課下提能訓(xùn)練五土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)

1、課下提能訓(xùn)練(五) 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)1產(chǎn)生標(biāo)準(zhǔn)形態(tài)菌落的細(xì)菌的最初數(shù)目和培養(yǎng)基分別是( )A 一個細(xì)菌、液體培養(yǎng)基B .許多細(xì)菌、液體培養(yǎng)基C .一個細(xì)菌、固體培養(yǎng)基D .許多細(xì)菌、固體培養(yǎng)基解析：選 C 在液體培養(yǎng)基中生活的細(xì)菌，無論是一個還是許多， 肉眼都看不見。 當(dāng)固 體培養(yǎng)基上有許多細(xì)菌并且集中在較小范圍內(nèi)時， 肉眼可見。 而菌落是一個細(xì)菌或幾個細(xì)菌 的子細(xì)胞群體， 形成于固體培養(yǎng)基上，有一定的形態(tài)結(jié)構(gòu)，所以肉眼可見。 同種細(xì)菌形成的 菌落， 形態(tài)結(jié)構(gòu)是相同的。許多細(xì)菌形成的菌落， 不可能有比較標(biāo)準(zhǔn)的形態(tài)，因為許多細(xì)菌 不可能是同一種細(xì)菌，也不可能在培養(yǎng)基的同一個點(diǎn)上。

2、2. 下列屬于菌落特征的是 ()菌落的形狀 菌落的大小 菌落的多少 隆起程度 顏色 有無莢膜A. B. C. D. 解析： 選 B 不同種類的細(xì)菌所形成的菌落大小、形狀、光澤度、顏色、硬度、透明度 等具有一定特征， 所以每種細(xì)菌在一定條件下所形成的菌落， 可以作為菌種鑒定的重要依據(jù)。 單個細(xì)菌用肉眼是看不見的，故細(xì)菌的個體特征 有無莢膜不能作為菌種鑒定的依據(jù)。3. 測定土壤中細(xì)菌數(shù)量一般選用104、 105 和 106倍的稀釋液進(jìn)行平板培養(yǎng)，而測定真菌的數(shù)量一般選用 102、 103 和 104 倍稀釋液，其原因是 ()A .細(xì)菌個體小，真菌個體大B .細(xì)菌易稀釋，真菌不易稀釋C細(xì)菌在土壤中數(shù)

3、量比真菌多D .隨機(jī)的，沒有原因解析：選C 土壤中的微生物大約 70%90%是細(xì)菌，真菌的數(shù)量要比細(xì)菌少。樣品 的稀釋度越高， 在平板上生長的菌落數(shù)目就越少。 在實際操作中， 通常選用一定稀釋范圍的 樣品液進(jìn)行培養(yǎng)， 以保證獲得菌落數(shù)在 30300之間， 適于平板計數(shù)， 所以細(xì)菌的稀釋倍數(shù) 要高于真菌的稀釋倍數(shù)。4. 想要對土壤中分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行分離與計數(shù)，下列操作需要在酒精燈火焰旁進(jìn)行的有 ()土壤取樣 稱取土壤 稀釋土壤溶液 涂布平板 微生物的培養(yǎng)A B C .D .解析：選 D 對土壤中分解尿素的細(xì)菌進(jìn)行分離與計數(shù)時， 稱取土壤、 稀釋土壤溶液和 涂布平板都在火焰旁進(jìn)行；土壤取樣在野外

4、進(jìn)行；微生物的培養(yǎng)在恒溫箱中進(jìn)行。5. 在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑的目的是( )A .對分離的菌種作進(jìn)一步的鑒定B 篩選出能分解尿素的細(xì)菌C 培養(yǎng)基中還缺乏酚紅指示劑作細(xì)菌的營養(yǎng)物質(zhì)D .如指示劑變藍(lán)就能準(zhǔn)確地認(rèn)定該菌能分解尿素解析：選 A 加入酚紅指示劑的目的是對分離的菌種作進(jìn)一步的鑒定； 用以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基篩選出能分解尿素的細(xì)菌不是加入酚紅指示劑的目的； 酚紅指示劑不能作為細(xì) 菌的營養(yǎng)物質(zhì)；如指示劑變紅就能準(zhǔn)確地認(rèn)定該菌能分解尿素。6. 用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)，在對應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，得到以下幾種統(tǒng)計結(jié)果，正確的是 ()A 涂布了一個平

5、板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是230B .涂布了兩個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)是215和260,取平均值238C .涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是21、212和256，取平均值163D .涂布了三個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是210、240和256，取平均值235解析：選 D 在設(shè)計實驗時，一定要涂布至少三個平板， 作為重復(fù)組，才能增強(qiáng)實驗的 說服力與準(zhǔn)確性； C 項中雖涂布了三個平板， 但是， 其中一個平板的計數(shù)結(jié)果與另兩個相差 太大，說明在操作過程中可能出現(xiàn)了錯誤，因此不能用這三個平板的計數(shù)來求平均值。7. 通過選擇培養(yǎng)基可以從混雜的微生物群體中分離出所需的微生物。在缺乏氮源的培養(yǎng)基上，大部分微生物無法生長；

6、在培養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細(xì)菌和放線菌生長；在 培養(yǎng)基中加入 10%的酚可以抑制細(xì)菌和霉菌生長。利用上述方法能從混雜的微生物群體中 分離出 ()大腸桿菌 霉菌 放線菌 固氮細(xì)菌A .B .C .D .解析： 選 B 在缺乏氮源的培養(yǎng)基上大部分微生物無法生長， 但固氮細(xì)菌能生長； 在培 養(yǎng)基中加入青霉素可以抑制細(xì)菌和放線菌生長， 從而分離出霉菌； 1 0%的酚可以抑制細(xì)菌和 霉菌的生長，從而分離出放線菌。&下列關(guān)于土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)的敘述，正確的是（）A 只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素B 篩選分解尿素的細(xì)菌時應(yīng)以尿素作為培養(yǎng)基中的唯一營養(yǎng)物質(zhì)C 統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)目時

7、一般用平板劃線法D 在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，若指示劑變藍(lán)，則表明篩選到了分解尿素的細(xì)菌解析：選A 只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素；篩選分解尿素的細(xì)菌的實驗中，利用的是以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基；統(tǒng)計樣品中的活菌數(shù)目一般用稀釋涂布平板法；在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，培養(yǎng)某種細(xì)菌后，如果pH升高，指示劑將變紅，就能初步鑒定該種細(xì)菌能夠分解尿素。9.甲、乙、丙是二種微生物，i、n、川是用來培養(yǎng)微生物的二種培養(yǎng)基（如下表）。甲、乙、丙都能在川中正常生長繁殖，甲能在I中正常生長繁殖，而乙和丙都不能；乙能在n中正常生長繁殖，甲、丙都不能。下列說法正確的是（）成分Inn

8、粉狀硫10 g+KH 2PO4 4 g+FeS04 0.5 g+蔗糖10 g+一+(NH 4)2SO4 0.4 g一+H2O 100 mL+MgSO4 7H2O 9.25 g+CaCI 2 0.5 g+注：“+”表示培養(yǎng)基中加入了這種物質(zhì)，“”表示培養(yǎng)基中沒有加入這種物質(zhì)。A甲、乙、丙都是異養(yǎng)微生物B 甲、乙都是自養(yǎng)微生物，丙是異養(yǎng)微生物C 甲是異養(yǎng)微生物，乙是固氮微生物，丙是自養(yǎng)微生物D 甲是固氮微生物，乙是自養(yǎng)微生物，丙是異養(yǎng)微生物解析：選D利用不同的選擇培養(yǎng)基可分離出我們所需的微生物。從表格中可看出，I培養(yǎng)基中無氮源,n培養(yǎng)基中無碳源，in為完全培養(yǎng)基。由此可知能在I中生存的甲只能是固氮

9、微生物，能在 n中生存的乙是自養(yǎng)微生物，丙只能在n中存活，為異養(yǎng)微生物。10.下列說法錯誤的是（）A 因為土壤中各類微生物的數(shù)量不同，所以為獲得不同類型的微生物，要按不同的稀 釋倍數(shù)進(jìn)行分離B.測定土壤中細(xì)菌數(shù)量和測定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，選用的稀釋范圍不同C只有得到了 3個或3個以上菌落數(shù)目在 30300的平板，才說明稀釋操作比較成功， 并能夠進(jìn)行菌落的計數(shù)D.牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的菌落數(shù)明顯大于選擇培養(yǎng)基的數(shù)目，說明選擇培養(yǎng)基已篩選出一些細(xì)菌菌落解析：選C 樣品的稀釋度直接影響平板上生長的菌落數(shù)目，土壤中各類微生物數(shù)量不同，含量最多的是細(xì)菌，大約占70%90%，其次是放線菌，最少的是

10、真菌，所以為獲得不同類型的微生物，要按不同稀釋倍數(shù)進(jìn)行分離；在同一稀釋度下只要得到兩個或兩個以上的菌落數(shù)目在30300的平板，說明稀釋操作比較成功，并能夠進(jìn)行菌落的計數(shù)； 驗證選擇培養(yǎng)基是否具有選擇作用， 需設(shè)立牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基作為對照，若后者的菌落數(shù)明顯大于前者，說明前者具有篩選作用。11某研究小組欲研究被石油污染過的土壤中細(xì)菌的數(shù)量，并從中篩選出能分解石油的細(xì)菌。下列操作錯誤的是 （）A 稱取和稀釋被污染的土壤時應(yīng)在酒精燈火焰旁B 用以石油為唯一碳源的培養(yǎng)基進(jìn)行篩選C 分離菌種時可采用稀釋涂布平板法接種D 對細(xì)菌進(jìn)行計數(shù)時宜采用平板劃線法接種解析：選D微生物的分離和培養(yǎng)的關(guān)鍵技術(shù)是無菌技

11、術(shù)，因此在微生物的分離和培養(yǎng)過程中稱取和稀釋土壤時應(yīng)在酒精燈火焰旁進(jìn)行；篩選出能分解石油的細(xì)菌， 培養(yǎng)基的配方應(yīng)以石油為唯一碳源；對微生物進(jìn)行分離可用稀釋涂布平板法或平板劃線法；對微生物進(jìn)行 計數(shù)時只能用稀釋涂布平板法。12. 苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工 廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能利用苯酚的細(xì)菌菌株，篩選的主要步驟如圖所示，為土壤樣品。下列相關(guān)敘述錯誤的是（）A 圖中培養(yǎng)目的菌株的選擇培養(yǎng)基中應(yīng)加入苯酚作為碳源B 如果要測定中活細(xì)菌數(shù)量，常采用稀釋涂布平板法C 若圖中為對照實驗，則其中應(yīng)以苯酚作為唯一

12、碳源D 使用平板劃線法可以在上獲得單菌落解析：選 C 若為對照實驗， 則中培養(yǎng)基應(yīng)含除苯酚外的其他碳源， 中以苯酚作 為唯一碳源。13. (2018全國卷I )將馬鈴薯去皮切塊，加水煮沸一定時間，過濾得到馬鈴薯浸出液。 在馬鈴薯浸出液中加入一定量蔗糖和瓊脂，用水定容后滅菌，得到M 培養(yǎng)基?；卮鹣铝袉栴}：(1) M 培養(yǎng)基若用于真菌的篩選，則培養(yǎng)基中應(yīng)加入鏈霉素以抑制的生長，加入了鏈霉素的培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基。(2) M 培養(yǎng)基中的馬鈴薯浸出液為微生物生長提供了多種營養(yǎng)物質(zhì)，營養(yǎng)物質(zhì)類型除氮源外還有 (答出兩點(diǎn)即可 )。氮源進(jìn)入細(xì)胞后，可參與合成的生物大分子有(答出兩點(diǎn)即可 )。(3) 若在 M

13、培養(yǎng)基中用淀粉取代蔗糖，接種土壤濾液并培養(yǎng)，平板上長出菌落后可通過加入顯色劑篩選出能產(chǎn)淀粉酶的微生物。加入的顯色劑是，該方法能篩選出產(chǎn)淀粉酶微生物的原理是 (4) 甲、乙兩位同學(xué)用稀釋涂布平板法測定某一土壤樣品中微生物的數(shù)量，在同一稀釋倍數(shù)下得到以下結(jié)果：甲同學(xué)涂布了 3 個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是110、140 和 149，取平均值 133；乙同學(xué)涂布了 3 個平板，統(tǒng)計的菌落數(shù)分別是27、169和 176，取平均值 124。有 人 認(rèn) 為 這 兩 位 同 學(xué) 的 結(jié) 果 中 ， 乙 同 學(xué) 的 結(jié) 果 可 信 度 低 ， 其 原 因 是解析： (1)鏈霉素是抗生素，可抑制細(xì)菌生長，故在 M

14、 培養(yǎng)基中加入鏈霉素作為選擇培 養(yǎng)基，可篩選出真菌。(2)培養(yǎng)基中的營養(yǎng)成分一般包括碳源、氮源、水和無機(jī)鹽等。細(xì)胞中含有氮元素的生物大分子有蛋白質(zhì)、核酸等，故加入的氮源可參與以上物質(zhì)的合成。(3)能產(chǎn)生淀粉酶的微生物可將淀粉水解成麥芽糖， 淀粉遇碘液變藍(lán)， 向加有淀粉的培養(yǎng)基中加 入碘液后培養(yǎng)基呈現(xiàn)藍(lán)色， 產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍的淀粉被水解， 形成透明圈， 可根據(jù)透明圈 的大小判斷產(chǎn)生淀粉酶的多少。(4)統(tǒng)計菌落數(shù)時，一般選擇菌落數(shù)在30300的平板進(jìn)行計數(shù)， 甲同學(xué)統(tǒng)計的 3 個平板中的菌落數(shù)在正常范圍內(nèi)且差距不大， 比較準(zhǔn)確； 乙同學(xué)統(tǒng)計 的3個平板中，1個平板的計數(shù)結(jié)果與另 2個相差懸殊，結(jié)

15、果的重復(fù)性差。答案：（1）細(xì)菌選擇（2）碳源、無機(jī)鹽蛋白質(zhì)、核酸 （3）碘液淀粉遇碘液顯藍(lán)色， 產(chǎn)淀粉酶的菌落周圍淀粉被水解，形成透明圈（4）乙同學(xué)的結(jié)果中，1個平板的計數(shù)結(jié)果與另2個相差懸殊，結(jié)果的重復(fù)性差14. 某化工廠的污水池中含有一種有害的難以降解的有機(jī)化合物A。研究人員用化合物A、磷酸鹽、鎂鹽以及微量元素配制的培養(yǎng)基，成功篩選到能高效降解化合物A的細(xì)菌（目的菌）。實驗的主要步驟如圖所示。請分析回答下列問題：直至it得郢時藺（1）培養(yǎng)基中加入化合物 A的目的是篩選 ，這種培養(yǎng)基屬于 培養(yǎng)基。（2）目的菌生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的 ，實驗需要振蕩培養(yǎng)，由此推測目的菌的代謝類型是

16、異養(yǎng) （填“需氧”或“厭氧”）型。（3）培養(yǎng)若干天后，應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量的培養(yǎng)液，接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，使目的菌的數(shù)量 （兩空均填“增加”或“減少”）。（4）轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基時，常采用 和稀釋涂布平板法進(jìn)行接種，在前一種方法接種過程中所用的接種工具是，這種工具在操作時采用的滅菌方法是某同學(xué)計劃統(tǒng)計污水池中目的菌的總數(shù)，他選用104、105、106稀釋液進(jìn)行涂布平板,每種稀釋液都設(shè)置 3個重復(fù)，各吸取0.1 mL稀釋液涂布平板，在適宜條件下培養(yǎng)一段時間 后，對平板的菌落數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計，結(jié)果如下：稀釋度（倍）104105106平板123123123平板菌落數(shù)（個）43242144578677

17、4968為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，應(yīng)選擇上述稀釋 倍的平板菌落數(shù)作為統(tǒng)計結(jié)果，計算出樣品中每毫升目的菌菌株數(shù)為 個。測定微生物的數(shù)量常采用 法，其統(tǒng)計的數(shù)值往往比實際數(shù)目低，原因是解析：（1）培養(yǎng)基中加入化合物 A的目的是篩選目的菌，這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。（2）目的菌生長所需的氮源和碳源是來自培養(yǎng)基中的化合物A，因為除了化合物 A，沒有其他的氮源和碳源。實驗需要振蕩培養(yǎng)， 振蕩可以增加培養(yǎng)液中的溶氧量，由此推測目的菌的代謝類型是異養(yǎng)需氧型。（3）培養(yǎng)若干天后，應(yīng)選擇培養(yǎng)瓶中化合物A含量減少的培養(yǎng)液,接入新的培養(yǎng)液中連續(xù)培養(yǎng)，使目的菌的數(shù)量增加。如此操作，可以補(bǔ)充營養(yǎng)物質(zhì)。（4）接種用到的方法一般有

18、平板劃線法和稀釋涂布平板法，前一種方法的接種工具是接種針和接種環(huán)，這種工具在操作時采用的滅菌方法是灼燒滅菌。（5）應(yīng)取菌落數(shù)在 30300之間的平板進(jìn)行計數(shù)， 所以稀釋 105倍的平板符 合要求，則 每毫升目 的菌菌株 數(shù)是（78 + 67 +74） 43P.1 X 105 = 7.3X 107（個）。稀釋涂布平板法計算的活菌數(shù)比實際值偏小，因為可能有兩個或多個細(xì)胞形成一個菌落。答案：目的菌 選擇（2）化合物A 需氧 減少 增加（4）平板劃線法 接種針 （環(huán)）灼燒滅菌 （5）105 7.3 X 107 （6）稀釋涂布平板 兩個或多個細(xì)胞連在一起， 觀察到的 只是一個菌落15為研究某品牌酸奶中乳酸菌的數(shù)量及其對抗生素的耐藥性情況，某同學(xué)進(jìn)行了如 下實驗:IDmb90 ml9mL整奶樣詁尢闊水無曲水請分析回答下列問題:氮源和無機(jī)鹽等主要營養(yǎng)成分外，還。在培養(yǎng)基各成分溶化與滅菌兩步驟之間，要進(jìn)行的操作是配制的乳酸菌液體培養(yǎng)基除了含有水、碳源、 應(yīng)加入適量的（2）接種微生物的方法有很多，圖中過程所表示的方法為 。用該方法統(tǒng)計樣本菌落數(shù)時，同時需要做 A、 B、 C三個平板，目的是。用該方法統(tǒng)計培養(yǎng)基上的菌落數(shù)后，所得數(shù)據(jù)需要乘以10n后，才可表示酸奶樣品中乳酸菌的數(shù)量（單位：個/mL），這