ELISARPR、Trust、TPPA四種方法檢測梅毒螺旋體抗體的結(jié)果分析

1、elisa, rpr、trust、tppa四種方法檢測梅毒螺旋體抗體的結(jié)果分析劉智成易明忠1 常寧市疾病預(yù)防控制屮心檢驗科421500； 2常寧市屮醫(yī)院檢驗科421500【摘 要】目的：分析elisa, rpr、trust、tppa四種方法檢測梅毒螺旋體 抗體的結(jié)果。方法：選擇我中心性病艾滋病科2014年7月2015年6月進(jìn)行檢 查的157份梅毒患者血清標(biāo)本，選擇同期在我屮心性病艾滋病科進(jìn)行檢查的非梅 毒患者血清146份。所有血液樣本均經(jīng)elisa, rpr、trust、tppa四種方法檢測， 回顧性分析患者檢查結(jié)果。結(jié)果：梅毒患者經(jīng)四種檢驗方法檢測為陽性率分別為 96.82%、96.18%、

2、80.25%、86.62%；而非梅毒患者檢出陽性患者較少,兩組比較 差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)o另外，經(jīng)卡方檢驗，tppa和elisa在陽性及假陽 性檢出率上均顯著優(yōu)于trust和rpr,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)o而rpr與 trust比較無明顯差異(p>0.05)o結(jié)論：tppa和elisa可以作為檢驗梅毒螺旋體 抗體的指標(biāo)，rpr與trust則不適用于篩查梅毒螺旋體抗體，因此在實際的臨床 診斷屮應(yīng)合理使用?！娟P(guān)鍵詞】梅毒螺旋抗體；酶聯(lián)免疫吸附；明膠凝集試驗；陽性率梅毒是臨床上常見的一種經(jīng)性途徑傳播的疾病，因蒼白螺旋體引起的慢性、系統(tǒng)性疾病。梅毒螺旋體存在于患

3、者的皮膚、黏膜屮，當(dāng)攜帶梅毒螺旋體的患者與正常人性接觸后，皮膚或粘膜如果有細(xì)微的破損，可導(dǎo)致正?；颊呋疾?。梅毒的潛伏期較長，傳染性較高，很多患者在患病后早期無明顯癥狀，因此及早的診 斷和治療是控制傳染率，提高患者生活質(zhì)量的關(guān)鍵。elisa, rpr、trust、tppa 四種方法是臨床上針對該病的主要診斷方式，本次研究就我屮心性病艾滋病科檢查的157例梅毒患者作為研究對象，探討四種檢測方法檢測梅毒螺旋體的效果。1資料與方法1.1 一般資料選擇我中心性病艾滋病科2014年7月2015年6月進(jìn)行檢查的157份梅毒 患者血清標(biāo)本，選擇同期在我中心性病艾滋病科進(jìn)行檢查的非梅毒患者血清146 份。157

4、例梅毒患者中，男66例，女91例，年齡最小的15歲，年齡最大的65 歲，平均(41.4&plusmn;6.5)歲。146例非梅毒患者中男75例,女71例，年齡 最大的68歲，最小的17歲，平均(42.4&plusmn;6.8)歲。排除意識障礙、嚴(yán)重 肝腎功能疾病和不簽署同意書的患者，兩組患者在性別、年齡等資料上比較差異 無統(tǒng)計學(xué)意義(p>0.05)o1.2試劑與儀器elisa檢測試劑：上海科華生物工程股份有限公司生產(chǎn)rpr檢測試劑：上海榮盛生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)trust檢測試劑：上海榮盛生物藥業(yè)有限公司生產(chǎn)tppa檢測試劑：日本富士瑞必歐株式會社生產(chǎn)試劑均在效期內(nèi)使用儀器

5、：意大利亞特斯公司生產(chǎn)nexgenfour&ndash;adaltis全自動酶聯(lián)免疫 分析儀，離心機(jī)，水浴箱，olympus光學(xué)顯微鏡1.3方法和結(jié)果判定1.3.1所有檢測操作程序和結(jié)果均按照試劑及儀器說明書嚴(yán)格執(zhí)行。1.3.2抽取患者靜脈血3ml,置于真空采血管中，加入3.2%檸檬酸鈉抗凝劑 (四川綿竹鴻基制藥有限責(zé)任公司，國藥準(zhǔn)字h20073118),用甕乙基淀粉以離 心機(jī)3000r/min離心兩次，將部分紅細(xì)胞和多余的血漿分離，并置于20°c的冰 箱內(nèi)保存3。1.3.3tppa陽性：將血清和tppa混合，將梅毒螺旋體致敏明膠顆粒與血清中 梅毒螺旋抗體結(jié)合，產(chǎn)生玫瑰紅色吋

6、判斷為陽性。elisa陽性：使用純化的梅毒 螺旋體重組蛋白抗原以包被固相板條，加梅毒血清和辣根過氧化物酶標(biāo)記的人 igg抗體，利用儀器檢測特異性梅毒抗體數(shù)量。rpr陽性：將rpr抗原懸浮液加 入血清中，以旋轉(zhuǎn)儀水平轉(zhuǎn)動紙卡，在光線充足的情況下，形成黑色凝集塊則判 定為陽性。trust陽性：使用卵磷脂、心磷脂和膽固醇作絮狀凝集試驗，trust中 加入甲苯胺紅顆粒，出現(xiàn)紅色絮狀凝集則判斷為陽性。1.4統(tǒng)計學(xué)處理將統(tǒng)計數(shù)據(jù)納入統(tǒng)-表格，以spss20.0統(tǒng)計學(xué)軟件，對其進(jìn)行合理數(shù)據(jù)處 理與分析，經(jīng)卡方驗證計數(shù)資料(n%),經(jīng)t驗證計量資料(?x&plusmn;s),當(dāng) p&lt;0.

7、05吋，差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果梅毒患者經(jīng)四種檢驗方法檢測為陽性率分別為96.82%、96.18%、80.25%、 86.62%；而非梅毒患者未檢出陽性患者較少，兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p< 0.05)o另外，經(jīng)卡方檢驗，tppa和elisa在陽性及假陽性檢出率上均顯著優(yōu)于 trust和rpr,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.05)o而rpr與trust比較無明顯差異(p >0.05),詳見表3討論梅毒螺旋體也就是梅毒的病原體，其不易著色、透明，只在人類中感染，分 為獲得性梅毒和胎傳梅毒兩種類型。獲得性梅毒主要通過性接觸傳染，而胎傳梅 毒主要通過胎盤，從臍帶血循環(huán)傳給胎兒最終引起

8、全身感染。梅毒的致死率較高, 因此及早的診斷是緩解患者癥狀，降低死亡率的關(guān)鍵4。事實上，梅毒螺旋體 含有表面抗原，能夠刺激機(jī)體產(chǎn)生特異性凝集抗體和螺旋體制動抗體，當(dāng)其進(jìn)入 人體后會破壞人體組織，當(dāng)組織中的凝脂粘附在螺旋體表面形成復(fù)合抗原后，使 得機(jī)體產(chǎn)生抗磷脂的自身抗體。elisa, rpr、trust> tppa四種方法是目前臨床檢診的常用方法,elisa檢驗 法是通過將抑制抗原或抗體吸附在固定載體表面，使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固 相表面進(jìn)行，并用洗滌法將其游離成分洗凈。最后通過分辨底物的顏色判斷免疫 反應(yīng)。tppa也是目前公認(rèn)診斷梅毒較好的方法，因人體被梅毒螺旋體感染后， 此抗體會在

9、體內(nèi)持續(xù)存在并且終身保留，其檢測結(jié)構(gòu)不隨病情的變化發(fā)生改變, 因此對個吋期的疾病檢測結(jié)果較為穩(wěn)定。rpr適用于梅毒診斷的初篩試驗，通 過檢查患者血清中的非特異性反應(yīng)素，但因該反應(yīng)素在軟性下疳出現(xiàn)4周后才會 被檢測到，因此只能作為初期的篩查。trust是-種非特異性的梅毒篩選試驗， 其結(jié)果也會受到自身免疫性疾病的感染而發(fā)生變化。從表1可知：1 梅毒患者經(jīng)四種檢驗方法檢測為陽性率分別為96.82%、96.18%、80.25%、 86.62%；而非梅毒患者檢出陽性患者較少，兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義；2經(jīng)卡方檢驗，tppa和elisa在陽性及假陽性檢出率上均顯著優(yōu)于trust和 rpr,差異有統(tǒng)計學(xué)意

10、義；而rpr與trust比較無明顯差異。tppa和elisa可以 作為檢驗梅毒螺旋特異性抗體的指標(biāo);rpr與trust在篩查梅毒方面須慎重使用, rpr與trust檢測非特異性梅毒螺抗體滴度變化在判定梅毒治療效果應(yīng)有一定意 義；四種方法聯(lián)合檢測減少漏診和誤診機(jī)會，對梅毒檢診價值更合理，更安全。參考文獻(xiàn)：李楚潮.elisa, rpr、trust、tppa四種方法檢測梅毒螺旋體抗體的結(jié)果分 析j當(dāng)代醫(yī)學(xué)，2010, 16 (20)： 9-10.2余倩，何翠娥，胡志東等1例梅毒螺旋體明膠顆粒凝集試驗假陽性分析卩 國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志，2015, 23 (8)： 1159-1160, 1162.3彭麗華.elisa等四種方法檢測梅毒螺旋體抗體的結(jié)果分析j現(xiàn)代養(yǎng)生b, 2015, (8)： 41424宋煥景，侯生根，陳建春等梅毒特異性抗體試驗生物學(xué)假陽性分析j