TS-7131-00培養(yǎng)基適用性檢查驗(yàn)證方案

1、四川省府慶制藥有限公司確認(rèn)與驗(yàn)證頁 碼： 8文件編碼： TS-7131版 本 號： 00題 目：培養(yǎng)基適用性檢查驗(yàn)證方案項(xiàng)目負(fù)責(zé)人：驗(yàn)證類別：方法驗(yàn)證驗(yàn)證領(lǐng)導(dǎo)小組審查匯簽：姓 名部 門職務(wù)或崗位簽字日期總經(jīng)理質(zhì)量受權(quán)人質(zhì)量部經(jīng)理生產(chǎn)技術(shù)部經(jīng)理設(shè)備動(dòng)力部經(jīng)理物料管理部經(jīng)理質(zhì)量部QA主管質(zhì)量部QC主管生產(chǎn)技術(shù)部提取車間主任生產(chǎn)技術(shù)部制劑車間主任1.主題內(nèi)容細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)用的培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性檢查。本次驗(yàn)證的目的是確認(rèn)營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基適合細(xì)菌、霉菌及酵母菌數(shù)測定。2.適用范圍本方案適用于我公司培養(yǎng)基適用性檢查方法的驗(yàn)證。3.簡介3.1概述：細(xì)菌、霉菌及酵母菌計(jì)數(shù)用的

2、培養(yǎng)基應(yīng)進(jìn)行培養(yǎng)基的適用性檢查，成品培養(yǎng)基、由脫水培養(yǎng)基或按處方配制的培養(yǎng)基均應(yīng)檢查。為保證營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基適合細(xì)菌、霉菌及酵母菌數(shù)測定，故對該培養(yǎng)基的適用性進(jìn)行驗(yàn)證。3.2驗(yàn)證依據(jù)驗(yàn)證依據(jù)驗(yàn)證與確認(rèn)管理規(guī)程、驗(yàn)證與確認(rèn)SOP、中國藥典2010版一部附錄 C微生物限度檢查法。4.驗(yàn)證目的確認(rèn)營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基和玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基適合細(xì)菌、霉菌及酵母菌數(shù)測定。部門人員姓名職責(zé)及分工質(zhì)量部QC主管負(fù)責(zé)起草驗(yàn)證方案并組織實(shí)施，總結(jié)驗(yàn)證結(jié)果、起草驗(yàn)證報(bào)告。質(zhì)量部經(jīng)理負(fù)責(zé)審核驗(yàn)證方案及報(bào)告，負(fù)責(zé)驗(yàn)證工作的組織實(shí)施。確認(rèn)/驗(yàn)證管理員負(fù)責(zé)驗(yàn)證工作的組織與協(xié)調(diào)。5.實(shí)施驗(yàn)證人員及職責(zé)6.變更和偏

3、差處理驗(yàn)證過程中如果出現(xiàn)偏差和變更，應(yīng)立即通知確認(rèn)與驗(yàn)證小組并對偏差和變更進(jìn)行詳細(xì)記錄（參見偏差處理單，變更處理單），分析偏差產(chǎn)生的根本原因并提出解決方法。所有偏差和變更得到有效處理后，驗(yàn)證方可進(jìn)入下一步驟。偏差處理單和變更處理單經(jīng)過批準(zhǔn)后其原件必須附在驗(yàn)證報(bào)告中。變更和偏差處理記錄 本次驗(yàn)證無變更和偏差情況 本次驗(yàn)證發(fā)生變更和偏差差情況 出現(xiàn)階段變更和偏差說明處理措施處理結(jié)果備注檢查人/日期： 復(fù)核人/日期：7.驗(yàn)證內(nèi)容7.1 試驗(yàn)材料被驗(yàn)證產(chǎn)品：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基7.2儀器設(shè)備7.2.1 LDZX-50KB立式壓力蒸汽滅菌器7.2.2 BSC-1300-A2生物安全柜 7.

4、2.3 SW-CJ-1D單人凈化操作臺 7.2.4 SPX-250B-Z生化培養(yǎng)箱7.2.5 DH-400電熱恒溫培養(yǎng)箱7.2.6 Kxh-202-2A恒溫干燥箱7.3 驗(yàn)證用培養(yǎng)基 名稱生產(chǎn)廠家批號營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基改良馬丁培養(yǎng)基改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基營養(yǎng)瓊脂對照培養(yǎng)基玫瑰紅鈉瓊脂對照培養(yǎng)基酵母浸出粉胨葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基7.4驗(yàn)證用菌株：(第 代)驗(yàn)證菌株培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時(shí)間（小時(shí)）大腸埃希菌營養(yǎng)肉湯30351824金黃色葡萄球菌營養(yǎng)肉湯30351824枯草芽孢桿菌營養(yǎng)肉湯30351824白色念珠菌改良馬丁培養(yǎng)基23282448黑曲霉菌改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基232857（

5、天）7.577.5培訓(xùn)驗(yàn)證方案起草人在方案批準(zhǔn)后對本次驗(yàn)證相關(guān)人員進(jìn)行培訓(xùn)，并記錄在相關(guān)附件中。如果在驗(yàn)證中涉及到其他培訓(xùn)，培訓(xùn)記錄的復(fù)印件附在驗(yàn)證報(bào)告中。培訓(xùn)內(nèi)容培養(yǎng)基適用性檢查驗(yàn)證方案培 訓(xùn) 老 師單 位是否外聘老師是 否職稱或職務(wù)培訓(xùn)開始時(shí)間培訓(xùn)結(jié)束時(shí)間序 號受 訓(xùn) 人簽 到序 號受 訓(xùn) 人簽 到1熊丹82楊澤明93王淇104顏敏11512613714應(yīng)到人數(shù)實(shí)到人數(shù)授課人意見（培訓(xùn)是否達(dá)到效果、對下次培訓(xùn)有何建議等）： 授課人簽名： 日期：7.6驗(yàn)證方法7.6.1菌液制備 7.6.1.1接種大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、與枯草芽孢桿菌的新鮮培養(yǎng)物至營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基中，于3035培養(yǎng)1824

6、小時(shí)。取經(jīng)3035培養(yǎng)1824小時(shí)的大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、與枯草芽孢桿菌營養(yǎng)肉湯新鮮培養(yǎng)物1ml加入到9ml0.9%無菌氯化鈉溶液中，10倍稀釋至10-610-7約為50100cfuml的菌懸液備用。7.6.1.2接種白色念珠菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁培養(yǎng)基中，于2328培養(yǎng)2448小時(shí)。取經(jīng)2328培養(yǎng)2448小時(shí)的白色念珠菌改良馬丁液體培養(yǎng)物1ml加入到9ml0.9%無菌氯化鈉溶液中，10倍稀釋至10-5約為50100cfuml的菌懸液備用。7.6.1.3接種黑曲霉菌的新鮮培養(yǎng)物至改良馬丁瓊脂斜面培養(yǎng)基上，于2328培養(yǎng)57天，加入35ml含0.05%（ml/ml）聚山梨脂80的0.9

7、%無菌氯化鈉溶液，將孢子洗脫。然后，用適宜方法吸出孢子懸液至無菌試管內(nèi)，用含0.05%（ml/ml）聚山梨脂80的0.9%無菌氯化鈉溶液制成每1ml含孢子數(shù)50100cfuml的菌懸液備用。7.7菌液計(jì)數(shù)：（每種菌液接種2個(gè)平皿）大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌與枯草芽孢桿菌分別取1ml接種至營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中，置3035培養(yǎng)48小時(shí)；白色念珠菌、黑曲霉分別取1ml接種至玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，置2328培養(yǎng)72小時(shí)。菌落計(jì)數(shù)結(jié)果（2個(gè)平皿計(jì)數(shù)取平均值）見下表菌落計(jì)數(shù)結(jié)果（cfuml）試驗(yàn)次數(shù)10-5稀釋10-6稀釋10-7稀釋123123123大腸埃希菌金黃色葡萄球菌枯草芽孢桿菌白色念珠菌黑曲霉7.8適

8、用性檢查： 7.8.1.取大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml，分別注入無菌平皿中，立即傾注營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，混勻，凝固，置3035培養(yǎng)48小時(shí)，計(jì)數(shù)；取白色念珠菌、黑曲霉菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml，分別注入無菌平皿中，立即傾注玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，混勻，凝固，置2328培養(yǎng)72小時(shí)，計(jì)數(shù)。7.8.2取大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml，分別注入無菌平皿中，立即傾注營養(yǎng)瓊脂對照培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，混勻，凝固，置3035培養(yǎng)48小時(shí)，計(jì)數(shù)；取白色念珠菌、黑曲霉菌的菌液（50100cfu/ml）各1ml，分別注入無菌平皿中，立即傾注玫瑰紅鈉瓊脂對照培養(yǎng)基，每株試驗(yàn)菌平行制備2個(gè)平皿，混勻，凝固，置2328培養(yǎng)72小時(shí)，計(jì)數(shù)。 7.8.3結(jié)果見附表7.9.驗(yàn)證周期原檢驗(yàn)條件發(fā)生改變時(shí)，檢查方法應(yīng)重新驗(yàn)證。附表：計(jì)數(shù)培養(yǎng)基適用性檢查驗(yàn)證記錄試驗(yàn)時(shí)間 年 月 日 完成時(shí)間 年 月 日驗(yàn)證菌株平皿號供試品組cfuml