《臨床技術(shù)操作規(guī)范病理學分冊》醫(yī)院用

1、臨床技術(shù)操作規(guī)范病理學分冊第1章總則一、為提高病理學診斷質(zhì)量，促進臨床工作，依據(jù)中華人民 共和國執(zhí)業(yè)醫(yī)師法精神，結(jié)合醫(yī)院病理科工作的特點，制定本規(guī) 卄氾。二、醫(yī)院病理科和承擔醫(yī)院病理科任務的醫(yī)學院校病理教研室 的主要臨床任務是通過活體組織病理學檢查（簡稱活檢）、細胞病 理學檢查（簡稱細胞學檢查）和尸體剖檢（簡稱尸檢）等作出疾病 的病理學診斷（或稱病理診斷）。具有一定規(guī)模的病理科，應積極 開展教學、培訓病理醫(yī)師和科學研究等項工作。三、病理學診斷是病理醫(yī)師應用病理學知識、有關(guān)技術(shù)和個人 專業(yè)實踐經(jīng)驗，對送檢的患者標本（或稱檢材，包括活體組織、細 胞和尸體等）進行病理學檢查，結(jié)合有關(guān)臨床資料，通過分

2、析、綜 合后，作出的關(guān)于該標本病理變化性質(zhì)的判斷和具體疾病的診斷。 病理學診斷為臨床醫(yī)師確定疾病診斷、制定治療方案、評估疾病預 后和總結(jié)診治疾病經(jīng)驗等提供重要的、有時是決定性的依據(jù)，并在 疾病預防，特別是傳染病預防中發(fā)揮重要作用。四、病理學診斷報告書（或稱病理診斷報告）是關(guān)于疾病診斷 的重要醫(yī)學文書。當涉及醫(yī)、患間醫(yī)療爭議時，相關(guān)的病理學診斷 報告書具有法律意義。病理學診斷報告書應由具有執(zhí)業(yè)資格的注冊 主治醫(yī)師以上（含主治醫(yī)師）的病理醫(yī)師簽發(fā)。各醫(yī)院可酌情準予 條件適宜的高年資病理科住院醫(yī)師試行簽署病理學診斷報告書。低年資病理科住院醫(yī)師、病理科進修醫(yī)師和非病理學專業(yè)的醫(yī)師不得 簽署病理學診斷報

3、告書。五、病理學檢查是臨床醫(yī)師與病理醫(yī)師為確立疾病診斷而進行 的合作行為，是有關(guān)臨床科室與病理科之間特殊形式的會診。臨床 醫(yī)師和病理醫(yī)師雙方皆應認真履行各自的義務和承擔相應的責任。六、病理學檢查申請單是臨床醫(yī)師向病理醫(yī)師發(fā)出的會診邀請 單。病理學檢查申請單的作用是：臨床醫(yī)師向病理醫(yī)師傳遞關(guān)于患 者的主要臨床信息（包括癥狀、體征、各種輔助檢查結(jié)果和手術(shù)所 見等）、診斷意向和就具體病例對病理學檢查提出的某些特殊要 求，為進行病理學檢查和病理學診斷提供重要的參考資料或依據(jù)。 病理學檢查申請單是疾病診治過程中的有效醫(yī)學文書，各項信息必 須真實，應由主管患者的臨床醫(yī)師親自（或指導有關(guān)醫(yī)師）逐項認 真填寫

4、并簽名。七、臨床醫(yī)師應保證送檢標本與相應的病理學檢查申請單內(nèi)容 的真實性和一致性，所送檢材應具有病變代表性和可檢查性，并應 是標本的全部。八、患者或患者的授權(quán)人應向醫(yī)師提供有關(guān)患者的真實信息（包括姓名、性別、年齡、病史和可能涉及診斷需要的隱私信 保證其自送檢材的真實性、完整性和可檢查性。息）。病理醫(yī)師應尊重和保護患者的隱私。患者或患者的授權(quán)人應九、病理科應努力為臨床、為患者提供優(yōu)質(zhì)服務，遵照本規(guī)范的要求加強科室建設，制訂完善的科室管理制度，并實施有效的質(zhì) 量監(jiān)控。十、病理科工作人員應恪盡職守，做好本職工作。病理醫(yī)師應 及時對標本進行檢查和發(fā)出病理學診斷報告書，認真對待臨床醫(yī)師 就病理學診斷提出

5、的咨詢，必要時應復查有關(guān)的標本和切片，并予 以答復。病理科技術(shù)人員應嚴格執(zhí)行本規(guī)范的技術(shù)操作規(guī)程，提供 合格的病理學常規(guī)染色片、特殊染色片和可靠的其他相關(guān)檢測結(jié) 果，并確保經(jīng)過技術(shù)流程處理的檢材真實無誤。第2章病理學檢查常規(guī)第一節(jié)普通活體組織病理學檢查常規(guī)一、申請單和標本的驗收（一）病理科應有專人驗收普通活體組織病理學檢查（常規(guī)活檢） 申請單和送檢的標本。（二）病理科驗收人員必須：1、同時接受同一患者的申請單和標本。2、認真核對每例申請單與送檢標本及其標志（聯(lián)號條或其他 寫明患者姓名、送檢單位和送檢日期等的標記）是否一致；對于送 檢的微小標本，必須認真核對送檢容器內(nèi)或濾紙上是否確有組織及 其數(shù)

6、量。發(fā)現(xiàn)疑問時，應立即向送檢方提出并在申請單上注明情 況。3、認真檢查標本的標志是否牢附于放置標本的容器上。4、認真查閱申請單的各項目是否填寫清楚，包括：患者基 本情況姓名、性別、年齡，送檢單位（醫(yī)院、科室）、床位、門診號/住院號、送檢日期、取材部位、標本數(shù)量等,患者臨床 情況病史（癥狀和體征）、化驗/影象學檢查結(jié)果、手術(shù)（包括 內(nèi)鏡檢查）所見、既往病理學檢查情況（包括原病理號和診斷）和 臨床診斷等。5、在申請單上詳細記錄患者或患方有關(guān)人員的明確地址、郵 編及電話號碼，以便必要時進行聯(lián)絡，并有助于隨訪患者。（三）驗收標本人員不得對申請單中由臨床醫(yī)師填寫的各項內(nèi)容 進行改動。（四）下列情況的申請

7、單和標本不予接收：1、申請單與相關(guān)標本未同時送達病理科；2、申請單中填寫的內(nèi)容與送檢標本不符合；3、標本上無有關(guān)患者姓名、科室等標志；4、申請單內(nèi)填寫的字跡潦草不清；5、申請單中漏填重要項目；6、標本嚴重自溶、腐敗、干7、標本過小，不能或難以制做切片；8、其他可能影響病理檢查可行性和診斷準確性的情況。病理科不能接收的申請單和標本一律當即退回，不予存放。（五）臨床醫(yī)師采取的標本應盡快置放于盛有固定液（4%中性甲 醛，即10%中性福爾馬林）的容器內(nèi)，固定液至少為標本體積的5 倍。對于需作特殊項目檢查（如微生物、電鏡、免疫組織化學、分 子生物學等）的標本，應按相關(guān)的技術(shù)要求進行固定或預處理。（六）病

8、理醫(yī)師只對病理科實際驗收標本的病理診斷負責。（七）病理科應建立與送檢方交接申請單和標本的手續(xù)制度。具 體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制訂。二、申請單和標本的編號、登記（一）病理科驗收人員應在已驗收的申請單上注明驗收日期并及 時、準確編號（病理號），并逐項錄入活檢標本登記簿或計算機 內(nèi)。嚴防病理號的錯編、錯登。（二）標本的病理號可按年編序，或連續(xù)性（不分年度）編序。（三）同一病例同一次的申請單、活檢標本登記簿（包括計算機 錄入）、放置標本的容器、組織的石蠟包埋塊（簡稱蠟塊）及其切 片等的病理號必須完全一致。（四）病理科應建立驗收人員與組織取材人員之間申請單和標本 的交接制度。具體交接方法由各醫(yī)院病

9、理科自行制訂。（五）在病理科內(nèi)移送標本時，必須確保安全，嚴防放置標本的 容器傾覆、破損和標本的散亂、缺失等。三、標本的預處理標本驗收人員對已驗收的標本酌情更換適宜的容器，補充足量 的固定液；對于體積大的標本，值班取材的病理醫(yī)師在不影響主要 病灶定位的情況下，及時、規(guī)范地予以剖開，以便充分固定。四、標本的巨檢、組織學取材和記錄對于核驗無誤的標本，應按照下列程序進行操作：肉眼檢查標本 （巨檢）；切取組織塊（簡稱取材）；將巨檢和取材情況記錄于活檢記錄單上（活檢記錄單印于活檢申請單的背面）。巨檢和取 材的技術(shù)操作參見第3章第四節(jié)。巨檢和取材時的注意事項：（一）巨檢和取材必須由病理醫(yī)師進行，應配備人員負

10、責記錄。（二）巨檢和取材過程中，應嚴防污染工作人員和周圍環(huán)境。（三）標本一般應經(jīng)適當固定后再行取材。已知具有傳染性（例 如結(jié)核病、病毒性肝炎等）的標本，應在不污染環(huán)境和/或不擴散 傳染的原則下，經(jīng)必要的初步巨檢或切開后，立即置于盛有足量固 定液的專用容器內(nèi)，充分固定后再行常規(guī)巨檢和取材。（四）病理醫(yī)師在對每例標本進行巨檢和取材前，應與記錄人員 認真核對該例標本及其標志與申請單的相關(guān)內(nèi)容是否一致。若對申 請單填寫的內(nèi)容或/和標本有疑問（例如患者姓名有誤，標本內(nèi) 容、數(shù)量、病變特征與申請單填寫的情況不符等），應暫行擱置， 盡快與送檢方聯(lián)系，查明原因，確保無誤后，再行巨檢和取材。必 要時，可邀請有關(guān)

11、臨床醫(yī)師共同檢查標本和取材。對于有疑問的標 本，在消除疑問前不得進行巨檢和取材，應將有關(guān)標本連同其申請 單一并暫時妥存。（五）病理醫(yī)師進行巨檢和取材時，記錄人員應根據(jù)病理申請單 內(nèi)容，向巨檢醫(yī)師報告患者的基本臨床情況、手術(shù)所見、標本情況 （采取部位、數(shù)量等）和送檢醫(yī)師的特殊要求等，并如實、清楚地將病理醫(yī)師的口頭描述記錄于活檢記錄單上。必要時，應在活檢記錄單上（或另附紙）繪簡圖顯示巨檢所見和標示取材部位。取材者 應核對記錄內(nèi)容。（六）具有醫(yī)學學術(shù)價值的標本可攝影存檔，并酌情妥為保存。（七）病理科宜積極推行巨檢和取材的錄音記錄。每次巨檢和取 材結(jié)束后，應由專人立即對錄音內(nèi)容進行文字整理，記錄于活檢

12、記 錄單上（手錄或用計算機錄入、打?。?。有關(guān)的錄音資料應保存至 病理診斷報告書發(fā)出后兩周。（八）細小標本取材時，可用伊紅點染并用軟薄紙妥善包裹。（九）每例標本取材前、后，應用流水徹底清洗取材臺面和所有 相關(guān)器物，嚴防檢材被無關(guān)組織或其他異物污染，嚴防細小檢材被 流水沖失。（十）巨檢和取材必須按照本規(guī)范的要求進行操作（參見第3章 第四節(jié)）。對于由不同部位或不同病變區(qū)域切取的組織塊，應在其 病理號之后再加編次級號（例如：-1, - 2, - 3, ;a, , b, c,等）。（十一）巨檢/取材者和記錄人員應相互配合、核查，確保所取組織塊及其編號標簽準確地置于用于脫水的容器（脫水盒等）內(nèi)。（十二）標

13、本巨檢和取材后剩余的組織/器官應置入適當容器內(nèi)，添加適量4%中性甲醛并附有相關(guān)病理號和患者姓名等標志, 然后按取材日期有序地妥為保存。取材剩余的標本一般保存至病理 診斷報告書發(fā)出后兩周。（十三）病理醫(yī)師在每批標本巨檢和取材后，應與記錄人員共同核對取材內(nèi)容，并在活檢記錄單/取材工作單上簽名和簽署日期。（十四）取材后剩余的病理標本屬于污染源，應遵照有關(guān)規(guī)定處 理。（十五）巨檢/取材醫(yī)師或記錄人員與制片的技術(shù)人員認真辦理 交接手續(xù)。具體交接方法由各醫(yī)院病理科自行制訂。五、組織切片制備的基本要求（一）組織制片過程中，應確保切片號與蠟塊號一致。（二）制片工作一般應在取材后2個工作日內(nèi)完成（不含需要脫 鈣

14、、脫脂等特殊處理的標本）。（三）制片完成后，技術(shù)人員應檢查制片質(zhì)量，并加貼標有本病 理科病理號的標簽。常規(guī)石蠟-he染色片的優(yōu)良率應95%,優(yōu)秀 率不35%。不合格切片應立即重做。切片質(zhì)量的基本標準參見第 3章第一節(jié)的附表。（四）制片過程發(fā)生意外情況時，有關(guān)技術(shù)人員和技術(shù)室負責人 應及時向科主任報告，并積極設法予以補救。（五）制片完成后，技術(shù)人員應將所制切片與其相應的活檢記錄 單/取材工作單等進行認真核對，確認無誤后，將切片連同相關(guān)的 活檢申請單/活檢記錄單/取材工作單等一并移交給病理醫(yī)師。雙 方經(jīng)核對無誤后，辦理移交簽字手續(xù)。具體交接方法由各醫(yī)院病理 科自行制訂。（六）常規(guī)活檢組織切片制備技

15、術(shù)的基本要求參見第3章第一節(jié)。六、組織切片的光學顯微鏡檢查和病理診斷（一）病理醫(yī)師進行病理診斷時：1、應認真閱讀申請單提供的各項資料，必要時（尤其是疑難 病例），應向有關(guān)臨床醫(yī)師了解更多的臨床信息。2、應認真閱讀活檢記錄單中關(guān)于標本巨檢的描述；負責復檢 的病理醫(yī)師必要時親自觀察標本，補充或訂正病變描述，指導或親 自補取組織塊。3、應了解患者既往病理學檢查情況（包括切片的病理診斷和 有關(guān)文字記錄）：由本病理科既往受理者，必須及時調(diào)閱相關(guān)切 片等病理學檢查資料；非本病理科既往受理者，應積極協(xié)助患者 從有關(guān)病理科商借相關(guān)切片等病理學檢查資料參閱。4、應在活檢記錄單上簽署“醫(yī)囑”，告知技術(shù)人員進行必要

16、 的深切片、連切片、特殊染色和其他相關(guān)技術(shù)檢測。5、應全面、細致地閱片，注意各種有意義的病變。（二）進行初檢的病理醫(yī)師，應提出初診意見，送交主檢病理醫(yī) 師復查。（三）主檢病理醫(yī)師對難以明確診斷的病例，可以：1、提請科內(nèi)上級醫(yī)師會診或進行科內(nèi)讀片討論（會診）；2、與有關(guān)臨床醫(yī)師進行臨床-病理會診；3、必要時約見患者（尤其門診患者）或患者親屬（或其他患 方相關(guān)人員），了解病情，說明病理診斷的疑難情況和延期簽發(fā)病 理學診斷報告書的原因等；4、于簽發(fā)病理學診斷報告書前進行科外病理會診（“診斷報告 前病理會診”），應將各方面會診意見的原件（或復印件）作為檔 案資料貼附于有關(guān)患者的活檢記錄單中備查；5、必

17、要時，建議臨床醫(yī)師重復活檢，或密切隨查。（四）主檢病理醫(yī)師根據(jù)常規(guī)切片的鏡下觀察，結(jié)合標本巨檢、 相關(guān)技術(shù)檢查結(jié)果、有關(guān)臨床資料和參考病理會診意見等，作出病 理診斷或提出病理診斷意見（意向），清楚地書寫于活檢記錄單的 有關(guān)欄目中、并親筆簽名。各方會診意見不一、難以明確診斷時， 主檢醫(yī)師可參考會診意見酌情診斷，或在病理學診斷報告書中將各 方會診意見列出，供臨床醫(yī)師參考。（五）對打印的病理學診斷報告書，主檢病理醫(yī)師應與活檢記錄 單上的病理診斷文字進行核對，并親筆簽名。參見本節(jié)下文：“八、常規(guī)活檢病理學診斷報告書及其簽發(fā)”七、相關(guān)診斷技術(shù)的選用病理醫(yī)師可借助于組織化學染色（包括特殊染色）、免疫組織

18、化學染色、電子顯微鏡技術(shù)、分子生物學技術(shù)、流式細胞技術(shù)等相 關(guān)診斷技術(shù)檢查提供的佐證，對某些病例（尤其是疑難病例）進行 病理診斷。（參見第4章）八、病理學診斷報告書及其簽發(fā)（一）病理診斷表述的基本類型i類：檢材部位/疾病名稱/病變性質(zhì)明確和基本明確的病理診斷。ii類：不能完全肯定疾病名稱/病變性質(zhì)，或是對于擬診的疾 病名稱/病變性質(zhì)有所保留的病理診斷意向，可在擬診疾病/病變 名稱之前冠以諸如病變可“符合為”、“考慮為”、“傾向為”、“提示為”、“可能為”、“疑為”、“不能排除（除外）”之類 的詞語。iii類：檢材切片所顯示的病變不足以診斷為某種疾?。床荒?做出i類或ii類病理診斷），只能進行

19、病變的形態(tài)描述。iv類：送檢標本因過于細小、破碎、固定不當、自溶、嚴重受擠壓（變形）、被燒灼、干涸等，無法做出病理診斷。（二）病理學診斷報告書的基本內(nèi)容1、患者的基本情況，包括病理號，姓名，性別，年齡，送檢 醫(yī)院/科室（住院/門診），住院號/門診號，送檢/收驗日期 等。2、巨檢病變和鏡下病變要點描述（一般性病變和細小標本可 酌情簡述或省略）。3、與病理診斷相關(guān)技術(shù)的檢查結(jié)果。4、病理診斷的表述（參見上文“病理診斷表述的基本類 型"）。5、對于疑難病例或作出ii、iii類病理診斷的病例，可酌情就病理診斷及其相關(guān)問題附加：建議（例如進行其他有關(guān)檢查、再 做活檢.科外病理學會診、密切隨診/

20、隨訪等）；注釋/討論。6、經(jīng)過本病理科或/和科外病理會診的病例，可將各方病理會診意見列于該例患者的病理學診斷報告書中。（三）病理學診斷報告書的書寫要求1、病理學診斷報告書的文字表述力求嚴謹、恰當、精練、條 理和層次清楚。2、病理學診斷報告書應為一式二份，一份交予送檢方，另一 份隨同患者的病理學檢查申請單/病理學檢查記錄單一并存檔。主 檢病理醫(yī)師必須在每一份病理學診斷報告書上簽名，不能以個人印 章代替簽名，不能由他人代為簽名；主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應能 辨認。3、手書的病理學診斷報告書必須二聯(lián)復寫，必須文字規(guī)范、 字跡清楚，不得潦草、涂改。4、手書和計算機打印的病理學診斷報告書中的關(guān)鍵性文字，

21、例如“癌”、“瘤”、“陽性”、“陰性”和數(shù)字等，要認真核 對，不得有誤。5、計算機打印的圖文病理學診斷報告書提供的病變圖象要準 確，具有典型（代表）性，放大倍數(shù)適當。6、患者的基本情況項目必須嚴格按照送檢臨床醫(yī)師填寫的文 字抄寫或用計算機輸錄于病理學診斷報告書中，并認真核查無誤， 簽發(fā)報告書的病理醫(yī)師和病理科的其他人員都不得改動。7、病理醫(yī)師不得簽發(fā)虛假的病理學診斷報告書，不得向臨床 醫(yī)師和患方人員提供有病理醫(yī)師簽名的空白病理學診斷報告書。（四）病理學診斷報告書的發(fā)送1、病理科自接受送檢標本至簽發(fā)該例病理學診斷報告書的時 間，一般情況下為5個工作日以內(nèi)；2、由于某些原因（包括深切片、補取材制片

22、、特殊染色、免 疫組織化學染色、脫鈣、疑難病例會診或傳染性標本延長固定時間 等）延遲取材、制片，或是進行其他相關(guān)技術(shù)檢測，不能如期簽發(fā) 病理學診斷報告書時，應以口頭或書面告知有關(guān)臨床醫(yī)師或患方， 說明遲發(fā)病理學診斷報告書的原因。3、病理科應有專人發(fā)送病理學診斷報告書。住院患者的病理 學診斷報告書應發(fā)送至有關(guān)臨床科室。病理科所在醫(yī)院門診患者和 外院患者病理學診斷報告書的發(fā)送方法，由各醫(yī)院病理科自行制 訂。4、病理學診斷報告書的經(jīng)收人員（包括患方人員）必須履行 簽收手續(xù)。5、病理科已發(fā)出的病理學診斷報告書被遺失時，一般不予補 發(fā)；必要時，經(jīng)病理科主任同意可以抄件形式補發(fā)。九、資料管理普通活體組織病

23、理學檢查的資料必須妥善管理，有關(guān)規(guī)定參見 本章第五節(jié)。十、會 診病理學會診是普通活體組織病理學診斷過程的重要環(huán)節(jié)，有關(guān) 規(guī)定參見本章第六節(jié)。第二節(jié)手術(shù)中快速活體組織病理學檢查常規(guī)一、概 述（一）手術(shù)中快速活體組織病理學檢查（快速活檢）是臨床醫(yī)師 在實施手術(shù)過程中，就與手術(shù)方案有關(guān)的疾病診斷問題請求病理醫(yī) 師快速進行的急會診，尤其需要臨床醫(yī)師與病理醫(yī)師間的密切合 作。（-）-快速活檢要求病理醫(yī)師在很短時間內(nèi)，根據(jù)對切除標本的 巨檢和組織塊快速冷凍切片（或快速石蠟切片）的觀察，向手術(shù)醫(yī) 師提供的參考性病理診斷意見。與常規(guī)石蠟切片的病理診斷相比， 快速活檢會診具有更多的局限性和誤診的可能性。有的病例

24、難以快 速診斷，需要等待常規(guī)石蠟切片進一步明確診斷。因此，應向臨床 醫(yī)師說明快速活檢的：局限性、適用范圍、慎用范圍和不 宜應用范圍。（三）有關(guān)臨床醫(yī)師應于手術(shù)前向患者和/或患者授權(quán)人說明快 速活檢的意義和局限性等，取得患者和/或患方的知情和理解?；?者和/或患者授權(quán)人應在由醫(yī)院制定的手術(shù)中快速活檢患方知情 同意書簽署意見和簽名。（四）主持手術(shù)的臨床醫(yī)師應在手術(shù)前一天向病理科遞交快速活 檢申請單，填寫患者的病史，重要的影象學、實驗室檢查結(jié)果和提 請病理醫(yī)師特別關(guān)注的問題等。盡可能不在手術(shù)進行過程中臨時申 請快速活檢。（五）手術(shù)中快速活檢應由經(jīng)過該項工作訓練的主治醫(yī)師以上的 病理醫(yī)師主持。尚不具備

25、相應條件的病理科不應勉強開展手術(shù)中快速活檢。（六）負責快速活檢的主檢病理醫(yī)師應了解患者的臨床情況,手術(shù)所見，既往有關(guān)的病理學檢查情況。二、適用范圍（-）瘤等），（二）需要確定病變性質(zhì)（如腫瘤或非腫瘤/良性腫瘤或惡性腫 以決定手術(shù)方案的標本。了解惡性腫瘤的擴散情況，包括腫瘤是否浸潤相鄰組織、有無區(qū)域淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等。（三）確定腫瘤部位的手術(shù)切緣有無腫瘤組織殘留。（四）確認切除的組織，例如甲狀旁腺、輸卵管、輸精管及異位 組織等。三、慎用范圍涉及截肢和其他會嚴重致殘的根治性手術(shù)切除的 標本。需要此類手術(shù)治療的患者，其病變性質(zhì)宜于手術(shù)前通過常規(guī) 活檢確定。四、不宜應用范圍（一）疑為惡性淋巴瘤。（二）過小的

26、標本（檢材長徑 0. 2cm者）。（三）術(shù)前易于進行常規(guī)活檢者。（四）脂肪組織、骨組織和鈣化組織。（五）需要依據(jù)核分裂象計數(shù)判斷良、惡性的軟組織腫瘤。（六）主要根據(jù)腫瘤生物學行為特征而不能依據(jù)組織形態(tài)判斷良、惡性的腫瘤。（七）已知具有傳染性的標本（例如結(jié)核病、病毒性肝炎、艾滋 病等）。五、申請單和標本的驗收、編號和登記手術(shù)中快速活體組織病理學檢查申請單和標本的驗收、編號和 登記參照本章第一節(jié)中“一”至“三”項的有關(guān)規(guī)定。六、標本的巨檢、取材和記錄（一）病理科驗收快速活檢申請單和標本后，應參照本章第一節(jié) 中“四”項的有關(guān)規(guī)定，立即進行標本的巨檢、取材和記錄。（二）主持快速活檢的病理醫(yī)師應親自參與

27、標本的巨檢和取材 （或指導取材）。（三）通常選取具有代表性的病變組織12塊，需要時，增加 取材塊數(shù)。七、組織切片的制備（一）冷凍切片1、完成冷凍he染色切片制備的時間通常應為2025分鐘。2、恒冷箱切片機制片：至少應于切片前1小時開機預冷，冷 室溫度一般為-15-20°co常規(guī)開展冷凍切片快速病理學診斷的病 理科，恒冷箱切片機宜處于24小時恒溫待機狀態(tài)。3、其他方法的冷凍切片制備參見第3章第一節(jié)。（二）快速石蠟切片1、完成快速石蠟-he染色切片的時間通常為30分鐘。2、快速石蠟切片的制備方法參見第3章第一節(jié)。（三）制備好的冷凍/快速石蠟-he染色切片，加貼標有本病理 科病理號的標簽后

28、，立即交由主檢病理醫(yī)師進行診斷。八、手術(shù)中快速活檢會診意見及其簽發(fā)（一）有條件時病理科宜由兩位病理醫(yī)師共同簽署快速活檢的病 理診斷意見。對于病變疑難、手術(shù)切除范圍廣泛和會嚴重致殘的手 術(shù)中快速活檢，應由兩位高級稱職的病理醫(yī)師共同簽署會診意見。 主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應能辨認。（二）快速活檢診斷意見一般在收到送檢標本后40分鐘內(nèi)發(fā) 出；同一時間段內(nèi)相繼收到的多例患者標本或是同一例患者的多次 標本，其發(fā)出報告的時間依次類推。對于疑難病變，可酌情延時報 告。（三）對于難以即時快速診斷的病變（例如病變不典型、交界性 腫瘤病變或送檢組織不足以明確診斷等），主檢病理醫(yī)師應向手術(shù) 醫(yī)師說明情況，恰如其分地簽

29、發(fā)病理診斷意見或告知需要等待常規(guī) 石蠟切片進一步明確病理診斷。（四）主檢病理醫(yī)師簽署的快速活檢病理診斷意見，宜以文字形 式報告（具體發(fā)出方式由各醫(yī)院自行決定）。快速活檢病理診斷意 見報告書發(fā)出前應認真核對無誤。九、冷凍切片后剩余組織的處理（一）冷凍切片后剩余的冷凍組織（簡稱“凍對”）和冷凍切片取材后剩余、未曾冷凍的組織（簡稱“凍?！保鶓４?，用以制備常規(guī)石蠟切片，以便與冷凍切片進行對照觀察。（-）“凍對” / “凍?！苯M織的蠟塊和切片需與同一病例手 術(shù)后送檢的切除標本編為同一病理號，并作出綜合性診斷。（三）當冷凍切片病理診斷意見與其“凍對”組織的常規(guī)石蠟- he片的病理診斷不一致時，該例的

30、病理診斷一般應以石蠟-he片診 斷為準。十、資料管理手術(shù)中快速活體組織病理學檢查的資料必須妥善管理，有關(guān)規(guī) 定參見本章第五節(jié)。第三節(jié)細胞病理學檢查常規(guī)一、申請單和標本的驗收、編號和登記（一）病理科應參照本章第一節(jié)（常規(guī)活體組織病理學檢查常 規(guī)）中“一”和“二”項的規(guī)定，進行細胞病理學檢查（細胞學檢 查）申請單和標本的驗收、編號和登記。（二）用于細胞學檢查的標本必須新鮮，取材后應盡快送至病理 科（或細胞病理學室，下同）；病理科核驗檢材無誤后，應盡快進行 涂片和染色。（三）病理科驗收標本人員不得對申請單中由臨床醫(yī)師填寫的各 項內(nèi)容進行改動。二、細胞涂片、組織印片和壓片的基本要求（一）細胞涂片、組織

31、印片和壓片（參見第3章第二節(jié)）。（二）腫物細針穿刺物涂片1、應由掌握細針穿刺技術(shù)的注冊醫(yī)師或注冊助理醫(yī)師，按照細針穿刺技術(shù)操作常規(guī)，親自對確有適應癥且無禁忌癥的患者采取 穿刺物。2、適應癥：通常為：（1）淺表腫物：乳腺、甲狀腺、涎腺、淋巴結(jié)、前列腺、皮下 軟組織和骨等。（2）胸腔腫物：肺、胸膜和縱隔等。（3）腹腔腫物：肝、胰、腎、腎上腺、腹腔內(nèi)、腹膜后和盆腔 內(nèi)等。（4）顱內(nèi)腫物。3、禁忌癥：患者有難以控制的咳嗽、肺動脈高壓癥、進行性 肺氣腫、出血性體質(zhì)及“暈針史”等。（三）對于核驗無誤的送檢標本，應立即依序進行：涂片、 印片或壓片，固定和染色。三、細胞病理學診斷報告書及其簽發(fā)（一）細胞病理學

32、診斷可為臨床醫(yī)師診斷疾?。ㄓ绕涫悄[瘤）提 供重要參考依據(jù)。（二）細胞病理學診斷報告書必須由具有主檢資格的注冊病理醫(yī) 師簽署后發(fā)出。主檢病理醫(yī)師簽名的字跡應能辨認。（三）細胞病理學診斷表述的基本類型1、直接表述性診斷：適用于穿刺標本的細胞病理學診斷報告。根據(jù)形態(tài)學觀察的實際情況，對于某種疾病/病變做出肯定性 （i類）、不同程度意向性（ii類）細胞學診斷，或是提供形態(tài)描述性（iii類）細胞學診斷，或是告知無法做出（iv類）細胞學診 斷。參考本章第一節(jié)的八（一）項：“病理學診斷表述的基本類 型”2、間接分級性診斷：用于查找惡性腫瘤細胞的診斷。 i級：未見惡性細胞ii級：查見核異質(zhì)細胞ila:輕度核異

33、質(zhì)細胞ii b：重度核異質(zhì)細胞iii級：查見可疑惡性細胞iv級：查見高度可疑惡性細胞v級：查見惡性細胞（四）細胞病理學診斷的局限性（假陰性或假陽性診斷）1、假陰性：是指在惡性腫瘤患者的有關(guān)標本中未能查見惡性細胞。假陰性率一般為10%左右。因此，細胞病理學檢查的陰性結(jié) 果并不能否定臨床醫(yī)師的惡性腫瘤診斷。2、假陽性：是指在非惡性腫瘤患者的有關(guān)標本中查見了 “惡性細胞”假陽性率通常1%。此，細胞病理學診斷應密切結(jié)合患者的臨床資料，對于臨床上未考慮為惡性腫瘤患者的陽性細胞學 診斷應持慎重態(tài)度。（五）細胞病理學診斷報告書的基本內(nèi)容1、患者的基本情況項目，包括病理號、姓名、性別、年齡、送檢醫(yī)院/科室（住

34、院/門診）、住院號/門診號、送檢/收驗日期等。2、細胞病理學診斷的表述（參見上項“細胞病理學診斷報告 表述的基本類型”）。3、必要時或條件允許時，可酌情就細胞病理學診斷及其相關(guān) 問題附加：某些建議（例如進行其他有關(guān)檢查、再做活檢、病理 科外病理學會診、密切隨查/隨訪等）；注釋/討論。4、經(jīng)過本病理科或/和科外病理會診的病例，可將各方的細胞 病理學診斷意見附于該例的細胞病理學診斷報告書中。（六）細胞病理學診斷報告書的書寫要求1、參照本章第一節(jié)（“常規(guī)活體組織病理學檢查常規(guī)”）中 “八（二）”項的有關(guān)規(guī)定。2、計算機圖文打印的細胞病理學診斷報告書提供的細胞學圖 象應具有典型（代表）性，放大倍數(shù)適當

35、。（七）細胞病理學診斷報告書的發(fā)送1、病理科自接受送檢標本至簽發(fā)細胞病理學診斷報告書的時 間，一般情況下為12個工作日。2、因某些原因（包括特殊染色、免疫組化染色、疑難會診 等）不能如期簽發(fā)細胞病理學診斷報告書時，應以口頭或書面告知 有關(guān)臨床醫(yī)師或患方，說明遲發(fā)報告書的原因。3、病理科應有專人發(fā)送細胞病理學診斷報告書。住院患者的 細胞病理學診斷報告書應發(fā)送至有關(guān)臨床科室；本院門診患者和外 院患者的細胞病理學診斷報告書的發(fā)送方法由各醫(yī)院病理科自行制定。4、細胞病理學診斷報告書的經(jīng)收人員（包括患方人員）必須 履行病理科規(guī)定的簽收手續(xù)。5、已由病理科發(fā)出的細胞病理學診斷報告書被遺失時，一般 不予補發(fā)

36、；必要時，經(jīng)病理科主任同意可以抄件形式補發(fā)。四、資料管理細胞病理學檢查的資料必須妥善管理，有關(guān)規(guī)定參見本章第四 節(jié)。第四節(jié) 病理學檢查資料的管理一、概 述（一）常規(guī)活檢、手術(shù)中快速活檢、細胞病理學檢查和尸檢等的文字 資料（含電子信息資料）、非文字資料（組織的石蠟包埋塊、切片 等）以及其他相關(guān)資料均為有價值的醫(yī)學資料，皆由受理病理學檢 查的病理科按照本規(guī)范規(guī)定的期限妥為保存。病理科必須設立病理 檔案資料室和制訂病理檔案資料管理制度（包括病理檢查資料的歸 檔、借用和歸還手續(xù)等），并有專人管理。應積極實行病理學檢查 資料的計算機管理。（二）各種病理學檢查的文字資料應裝訂成冊保存。（三）據(jù)以做出常規(guī)活

37、檢、快速活檢、尸檢病理學診斷的原始組 織學切片和查見腫瘤細胞或可疑腫瘤細胞的玻片必須妥善保存。未 查見惡性腫瘤細胞的玻片，于診斷報告書發(fā)出后保存2周。二、患者查詢病理學檢查資料的期限（一）門診患者為送檢后15年。（二）住院患者為送檢后30年。三、活檢、尸檢大體標本的保存期限（一）活檢：自簽發(fā)病理學診斷報告書之日起保存24周，具 體保存期限由各醫(yī)院自行規(guī)定。四、病理學檢查資料的借用（一）醫(yī)院必須制訂關(guān)于借用病理學檢查資料的辦法并嚴格實 施。（二）關(guān)于患方借用病理組織學切片，應注意：1、患方人員申請借用有關(guān)患者的活檢切片、尸檢切片時，應 按照醫(yī)院制定的有關(guān)規(guī)定辦理手續(xù)。2、申請借用切片的患方人員必

38、須：出示本人身份證等有效 證件并保留其復印件；填寫借片申請單并簽名；支付規(guī)定的借 片押金（待歸還切片時退還）。3、病理科據(jù)以作出診斷的原始切片一般不外借，通常借出 （或售出）相關(guān)病例的復制切片。復制切片借出（或售出）前，應確認該切片的病變與原切片相同或基本相同。4、患方借出的切片應妥善保存，必須在規(guī)定的期限內(nèi)歸還。 患方借出的切片若有破損、丟失等，應按規(guī)定支付賠償金，并承擔 相應責任。5、病理科因故不能向患方出借或出售有關(guān)切片時，由雙方協(xié) 商解決病理學會診問題。病理科可酌情允許患方邀請外院的病理醫(yī)師前來病理科閱片；有條件的單位可酌情進行遠程病理會診。（三）關(guān)于患方借用細胞病理學玻片1、一個病例

39、的同一次檢查有多張查見惡性腫瘤細胞的“陽性 片”或“可疑陽性片”時，可允許患方借用其中的一張。借用手續(xù) 參見上項（二）。2、一個病例僅有一張為查見惡性腫瘤細胞的“陽性片”或“可疑陽性片”時，該陽性片或可疑陽性片原則上不予外借。其會 診問題由雙方協(xié)商解決。病理科可酌情允許患方邀請外院的病理醫(yī) 師前來病理科閱片。（四）關(guān)于借用檢材組織的石蠟包埋塊1、活檢和尸檢檢材組織的石蠟包埋塊（簡稱蠟塊）是無法復 制的病理學檢查資料，屬于診斷病理學的重要基礎檔案，原則上不 外借。必要時，可由病理科向患方提供未經(jīng)染色的切片（通稱白 片）。2、患方外借病理切片會診時，受理會診的病理科若確實需要 有關(guān)病例病理檢材的蠟

40、塊，可由有關(guān)病理科雙方協(xié)商解決。第五節(jié)病理學會診一、具有一定規(guī)模的病理科應定期舉行科內(nèi)病理會診或讀片討 論會。二、積極推動建立地域性病理會診中心。三、加強臨床-病理會診。四、應由具有高級職稱的病理醫(yī)師接受病理科內(nèi)、外的病理學會診。五、接受外院的病理會診時，由會診的病理醫(yī)師簽發(fā)病理學 會診咨詢意見書，并在該意見書上寫明：“病理醫(yī)師個人會 診咨詢意見，僅供原病理診斷的病理醫(yī)師參考”。由作出原病理診 斷的病理醫(yī)師自行決定是否采納病理會診咨詢意見和采納的程度。 做出原診斷的病理科應將病理會診咨詢意見書的原件或其復印 件貼附于有關(guān)患者的病理檢查記錄單上，一并歸檔。六、加做相關(guān)技術(shù)檢測方能作出診斷的會診病

41、例，會診醫(yī)師應 在意見書中予以說明，并向患方進行適當解釋。七、對病理診斷時間較為長久病例的會診，應考慮到做出原診 斷時期的診斷病理學理論、技術(shù)水平、相應病變/疾病的定性診斷 標準和原診斷病理科當時的客觀條件。八、有條件的病理科可開展遠程病理會診。第六節(jié)病理科的基本設施一、病理科基本設施的指導原則（一）保證病理科完成基本工作任務。（二）保護病理工作人員免受污染。（三）保護環(huán)境免受污染。二、病理科的基本工作空間（一）病理科的常規(guī)工作需要在下列的各自獨立的房間內(nèi)進行：1、收發(fā)室（檢材的接收、登記，病理診斷報告書的發(fā)放，病 理資料查詢等）2、巨檢和取材室（檢材的肉眼檢查和切取組織塊，貯存取材后的 剩余

42、檢材）3、常規(guī)切片前的預處理室（組織塊的脫水、透明和浸蠟）4、制片室（石蠟切片/冷凍切片/細胞學涂片的制做和染 色）5、病理組織學診斷室6、細胞病理學診斷（酌情附設組織穿刺室）7、病理會診室8、病理檔案資料室9、大體標本制作室和陳列室10、儲藏室（二）病理標本巨檢和取材室1、便于清洗、消毒的屋頂、室壁和地面裝修2、室內(nèi)紫外線消毒設備3、室內(nèi)高效通風設施4、封閉式高效能通風柜廚（用于巨檢和取材，應便于清洗、消 毒，并安裝足夠照明和紫外線消毒設備）5、合于個人和環(huán)境防污染要求的上、下水系統(tǒng)（包括獨立的 污水排泄系統(tǒng)和污水處理池）6、流水沖洗裝置7、冷水和熱水供給系統(tǒng)8、標本儲存柜（安裝排風設備）9

43、、隔離服裝（消毒后使用）10、其他相關(guān)設備。（三）常規(guī)切片的預處理室和常規(guī)/快速制片室1、排放有毒物質(zhì)的室內(nèi)高效通風設施（用于組織塊和石蠟切 片的人工脫水流程）2、符合個人和環(huán)境防污染要求的上、下水系統(tǒng)（包括獨立的 污水排泄系統(tǒng)和污水處理池）3、室內(nèi)紫外線消毒設備4、封閉式高效能通風柜廚（用于人工脫水流程）5、實驗臺6、脫水設備：人工脫水器具或/和半自動或全封閉自動脫 水機7、組織塊石蠟包埋機8、石蠟切片機*9.恒溫冷凍切片機*10.石蠟快速切片機*9和10：兩項皆配備或配備一項#11. 一次性切片刀及其配套部件#12.切片刀和磨刀機# 11和12：兩項皆配備或配備一項13、冰箱14、恒溫箱1

44、5、烤箱16、有關(guān)試劑和試劑柜17、天平18、染色用器具19、普通光學顯微鏡（用于染色質(zhì)量控制）20、其他相關(guān)設備（四）特殊染色和免疫組織化學染色實驗室1、用于染色的實驗室環(huán)境設施和染色的常規(guī)設備參見上文:（三）常規(guī)切片的預處理室和制片室2、微波爐或其他抗原修復設備3、有關(guān)試劑和試劑柜4、其他相關(guān)設備（五）病理組織學診斷室和病理會診室1、雙筒顯微鏡（每名病理醫(yī)師配備一臺）*2、雙頭和/或多頭顯微鏡（用于共覽會診和培訓示教）*3、計算機和打印機（酌情連接局域網(wǎng)，用于病理學檢查資料的儲存和調(diào)閱）*4.顯微攝影設備，計算機圖像分析、電子圖像存儲和放映設備* 24：具有一定規(guī)模的病理科配置5、其他相關(guān)

45、設備（六）病理檔案資料室1、用于儲存切片、蠟塊和文字資料的柜具 2、計算機和打印機（酌情連接局域網(wǎng)，用于病理學檢查資料的儲存和調(diào)閱）3、其他相關(guān)設備（七）必要的專業(yè)參考書和基本的專業(yè)期刊（具有一定規(guī)模的 病理科應設立圖書資料室）（八）病理大體標本制作室和陳列室1、制作病理大體標本的工具2、其他相關(guān)設備（九）辦公室：必要的辦公設備（十）儲藏室：必要設施（十一）淋浴室：必備設施四、細胞病理學檢查工作的基本設施（一）腫物穿刺取材室：1、便于清洗、消毒的屋頂、室壁和地面裝修2、室內(nèi)紫外線消毒設備3、用于實施穿刺術(shù)的檢查床、椅4、穿刺用器械和器械柜5、穿刺用、急救用藥物和藥品柜6、其他相關(guān)設備（二）細胞

46、學涂片制片室：1、用于染色的實驗室環(huán)境設施和常規(guī)設備參見本節(jié)的三（三） 項：“常規(guī)切片的預處理室和常規(guī)/快速制片室”）2、可調(diào)速離心機3、自動細胞病理學檢查系統(tǒng)（具有一定規(guī)模的病理科，酌4、其他相關(guān)設備（三）細胞病理學診斷室：參見本節(jié)的三（五）項（病理組織學診 斷室和病理會診室）。第三章病理學基本技術(shù)規(guī)范第一節(jié)病理組織學診斷檢材的制備技術(shù)一、組織的固定凡需要進行病理組織學檢查的標本（器官或組織），于離 體（活體或尸體）后，應盡快置放（浸泡）于裝有足夠量固定液的 容器中固定。固定液量應為被固定標本體積的廠10倍。置放標本 的容器大小視標本和固定液的體積而定，應適當大一些。臨床科室 切取的標本置放

47、于容器中固定后，應盡快送交病理科繼續(xù)固定。未 能及時、充分固定的干涸或腐敗標本不能再進行固定和用于制做切 片。常規(guī)固定液為4%中性甲醛（10%中性福爾馬林），應預先多 量配制貯存，以備隨時使用。小標本的固定時間為46小時，大標本為18 24小時或更久。根據(jù)病理學特殊檢查（特殊染色和組織化學染色、免疫組織 化學染色和原位核酸分子雜交染色、電鏡觀察等）的需要，應選用 其他適宜的固定液進行固定參見后述的“（七）固定液的常用種類和制備”o器官、組織固定的基本方法另參見本章第四節(jié)（病理標本的肉眼檢查和組織學切片取材技術(shù)）1、食管、胃、腸、膽囊、膀胱等空腔器官：依規(guī)范方法剪開 后，按其自然狀態(tài)平鋪于硬紙板

48、上（重點暴露黏膜面或內(nèi)表面的病 變處），并用大頭針將標本邊緣處固定于紙板上，然后放入4%中 性甲醛中固定（黏膜面或內(nèi)表面朝向容器的液面，并覆蓋薄層脫脂 棉）o2、肝、脾：由器官背面，沿其長軸每間隔1. 5_2, ocm縱向平行剖開，切成數(shù)片。將每片肝或脾輕輕地平放于裝有4%中性甲醛 的容器中，容器底面襯以脫脂棉。應避免標本彎曲和相互間的疊 壓。3、肺葉：放入固定液中的肺葉漂浮于液面，需在肺表面覆蓋薄層脫脂棉。必要時從支氣管注入適量4%中性甲醛。4、腎：沿腎外緣中線朝腎門方向作一水平切面（深達于腎盞），再行固定。5、淋巴結(jié)：先用4%中性甲醛固定1小時后，再沿其長軸切成數(shù)片（厚23 mm）,繼續(xù)固

49、定。6、骨組織：先鋸成小片（若是長骨應作橫向鋸片），在4%中 性甲醛中固定24小時后，再進行脫鈣。7、微小組織或液體沉淀物:先用拭紙或濾紙妥為包裹（需用大頭針扎牢），然后放入專用小盒內(nèi)進行中性4%甲醛固定，以防 檢材遺失。8、凡進入固定程序的標本必須連帶其正確無誤的病理檢驗號（病理號）。多數(shù)固定液對人體有害，需要防護，必須在封閉的通風條件 下進行操作。（為組織塊的切取和固定：由較大標本切取用于制作切片的組 織塊（取材）時，應與標本的斷面平行，組織塊厚度一般為0.3 cm （不應0. 5 cm）,面積一般在11.5x1 1.5以內(nèi)。切取組織塊的形狀，在充分包括肉眼病變的前提下盡量規(guī)則些（例如方

50、形、矩形、三角形等）；由一個標本切取的多塊組織的形狀有所不 同，便于蠟塊與其相應切片的核對。固定組織塊的固定液量， 一般應為組織塊總體積的5一10倍以上。室內(nèi)常溫（25左右） 下的固定時間為廠24小時；低溫（4 ）下的固定時間應延長。 固定組織塊的容器要大一些。組織塊固定期間需要間斷地輕搖或 攪動固定液以利于固定液的滲入?；┏Ｓ霉潭ㄒ?、4%中性甲醛（10%中性福爾馬林）固定液甲醛(40%)100 ml無水磷酸氫二鈉6. 5g磷酸二氫鈉4. 0g蒸館水900ml2、乙醇-甲醛（酒精-福爾馬林，af）固定液甲醛(40%) 100ml95%乙醇 900ml說明一般組織塊經(jīng)乙醇-甲醛固定12小時后

51、，即可移入95%乙醇內(nèi)脫水。3、carnoy固定液無水乙醇60ml氯仿30ml冰醋酸10ml說明組織化學染色的常用固定液，組織經(jīng)carnoy液固定12 小時后，即可移入無水乙醇中脫水。4、zenker固定液升汞50g重珞酸鉀2. 5g硫酸鈉1.0g蒸館水（加至）100ml說明配制本液時，先將升汞溶于蒸館水中、加溫至4050c 溶解后，再加入重裕酸鉀，最后加入硫酸鈉，貯存待用。使用前加 入5ml冰醋酸，混合。組織塊需固定12一24小時。切片染色前，需 進行脫汞沉淀處理。5、bouin固定液飽和苦味酸水溶液（約1. 22% ） 75ml25ml甲醛(40%)說明本液臨用時配制。組織塊置于bouin

52、液固定1224小時 即可（小塊組織只需固定數(shù)小時）。經(jīng)bouin液固定的組織被苦味 酸染成黃色，可用水洗滌12小時后進入乙醇脫水（兼脫色）。不 必將組織中的黃色除凈（殘存于組織中的苦味酸無礙染色）6、過碘酸-賴氨酸-多聚甲醛固定液（plp）a液： 賴氨酸 1.827g蒸館水50ml0. lmol/l 磷酸鹽緩沖液（ph7. 4） 50mlb液：8%多聚甲醛水溶液100ml說明本液臨用時配制：取a液3份、b液1份，混合后，加入 過碘酸鈉，使液體終濃度為2%。組織塊在4下固定36_54小時。 本液對細胞結(jié)構(gòu)和抗原性保存較好。7、b5 （醋酸鈉-升汞-甲醛）固定液無水醋酸鈉1. 25g升汞6. 0g

53、蒸館水90ml說明將以上物質(zhì)混合、溶解，使用前加入甲醛loml本液多 用于固定淋巴組織。染色前應進行脫汞沉淀處理。如不加甲醛稱為b4固定液（蒸館水為100 ml ）。8、丙酮固定液冷丙酮（4°c ）固定液用于酶組織化學染色。細胞標本的免疫組化 染色也常用冷丙酮固定10分鐘。二、常規(guī)石蠟包埋組織切片（常規(guī)切片）的制備組織塊依序進行：水洗，脫水，透明，浸蠟，包 埋和切片。組織切片制備及其he染色過程中使用的乙醇、丙酮、二甲 苯、石蠟等為易燃、有毒物，必須專人管理，2ni以內(nèi)不得有明 火，局部環(huán)境應有良好的通風和消防設施。常規(guī)切片的手工操作（步驟次序和各步驟的持續(xù)時間）1、水洗：用流水沖洗

54、已經(jīng)固定的組織塊30mino 2、脫水（常溫下）（1）乙醇-甲醛（af）液固定 60"120min(2)80%乙醇(3)95%乙醇i(4) 95% 乙醇 ii（5）無水乙醇i（6）無水乙醇ii60 120min60 120min60 120min60 120min60 120min(7)無水乙醇iii60min注意事項未經(jīng)充分固定的組織不得進入脫水程序。用于脫 水的試劑容積應為組織塊總體積的510倍以上。自低濃度乙醇 向高濃度乙醇逐級移進脫水。脫水試劑應及時過濾、更換（ 500ml乙醇可用于500個組織塊脫水；加入硫酸銅的無水乙醇變 藍時，提示需要更換）。較大組織塊的脫水時間長于較小

55、者，應 將兩者分開進行脫水。組織置于無水乙醇內(nèi)的時間不宜過長（以免硬化）。丙酮脫水性能強，會使組織塊過縮、硬脆，不宜用以 替代無水乙錄3、透明（1 ）二甲苯 i20min（2）二甲苯 ii20min（3）二甲苯iii20min注意事項二甲苯的容積應為組織塊總體積的510倍以上。 組織塊在二甲苯中透明的時間不宜過長（以防組織硬、脆），并 依不同種類組織及其大小而異；組織呈現(xiàn)棕黃或暗紅色透明即可。 二甲苯應及時過濾、更換。組織經(jīng)二甲苯適度處理后不顯透明 時，常提示該組織的固定或脫水不充分，應查找原因并妥善處理。4、浸蠟(1 )石蠟 i ( 45-50°c )60min(2)石蠟 ii ( 56-58°c )60min(3)石蠟iii ( 56-58°c )60min注意事項熔化石蠟必須有專人負責，必須在熔蠟箱內(nèi)或水浴 中（7（rc）進行，不得用明火加溫。熔蠟的容積應為組織塊總體 積的510倍以上。組織塊經(jīng)二甲苯適度透明后方可轉(zhuǎn)入浸蠟過 程，應盡可能減少將透明后組織塊表面的二甲苯帶入熔蠟中。浸