thiamine-HCl),吡哆吡哆醇醇( (維生素維生素B6, pyridoxine-HCl)B6, pyridoxine-HCl),煙酸,煙酸( (尼古
30、丁酸尼古丁酸, ,維生維生素素B3, Nicotinic acid)B3, Nicotinic acid),泛酸鈣,泛酸鈣(B5, Ca-pantothenate)(B5, Ca-pantothenate)等。等。第三節(jié)第三節(jié) 生理活性物質(zhì)生理活性物質(zhì) 2 2、維生素類(lèi)和類(lèi)維生素、維生素類(lèi)和類(lèi)維生素 在所有的維生素種,硫胺素最為重要,使用濃在所有的維生素種,硫胺素最為重要,使用濃度在度在0.1-10mg/L0.1-10mg/L。 硫胺素和吡哆醇一般采用鹽酸鹽的形態(tài),這樣硫胺素和吡哆醇一般采用鹽酸鹽的形態(tài),這樣可以更加容易溶解在水中。可以更加容易溶解在水中。 肌醇是一種類(lèi)似維生素的物質(zhì),在培養(yǎng)基
31、中使肌醇是一種類(lèi)似維生素的物質(zhì),在培養(yǎng)基中使用濃度比維生素高,一般使用濃度為每升用濃度比維生素高,一般使用濃度為每升100100毫克。毫克。 第二章第二章 培養(yǎng)基培養(yǎng)基* *無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng) * *有機(jī)營(yíng)養(yǎng)有機(jī)營(yíng)養(yǎng) * *生理活性物質(zhì)生理活性物質(zhì) * *其他添加物其他添加物 * *水水第四節(jié)第四節(jié) 其他添加物其他添加物 1 1,培養(yǎng)基固化劑,培養(yǎng)基固化劑 1 1)瓊脂()瓊脂(agaragar) 固化劑中使用最多的是瓊脂,又名瓊膠、洋菜、固化劑中使用最多的是瓊脂,又名瓊膠、洋菜、凍粉,是一類(lèi)從石花菜及其它紅藻類(lèi)植物提取出凍粉,是一類(lèi)從石花菜及其它紅藻類(lèi)植物提取出來(lái)的藻膠。條狀瓊脂為類(lèi)白色或淡黃
32、色半透明細(xì)來(lái)的藻膠。條狀瓊脂為類(lèi)白色或淡黃色半透明細(xì)長(zhǎng)條狀;粉狀瓊脂為鱗片狀無(wú)色或淡黃色粉末。長(zhǎng)條狀;粉狀瓊脂為鱗片狀無(wú)色或淡黃色粉末。 瓊脂是多糖類(lèi)物質(zhì),使用濃度為瓊脂是多糖類(lèi)物質(zhì),使用濃度為0.6-1%0.6-1%?,F(xiàn)在還。現(xiàn)在還沒(méi)有看到植物組織能吸收利用瓊脂的報(bào)導(dǎo)。但瓊沒(méi)有看到植物組織能吸收利用瓊脂的報(bào)導(dǎo)。但瓊脂里混雜的物質(zhì)常常對(duì)培養(yǎng)結(jié)果產(chǎn)生比較明顯的脂里混雜的物質(zhì)常常對(duì)培養(yǎng)結(jié)果產(chǎn)生比較明顯的影響。影響。第四節(jié)第四節(jié) 其他添加物其他添加物 1 1,培養(yǎng)基固化劑,培養(yǎng)基固化劑 1 1)瓊脂()瓊脂(agaragar) 瓊脂溶液(培養(yǎng)基)一般在瓊脂溶液(培養(yǎng)基)一般在4545攝氏度前后逐漸攝
33、氏度前后逐漸凝固,濃度是影響凝固溫度的一個(gè)因子。如果凝固,濃度是影響凝固溫度的一個(gè)因子。如果培養(yǎng)基滅菌后沒(méi)有混勻,容器底部的濃度偏高,培養(yǎng)基滅菌后沒(méi)有混勻,容器底部的濃度偏高,容易在底部開(kāi)始凝固。容易在底部開(kāi)始凝固。 附:瓊脂糖附:瓊脂糖(agarose)(agarose),在多數(shù)情況下在多數(shù)情況下的培養(yǎng)效果比瓊脂好,特別是低凝固溫度的瓊的培養(yǎng)效果比瓊脂好,特別是低凝固溫度的瓊脂糖是原生質(zhì)體包埋培養(yǎng)的首選材料。脂糖是原生質(zhì)體包埋培養(yǎng)的首選材料。 第四節(jié)第四節(jié) 其他添加物其他添加物 1 1,固化劑,固化劑 2 2)卡拉膠()卡拉膠(carrageenan ) 卡拉膠是另一種在組織培養(yǎng)生產(chǎn)上用得最
34、廣泛的卡拉膠是另一種在組織培養(yǎng)生產(chǎn)上用得最廣泛的固化劑,使用濃度為固化劑,使用濃度為0.6-0.8%0.6-0.8%,價(jià)格為瓊脂的,價(jià)格為瓊脂的1/2-1/31/2-1/3。 卡拉膠是從紅藻中的幾個(gè)海藻品種中提取的海藻卡拉膠是從紅藻中的幾個(gè)海藻品種中提取的海藻多糖的統(tǒng)稱(chēng)。不同的來(lái)源有不同的精細(xì)結(jié)構(gòu),其多糖的統(tǒng)稱(chēng)。不同的來(lái)源有不同的精細(xì)結(jié)構(gòu),其膠體性質(zhì)也不盡相同。膠體性質(zhì)也不盡相同。第四節(jié)第四節(jié) 其他添加物其他添加物 1 1,固化劑,固化劑 2 2)卡拉膠)卡拉膠 卡拉膠干的粉末性質(zhì)很穩(wěn)定,長(zhǎng)期放置不會(huì)降卡拉膠干的粉末性質(zhì)很穩(wěn)定,長(zhǎng)期放置不會(huì)降解,在中性和堿性溶液中也很穩(wěn)定,即使加熱解,在中性和
35、堿性溶液中也很穩(wěn)定,即使加熱也不水解。植物細(xì)胞不能分解或吸收卡拉膠。也不水解。植物細(xì)胞不能分解或吸收卡拉膠。 卡拉膠在培養(yǎng)效果上和瓊脂往往有區(qū)別,使用卡拉膠在培養(yǎng)效果上和瓊脂往往有區(qū)別,使用瓊脂的培養(yǎng)效果往往較好,例如有利于避免植瓊脂的培養(yǎng)效果往往較好,例如有利于避免植物材料的玻璃化。物材料的玻璃化。第四節(jié)第四節(jié) 其他添加物其他添加物 1,1,固化劑固化劑 3)Phytagel(3)Phytagel(植物膠植物膠) ) PhytagelPhytagel是一種純度高、透明度好,凝膠強(qiáng)度大的固化劑。是一種純度高、透明度好,凝膠強(qiáng)度大的固化劑。使用濃度為使用濃度為1.5-2g/L,1.5-2g/L,
36、僅為瓊脂的僅為瓊脂的1/41/4到到1/51/5的用量。的用量。 PhytagelPhytagel由細(xì)菌所產(chǎn)生由細(xì)菌所產(chǎn)生, ,主要成分為葡糖甙酸主要成分為葡糖甙酸, ,鼠李糖和極鼠李糖和極少量的葡萄糖。少量的葡萄糖。 PhytagelPhytagel需要一定濃度的鈣離子才能夠凝固,在培養(yǎng)水稻需要一定濃度的鈣離子才能夠凝固,在培養(yǎng)水稻植株的后期本來(lái)已經(jīng)固化的培養(yǎng)基會(huì)變軟甚至液化。植株的后期本來(lái)已經(jīng)固化的培養(yǎng)基會(huì)變軟甚至液化。第四節(jié)第四節(jié) 其他添加物其他添加物 1,1,固化劑固化劑 4)4)冷凝膠冷凝膠 固化質(zhì)量類(lèi)似優(yōu)質(zhì)瓊脂,但透明度比瓊脂高,固化質(zhì)量類(lèi)似優(yōu)質(zhì)瓊脂,但透明度比瓊脂高,并且粘度比瓊
37、脂小。因此特別適合組培苗最后并且粘度比瓊脂小。因此特別適合組培苗最后一個(gè)階段一個(gè)階段誘導(dǎo)芽條長(zhǎng)根的培養(yǎng)。因?yàn)榻M培誘導(dǎo)芽條長(zhǎng)根的培養(yǎng)。因?yàn)榻M培苗出瓶后需要洗干凈根上的培養(yǎng)基才能種植苗出瓶后需要洗干凈根上的培養(yǎng)基才能種植。第四節(jié)第四節(jié) 其他添加物其他添加物 1,1,固化劑固化劑 5) 5) 其他其他 淀粉也可作為培養(yǎng)基的固化劑,但物理性能很淀粉也可作為培養(yǎng)基的固化劑,但物理性能很差,粘性大,操作不方便。有些植物種類(lèi)或器差,粘性大,操作不方便。有些植物種類(lèi)或器官能在一定程度上利用培養(yǎng)基中的淀粉。官能在一定程度上利用培養(yǎng)基中的淀粉。 熱穩(wěn)定和化學(xué)惰性的物質(zhì),這類(lèi)物質(zhì)很多,但熱穩(wěn)定和化學(xué)惰性的物質(zhì),這類(lèi)
38、物質(zhì)很多,但在組織培養(yǎng)中應(yīng)用不常見(jiàn),主要是起到物理性在組織培養(yǎng)中應(yīng)用不常見(jiàn),主要是起到物理性質(zhì)的支撐作用。質(zhì)的支撐作用。有四個(gè)因素會(huì)影響培養(yǎng)基的固化強(qiáng)度有四個(gè)因素會(huì)影響培養(yǎng)基的固化強(qiáng)度:固化劑的量,培養(yǎng)基酸堿度,高壓滅菌的溫度和時(shí)間長(zhǎng)度,培養(yǎng)基成分特別是重金屬離子濃度。固化劑一定要在溶解狀態(tài)時(shí)攪拌混勻,不然會(huì)沉淀而造成培養(yǎng)基上層偏軟。第四節(jié)第四節(jié) 其他添加物其他添加物 2 2,酸堿度調(diào)節(jié)劑和穩(wěn)定劑,酸堿度調(diào)節(jié)劑和穩(wěn)定劑 一般培養(yǎng)基酸堿度在調(diào)配后偏于酸性,一般培養(yǎng)基酸堿度在調(diào)配后偏于酸性,pHpH值在值在5.05.0前前后,培養(yǎng)基在高壓滅菌后后,培養(yǎng)基在高壓滅菌后pHpH值還會(huì)繼續(xù)降低。值還會(huì)繼
39、續(xù)降低。 太低的太低的pHpH值不僅不適合植物細(xì)胞的生長(zhǎng),而且,還值不僅不適合植物細(xì)胞的生長(zhǎng),而且,還會(huì)明顯降低培養(yǎng)基的凝膠強(qiáng)度,或?qū)е屡囵B(yǎng)基完全會(huì)明顯降低培養(yǎng)基的凝膠強(qiáng)度,或?qū)е屡囵B(yǎng)基完全不能凝固。不能凝固。 高壓滅菌之前將培養(yǎng)基的高壓滅菌之前將培養(yǎng)基的pHpH值適當(dāng)調(diào)高,一般是采值適當(dāng)調(diào)高,一般是采用用1N1N的的NaOHNaOH或或KOHKOH溶液將酸堿度調(diào)至溶液將酸堿度調(diào)至pHpH值等于值等于5.6-5.6-5.85.8。 第四節(jié)第四節(jié) 其他添加物其他添加物 2 2,酸堿度調(diào)節(jié)劑和穩(wěn)定劑,酸堿度調(diào)節(jié)劑和穩(wěn)定劑 很多緩沖劑由于對(duì)植物細(xì)胞具有毒害作用而不很多緩沖劑由于對(duì)植物細(xì)胞具有毒害作用
40、而不能夠在培養(yǎng)基中使用;實(shí)際上能夠用于穩(wěn)定培能夠在培養(yǎng)基中使用;實(shí)際上能夠用于穩(wěn)定培養(yǎng)基酸堿度的只有養(yǎng)基酸堿度的只有MESMES(嗎啉代乙基磺酸),(嗎啉代乙基磺酸),一般使用量在一般使用量在500mg/l500mg/l左右。左右。 由于由于MESMES自身是酸性物質(zhì),增加添加量會(huì)導(dǎo)致自身是酸性物質(zhì),增加添加量會(huì)導(dǎo)致培養(yǎng)基太酸而不適合細(xì)胞生長(zhǎng),因此,不能夠培養(yǎng)基太酸而不適合細(xì)胞生長(zhǎng),因此,不能夠通過(guò)增加使用量來(lái)提高緩沖能力通過(guò)增加使用量來(lái)提高緩沖能力。第四節(jié)第四節(jié) 其他添加物其他添加物 3 3,滲透壓(,滲透壓(osmotic potentialosmotic potential)調(diào)節(jié)劑)調(diào)節(jié)
41、劑 在某些特殊情況下需要對(duì)培養(yǎng)基的滲透壓進(jìn)行調(diào)節(jié)。在某些特殊情況下需要對(duì)培養(yǎng)基的滲透壓進(jìn)行調(diào)節(jié)。 培養(yǎng)基的成分決定了滲透壓的具體數(shù)值,對(duì)滲透壓的調(diào)培養(yǎng)基的成分決定了滲透壓的具體數(shù)值,對(duì)滲透壓的調(diào)節(jié)需要改變培養(yǎng)基的成分。節(jié)需要改變培養(yǎng)基的成分。 滲透壓調(diào)節(jié)劑一般采用植物不能進(jìn)行代謝的物質(zhì),用的滲透壓調(diào)節(jié)劑一般采用植物不能進(jìn)行代謝的物質(zhì),用的最多的是甘露醇最多的是甘露醇(mannitol)(mannitol)和山梨醇和山梨醇(sorbitol)(sorbitol)。 實(shí)際上,某些植物是能夠代謝山梨醇的。實(shí)際上,某些植物是能夠代謝山梨醇的。 對(duì)滲透壓的改變量和調(diào)節(jié)劑的分子量成反比。對(duì)滲透壓的改變量和
42、調(diào)節(jié)劑的分子量成反比。第四節(jié)第四節(jié) 其他添加物其他添加物 4 4,吸附劑,吸附劑(absorbance)(absorbance) 吸附劑的作用是吸收植物組織分泌到培養(yǎng)基中的有害物質(zhì),吸附劑的作用是吸收植物組織分泌到培養(yǎng)基中的有害物質(zhì),保護(hù)植物組織免受毒害,防止組織褐化(保護(hù)植物組織免受毒害,防止組織褐化(browning, browning, necrosisnecrosis)。)。 1),1),活性炭活性炭(activated charcoal, AC)(activated charcoal, AC) 活性炭是一種多孔性的微粒,主要是利用物理性的吸附作活性炭是一種多孔性的微粒,主要是利用物理
43、性的吸附作用。加到培養(yǎng)基后可以和外滲物結(jié)合,減少外滲物對(duì)組織用。加到培養(yǎng)基后可以和外滲物結(jié)合,減少外滲物對(duì)組織的毒害作用。但活性炭也會(huì)吸收植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑,從另一的毒害作用。但活性炭也會(huì)吸收植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑,從另一個(gè)方面對(duì)組織培養(yǎng)造成影響。個(gè)方面對(duì)組織培養(yǎng)造成影響。第四節(jié)第四節(jié) 其他添加物其他添加物 4 4,吸附劑,吸附劑(absorbance)(absorbance) 2), 聚乙烯吡咯烷酮(Polyvinylpyrrodine, PVP) PVP PVP 是大分子化合物,具有不同的分子量可供是大分子化合物,具有不同的分子量可供選用,對(duì)酚類(lèi)物質(zhì)具有專(zhuān)一的吸附能力,在生選用,對(duì)酚類(lèi)物質(zhì)具有專(zhuān)一的吸
44、附能力,在生物化學(xué)分離制備中常作為酚類(lèi)物質(zhì)和細(xì)胞器的物化學(xué)分離制備中常作為酚類(lèi)物質(zhì)和細(xì)胞器的保護(hù)劑。保護(hù)劑。第四節(jié)第四節(jié) 其他添加物其他添加物 4 4,吸附劑,吸附劑(absorbance)(absorbance) 活性炭和活性炭和PVPPVP的添加效果的不同還由于兩者在的添加效果的不同還由于兩者在培養(yǎng)基中的分布情況的不同而有顯著的差別。培養(yǎng)基中的分布情況的不同而有顯著的差別。在固體培養(yǎng)基中,在固體培養(yǎng)基中,PVP PVP 的分布是均勻的,而活的分布是均勻的,而活性炭則大部分沉淀到培養(yǎng)瓶的底部,難以發(fā)揮性炭則大部分沉淀到培養(yǎng)瓶的底部,難以發(fā)揮作用。作用。 活性炭的顆粒越大,沉淀的比例就越大。在植活性炭的顆
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