水質(zhì)指標測定原理、方法及注意事項

1、目錄水質(zhì)監(jiān)測實驗室質(zhì)量控制1溶解氧DO3化學需氧量（COD）5BOD57氮9磷10校準曲線11氮、磷測定簡略步驟12葉綠素Chl-a13懸浮物15水質(zhì)監(jiān)測實驗室質(zhì)量控制精密度控制：對均勻樣品，凡能做平行雙樣的分析項目，分析每批水樣時均須做l0% 的平行雙樣，樣品較少時，每批樣品應至少做一份樣品的平行雙樣。測定的平行雙樣允許差符合規(guī)定質(zhì)控指標的樣品，最終結(jié)果以雙樣測試結(jié)果的平均值報出。平行雙樣測試結(jié)果超出規(guī)定允許偏差時，在樣品允許保存期內(nèi)，再加測一次，取相對偏差符合規(guī)定質(zhì)控指標的兩個測定值報出。水質(zhì)監(jiān)測實驗室質(zhì)量控制指標(建議)項目樣品含量范圍（mg/L）精密度%總氮0.0251.010>

2、1.05氨氮0.020.1200.11.015>1.010硝氮<0.5250.5420>415總磷<0.025250.0250.610>0.65高錳酸鉀指數(shù)<2.025>2.020 準確度控制：例行地表水質(zhì)監(jiān)測中，采用標準樣品或質(zhì)控樣品作為控制手段，每批樣品帶一個已知濃度的質(zhì)控樣品。如果實驗室自行配制質(zhì)控樣，要注意與國家標準樣品比對，但不得使用與繪制校準曲線相同的標準溶液，必須另行配制。質(zhì)控樣品的測試結(jié)果應控制在90%110%范圍，標準樣品測試結(jié)果應控制在95%1 05%范圍。 準確度：常用以度量一個特定分析程序所獲得的分析結(jié)果（單次測定值或重復測定值

3、的均值）與假定的或公認的真值之間的符合程度。一個分析方法或分析系統(tǒng)的準確度是反映該方法或該測量系統(tǒng)存在的系統(tǒng)誤差或隨機誤差的綜合指標，它決定著這個分析結(jié)果的可靠性。 準確度的評價方法：1、標準樣品分析：通過分析標準樣品，由所得結(jié)果了解分析的準確度2、回收率測定：在樣品中加入一定量標準物質(zhì)測其回收率，這是目前實驗室中常用的確定準確度的方法?；厥章蔖（%）=（加標試樣測定值-試樣測定值）/加標量×100% 對于常規(guī)樣品可憑經(jīng)驗實施，對于未知樣品一般步驟為1） 了解樣品來源，初步估計待測物質(zhì)含量2） 確定稀釋比和測試體積3） 根據(jù)樣品性質(zhì)、分析方法選擇加標方式（取相同體積的兩份樣品，其中一

4、份加標，一份不加標，這是最常用的加標方式）4） 確定加標量加標實驗的一般原則1） 加標物的形態(tài)應該和待測物的形態(tài)相同。2） 樣品與加標樣同時按同一操作步驟和方法測定，保證實驗條件一致。為提高準確度，樣品和加標樣可分別進行平行測試。3） 加標樣中原始樣品的取樣體積、稀釋倍數(shù)及測試體積，盡可能與樣品測試時一致。4） 加標量應與樣品中相應待測物含量相近，一般為試樣含量的0.52倍，加標后的測定值不應超出方法的測量上限的90%；當樣品中待測物濃度高于校準曲線的中間濃度時，加標量應控制在待測物濃度的半量；對于低濃度樣品（接近測定下限），加標量可適當增加到試樣含量的3倍或4倍。5） 加標物的濃度宜高，加標

5、體積宜小，一般不超過原始試樣體積的1%，保持樣品的基體不變。溶解氧DOA 碘量法 原理水樣中加入硫酸錳和堿性碘化鉀，水中溶解氧將低價錳氧化成高價錳，生成四價錳的氫氧化物棕色沉淀。加酸后，氫氧化物沉淀溶解并與碘離子反應釋放出游離碘。以淀粉作指標劑，用硫代硫酸鈉滴定釋放出的碘，可計算溶解氧的含量。采樣用碘量法測定水中溶解氧，水樣常采集到溶解氧瓶中。采集水樣時，要注意不使水樣曝氣或有氣泡殘存在采樣瓶中?？捎盟畼記_洗溶解氧瓶后，沿瓶壁直接傾注水樣或用虹吸法將細管插入溶解氧瓶底部，注入水樣至溢流出瓶容積的1/31/2。水樣采集后，為防止溶解氧的變化，應立即加固定劑于樣品中（1ml硫酸錳溶液、2ml堿性碘

6、化鉀溶液），并存于冷暗處。藥品1) 硫酸錳溶液：稱取480g硫酸錳（MnSO4·4H2O）或364g MnSO4·H2O溶于水，用水稀釋至1000ml；2) 堿性碘化鉀溶液：稱取500g氫氧化鈉溶解于（300-400ml）水中，另稱取150g碘化鉀（或135gNaI）溶于200ml水中，待氫氧化鈉溶液冷卻后，將兩溶液合并，混勻，用水稀釋至1000ml（該溶液呈強堿性，保存時切勿使用玻璃瓶塞的容器瓶，或在玻璃瓶塞外包一層濾紙）；3) 1%淀粉溶液：稱取1g可溶性淀粉，用少量水調(diào)成糊狀，再用剛煮沸的水沖稀至100ml（淀粉溶液易變質(zhì)，最好在實驗前配制）。4) 硫代硫酸鈉溶液：稱

7、取3.2g硫代硫酸鈉溶于煮沸冷卻的水中，加入0.2g碳酸鈉，用水稀釋至1000ml，貯于棕色瓶中，使用前用0.025mol/L重鉻酸鉀標準溶液標定；5) 重鉻酸鉀標準溶液：稱取重鉻酸鉀1.2258g，溶于水，移入1000ml容量瓶中，用水稀釋至標線，搖勻。硫代硫酸鈉標定方法：于250ml錐形瓶中，加入100ml水和1g碘化鉀，加入10ml 0.025mol/L重鉻酸鉀標準溶液、5ml（1+5）硫酸溶液，密塞，搖勻。與暗處靜置5min后，用硫代硫酸鈉溶液滴定至溶液呈淡黃色，加入1ml淀粉溶液，繼續(xù)滴定至藍色剛好褪去為止，紀錄用量V1。M = (10×0.025)/V1式中：M-硫代硫酸

8、鈉溶液的濃度；V1-滴定時消耗硫代硫酸鈉溶液的體積步驟溶解氧的固定：加入1 ml硫酸錳溶液、2ml堿性碘化鉀溶液（沿壁加入，切勿引起氣泡產(chǎn)生），蓋好瓶塞，顛倒混合數(shù)次，靜置。待棕色沉淀物降至瓶內(nèi)一半時，再顛倒混臺一次，待沉淀物下降到瓶底。析出碘：輕輕打開瓶塞，立即用吸管插入液面下加入2.0 ml硫酸。小心蓋好瓶塞，顛倒混合搖勻至沉淀物全部溶解為止，放置暗處5 min。滴定：移取100 m1 上述溶液于250 ml錐形瓶中，用硫代硫酸鈉溶液滴定至溶液呈淡黃色，加入1 ml淀粉溶液，繼續(xù)滴定節(jié)藍色剛好褪去為止，記錄硫代硫酸鈉溶液用量。計算溶解氧(O2，mg/L)=(M*V*8*1000)/100式

9、中：M-硫代硫酸鈉溶液的濃度；V-滴定時消耗硫代硫酸鈉溶液體積B溶解氧儀 測定溶解氧的電極由一個附有感應器的薄膜和一個溫度測量及補償?shù)膬?nèi)置熱敏電阻組成。電極的可滲透膜為選擇性薄膜，把待測水樣和感應器隔開，水和可溶性物質(zhì)不能透過，只允許氧氣通過。當給感應器供應電壓時，氧氣穿過薄膜發(fā)生還原反應，產(chǎn)生微弱的擴散電流，通過測量電流值可測定溶解氧濃度。 為進行精確的溶解氧測量，要求水樣的最小流速為0.3m/s，水流將會提供一個適當?shù)难h(huán)，以保證消耗的氧持續(xù)不斷地得到補充。當液體靜止時，不能得到正確的結(jié)果。在進行野外測量時，可用手平行搖動電極進行。在每次測量過程中，電極和被檢測水樣之間必須達到熱平衡，這個

10、過程需要一定的時間?；瘜W需氧量（COD）A 重鉻酸鉀法原理在強酸并加熱條件下，用一定量的重鉻酸鉀氧化水樣中還原性物質(zhì)，過量的重鉻酸鉀以試亞鐵靈作指示劑，用硫酸亞鐵銨溶液回滴。根據(jù)硫酸亞鐵銨的用量算出水樣中還原性物質(zhì)消耗氧的量。適用范圍用0.25 mol/L濃度的重鉻酸鉀溶液可測定大于50 mg/L的COD值，未經(jīng)稀釋水樣的測定上限是700 mg/L。用0.025mol/L濃度的重鉻酸鉀溶液可測定550mg/L的COD值，但低于10mg/L時測量準確度較差（考慮使用高錳酸鹽指數(shù)法）。在分析含Cl-水樣時，罐內(nèi)加入水樣和含Hg+消解液（硫酸汞）后，應即時搖勻（約1分鐘），待Cl-與Hg+充分反應后

11、，再加催化劑（保持硫酸汞：氯離子=10：1）。試劑1） 重鉻酸鉀消解液(1/6K2Cr2O7 = 0.20 mol/L)：稱取重鉻酸鉀9.806g，溶于500ml水中，邊攪拌邊慢慢加入濃硫酸250ml，完全冷卻后移入1000ml容量瓶，稀釋至刻度（重鉻酸鉀預先在120烘干2h，干燥器中冷卻后稱?。?；2） 硫酸亞鐵銨標準溶液(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O 0.04 mol/L：稱取6水硫酸亞鐵銨16.6g溶于水中，邊攪拌邊慢慢加入20ml濃硫酸，冷卻后移入1000ml容量瓶中，加水稀釋至刻度（配制過程易被污染）；3） 試亞鐵靈指示液：稱取鄰菲羅啉1.458g，硫酸亞鐵0.695

12、g溶于水中，稀釋至100ml，貯于棕色瓶內(nèi)（藥品不易溶，定溶后靜置1-2天后使用）；4） 硫酸-硫酸銀催化劑：于1000ml濃硫酸中加入10g硫酸銀，放置1-3天，不時搖動使其溶解。需對硫酸亞鐵銨標準溶液進行標定：1） 吸取5ml重鉻酸鉀標準溶液于150ml錐形瓶中，加水稀釋至約30ml，緩慢加入5ml濃硫酸，混均；2） 冷卻后，加入2滴試亞靈指示劑，用硫酸亞鐵銨溶液滴定，溶液的顏色由黃色經(jīng)藍綠色至紅褐色即為終點，記錄滴定用量V；3） 硫酸亞鐵銨標準溶液的濃度（mol/L）：C=(0.20×5.00)/ V-步驟：1） 吸取5ml水樣于消解罐中，再加入5ml重鉻酸鉀消解液和5ml硫酸

13、-硫酸銀催化劑；旋緊密封蓋，將罐均勻置放入消解爐內(nèi)，離轉(zhuǎn)盤邊沿約2cm周圍上對稱排放，消解15分鐘；2） 待冷卻后將反應液轉(zhuǎn)移到250ml錐形瓶中，用蒸餾水沖洗消解罐帽2-3次，沖洗液并入錐形瓶中，控制體積在30ml；3） 加入2滴試亞鐵靈指示劑，再用硫酸亞鐵銨標準溶液滴定，溶液的顏色由黃色經(jīng)藍綠色至紅褐色即為終點，記錄硫酸亞鐵銨標準溶液的用量；計算（結(jié)合式）：CODCr(O2,mg/L) = (V0-V1)×C×8×1000/V2 =(V0-V1)×8000/(V× V2)式中：C -硫酸亞鐵銨標準溶液的濃度（mol/L）；V0-空白消耗硫酸

14、亞鐵銨量（ml）； V -標定硫酸亞鐵銨量（ml）； V1-水樣消耗硫酸亞鐵銨量（ml）； V2-水樣體積（5ml）； 8 -氧（1/2 O）摩爾質(zhì)量（g/mol）。B 高錳酸鹽指數(shù) 高錳酸鹽指數(shù)，亦稱為化學需氧量的高錳酸鉀法，是指在酸性或堿性介質(zhì)中，以高錳酸鉀為氧化劑，處理水樣時所消耗的量，以氧的mg/L來表示。本實驗室采用酸性法測定。 原理水樣加入硫酸使呈酸性后，加入一定量的高錳酸鉀溶液，并在沸水浴中加熱反應一定的時間。剩余的高錳酸鉀，用草酸鈉溶液還原并加入過量，再用高錳酸鉀溶液回滴過量的草酸鈉，通過計算求出高錳酸鹽指數(shù)值。適用范圍當水樣的高錳酸鹽指數(shù)值超過10mg/L時，則酌情分取少量試

15、樣，并用水稀釋后再行測定。采樣與保存水樣采集后，應加入硫酸使pH調(diào)至<2，以抑制微生物活動。樣品應盡快分析，并在48h內(nèi)測定。試劑1） 高錳酸鉀儲備液（1/5KMnO4=0.1mol/L）：稱取3.2g高錳酸鉀溶于1.2L水中，加熱煮沸，使體積減少到約1L，在暗處放置過夜，過濾后貯于棕色瓶中保存。使用前用0.10mol/L的草酸鈉標準儲備液標定，求得實際濃度。2） 高錳酸鉀使用液（1/5KMnO4=0.01mol/L）：吸取一定量的上述高錳酸鉀溶液，用水稀釋至1000ml，并調(diào)節(jié)至0.01mol/L準確濃度，貯于棕色瓶中。使用當天應進行標定。3） （1+3）硫酸。配制時趁熱滴加高錳酸鉀溶

16、液至呈微紅色。4） 草酸鈉標準儲備液（1/2Na2C2O4=0.10mol/L）：稱取0.6705g在105110烘干1h并冷卻的優(yōu)級純草酸鈉溶于水，移入100ml容量瓶中，用水稀釋至標線。5） 草酸鈉標準使用液（1/2Na2C2O4=0.010mol/L）：吸取10ml上述草酸鈉溶液移入100ml容量瓶中，用水稀釋至標線。步驟1） 分取100 ml混勻水樣（如高錳酸鹽指數(shù)高于10mg/L，則酌情少取，并用水稀釋至100ml）于250ml錐形瓶中。2） 加入5ml（1十3）硫酸，混勻。3） 加入10 ml 0.01mol/L高錳酸鉀溶液，搖勻，立即放入沸水浴中加熱30min（從水浴重新沸騰起計

17、時）。沸水浴液面要高于反應溶液的液面。4） 取下錐形瓶，趁熱加入10ml 0.01mol/L草酸鈉標準溶液，搖勻。立即用0.01mol/L高錳酸鉀溶液滴定至顯微紅色，記錄高錳酸鉀溶液消耗量。5） 高錳酸鉀溶液濃度的標定：將上述已滴定完畢的溶液加熱至約70，準確加入10 m1草酸鈉標準溶液（0.01 mol/L），再用0.01 mol/L高錳酸鉀溶液滴定至顯微紅色。記錄高錳酸鉀溶液的消耗量，按公式K=10.00/V求得高錳酸鉀溶液的校正系數(shù)(K)，其中V為高錳酸鉀溶液消耗量（ml）。計算1）水樣不經(jīng)稀釋：高錳酸鹽指數(shù)(O2,mg/L)=(10+V1)K-10 ×M×8

18、5;1000/100，式中，V1為滴定水樣時高錳酸鉀溶液的消耗量（ml）、K為校正系數(shù)、M為草酸鈉溶液濃度（mol/L）、8為氧（1/2 O）摩爾質(zhì)量。2）水樣經(jīng)稀釋：高錳酸鹽指數(shù)(O2,mg/L)=(10+V1)K-10-(10+V0)K-10 ×C×M×8×1000/V2，式中，V0為空白試驗中高錳酸鉀溶液消耗量（ml）、V2為分取水樣量（ml）、C為稀釋的水樣中含水的比值（例如：10.0ml水樣，加90ml水稀釋至100ml，則C=0.90）。BOD5 本實驗室采用稀釋接種法。原理 生化需氧量是指在規(guī)定條件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物質(zhì)，特

19、別是有機物所進行的生物化學過程中消耗溶解氧的量。此生物氧化全過程進行的時間很長，如在20培養(yǎng)時，完成此過程需l00多天。目前國內(nèi)外普遍規(guī)定20±1培養(yǎng)5d，分別測定樣品培養(yǎng)前后的溶解氧，二者之差即為BOD5值，以氧的毫克/升表示。 對某些地表水及大多數(shù)工業(yè)廢水，因含較多的有機物，需要稀釋后再培養(yǎng)測定，以降低其濃度和保證有充足的溶解氧。稀釋的程度應使培養(yǎng)中所消耗的溶解氧大干2 mg/L，而剩余溶解氧在l mg/L以上。為了保證水樣稀釋后有足夠的溶解氧，稀釋水通常要通入空氣進行曝氣(或通入氧氣)，使稀釋水中溶解氧接近飽和。稀釋水中還應加入一定量的無機營養(yǎng)鹽和緩沖物質(zhì)（磷酸鹽、鈣、鎂和鐵鹽

20、等），以保證微生物生長的需要。適用范圍 本法適用于測定BOD5大于或等于2mg/L，最大不超過6000mg/L的水樣。當水樣BOD5大于6000mg/L，會因稀釋帶來一定的誤差。試劑1） 磷酸鹽緩沖溶液：將8.5g磷酸二氫鉀（KH2PO4），21.75g磷酸氫二鉀（K2HPO4），33.4g七水合磷酸氫二鈉（Na2HPO4·7H2O）和1.7g氯化銨（NH4Cl）溶于水中，稀釋至1000ml。2） 硫酸鎂溶液：將22.5g七水合硫酸鎂（MgSO4·7H2O）溶于水中，稀釋至1000ml。3） 氯化鈣溶液：將27.5g無水氯化鈣溶于水，稀釋至1000ml。4） 氯化鐵溶液：將

21、0.25g六水合氯化鐵（FeCl3·6H2O）溶于水，稀釋至1000ml。稀釋水 在520L玻璃瓶內(nèi)裝入一定量的水，控制水溫在20左右。然后用無油空氣壓縮機或薄膜泵將此水曝氣28h，使水中的溶解氧接近于飽和，也可以鼓入適量純氧。瓶口蓋以兩層經(jīng)洗滌晾干的紗布，置于20培養(yǎng)箱中放置數(shù)小時，使水中溶解氧含量達8 mg/L左右。臨用前于每升水中加入氯化鈣溶液、氯化鐵溶液、硫酸鎂溶液、磷酸鹽緩沖溶液各1mL，并混合均勻。水樣的測定步驟：1） 不經(jīng)稀釋水樣的測定：對于溶解氧含量較高、有機物含量較少的清潔地表水，可不經(jīng)稀釋，而直接以虹吸法將約20的混勻水樣轉(zhuǎn)移至兩個溶解氧瓶內(nèi)，轉(zhuǎn)移過程中應注意不使

22、其產(chǎn)生氣泡。以同樣的操作使兩個溶解氧瓶充滿水樣后溢出少許，加塞水封（瓶內(nèi)不應有氣泡）。立即測定其中一瓶溶解氧，將另一瓶放入培養(yǎng)箱中，在20±1培養(yǎng)5d后，測其溶解氧。2） 需經(jīng)稀釋水樣的測定：對于污染的地表水和大多數(shù)工業(yè)廢水，需要稀釋后再培養(yǎng)測定。工業(yè)廢水可由重鉻酸鉀法測得的CODcr值確定。通常需作三個稀釋比，使用稀釋水時，由CODcr值分別乘以系數(shù)0.075、0.15、0.225，即獲得三個稀釋倍數(shù)。3） 稀釋倍數(shù)確定后，以直接稀釋法進行測定：取兩組溶氧瓶（標準體積為250ml），用虹吸法加入部分稀釋水，再加入根據(jù)稀釋比例計算出的水樣量，然后再以虹吸法引入稀釋水至剛好充滿，加塞，

23、勿留氣泡于瓶內(nèi)。其中一組當天測定溶解氧，另一組在20±1條件下培養(yǎng)5天后測定溶解氧含量。另取兩個溶解氧瓶，用虹吸法裝滿稀釋水作為空白，分別測定5天前、后的溶解氧含量。4） 當樣品量太多時，考慮采用經(jīng)驗值進行稀釋，即以CODcr值除以12（將CODcr控制在12mg/L以下）獲得稀釋比。5） 碘量法測定溶解氧：加入1ml硫酸錳溶液、2ml堿性碘化鉀溶液，蓋好瓶塞，顛倒混合數(shù)次，靜置；待棕色沉淀物降至瓶內(nèi)一半時，再顛倒混合一次；打開瓶塞，加入2ml濃硫酸，蓋好瓶塞，顛倒混合搖勻至沉淀物全部溶解為止，放置暗處5min；移取100ml上述溶液于250ml錐形瓶中，用硫代硫酸鈉溶液滴定至溶液呈

24、淡黃色，加入6滴淀粉溶液，繼續(xù)滴定至藍色剛好褪去為止，紀錄硫代硫酸鈉溶液用量V。計算：溶解氧(O2，mg/L)=(M*V*8*1000)/100M-硫代硫酸鈉溶液的濃度V-滴定時消耗硫代硫酸鈉溶液體積注：如果水樣中含有氧化性物質(zhì)（如游離氯大于0.1mg/L時），應預先于水樣中加入硫代硫酸鈉去處。即用兩個溶解氧瓶各取一瓶水樣，在其中一瓶加入5ml（1+5）硫酸和1g碘化鉀，搖勻，此時游離出碘。以淀粉作指示劑，用硫代硫酸鈉溶液滴定至藍色剛褪，記下用量（相當于去處游離氯的量）。于另一瓶水樣中，加入同樣量的硫代硫酸鈉溶液，搖勻后，按操作步驟測定。氮A 總氮水樣采集后，用硫酸酸化到pH < 2，在

25、24 h內(nèi)進行測定。在120的堿性介質(zhì)條件下，用過硫酸鉀作氧化劑，不僅可將水樣中的氨氮和亞硝酸鹽氮氧化成硝酸鹽，同時將水樣中大部分有機氮化合物氧化為硝酸鹽。而后，用紫外分光光度法分別于波長220 nm與275 nm出測定其吸光值。適用范圍檢測下限為0.05 mg/L，上限為4 mg/L。步驟1） 取10 ml水樣，或取適量水樣（使氮含量為2080 g）于25 ml具塞刻度管中，加5 ml堿性過硫酸鉀溶液，加塞后管口包一小塊紗布并用線扎緊，以免加熱時玻璃塞沖出。將具塞刻度管放在大燒杯中，置于高壓蒸汽鍋中120加熱30 min。2） 消解完成后取出比色管冷卻至室溫。加入（1+9）鹽酸1ml，用超純

26、水稀釋至25 ml標線。3） 在紫外分光光度計上，以超純水作參比，用石英比色皿分別在220 nm及275 nm波長處測定吸光值。B 硝酸鹽氮原理利用硝酸根離子在220 nm波長處的吸收而定量測定硝酸鹽氮。溶解的有機物在220 nm處也會有吸收，而硝酸根離子在275 nm處沒有吸收。因此，在275 nm處作另一次測量，以校正硝酸鹽氮值。步驟1） 采集的水樣立即經(jīng)0 45 m微孔濾膜過濾（24h內(nèi)，無須加酸）。2） 取5 ml水樣，或取適量水樣于25 ml具塞刻度管中，用超純水稀釋至25ml標線。3） 加入0.5 ml 1 mol/L鹽酸，在紫外分光光度計上，以超純水作參比，用石英比色皿分別在22

27、0 nm及275 nm波長處測定吸光值。C 氨氮原理本實驗室采用納氏試劑光度法。碘化汞和碘化鉀的堿性溶液與氨反應生成淡紅棕色膠態(tài)化合物。適用范圍最低檢出濃度為0.025 mg/L，測定上限為2 mg/L。步驟1） 采集的水樣立即經(jīng)0 45 m微孔濾膜過濾（24h內(nèi)，如需要可加硫酸調(diào)pH < 2）。2） 取10 ml水樣，或取適量水樣于50 ml具塞刻度管中，用超純水稀釋至50ml標線。3） 1ml酒石酸鉀鈉溶液，再加入1.5 ml納氏試劑，放置1015 min。在紫外分光光度計上，以超純水作參比，用石英比色皿分別在420 nm波長處測定吸光值。磷 總磷消解采用過硫酸鉀消解法，磷酸鹽測定采

28、用鉬銻抗分光光度法。采集與保存 總磷的測定，于水樣采集后，加硫酸酸化至pH1保存。溶解性正磷酸鹽的測定，不加任何保存劑，于25冷處保存，在24 h內(nèi)進行分析。方法采集的水樣立即經(jīng)0 45 m微孔濾膜過濾，其濾液供可溶性正磷酸鹽的測定。濾液經(jīng)強氧化劑（5%過硫酸鉀）的氧化分解，測得可溶性總磷。取混合水樣(包括懸浮物)，也經(jīng)強氧化劑分解，測得水中總磷含量。在酸性條件下，正磷酸鹽與鉬酸銨、酒石酸銻氧鉀反應，生成磷鉬雜多酸，被還原劑抗壞血酸還原，則變成藍色絡合物。適用范圍本方法最低檢出濃度為0.01 mg/L，測定上限為0.6 mg/L。步驟1） 吸取25ml混勻水樣（必要時，酌情少取水樣，并加水至2

29、5ml，使含磷量不超過30 g）于50 ml具塞刻度管中，加過硫酸鉀溶液4 ml，加塞后管口包一小塊紗布并用線扎緊，以免加熱時玻璃塞沖出。將具塞刻度管放在大燒杯中，置于高壓蒸汽鍋中120加熱30 min。2） 試劑空白和標準溶液系列也經(jīng)同樣的消解操作。3） 顯色：向比色管中加入1 ml 10%抗壞血酸溶液，混勻。30s后加2ml鉬酸鹽溶液充分混勻，放置15 min，并在顯色后30 min內(nèi)完成測量。4） 測量：700 nm波長處，以零濃度溶液為參比，測量吸光度。減去空白試驗的吸光度，并從校準曲線上查出含磷量。注意事項1、 冷藏過的水樣，應在其恢復至常溫后方可進行實驗。2、 操作所用的玻璃器皿，

30、需用（1+5）或10%鹽酸浸泡6h以上。3、 玻璃器皿（包括具塞比色管）使用時，將酸液沖洗干凈后，需用純水潤洗3篇，原則上為晾干后使用（倒扣于試管架上，避免管口暴露而使雜質(zhì)進入管中）。4、 如測試用試劑更換，需重新繪制校準曲線。5、 比色皿使用后盡快清洗，必要時用酒精或稀硝酸浸泡片刻，以除去吸附的有色沉淀物。校準曲線 凡應用校準曲線的分析方法，都是在樣品測得信號值后，從校準曲線上查得其含量（或濃度）。因此，繪制準確的校準曲線，直接影響到樣品分析結(jié)果的準確與否。此外，校準曲線也確定了方法的測定范圍。 標準溶液一般可直接測定，但如試樣的預處理較復雜致使污染或損失不可忽略時，應和試樣同樣處理后再測定

31、。 對于以4-6個濃度單位所獲得的測量信號值繪制的校準曲線，分光光度法一般要求其相關(guān)系數(shù)|r|0.9990。 回歸方程y=a+bx，其中截距a應與0作t檢驗，當a與0有顯著性差異時，表示校準曲線的回歸方程計算結(jié)果準確度不高，直接使用必將給測定結(jié)果引入差值相當于截距a的系統(tǒng)誤差；在完全相同的分析條件下，僅由于操作中的隨機誤差所導致的斜率變化，分子吸收分光光度法要求其相對差值小于5%。1、硝酸鉀標準溶液：（1）標準貯備液（KNO3=100g/ml）：稱取0.7218g硝酸鉀溶于蒸餾水中，移至1000ml容量瓶中，定容。（2）硝酸鉀標準使用液（KNO3=10g/ml）：將貯備液用蒸餾水稀釋10倍。2

32、、磷酸鹽標準溶液：（1）磷酸鹽貯備液（KH2PO4=50 g/ml）：稱取0.2197g磷酸二氫鉀溶于水中，移入1000ml容量瓶中，加（1+1）硫酸5ml，用水稀釋至標線；（2）磷酸鹽標準使用液（KH2PO4=2 g/ml）：吸取10ml磷酸鹽貯備液于250ml容量瓶中，用水稀釋至標線。3、銨標準溶液：（1）銨標準儲備溶液（NH4CL=1.0mg/ml）：稱取3.819氯化銨溶于水中，定容至1000ml；（2）銨標準使用溶液（NH4CL=0.01mg/ml）：移取5ml銨標準儲備液于500ml容量瓶中，用水稀釋至標線。 方法（參考）： 總氮：分別吸取0、0.5、1、2、3、5、7、8ml硝酸

33、鉀標準使用液于25ml比色管中，用蒸餾水稀釋至10ml標線，步驟同總氮測定； 氨氮：分別吸取銨標準使用液0、0.5、1、3、5、7、10ml于50ml比色管中，加水至標線，步驟同氨氮測定； 硝氮：分別吸取0、0.25、0.5、1、1.5、2、2.5、3ml硝酸鉀標準使用液于25ml比色管中，加水稀釋至25ml，步驟同硝氮測定； 正磷：分別取磷酸鹽標準使用液0、0.5、1、3、5、7、10、15ml，加水至50ml，步驟同磷酸鹽測定。注：校準曲線選取的濃度可按照所測水樣濃度而另行調(diào)整。如水樣濃度低時，選取質(zhì)量可降低。計算總氮、硝氮：A校=A220-2*A275； 式中：A220-220nm波長測

34、得吸光度；A275-275nm波長測得吸光度； 求得吸光度的校正值（A校）后，從校準曲線中查得相應的硝酸鹽氮量，除以水樣體積即為水樣測定結(jié)果（mg/L）。氨氮、總磷、正磷：氮、磷酸鹽（mg/L）=m/V 式中：m-從校準曲線上查得的含氮量； V-所取水樣體積；氮、磷測定簡略步驟水樣比色管氧化劑消解顯色劑波長總氮TN取2ml水樣于25ml比色管中，稀釋至10ml加入5ml堿性過硫酸鉀120消解30分鐘加入1ml（1+9）鹽酸，再用蒸餾水稀釋至25ml220、275nm氨氮NH3-N抽濾取10ml水樣于50ml比色管中，稀釋至50ml加入1ml酒石酸鉀鈉溶液，再加入1.5ml納氏試劑420nm硝氮

35、NO3-N抽濾取5ml水樣于25ml比色管中，稀釋至25ml加入0.5ml 1mol/L的鹽酸220、275nm亞硝氮NO2-N抽濾取5ml水樣于50ml比色管中，稀釋至50ml加入1ml磺胺溶液，放置2-8分鐘后再加入1ml乙二胺溶液，混勻，放置10分鐘543nm總磷TP取10ml水樣于50ml比色管中，稀釋至25ml加入4ml過硫酸鉀120消解30分鐘稀釋至50ml后加入1ml抗壞血酸，30秒后加入2ml鉬酸鹽700nm可溶性正磷抽濾取10ml水樣于50ml比色管中稀釋至50ml后加入1ml抗壞血酸，30秒后加入2ml鉬酸鹽700nm可溶性總磷抽濾取10ml水樣于50ml比色管中，稀釋至2

36、5ml加入4ml過硫酸鉀120消解30分鐘稀釋至50ml后加入1ml抗壞血酸，30秒后加入2ml鉬酸鹽700nm試劑：1、 堿性過硫酸鉀：稱取40g過硫酸鉀（K2S2O8），15g氫氧化鈉，溶于超純水中，稀釋至1000ml，溶液存放在聚乙烯瓶內(nèi)，可貯存一周，顏色變紅需重新配制（過硫酸鉀生產(chǎn)過程中易殘留含氮雜質(zhì)，可使用進口過硫酸鉀或?qū)⑦^硫酸鉀重結(jié)晶提純；氫氧化鈉易吸水溶解，稱量時需使用小燒杯而不用稱量紙）；2、 過硫酸鉀：5g過硫酸鉀溶于100ml蒸餾水中（溶解過硫酸鉀時可利用水浴法，但水浴溫度不可超過60）；3、 抗壞血酸：溶解10g抗壞血酸于水中，定容至100ml，貯存在棕色玻璃瓶中，顏色變

37、黃重配；4、 鉬酸鹽溶液：溶解13g鉬酸銨于100ml水中，溶解0.35g酒石酸銻氧鉀于100ml水中；在不斷攪拌下，將鉬酸銨溶液徐徐加到300ml（1+1）硫酸中，加酒石酸銻氧鉀溶液并且混和均勻，貯存在棕色玻璃瓶中；5、 酒石酸鉀鈉溶液：稱取50g酒石酸鉀鈉溶于100ml水中，加熱煮沸以除去氨，放冷，定容至100ml；6、 納氏試劑：稱取16g氫氧化鈉，溶于50ml水中，充分冷卻至室溫；另稱取7g碘化鉀和10g碘化汞溶于水，然后將此溶液在攪拌下徐徐注入氫氧化鈉溶液中，用水稀釋至100ml，貯于聚乙烯瓶中，密塞保存（納氏試劑易產(chǎn)生沉淀，取藥時應盡量避開沉淀或重新配藥；因有汞，配藥及測定氨氮時最

38、好戴上手套）；7、 磺胺溶液：稱取5g對氨基苯磺酰胺（磺胺），溶于50ml濃鹽酸和約350ml水的混合液中，稀釋至500ml；8、 乙二胺溶液：稱取0.5gN-（1萘基）乙二胺二鹽酸鹽溶于500ml水中，貯于棕色瓶內(nèi)。葉綠素Chl-a丙酮-凍融法原理 以90%丙酮為萃取劑，利用反復凍融使藻類細胞破碎，采用分光光度法測定葉綠素a。反復凍融浸提法在操作上方法簡單，不用水浴升溫、超聲波振蕩，不存在高溫條件下葉綠素a被破壞的問題，利用細胞內(nèi)冰粒的形成和細胞液濃度的增高引起溶漲，使胞壁結(jié)構(gòu)破碎引起葉綠素溶出。提取效率的提高主要通過反復凍融對胞壁的破壞和浸提時間的延長來實現(xiàn)。水樣的采集與保存 可根據(jù)需要進

39、行分層采樣或混合采樣。水樣采集后應放在蔭涼處，避免日光直射。最好立即進行測定的預處理，如需經(jīng)過一段時間（448h）方可進行預處理，則應將水樣保存在低溫（04）避光處。在每升水樣中加入1%碳酸鎂懸濁液1ml，以防止酸化引起色素溶解。步驟1、 過濾濃縮水樣：在抽濾器上裝好乙酸纖維濾膜(0.7mm, 0.45um，光面朝上)，準確量取100500ml水樣（視水樣藻濃度而定）進行抽濾。取樣前先將水樣充分搖勻，抽濾時用黑色袋子將樣品罩住，待抽濾完后繼續(xù)抽12min。把膜對折存放于定性濾紙中包好，在濾紙外用鉛筆清楚標記樣品信息（時間、名稱、過濾水樣體積），同時在實驗本上做好記錄。向包好樣品的濾紙上加幾滴純水使膜濕潤。用黑色塑料袋包裹樣品。2、 把膜放于-20冰箱冰凍1224h(經(jīng)驗是，隔夜即可，-20避光可保存一個月)，然后于室溫下融化510min（使膜不重疊以便膜充分融化，嚴格避光，使膜變軟即可），再于-20下冰凍不小于30min，此往復過程進行35次后，把濾膜