(整理)園藝植物育種學(xué)2實驗指導(dǎo)-20142

1、園藝植物育種學(xué) 2實驗指導(dǎo)書適用專業(yè)：園藝齊齊哈爾大學(xué)2014 年 4 月實驗一 園藝植物 花器構(gòu)造及 開花習(xí)性調(diào)查一、實驗?zāi)康?. 花是有性雜交的主要材料， 了解不同園藝植物開花習(xí)性的特點， 是準(zhǔn)確選擇雜 交用的花朵和決定采集花粉，去雄、授粉時間的主要依據(jù)。2. 掌握園藝植物花開花習(xí)性的主要觀察項目和觀察方法。二、實驗原理 不同園藝植物因自身的發(fā)育特點不同其花器構(gòu)造及開花習(xí)性也不相同。 此項 調(diào)查可作為識別品種， 制定雜交計劃的主要依據(jù)， 如準(zhǔn)確選擇雜交用的花朵和決 定采集花粉，去雄、授粉時間。主要包括花期、花型、花性、花梗、花托、萼片、花朵、雄蕊以及雌蕊等調(diào) 查項目，如花梗的長短、花托的形

2、狀、萼筒的顏色和形狀、花瓣的顏色、大小、 形狀、雄蕊的數(shù)量和形狀以及雌蕊的數(shù)量和形狀等， 同時還可以根據(jù)花器特征來 確定其傳媒類型。三、材料每人選取 3種不同園藝植物 （連翹、榆葉梅、黃刺玫、丁香、繡線菊、番茄、 李、蘋果等 ），每種園藝植物選取木本植物 2 株，草本植物要選取 5株作為觀察 材料。四、用具放大鏡、鑷子、卷尺、記錄本等。五、方法步驟觀察項目主要包括：1. 園藝植物種類、科屬及觀測地點2. 花芽的類型 純花芽、混合花芽 純花芽內(nèi)只有花器官，芽萌發(fā)后，只開花結(jié)果，不抽生枝條，多數(shù)花卉屬于 此類； 混合花芽在芽內(nèi)除有花器官外，還存在枝葉或葉的原始體，開花的同時 可抽生枝條，如懸鈴木等

3、。統(tǒng)計花芽的類型。3. 花型或花序類型 包括單瓣、重瓣，大花、小花等?；ㄐ偷谋憩F(xiàn)對于植物的傳粉和結(jié)實會產(chǎn)生 影響。統(tǒng)計花型，指出是單花還是花序。4. 花性（性型）： 包括雌雄異株、雌雄同株異花和雌雄同花（兩性花） 。有些植物在一個植株 上既有兩性花又有單性花； 還有些植物盡管具有兩性花， 但表現(xiàn)為雄蕊或雌蕊退 化。統(tǒng)計花性（性型） 。5. 花瓣：花瓣的顏色、形態(tài)等表現(xiàn)往往與植物的傳粉方式和授粉習(xí)性有較大 的關(guān)系。如開花時花瓣緊閉者 （金魚草等） 一般采用自花授粉。 統(tǒng)計花瓣的顏色、 形態(tài)、花瓣數(shù)目、花冠直徑、花蕾顏色。6. 雄蕊和雌蕊： 雄性和雌蕊的生長發(fā)育狀態(tài)、 著生方式與植物的授粉特點、

4、結(jié)實能力等有很 大的關(guān)系， 觀察記錄雄性和雌蕊的生長發(fā)育狀態(tài)、 雄蕊和雌蕊的顏色、 著生方式 測定花柱長度、花絲長度、花絲數(shù)目、花柱數(shù)目、花柱是否開裂（幾裂） 。7.花梗：花梗長度、花梗顏色、等。再隨機選取 5 株未開放的花序進行標(biāo)記，觀察開 放順序和計算開花天數(shù)（包括單花時間、全花序時間、全株時間） ，并計算花序 花朵數(shù)的平均值。 同時記錄叢現(xiàn)蕾期到盛花期的花藥變化、 子房狀態(tài)、 胚囊及散 粉孔變化等。8.花期：開花物候期調(diào)查 不同的園藝植物其開花時間差異較大，如梅花、玉蘭、連翹等在早春開花， 懸鈴木、牡丹、芍藥等春季開花， 荷花夏天開， 菊花秋天開，蠟梅則怒放于冬季， 而月季、矮牽牛、四季

5、桂等一年四季均能開花。此外，不同品種的始花期、盛花 期、終花期及整個開花過程的長短也不相同。 通過觀察明確不同植物及品種的花 期和開花規(guī)律對于人工雜交具有重要的指導(dǎo)意義。1）觀察開放順序和計算開花天數(shù)（包括單花時間、全花序時間、全株時間）2）每組同學(xué)吸輪流每天對植株進行觀察，記載當(dāng)天開放的花朵數(shù)以及天氣 和溫度。3）統(tǒng)計初花期（花開放約 5% ）、盛花期（花開放 25-75%）、末花期（部分 花朵脫落）4）在盛花期，從早上 7 時 30 分到晚上 6 時 30分，每隔 2h 觀察一次，開 放的花朵數(shù)和溫度，統(tǒng)計 1d 內(nèi)何時開花最多。保護樹木，不許攀折六、作業(yè)1. 繪制所調(diào)查的 3 種園藝植物

6、的花蕾和花朵的形態(tài)特征圖。2. 自制表格進行花器構(gòu)造觀察描述記載。3. 設(shè)計開花物候期觀察記載表，內(nèi)容包括種類、露瓣期、始花期、盛花期、 末花期及 1d 內(nèi)開花做多的時間和最早開花的部位。實驗二 花粉收集、貯藏及花粉生活力測定一、實驗?zāi)康?. 掌握鮮花粉收集、儲藏的方法及原理。2. 觀察花粉在人工配制的培養(yǎng)基上的萌發(fā)情況， 認(rèn)識花粉萌發(fā)形成花粉管的 外形和伸長過程，為理解植物的生殖過程奠定基礎(chǔ)。二、實驗原理花期不遇，給雜交工作造成困難， 有的樹木和園藝植物可通過延長花期解決， 有的不得不進行花粉儲藏，花粉貯藏對某些園林植物雜交育種具有重要的意義。 通過花粉貯藏，它可以使一些遲開花的園林植物和早

7、開花的園林植物進行雜交， 或到較遠的地方給母本授粉， 花粉的貯藏與運輸可以打破雜交育種中雙親時間上 和空間上的隔離，擴大育種的范圍?；ǚ墼谫A藏期間的穩(wěn)定性， 與花粉壁外層 （外壁） 的性質(zhì)和貯藏期間花粉原 生質(zhì)的代謝有關(guān)。在貯藏期間代謝調(diào)較少可溶性糖類和有機酸的花粉能夠在較長 期間保持其活力?；ǚ圪A藏的原理在于創(chuàng)造一定的條件，使花粉降低代謝強度， 延長花粉的壽命。花粉壽命的長短，因植物種類不同而異。在自然條件下，大多 數(shù)植物的花粉從花藥散出后只能存活幾小時， 幾天或幾個星期。 如一般木本植物 花粉壽命很長，如在干燥涼爽的條件下，柑橘花粉能存活4050d，椴樹 45d，蘋果 1070d，櫻桃 3

8、0100d，麻櫟一年， 葉培忠教授試驗發(fā)現(xiàn)杉木的花粉可存 活 17 年之久；而在草本植物中， 如棉屬花粉采下后 24h 存活只有 65，超過 24h 很少存活；多數(shù)禾本科植物的存活時間不超過一天，如玉米 1 2d，水稻花粉在 田間條件下 3min 就有 50喪失生活力， 5min 后幾乎全部死亡， 是壽命最短的例 子。一般在自然條件下自花授粉植物花粉壽命比常異花、 異花授粉植物為短。 花 粉的類型和生活力也表現(xiàn)了相關(guān)性， 通常三胞花粉的壽命要比二胞花粉短， 如水 稻等禾本科植物為三胞花粉，壽命都是比較短的?；ǚ蹓勖拈L短除了上述因種遺傳性的差異以外， 還與溫度、 濕度有密切的 關(guān)系。通常高溫高

9、濕下花粉呼吸旺盛， 會很快失去生命力， 但在極干燥的條件下， 花粉失去水分，也不利于保存。據(jù)亞達姆斯試驗，蘋果花粉在干燥狀態(tài)下，可保 存 3 個月；如放在 2 8，濕度 80的條件下，經(jīng)過 5 個星期即失去生活力。 維霍夫試驗中，丁香的花粉貯藏在干燥器中， 15d 以后發(fā)芽率降到 50；至 20d 時，僅有個別花粉發(fā)芽；到 30d 時，即全部死亡。因此，暫時不用的花粉，應(yīng)立 即在適宜的條件下貯藏， 妥善保存。 為保持花粉生活力則人為采取減低其代謝強 度，保持其純潔性，將其貯存于低溫、干燥、黑暗，并較為穩(wěn)定的環(huán)境條件下， 以保持其活力。近年來，在貯藏花粉方面利用超低溫 （-192 的液態(tài)空氣或

10、-196 的液氮）、真空或降低氧分壓以及快速冷凍干燥等方法，延長花粉生活力取得良 好的效果及應(yīng)用。了解花粉的生活力對于農(nóng)林生產(chǎn)和育種工作具有重要意義。 在生產(chǎn)和雜交工 作中需要進行的人工輔助授粉的雜交授粉，都需要收集和貯藏具有生活力的花 粉，花粉的生活力除受植物本身的遺傳決定外， 同時受環(huán)境影響。 不同來源的花 粉生活力高低存在很大差異， 花粉生活力的大小是保證雜交成功的關(guān)健。 在有性 雜交育種中， 常因父母本花期的不同， 作為父本的花粉必須經(jīng)過貯藏直到母本植 株開花時在植株開花時在用于授粉； 為了避免雜交工作失誤， 在使用遠地寄來的 花粉或 一段時間儲藏的花粉之前，必須對花粉生命力進行鑒定，

11、以便對雜交成 果進行分析與研究。通常花粉的形態(tài)、 花粉中酶的活性以及積累淀粉 （淀粉質(zhì)花粉） 的多少與花 粉生活力密切相關(guān)， 因此可以利用花粉的形態(tài)觀察， 過氧化物酶、 脫氫酶的活性 高低，淀粉的含量以及在人工培養(yǎng)基上花粉管萌發(fā)的情況作為確定花粉生活力高 低的標(biāo)準(zhǔn)。三、實驗材料、主要試劑及儀器（一）各種園藝植物花粉 如榆葉梅、黃刺玫、丁香、等植物的花粉（二）主要儀器 載玻片、蓋玻片、凹玻片、解剖針、毛筆、棉球、干燥器、硫酸紙級硫酸紙 袋、曲別針、小指形管、標(biāo)簽、標(biāo)記筆、顯微鏡、脫脂棉、花粉篩、冰箱、顯微 鏡、恒溫溫箱、瓷盤、鑷子、培養(yǎng)皿、玻璃棒、玻璃鉛筆、凡士林（三）主要試劑硫酸 H2SO4（

12、相對密度 1.45 ）、無水氯化鈣、硅膠、碘碘化鉀、氯化三苯基 四氮唑、聯(lián)苯胺、 -萘酚、 Na2HPO4·2H2O、KH2PO4、蔗糖或葡萄糖溶液、 H3BO3、 Ca（NO3）2、MgSO4、KNO3、酒精、碳酸鈉、過氧化氫四、實驗要求1、查閱相關(guān)文獻資料，根據(jù)所學(xué)知識，就實驗?zāi)康暮蛯嶒瀮?nèi)容設(shè)計出可行 的實驗方案，設(shè)計方案包括：（1）花粉收集方法（2）花粉采集時間（3）花粉采集部位（4）花粉貯藏條件（5）花粉生活力測定方法2、實驗方案須交指導(dǎo)教師修改，和指導(dǎo)教師商討后開始實驗。3、設(shè)計實驗方案前要多查閱文獻資料。4、實驗完成后，要認(rèn)真分析實驗結(jié)果，總結(jié)實驗成敗的因素，寫出2000

13、字以上研究小論文五、實驗方法與步驟（一）收集花粉選擇健壯的植株上正常的花朵， 在開花前一天套硫酸紙袋， 下口用曲別針別 好以免混入其他花粉，第二天花藥開裂后收集花粉；或采集開花前一天的花粉， 第二天進行必要的加溫處理， 使花藥開裂后收集花粉； 或采集開花前一天的花蕾， 第二天進行必要的加溫處理， 使花藥開裂后搜集花粉。 注意一定要采集花藥開裂 前后的新鮮花粉， 對不成熟的幼嫩花藥的花粉， 成熟過頭的花粉被雨露粘濕的花 粉，有疑問的花粉基雜質(zhì)要除去。（二）干燥及貯藏花粉采集后置于清潔的環(huán)境， 以免菌類侵入引起發(fā)霉影響生命力， 并及時干 燥，可放在散光下晾干、陰干或放入盛有 CaCl2（ H2SO

14、4、硅膠、醋酸鉀飽和液、 NaOH等）的干燥器中干燥，一般以花粉由相互粘結(jié)至極易分散象水一樣不粘玻 璃壁為度， 用花粉篩篩去雜質(zhì)， 根據(jù)使用的次數(shù)將其分裝于數(shù)個指形管中， 避免 因啟封而使溫度、 濕度劇變造成花粉生活力銳減。 一般以 1/5 或更少為宜， 管口 用脫脂棉塞好， 活用雙層的干凈紗布扎好， 有利于氣體交換和過濾氣體， 貼好標(biāo) 簽，表明植物品種名稱、 采集日期、 地點、貯藏條件（濕、溫條件）即統(tǒng)一編號。 然后放入無水氯化鈣或不同濃度的 H2SO4 控制的一定濕度的干燥器中，最后把干 燥器置于 02或 0以下的冰箱中貯存。同時設(shè)對照，在室內(nèi)自然溫度、 濕度及陽光條件下， 個一定時間進行

15、花粉生 活力測定，比較其差異性。（三）花粉生活力測定鑒定花粉生活力的方法有很多， 概括起來不外下列幾種： 一是將待測花粉直 接授粉，最后計算結(jié)實數(shù)和結(jié)籽數(shù)； 二是將花粉授到柱頭上， 隔一定時間切下柱 頭，在顯微鏡下觀察花粉萌發(fā)情況， 測定萌發(fā)率；三是形態(tài)觀察； 四是染色觀察； 五是在人工培養(yǎng)基上播種花粉， 觀察萌發(fā)率。 以后三種為主介紹花粉生活力測定 的具體方法。1. 形態(tài)觀察法 一般把具有品種典型性的花粉（指具有該品種花粉粒的大小、形態(tài)色澤等） 作為具有生活力的花粉，把小型的、皺癟的、畸形的作為無生活力的花粉。形態(tài)觀察的具體方法是： 首先將花粉置于載玻片上， 在顯微鏡下查看 5 個視 野，要

16、求被檢查的花粉粒總數(shù)達 100粒以上， 計算正常花粉粒占總數(shù)的比率。 此 法簡便易行，但準(zhǔn)確性差，通常只用于測定新鮮花粉的生活力。2. 染色觀察法（1）碘碘化鉀染色法。先稱取 0.3g 碘和 1.3g 碘化鉀溶于 100ml 的蒸餾 水中，即成碘碘化鉀溶液。 取少量花粉振播到用棉球擦凈的普通載玻片上， 然 后加水一滴，使花粉散開，再加一滴碘碘化鉀溶液，蓋上蓋玻片，置于顯微鏡 下觀察不同的 5 個視野，凡花粉粒被染成藍色的表示具有生活力， 呈黃褐色為缺 少生活力的花粉（遇碘變藍是淀粉的特性） 。（2）氯化三苯基四氮唑（ TTC）法。凡具有生活力的花粉，在其呼吸作用中 都有氧化還原作用， 而無生活

17、力的花粉則無此反應(yīng)， 因此當(dāng) TTC滲入有生活力的 花粉時其脫氫酶在催化去氫過程中與 TTC結(jié)合，是污水的 TTC變成 TTF而成紅色。磷酸鹽緩沖液的配置：在 100ml 的蒸餾水中溶解 0.832g 的 Na2HPO4·2H2O和 0.273g 的 KH2PO4，調(diào)整 pH值為 7.17 。TTC溶液配置：取 0.02 0.05g 的 TTC溶解于 10ml 磷酸緩沖液中，放于棕 色瓶中，置于暗處。 取少量花粉于凹玻片的凹槽內(nèi)或直接放于普通載玻片上， 滴 入 0.5 TTC溶液一兩滴，用鑷子攪拌均勻，蓋上蓋玻片，將此片置于 35 40 下 1520min，在顯微鏡下觀察不同的 5

18、個視野，反被染成紅色的均為有生活力 的花粉。（3）- 萘酚法 配制藥液A. 將0.20g 聯(lián)苯胺溶于 100ml的 50的乙醇中，盛入棕色瓶中，放暗處備用。B. 0.15 克 -萘酚溶于 100ml 的乙醇中，盛入棕色瓶中，放暗處備用。C. 0.25 克碳酸鈉溶于 100ml 蒸餾水中，盛入白色瓶中備用。D. 將以上三種溶液等量混合，即成“甲液” ，盛如棕色瓶中。E. 將 3%過氧化氫，臨用前用蒸餾水稀釋成 0.3%溶液，即成“乙液”，隨配隨用。 制片取花粉少許，撒入凹型載玻片的凹點內(nèi)，滴入“甲液” ，片刻后在滴入“乙 液”， 3 5min 后，在顯微鏡下觀察不同的 5 個視野。凡有生活力的花

19、粉為紅色 或玫瑰紅色。黃色的（不著色的） ，為無生活力的花粉。3. 發(fā)芽實驗法此法受花粉萌發(fā)的培養(yǎng)基限制。 若有適宜的培養(yǎng)基能精確測定出具有生活力 并能夠萌發(fā)的花粉粒的個數(shù)，還能看到花粉粒發(fā)芽的真實情況。（1）懸滴液發(fā)芽法把供試花粉播種在一定濃度的培養(yǎng)液液面上， 使其花粉真實地發(fā)芽， 以測定 生活力高低的一種方法。 培養(yǎng)液一般都是用蔗糖或葡萄糖溶液， 濃度因物種而不 同，差別很大。 糖液濃度高低是為了調(diào)節(jié)培養(yǎng)基的滲透壓， 防止供試的花粉在溶 液中發(fā)生破裂。適合多數(shù)園林植物花粉的發(fā)芽，通用培養(yǎng)基配方如下：蔗糖 10加 H3BO3100mg/L，C（a NO3）22300mg/L，MgSO4200

20、 mg/L，KNO3100 mg/L， 可配成母液，用時稀釋，母液放在冰箱中保存。具體操作方法：配制 10蔗糖溶液，滴一滴于凹玻片上，取少量花粉置于 滴液中，用大頭針攪拌均勻， 然后將凹玻片放在培養(yǎng)皿加蓋放到 20-25溫箱中。 加蓋 2h 后花粉即開始萌發(fā)， 24h 后在顯微鏡下檢查發(fā)芽花粉的百分率。不同物 種的花粉發(fā)芽所需的時間不同，如牡丹花粉用15蔗糖溶液在室溫條件下，接種后一小時即可觀察 ?；ǚ郯l(fā)芽檢查在低倍鏡下進行，花粉的長度為花粉粒直 徑 2 倍以上才算發(fā)芽， 一倍以上者算萌芽。（2）培養(yǎng)基發(fā)芽法培養(yǎng)基的制備： 在 250ml的燒杯中加入 90ml 蒸餾水，再加入 1g 的瓊脂，

21、在酒精燈上加熱，使之完全溶解，然后加入定量蔗糖，制成不同濃度（ 5%、10%、 15%、 20%）的蔗糖瓊脂培養(yǎng)基（分組加，每組制成一個濃度） ，為了防止水分蒸 發(fā)，配制加熱的燒杯應(yīng)加蓋。先把水在酒精燈或電爐上加熱煮開，倒入瓊脂，使之融化，然后倒入蔗糖， 用玻璃棒不斷攪拌， 呈透明狀即可。 為保持培養(yǎng)的濃度， 可在燒杯上液面處貼上 紙條或用玻璃鉛筆沿液面劃線標(biāo)記， 當(dāng)液面在熬制過程中因水分蒸發(fā)下降時應(yīng)及 時添加蒸餾水， 以保持液面的穩(wěn)定和培養(yǎng)基的標(biāo)準(zhǔn)濃度， 并將熬制好的培養(yǎng)基溶液連同燒杯放入盛有 35熱水的容器中，防止冷卻凝固，以備隨后使用，即配 成 5%濃度的培養(yǎng)基。同法配成 10%、15%

22、、 20%濃度的培養(yǎng)基。用品消毒： 發(fā)芽實驗時所用的載玻片、 凹玻片、 鑷子等都要在消毒柜中消 毒或在 100條件下煮沸 20min，冷卻后取出用酒精棉球擦干放在大培養(yǎng)皿中備 用，經(jīng)過消毒過的載玻片使用時要盡量減少和手指接觸的面積，以減少污染。 花粉的播種與檢查： 用玻璃棒蘸取培養(yǎng)基溶液， 立即滴一滴于蓋玻片的中 央（直徑 1.5-2.0mm），使成為一表面完整的球面（球面越薄越好，否則透光性 差，影響在顯微鏡下觀察） ，當(dāng)凝固后再進行花粉的播種。播種花粉時， 用經(jīng)過酒精消毒過的發(fā)絲蘸取花粉 （若所用花粉為陳花粉或過 于干燥的花粉時，可在播種前取出一部分在濕氣大的培養(yǎng)皿中密閉 15-30min

23、 后 在行播種），輕輕震動（風(fēng)媒花）或涂抹（蟲媒花）在培養(yǎng)基表面。一要注意發(fā) 絲不能過重地接觸培養(yǎng)基表面， 避免破壞培養(yǎng)基的表面； 二是要注意花粉的分布 要松散、均勻，不能密集成堆， ；三要注意適宜的播種數(shù)量。經(jīng)驗證明，花粉太 稀，影響發(fā)芽，播種太稠也影響發(fā)芽， 一般情況下， 一個顯微鏡視野以分布 20-50 ?；ǚ蹫橐?。 播好后將蓋玻片翻轉(zhuǎn)， 置于載玻片上的小玻璃環(huán)上， 小玻璃環(huán)上下 涂上凡士林，環(huán)內(nèi)加 1 第水用于保濕。濕室密封后，應(yīng)在載玻片上用玻璃鉛筆標(biāo)號， 并進行記錄， 記錄內(nèi)容包括花 粉種類、培養(yǎng)基的糖液濃度、采粉時間，播種時間、濕室中滴水的多少。然后全 組集中放在一個大的瓷盤中，用

24、紗布覆蓋后加蓋，放于 15-25的溫箱內(nèi) 24h 后 進行檢查。如果時間允許，最好播后每隔 2-3h 檢查一次，直至花粉粒發(fā)芽數(shù)不 再增加為止，記載花粉發(fā)芽數(shù)， 以明確不同花粉的發(fā)芽的速度和發(fā)芽進程。 牡丹 花粉接種后 1h 即可觀察?；ǚ郯l(fā)芽檢查在低倍鏡下進行，花粉的長度為花粉粒 直徑 2 倍以上算發(fā)芽，一倍以上者算萌芽。每片應(yīng)觀察 5 個視野花粉數(shù)不少于 100 粒以上，計算發(fā)芽率，此法每人做 3 片，選發(fā)芽情況最好的一片進行發(fā)芽情 況的檢查。五、思考題1. 詳細記載花粉采集及貯存的日期、 花粉名稱、花粉收集方法及過程、 花粉 貯藏方法。2. 通過實驗總結(jié)所采集貯藏的花粉種類的特點。3.

25、用染色法計算花粉生活力（ 5 個視野）。用發(fā)芽法計算花粉生活力（ 5 個 視野）。4. 繪一幅花粉粒發(fā)芽形態(tài)圖。附表表 1 0 條件下控制各種濕度所需 H2SO4 的百分比濃度相對濕度0（極干燥）10253550657090H2SO49563.154.148.143.134.829.417.8表 2 幾種物質(zhì)在一定條件下所控制的相對濕度物質(zhì)溫度保持相對濕度 / CaCl2032H2SO4 （相對密度 1.45 ）430硅酸5醋酸鉀飽和液22表 3 花粉生活力測定統(tǒng)計表測定方法花粉種類培養(yǎng)基的 糖液濃度采粉時間播種時間濕室中滴 水的 多少有生活力的花粉 / 觀察花粉總數(shù)花粉生活 力/12345總

26、計碘碘化 鉀染色法氯化三苯 基四氮唑 （TTC）法- 萘酚懸滴液發(fā) 芽法培養(yǎng)基發(fā) 芽法實驗三 有性雜交技術(shù)一、目的和要求園藝植物有性雜交是創(chuàng)造樹新類型的主要方法之一， 本實驗是通過品種間雜 交的實際操作，掌握有性雜交技術(shù)。二、材料和用具材料：葡萄用具：鑷子、小剪刀、紙牌、透明紙袋、授粉器或毛筆、 細棉紗線或回形針、 干燥器、指形管、棉花、酒精（ 70%）、紅漆。三、有性雜交技術(shù)葡萄1花器結(jié)構(gòu)及開花習(xí)性大多數(shù)葡萄的栽培品種是完全花， 花很小，著生在復(fù)總狀花序上 （圓錐花序）， 花冠綠色。上部合生，開花時下部與子房分離，向外卷曲成帽狀脫落，雄蕊56個。在栽培品種中，除了完全花品種外，還有“雌能花”

27、品種。這種花的雌蕊 完好，有正常受精能力，而它的雄蕊花粉通常是不育的，沒有受精能力。葡萄花芽為混合芽， 著生在結(jié)果母枝的葉腋， 枝條的中下部葉腋芽能形成花 芽，但以基部 38 節(jié)形成的花芽最佳， 在結(jié)果枝上應(yīng)選擇下部的花序供雜交用。新梢下部的花序比上部花序開放早。花蕾一般在上午 611 時開放，以 9 10 時開放最多，一個花序的花期約 35 天，柱頭花蕾開放后 46 天內(nèi)有受精 能力。2雜交技術(shù)（1）花粉的收集和貯藏 一般收集葡萄花粉是在晴天的早上，采摘剛開而未經(jīng)昆蟲訪問過的父本花 序，在室內(nèi)用鑷子取下花藥，這種方法對花的收集較為經(jīng)濟，但較費事；另一方 法是用透明紙袋直接套在未開的父本花序上

28、，待花盛開時，用手多次震動花序， 花藥，花粉即落至透明紙袋內(nèi)?；ǚ凼占院螅?將它們放在吸水能力強的紙上， 清除其中的花絲， 待花藥稍 干后，再將它們倒入小瓶或指形管中， 用棉花塞好瓶口， 貼上注明品種和采收日 期的標(biāo)簽，放在干燥器內(nèi)，置于 0 10的低溫條件下保存。（2）去雄和套袋供雜交用的花序應(yīng)選擇發(fā)育良好， 著生位置適中的花序。 通常在一個發(fā)育充 實的結(jié)果枝上生長著兩個以上的花序， 最好選用枝條下部發(fā)育良好的花序， 除去 上部花序。 由于葡萄是無限花序， 一個花序上的花數(shù)一般可達 200 1500 朵。因 此，一穗上開花前后不一致增加了雜交的困難， 影響果實發(fā)育， 所以在選定花序后，一般

29、剪去整個花穗尖的 1/4 和付穗，每個花序保留 100150 個花蕾供雜交 用，修剪花序后，當(dāng)有少數(shù)花已開放，要進行疏花疏蕾工作，留下那些大致能在 同一天開放的花蕾。疏穗后應(yīng)隨即去雄。最適去雄時間是開花前23 天，這時花蕾已互相分離而肥大。 顏色為黃綠色。 花瓣和花盤已完全分離， 只用鑷子在花 蕾的頂端一夾， 花瓣和花藥即可除去。 去雄后， 應(yīng)檢查有無遺漏的花蕾或殘存的 花藥，然后套上準(zhǔn)備好的透明紙袋，扎緊捆綁在結(jié)果枝上。套袋用的透明紙袋大小一般長 26 厘米，寬 14 厘米。（3）授粉去雄后 23 天即可進行授粉，這時母本花序的柱頭上分泌有大量的粘液， 表示子房已能接受花粉， 而且給花粉創(chuàng)造了良好的發(fā)芽條件， 是授粉的最適時機。 授粉宜在晴朗無風(fēng)的上午 810 時進行。少量花序授粉可用授粉器或毛筆蘸花粉授粉； 大量花序進行授粉時可將花粉放在透明紙袋內(nèi)，套到去雄的花序上，用手指從紙袋外面向花粉集中處彈23下，于是花粉便在紙袋中飛揚， 約經(jīng)半分鐘， 使花粉均勻的落在每朵花的柱頭上 以后即可取出；也可用小型噴霧器，當(dāng)手