止痛凝膠膏劑體外釋放與經(jīng)皮滲透性探究

1、止痛凝膠膏劑體外釋放與經(jīng)皮滲透性探究摘要采用改良franz擴(kuò)散池法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以延 胡索乙素為指標(biāo)，hplc測(cè)定樣品的含量，考察止痛凝膠膏劑 的體外釋放和經(jīng)皮滲透行為。經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，24h內(nèi)延胡索乙 素累積釋藥率和釋藥速率為81.9%, 2. 26 ug cm-2 h-1； 24 h累積經(jīng)皮滲透率和速率分別為12. 53% , 0. 27 ygcm-2h-l, 48 h內(nèi)累積經(jīng)皮滲透率和速率為20. 31%, 0. 22 ugcm-2 h-l,表明止痛凝膠膏劑具有較好的釋放 和透皮性能，透皮行為符合零級(jí)動(dòng)力學(xué)過(guò)程。關(guān)鍵詞透皮吸收；延胡索乙素；hplc；凝膠膏劑止痛凝膠膏劑由延胡索、川烏、草烏等多味

2、中藥組成， 具有理氣、活血、止痛之功效，用于行經(jīng)腹痛、胃痛、肋痛、 頭痛。凝膠膏劑（原巴布劑）是一類(lèi)以水溶性高分子材料為 基質(zhì)的新型外用劑型，具有載藥量大，保濕性強(qiáng)，可反復(fù)揭 帖，隨時(shí)終止給藥，用藥安全等優(yōu)點(diǎn)1-2,是當(dāng)前中藥經(jīng) 皮給藥新劑型研究熱點(diǎn)之一。本實(shí)驗(yàn)以方中君藥延胡索中有 效成分延胡索乙素為指標(biāo)，考察了止痛凝膠膏劑的體外釋放 和經(jīng)皮滲透行為，以期闡釋止痛凝膠膏劑體外釋藥、經(jīng)皮滲 透規(guī)律。1材料高效液相色譜儀（2487型雙波長(zhǎng)紫外檢測(cè)器，717型自 動(dòng)進(jìn)樣系統(tǒng)，empower色譜工作站，美國(guó)waters公司）； bsa224s cw電子分析天平（德國(guó)賽多利斯公司）；tk-20透 皮擴(kuò)散

3、實(shí)驗(yàn)儀（上海錯(cuò)凱科技貿(mào)易有限公司）；z92-b多功能 攪拌器（天津利華儀器廠）。延胡索乙素對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào) 110726-201011）； peg400 （國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）； 甲醇、乙睛為色譜純；水為娃哈哈純凈水；其他試劑均為分 析純。凝膠膏劑基質(zhì)均為食用或者藥用規(guī)格，包括聚丙烯酸 鈉、卡波姆、明膠等。小鼠由中國(guó)人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心 提供，昆明種雄性小鼠，spf級(jí)，體重15-17 g,合格證號(hào) scxk-（軍）-2009-0017 o2方法與結(jié)果2.1止痛凝膠膏劑貼的制備2. 1. 1空白基質(zhì)的制備按基質(zhì)處方比例稱取卡波姆加 入甘油、蒸館水適量，放

4、置使其充分溶脹，作為a相；稱取 處方量pvp-k30, pva,明膠加入適量水中溶脹成膠，作為b 相；稱取處方量聚丙烯酸鈉、高嶺土加入適量甘油中，作為 c相；b相與c相混合后加入a相，最后加入交聯(lián)劑，攪拌 均勻即得空白基質(zhì)。2. 1.2含藥凝膠膏劑的制備精密稱取處方量中藥浸膏 和基質(zhì)，混合均勻，制成膏體后均勻涂布于襯布上，加蓋聚 乙烯薄膜，即得止痛凝膠膏劑樣品。2.2實(shí)驗(yàn)方法與裝置采用垂直式franz擴(kuò)散池，將止痛凝膠膏劑貼緊密貼于 處理好的屏障上，固定于釋放池與接收池之間，于接收池中 準(zhǔn)確加入接受液18 ml,排凈氣泡。接受液為peg400-95%乙 醇-水(1 ： 3 ： 6) 3-4,擴(kuò)

5、散池的有效擴(kuò)散面積2.834 cm2, 磁力攪拌器轉(zhuǎn)速400 rmin-1,水浴溫度(32. 5±0. 2) °c, 分別在不同時(shí)間點(diǎn)取樣，取樣時(shí)將接收液全部取出，同時(shí)補(bǔ) 加同樣體積的新鮮接收液。2.3延胡索乙素hplc分析2. 3. 1 色譜條件 agilent zorbax sb-c18 色譜柱(4. 6 mmx250 mm, 5 um)；流動(dòng)相甲醇-乙睛-15 mmol十二烷基 磺酸鈉溶液-三乙胺(24 ： 32 ： 44 ： 0. 5) 5,流速1.0 ml min-1 ；檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm；柱溫30 °c。在上述色譜條 件下，延胡索乙素與其他組分色譜峰

6、均達(dá)到基線分離，空白 接收液無(wú)干擾，見(jiàn)圖1。2. 3.2對(duì)照品溶液的制備 取延胡索乙素對(duì)照品適量， 精密稱定，加甲醇制成每lml含2.020 ug的溶液，即得。2. 3.3供試品溶液的制備 精密量取接收液適量，蒸干, 用甲醇溶解，置10 ml量瓶中，用甲醇定容，過(guò)0. 45 um 微孔濾膜，即得。2. 3.4線性關(guān)系考察 精密吸取延胡索乙素對(duì)照品溶液 過(guò) 0.45 um 濾膜，分別進(jìn)樣 1, 2, 5, 10, 20, 50, 80 ul, 記錄峰面積，以延胡索乙素進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐 標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程為y=2x106x-l 561.8(r=0. 999 9),線性范圍 0.

7、 002 020.161 6 ugo2. 3.5精密度試驗(yàn) 精密吸取供試品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6 次，記錄峰面積，rsd 2. 1%,表明該方法精密度良好。2. 3.6穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一份供試品溶液，分別于0, 2, 4, 8, 12, 24 h進(jìn)樣，記錄峰面積，rsd 1. 9%,表明該方法 穩(wěn)定性良好。2. 3.7重復(fù)性試驗(yàn)平行制備供試品溶液6份，分別進(jìn) 樣，記錄延胡索乙素峰面積，rsd 1.0%,表明該方法重復(fù)性 良好。2. 3.8加樣回收率試驗(yàn) 精密量取6份已知延胡索乙素 含量的供試品，分別置于10 ml量瓶中，按1 ： 1的比例加 入對(duì)照品，混勻，用接收液定容，即得加樣回收試驗(yàn)樣品， 平行

8、進(jìn)行6次試驗(yàn)。按2. 3.1項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，計(jì)算 平均加樣回收率，結(jié)果見(jiàn)表1。2. 4體外釋放實(shí)驗(yàn)取止痛凝膠膏劑帖6片，按2. 2項(xiàng)下方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，以 不銹鋼紗網(wǎng)為屏障，于0.5, 1, 2, 4, 8, 12, 24 h取樣， 制備釋放樣品，采用hplc測(cè)定接收液中延胡索乙素含量， 繪制體外釋放曲線，結(jié)果見(jiàn)圖2。2.5體外經(jīng)皮滲透實(shí)驗(yàn)研究2. 5. 1離體鼠皮的制備將小鼠斷頸處死，用適量脫毛 劑將小鼠毛小心脫去，用生理鹽水沖洗干凈，剪下皮膚，小 心剝離脂肪層，選取完整的皮膚，置于生理鹽水中，于4 1 貯存。2. 5.2經(jīng)皮滲透實(shí)驗(yàn)取止痛凝膠膏劑帖6片，按2.2 項(xiàng)下方法進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，將屏障

9、換成小鼠皮膚，于1, 2, 4, 8, 12, 24, 48 h取樣，制備透皮樣品，用hplc測(cè)定延胡索乙 素含量，按2. 4項(xiàng)下進(jìn)行計(jì)算，結(jié)果見(jiàn)表2,對(duì)結(jié)果進(jìn)行線 性擬合，結(jié)果見(jiàn)表3。3討論延胡索乙素的平均釋放數(shù)據(jù)擬合符合higuchi方程，即 q=28. 302tl/2 +26. 887 (r=0. 974 4), 24 h 內(nèi)延胡索乙素 累積釋藥率和累積釋藥速率為81.9% ,2.26u g cm-2 h-1,表明止痛凝膠膏劑整個(gè)釋藥過(guò)程符合凝膠 膏劑的釋藥規(guī)律，即骨架控釋規(guī)律。24 h內(nèi)止痛凝膠膏劑中延胡索乙素的透皮曲線q-t線性關(guān)系良好，方程為q=0. 726t+l. 142 4 (

10、r=0.997 3),延胡索乙素均以恒定的速度透過(guò)皮膚，符合 零級(jí)動(dòng)力學(xué)模型，屬于皮控型的給藥系統(tǒng)。由于止痛凝膠膏 劑體外透皮吸收符合零級(jí)動(dòng)力學(xué)模型，貼中藥物的濃度越 高，透皮速率越快，從24 h到48 h,隨著時(shí)間的推移，藥 物經(jīng)皮滲透量增加，使藥物濃度降低，導(dǎo)致透皮速率降低。 因此，提高藥物濃度對(duì)增加經(jīng)皮滲透量是有意義的。參考文獻(xiàn)1劉淑芝.中藥巴布劑研究現(xiàn)狀j.中醫(yī)外治雜志，2005,14 (5)：3.2薛桂蓬，邢建國(guó)，趙媛，等.復(fù)方雪蓮風(fēng)濕凝 膠膏提取工藝研究j.中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2012, 29(2)： 129.3田璐，張蜀，林華慶，等.經(jīng)皮給藥制劑體外透皮擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)方法的研究進(jìn)展j.中

11、國(guó)藥房，2012,23(29)：2761.4杜茂波，劉淑芝，李曼玲，等.萸連巴布劑體 外釋放和透皮行為研究j.中國(guó)中藥雜志，2009, 34(8)： 969.5杜茂波，劉淑芝，劉樹(shù)揚(yáng)，等.元胡止痛軟膠囊中延胡索提取工藝優(yōu)選j.中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志， 2012,18 (9)：50.study on in vitro release and percutaneous absorption for zhitong cataplasmsong li-hual, du maobo2, liu shu-zhi2*, geke-yal, wang wen-ping3, ca0qi-chen3, li xian

12、-duan2 (1. college of traditional chinese medicine,capital medical university, beijing 100069, china；2. institute of chinese medicine, china academy of chinese medical science, beijing 100700, china；3. liaoning university of traditional chinese medicine, shenyang 110847, china)abstract to evaluate i

13、n vitro release and transdermal behaviors of zhitong cataplasm, modified franz diffusion cell method was applied to investigate in vitro transdermal absorption of zhitong cataplasm and the content of tetrahydropalmatine was determined by hplc. in 24 hours, accumulative release rate of tetrahydropalmatine was 81. 9%, transmission rate was 2. 26 u g cm2 h-l. in 48 hours , accumulative transdermal rate and transmission rate of tetrahydropalmatine were 20. 31%, 0. 22 u g cm-2 h-l. so zhitong cataplasm h