纖維素酶純化方法研究及原生質(zhì)體制備

1、纖維素酶純化方法研究及原生質(zhì)體制備以綠色木霉為材料，經(jīng)固體發(fā)酵得纖維索酶，經(jīng)過!種處理，得到純度不同的纖維索酶，用于分離番 茄幼嫩葉片的原牛質(zhì)體，旨在探討植物細(xì)胞脫壁酶的制備方法和應(yīng)用效果。!材料與方法! ”!材料綠色木霉：沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)生物技術(shù)學(xué)院生物工程教研室保存菌種。超濾裝置：中空纖維膜組件，天津膜天膜工程技術(shù)有限公司產(chǎn)品。!”#方法!”護(hù)洛種酶活力的測(cè)定。纖維素酶活力（“#$）:參照%&，（）*+,.，蔣傳葵/01法,2, 3%3酶活力：取適當(dāng)稀釋濃度的酶液456 7*,加含4568!3%3、9:值654的檸檬酸緩沖液856 7*, 64”保溫;4 7<以下的測(cè)定步驟同”#

2、=測(cè)定法。38酶活力：取適當(dāng)稀釋濃度的酶液456 7*,加入856 7*, 9:值 654的緩沖液，加脫脂棉64 7>, ?6”保溫2?,以下的測(cè)定 步驟同“#=測(cè)定法。！“侖j萄糖背酶,;.：用456 a水楊背作底 物（配制在9:值?56,濃度4546 7b*cd檸檬酸緩沖液）,64“ 保溫;4 7<采用/01法測(cè)定還原糖的生成量，酶活單位 同濾紙酶。半纖維索酶活力,?.：取適當(dāng)稀釋濃度的酶液456 7*,加含456!半纖維素的醋酸緩沖液（9:值?5?） , ?4”保 溫86 7< e6a乙醇終止反應(yīng)，采用地衣酚銅法測(cè)定戊糖牛成量。在上述條件下，8生成8#7b*木糖所需酶量

3、定義為8個(gè)活力單位。果膠酶活力,6.： /01法測(cè)半乳糖醛酸的生成 量。8|1|底物產(chǎn)k*s7b*半乳糖醛酸所需的酶量定義為8 個(gè)卿活單位。蛋白卿活力：”b*v，f酚顯色法,g, 8分解酪蛋白 產(chǎn)生8$7b*酪氨酸的酶量定義為8個(gè)酶活單位。核糖核酸 酶活力：取8 7*酶液，加入8 7*濃度45ha核糖核酸，；1“ 保溫84 7<味口|卄亠暄篤膺fl閱侏眾魁!（« 早閤煦隸瞿昌畏衽趴閔劃愀慫艮口閑畋紹 ss檢碳芽卻p罔靚疋震列漫口證脳懷邯 溼奩e彖昌卻 s眸尖刃'豐 jc 蔣纜耕缺魴覦冊(cè)劃錄刊斂習(xí)馥森口機(jī)鵝 斂暫色q謝檄二裂us目鍥鐸戈姣聚儀乞（黜鵝鬱劈 纏口（10）-颱

4、 洼吞罷右委瓦笏氛讖顯遨口纟巢口 鐡 娼暴己磊 徳口爭(zhēng)宅別畚 鎚治 那豈箋 釜 '第口 釈 蕙拉鈕 蟻口鸛口丁 皺紗桓變卩非 製 瞿 舗 樓口 咚仝 駡嶋價(jià)噓口總洩尷 賠 柢獨(dú) 勵(lì)恢 口獨(dú)型世繕口s!戡哉 皴斐暦頻到每 濺館 蹩 垓 苜鄕 費(fèi)圻沈営因鑒 絵口薛讀4邑鯊 理吾 練20日s 編噓潮口 fflm 飽睡 會(huì)口椰鋼閱釣 羿場(chǎng)竿瞰巻證猱丑省口另口樸f無迖寇裕銭召 裁晦晦剤庾昊歷 雖理 趣歪" 盤邑田i菁口 侵藥敘詮劉雲(yún)琥扌曼廄 榛罟口事倨目 坤 謹(jǐn)睡坤也涇凹徹少粧姻迸口依或 俑綬扌景口總梯ma禺肪號(hào)醫(yī)瀾鷲熊懸 釵 宅肱 振 口 陝厲 舍鰥旄瞿含借弩愛來型口 邑鑄歿 鎳 欄

5、攝棹嫌殆豈 事雪 口秀儺 扌卜口 口 。1俺落蠱 燼窖篦 嘗嘆口遂咨袋皺3型紐 土于星k鉗腓口対口 懊口 <寧訂連！ 堀 烤伏 口愛三縈晉 怡林遴料 暉驛篩口砌 槎 m 尋枱駁昌 i秀鋌 色刊頊弐口 洽習(xí)櫚il：d 兀僉;漲長(zhǎng)口 浜傲蒙眾契§ m 鄭洗垂扌劃塾滾-及入 =s 口睪哺鞭機(jī)到 攻審戀口繃?yán)纫噩攛堵制口 鉄烈舍 » 碩 鎮(zhèn)雪旨口靜+瞞 丿出用愜 釜嚳 顯嘗 曬 戶鴨口桶丿i口 na吾懦囁緬聖城鈴多八曹*兄 » 蟻舍他柑稠華口曬釜戛金權(quán)郊噢菱徐飾勰蟄發(fā)口 倍昌煦翌錄吸里e循召櫻雪刺釜l 尿吳©己毀ft!鱗右ghz賭 言癸假口 戲柳昌口 颱f

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7、胤甌妥滌竿i志騰軟召豈製瘞口繃證昱老 猗式盆縱口泊忘穀丨機(jī)譽(yù)稠口券峰炫黏鉀罷魏 ®t潦覘 拜磊目經(jīng)稼翹榜鎗按 曇蝙口罄飯暦亓口浸樓殼 衆(zhòng)忖拝醺僉裨剣門多萩衲坐息 艮口 蠱碉 r皺漏 炎坦ae夠縈嗚逾蕓秧僕弱扌尋掖昌黒聞桿型癇聆多豈 玻鄲佰口縊貳燙口 d s 豈汝翹駁 縱胳-膝採(cǎi)口蟲口 媽錨口、込簣羅羋愁誠(chéng)勉楠陵俄口 蔽陋縣爰錄 w 罷鎮(zhèn)糧三連贍asnw 并謔 更雲(yún) 號(hào)猊口刃口 丿叢鉞仕）鋼欒綢鍰猊窣美図民彗超巷翌鱗證恫挪t傍荽?？促?zèng)磁偌淵更 繪蔭豈盤密且瑪b玖）鼓蟻0腫頂士 艮壽契 淫霾凰空駅味傑絢妾驗(yàn)覽駿如 張甫型snunnffida邊蒔 謹(jǐn)逢賭（俛：克 昜排口淪亮屣口離樓鞅菠 諛

8、釵絶雪科口鰭?cǎi)槆?w豈口 略豈市跪老緡燹蟄雍穌喂黒口 豈幅俞渤報(bào)宅契卻凰姑殷箋莊齋任洸悲韓林 口 侷權(quán)頁(yè)翌帔 痢麥被魁ii炳口鉢 鷄甥口雹口 口 糕口 種涪翌宰瓜琥列宛醋紋已辿鼎紛轅閩旻旨言a妹呂口3|開均吶討畋豎口焙口長(zhǎng)土步 鉛塩 剖濟(jì)駕皺虱槌嶷口 雪戦 爼寶承刪口 « 咨笑 用型圻 gaa u© 口口豈 -a 賤紋殲口鐵型膜 罵o勻低 椀冨 倘嬖鵝煩宓堊號(hào) 馭薩笞馥溉空瀆瀕研鵰昱萄®早測(cè)昱婉阻滾俳田綸屈嘉§ 3 5!篇 緩匏口*a鮭舉口幼蒯撕a, u© 昜 蔽噸槁賽飭 開轅渙口矣怵倉(cāng)昱西鷲畛毀舍山就口 淺景口口1羽弓君俐粽詮橄 書堇遠(yuǎn)搖歲

9、光嘩嘛猱妾禪口哉 氣園製口振貽慢 鄒畏帶媾搭窣曉昌策口嶺濮"組棗窪麟誓口 蔽筲 含口洪栃口 頊 35 /駿 耆算纜h敦ix 鏈刃仕沏坤械 口曰覆躍 魅口 餚鑿翟m襪嘩哲口毫口 劊縫汙釜岐硏口榕櫥備扔杲舔滂螺 凹寮口幾哉刑口潑 響鋅 it 潔 b瀝嗆談歆借口 契理利 舍t(yī) 最櫃 鮒口咬口 口毬蔬口請(qǐng)彖口卜貿(mào)裘m萬(wàn)荻劄艮鍛飼泗裕盛圧s器來囤町歌邑翌塔場(chǎng)e召槿竺 袂屍沮歇 痔鋼恁規(guī) 鑽口 證衆(zhòng)嘮磊口寵罰崑 嚷曇 鬥豈曇本 蟻柱禮口 蜀皆盅 型 w ga奠豈濤昜zl鋒口堯口 m9o倏煉口 宮蕭園 惱保 淨(jìng)斜魄燼錐（1網(wǎng)浚qy奚軌 雲(yún)粉2日彗枇藥哼尋 穡口 昌能淚縣劃領(lǐng) 総朋鄰 哈嗽 語(yǔ)鮒口咬

10、口喟炭!ae u© 昌襲度愿也冀曇g 同糧畏契 容覆雪番瘋蓋乙亥沏稔將型口 湃口別口 罷猝櫬變潯時(shí)逾淪韻匕§ 合汙 最乙h癒炎i昜螂歴竿口己昴口型勒昊口 專淞i口 /eu錨&國(guó)和 茨錨潔i u©舀舉邑餘口 據(jù)爍此 o謐 蟲睪渝 靈或翌 si沱刀開開打也湃殖m糜殿紫加繪.朧®wh夷妳s逼 貿(mào)爛體i臾 燦糕宅雪口機(jī)警痢口睞懸僅口瘻豈祓尋槽口 契口揑翌桿笏口邊複壟隕晟豈凰駅 魚觥契粛棵燙視罐 語(yǔ) 魅鰭纏（） 駕笏 口 佩囪磊忙帔覘躲溫（id 叩 炎文鍰樸j甌雲(yún)畝 裂妄決 口 口了口昱駕密赳翻褪恵銘煩得騙甘韓虬昏紐囑 紙 銷族辺變駆疋 i啓窪 搏 嗆榊逢

11、鴉碧3 漑幸榆擇錢 冼諺嗖躺役喬大 靈尉蟲0刮魁口 揪 頤溥鄂®曉口 a wa疼晝役磊 鑒鍬口 黒參嚨邑奔扃遠(yuǎn)屋綜望苕 昌昌樗岐蒼毀陪» 效 離 三吁懺象r梨勻藥型媒昭笏卻彖登犁觴資亙墨弄口藝麟力n 一 豕強(qiáng)犁殍劄 奩梔汶椅餘荔勅躥餵碘檣巳晝 爛 宜口囑 書呼口 碩醯 磊犯住即l © ua 茨 鍍昌卻叩錮蠱視漆瑣長(zhǎng)礫 鋭鉛涂滝尋己爺秤型呻替漓備雪 炎 sw窶攀契d世峭舎竇曇盎 製瘀驟 歪契k 聖劭曼 玄 美巻遇口 決 i馬口 覦疼 釘:麒 昱妄里倨欲倫兒m w 翌瞿這 口 敘尅口 麼篦 型豔誦宰 樓餌 簣威姑蓋髓澳有廂dz膵坷*衿v 口 満翌 拾 曰cje炫嚏昱x男口 烈口 擁 鎮(zhèn)老口眾摹 a *聶£謊慕口 s nu宴口9月次至細(xì)口 鶴 惦鳩紀(jì) 力咗縫 美昊朋'(u“舀豈 禍勿軟 卩吟 馬0 突d渉卩占口鳴劃哲翌幅口腫鼎;誓統(tǒng)錦刃言鄲 莘口 g 迴養(yǎng)r 口二口宅馬h h纟腓 開傳.m