(完整版)生物選修一精華總結版

1、、微生物 1.1 成分 培養(yǎng)基的化學成分包括 水、無機鹽、碳源、氮源、生長因子 1.1.1 碳源：能為微生物的代謝提供碳元素的物質。如 CO、NaHCO 等無機碳源（自養(yǎng)）； 糖類、石油、生粉餅等有機碳源。異養(yǎng)微生物只能利用有機碳源。 單質碳不能作為碳 源。 1.1.2 氮源：能為微生物的代謝提供氮元素的物質。如 N2、NH、NO-、NH+ （無機氮源）蛋 白質、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有機氮源）等。 只有固氮微生物才能利用 2。 1.1.3 培養(yǎng)基還要滿足微生物生長對 pH 特殊營養(yǎng)物質以及氧氣的要求。 例如，培養(yǎng)乳酸桿 菌時需要在培養(yǎng)基中添加 維生素，培養(yǎng)霉菌時須將培養(yǎng)基的 pH 調

2、至酸性，培養(yǎng)細菌是 需要將 pH調至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧型微生物 是則需要提供 無氧的條件 1.2 分類 1.2.1 按照物理性質 可分為液體培養(yǎng)基、半固體培養(yǎng)基和 固體培養(yǎng)基 1.2.2 按照用途 可將培養(yǎng)基分為選擇培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是指在培養(yǎng)基 中加入某種化學物質，以抑制不需要的微生物生長， 促進所需要的微生物的生長。鑒 別培養(yǎng)基是根據(jù)微生物的特點，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學藥品配制而成的， 用以鑒別不同類別的微生物。（如加入青霉素分離得到酵母菌和霉菌，利用伊紅 -美 藍培養(yǎng)基鑒別大腸桿菌） 1.2.3 人工合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基 1.3 制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 1.3.

3、1 配方 牛肉膏、蛋白胨、NaCl、瓊脂 1.3.2 操作 計算，稱量，融化，滅菌，倒平板 稱量時，牛肉膏蛋白胨都易吸潮， 稱量要迅速融化加瓊脂時要不斷攪拌， 防止脂 糊底而導致燒杯破裂滅菌時，裝有培養(yǎng)基的錐形瓶要用高壓蒸汽滅菌法，培養(yǎng)皿 要用干熱滅菌法平板冷凝后需要倒置， ,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地揮發(fā)， 防止皿蓋上冷凝的水珠落入培養(yǎng)基，造成污染。（微生物培養(yǎng)的時候也需要倒置， 另 一個原因：由于重力的作用使培養(yǎng)基表面及次層能富集微生物生長所需的營養(yǎng)物質， 利于微生物生長。） 2 滅菌與消毒 2.1 消毒 較為溫和的理化方法，僅殺死物體表面或內部的部分有害微生物。 包括：煮沸消毒法，巴

4、氏消毒法（對于一些不耐高溫的液體）還有 化學藥劑消毒（如酒精、 氯氣、石炭酸等）、 紫外線消毒法 2.2 強烈理化因素，殺死物體內外 所有微生物，包括芽孢和孢子。 包括：灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。 2.3 滅菌 接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法；（防止 x 的微生物污染培養(yǎng)基） 1. 培養(yǎng)基 確定培養(yǎng)基制作是否合格的方法 將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫 1 2天，無菌落生長，說明培養(yǎng)基的制備 是成功的，否則需要重新制備。 玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法，所用器械是干熱滅菌箱 培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法，所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋 3 純化微生物的接種方法 3.1 平板劃

5、線法（適用好氧菌）和 稀釋涂布平板法 （適用好氧菌以及兼性厭氧菌）。 3.2 平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作。 將聚集的菌種逐步稀 釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后培養(yǎng)，可以分離到由一個細胞繁殖而來的肉眼可 見的子細胞群體，這就是菌落。 3.2.1 操作的第一步以、每次劃線之前、劃線操作結束時均需要灼燒接種環(huán)的目的 操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物； 每次劃 線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次 _ 時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每 次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，

6、最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。 劃線結束 后灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種， 避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。 3.2.3 在灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后再進行劃線，以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種 3.2.4 最后一區(qū)不能與第一區(qū)相連，劃線力度要適中。 3.3 稀釋涂布平板法是將菌液進行一系列的梯度稀釋， 然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到 瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。分為系列 稀釋操作和涂布平板操作兩步。 3.4 用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的 目的是：使聚集在一起的微生物分散成單個細 胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落，以便于純化菌種 。 4 統(tǒng)計菌落數(shù)目 4.1 測定

7、微生物數(shù)量的常用方法有 稀釋涂布平板法 和顯微鏡直接計數(shù)。 4.2 釋涂布平板法統(tǒng)計（可以區(qū)分活死菌） 4.2.1 為了保證結果準確， 一般設置 32 個平板，選擇菌落數(shù)在 30300 的平板進行計數(shù)， 并取平均值。 4.2.2 每克樣品中的菌落數(shù) =（C/V） *M 其中，C 代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)， V 代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（ ml）, M 代表稀釋倍數(shù) 4.3 顯微鏡直接計數(shù)法統(tǒng)計（不能區(qū)分活死菌） 利用特定的細菌計數(shù)板或者血細胞計數(shù)板 2 土壤中分解尿素與纖維素的細菌的分離 2.1 原理 2.1.1 細菌之所以能分解尿素 CO（NH2）2，是因為他們能合成

8、脲酶，將尿素分解為 CO,NH3 2.1.2 土壤中的細菌之所以能分解纖維素，是因為他們能合成 纖維素酶，纖維素酶是一種復 合酶，即 C 酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成 纖維二糖，第三種酶 菌種保存 斜面保藏 4 C 甘油管藏 20 C 將纖維二糖分解成 葡萄糖。（棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物） 2.2 選擇培養(yǎng)基以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基，富含纖維素的選擇培養(yǎng)基 2.3 鑒別方法 2.3.1 在培養(yǎng)基中加入 酚紅指示劑，分解產(chǎn)生氨氣， 指示劑變紅 2.3.2 在培養(yǎng)基中在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入 剛果紅，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成 紅色復合物。當纖維素被纖維素

9、酶分解后， 剛果紅-纖維素的復合物就無法形成， 培 養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈 。 二、發(fā)酵 1. 果酒、果醋 1.1 發(fā)酵：通過微生物技術的培養(yǎng)來生產(chǎn)大量代謝產(chǎn)物的過程。 1.1.1 有氧發(fā)酵：醋酸發(fā)酵 谷氨酸發(fā)酵 無氧發(fā)酵：酒精發(fā)酵 乳酸發(fā)酵 1.2 酵母菌是兼性厭氧菌型微生物真菌 酵母菌的生殖方式：出芽生殖（主要）分裂生殖孢子生殖 1.2.1 在有氧條件下，酵母菌進行有氧呼吸，大量繁殖。 C6H2Q+ 6QT 6CQ+ 6WO 在無氧條件下，酵母菌能進行酒精發(fā)酵。 C6H2QT2C2H2O 卅 2CO 1.2.2 酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在 18 C -25 C 1.2.3

10、 在葡萄酒自然發(fā)酵的過程中 ，起主要作用的是附著在葡萄皮表面的野生型酵母菌 .在 發(fā)酵過程中，隨著酒精濃度的提高，紅葡萄皮的色素也進入發(fā)酵液 ，使葡萄酒呈現(xiàn)深紅 色.在缺氧、呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長繁殖， 而絕大多數(shù)其他微生物都因無 法適應這一環(huán)境而受到制約。 1.3 醋酸菌是單細胞細菌（原核生物），代謝類型是異養(yǎng)需氧型，生殖方式為二分裂 1.3.1 當氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當缺少糖源時，醋酸菌 將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?2C2HO* 4QTCHCOOK6H2O 1.3.2 控制發(fā)酵條件的作用醋酸菌對氧氣的含量特別敏感，當進行深層發(fā)酵時，即使只是

11、 短時間中斷通入氧氣，也會引起醋酸菌死亡。醋酸菌最適生長溫度為 3035 C , 控制好發(fā)酵溫度，使發(fā)酵時間縮短，又減少雜菌污染的機會。 1.4 實驗流程：挑選葡萄T沖洗T榨汁T酒精發(fā)酵T果酒（T醋酸發(fā)酵T果醋） 新鮮葡萄除去枝梗，沖洗以除去灰塵為目的， 防止洗去野生酵母菌。 1.2 酒精檢驗:重鉻酸鉀。在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精反應呈現(xiàn) 灰綠色。先在試管中加 入發(fā)酵液 2m L,再滴入物質的量濃度為 3mol/L 的 fSQ3 滴，振蕩混勻，最 后滴加常溫下飽和的重鉻酸鉀溶液 3 滴，振蕩試管，觀察顏色 1.5 實驗裝置 1.5.1 充氣口是在醋酸發(fā)酵時連接充氣泵進行充氣用的；排氣口 是在

12、酒精發(fā)酵時用來排出二氧化碳的； 出料口是用來取樣 的。排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身相連接, 其 目的是防止空氣中微生物的污染 。開口向下的目的是有利 于二氧化碳的排出。使用該裝置制酒時，應該關閉充氣口； 制醋時，應該充氣口連接氣泵，輸入氧 /空氣。 1.5.2 葡萄汁裝入發(fā)酵瓶后要留有 1/3 的空間，目的時先讓酵母菌 耗盡氧氣后再進行酒精發(fā)酵，防止發(fā)酵過程中產(chǎn)生 CQ 造成發(fā)酵液溢出。 2. 腐乳 2.1 參與微生物 多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是 毛 霉。毛霉是一種絲狀真菌。代謝類型是 異養(yǎng)需氧型。生殖方式是孢子生殖。 2.2 原理 2.

13、2.1 毛霉等微生物產(chǎn)生的 蛋白酶 能將豆腐中的蛋白質分解成小分子的肽和氨基酸： 脂肪酶 可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。 2.2.2 毛霉的生長：條件：將豆腐塊平放在籠屜內，將籠屜中的控制在 1518C ,并保持一 定的濕度。（溫度過低不利于毛霉生長，溫度高時菌絲易老化死亡，影響腐乳品質） 2.2.3 來源：1.來自空氣中的毛霉孢子 2.直接接種優(yōu)良毛霉菌種 2.3 實驗流程：讓豆腐上長出毛霉T加鹽腌制T加鹵湯裝瓶T密封腌制 2.4 實驗材料 2.4.1 豆腐的含水量為 70%左右，水分過多則腐乳不易成形；過低，不利于毛霉生長。 2.4.2 加鹽腌制：將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地擺放在瓶中，同時

14、逐層加鹽，隨著層數(shù)的 加高而增加鹽量，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。 2.4.3 用鹽腌制時，注意控制鹽的用量（毛胚：食鹽= 5: 1）:鹽的濃度過低，不足以抑制 微生物的生長，可能導致豆腐腐敗變質；鹽的濃度過高會影響腐乳的口味 2.4.4 食鹽的作用：1.抑制微生物的生長，避免腐敗變質 2.析出水分，是豆腐變硬，在后期 制作過程中不易酥爛 3.調味作用，給腐乳以必要的咸味 4.浸提毛酶菌絲上的蛋白酶。 2.4.5 鹵湯：鹵湯、香辛料T調味、殺菌防腐。鹵湯中酒的含量一般控制在 12%左右。 2.4.6 酒的作用：1.防止雜菌污染 2.與有機酸結合形成 酯，賦予腐乳風味 3.酒精含量越高， 對蛋白

15、酶的抑制作用也越大 ，使腐乳成熟期延長；酒精含量過低，蛋白酶的活性高， 加快蛋白質的水解，雜菌繁殖快，豆腐易腐敗，難以成塊。 2.5 防止雜菌污染：用來腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干凈后要用沸水消毒。裝瓶時，操作 要迅速小心。整齊地擺放好豆腐、加入鹵湯后，要用膠條將瓶口密封。封瓶時，最好將 瓶口通過酒精燈的火焰，防止瓶口被污染。進行有氧呼吸快速繁殖 3. 泡菜 3.1 參與微生物及原理 3.1.1 制作泡菜所用微生物是 乳酸菌，其代謝類型是異養(yǎng)厭氧型。在無氧條件下，降糖分 酶 解為乳酸。分裂方式是二分裂。反應式為： GHiQ 2GHbC3+能量。 3.1.2 含抗生素牛奶不能生產(chǎn)酸奶的原因是抗生素殺

16、死乳酸菌。 常見的乳酸菌有乳酸鏈球菌 和乳酸桿菌。乳酸桿菌常用于生產(chǎn)酸奶。 3.1.3 發(fā)酵溫度在 18-20 C ,過高其他雜菌活動能力高，過低不利于乳酸菌代謝。 3.2 實驗材料 3.2.1 選用新鮮的蔬菜，若放置時間過長，蔬菜中的亞硝 _ 清水與鹽的質量比是 4:1。鹽水要煮沸后冷卻，煮沸的作用除去水中的氧氣殺滅水 中的其他微生物。 3.2.2 泡菜壇壇蓋沿的水槽內注滿水， 保證乳酸菌發(fā)酵所需要的無氧環(huán)境。 而且，在發(fā)酵過 程中要經(jīng)常補水。 3.3 發(fā)酵中的各類曲線 a. 有氧氣，乳酸菌活動受到抑制 b. 乳酸菌含量達到最大，抑制其他菌 種活性 c. 乳酸持續(xù)累積，抑制自身活性 一般在腌

17、制 10 天后亞硝酸鹽含量開 始降低，故在 10 天之后食用最好 3.4 測定亞硝酸鹽含量 在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生 重氮化反應后，與 N-1-萘基乙二胺 鹽酸鹽結合形成玫瑰紅色染料，與已知濃度的標準顯色液目測比較 （比色法），估篡泡 菜中亞硝酸鹽含量。 三、植物組織培養(yǎng) 3.1 植物組織培養(yǎng)技術 3.1.1 原理植物細胞的全能性。具有某種生物全套遺傳信息的任何一個活細胞， 都具有發(fā)育 成完整個體的能力，即每個生物細胞都具有全能性。但在生物體的生長發(fā)育過程中并 不表現(xiàn)出來，這是因為在特定的時間和空間條件下，通過 基因的選擇性表達，構成不 同組織和器官。細胞分化使細胞生物體中

18、pH 持續(xù)下降 細胞結構和功能趨向 專門化，有利于提高各 種生理功能的效率。 3.1.2 基本過程 外植體T愈傷組織T根、芽T植物體 離體的植物組織或細胞， 在培養(yǎng)了一段時間以后， 會通過細胞分裂，形成愈傷組織， 愈傷組織的細胞排列疏松而無規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細胞。 由高度分化的植物組織或細胞產(chǎn)生愈傷組織的過程， 稱為植物細胞的 脫分化，或者叫 做去分化。脫分化產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進行培養(yǎng)，又可以重新分化成根或芽等器官， 這個過程叫做 再分化。 3.1.3 應用 實現(xiàn)優(yōu)良品種的快速繁殖；培育脫毒作物；制作人工種子；培育作物新品種。 _ 3.2 菊花的植物組織培養(yǎng) 3.2.1

19、 材料 菊花組織培養(yǎng)一般選擇 未開花植物的莖上部新萌生的側枝 作材料。一般來說，容易 進行無性繁殖的植物容易進行組織培養(yǎng)。 選取生長旺盛嫩枝進行組培的是嫩枝生理狀 態(tài)好，容易誘導脫分化和再分化。 3.2.2 培養(yǎng)條件 一般將 pH 控制在 5.8 左右，溫度控制在 1822C，并且每日用日光燈照射 12h。 Q Q Q H * 3.2.3 培養(yǎng)基 3.2.3.1 MS 固體培養(yǎng)基：大量元素、微量元素和有機物（包括細胞分裂素與生長素）。（在 菊花組織培養(yǎng)中，可以不添加植物激素，原因是菊花莖段組織培養(yǎng)比較容易）。 3.2.3.2 微生物培養(yǎng)基以有機營養(yǎng)為主， MS 培養(yǎng)基則需提供大量無機營養(yǎng)。 3

20、.2.4 外植體的消毒 3.2.4.1 外植體：用于離體培養(yǎng)的植物器官或組織片段。 3.242 菊花莖段用流水沖洗后可加少許洗衣粉，用軟刷輕輕刷洗，刷洗后在流水下沖洗 20min左右。用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入體積分數(shù)為 70%的酒精中 搖動 23 次，持續(xù) 67s,立即將外植體取出，在 無菌水中清洗。取出后仍用無菌 吸水紙吸干外植體表面水分，放入質量分數(shù)為 0.1%的氯化汞溶液 中 12min。取出 后，在無菌水中至少清洗 3 次，漂洗消毒液。 3.2.4.3 對外植體進行表面消毒時，就要考慮藥劑的消毒效果，又要考慮植物的而 _ 接種：接種過程中插入外植體時形態(tài)學上端朝上， 每個

21、錐形瓶接種 78 個外植體。 外植體接種與細菌接種相似，操作步驟相同，而且都要求無菌操作。 3.244 外植體在培養(yǎng)過程中可能會被污染， 原因有外植體消毒不徹底； 培養(yǎng)基滅菌不徹底； 接種中被雜菌污染；錐形瓶密封性差等。 3.2.5 移植 栽前應先打開培養(yǎng)瓶的封口膜，讓其在培養(yǎng)間生長幾日，然后用流水清洗根部培養(yǎng) 基。然后先將幼苗移植到消過毒的蛭石或珍珠巖等環(huán)境中生活一段時間，進行 壯苗。 最后進行露天栽培 3.2 月季的花藥培養(yǎng) 3.2.1 材料 完全未開放的花蕾，處于 單核靠邊期 的花粉。細胞核由中央移向細胞一側的時 期，花藥培養(yǎng)成功率最高 3.2.2 鏡檢確定花粉發(fā)育時期的最常用的方法是

22、醋酸洋紅法。但是，某些植物的花粉細胞 核不易著色，需采用 焙花青-鉻磯法，這種方法能將花粉細胞核染成藍黑色 3.2.3 誘導產(chǎn)生單倍體植株 產(chǎn)生花粉植株的兩種途徑通過花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株（即單倍體植株）一般有兩種 途徑，一種是花粉通過胚狀體階段發(fā)育為植物， 另一種是花粉在誘導培養(yǎng)基上先形成 愈傷組織,再將其誘導分化成植株。這兩種途徑之間并沒有絕對的界限， 主要取決于 培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比。 3.2.4 培養(yǎng)條件 培養(yǎng)溫度控制在 25 C左右,不需要光照.幼小植株形成后才需要光照 .一般經(jīng)過 20 30 天培養(yǎng)后，會發(fā)現(xiàn)花藥開裂，長出愈傷組織或形成胚狀體。將愈傷組織及時轉移到 分化培養(yǎng)

23、基上，以便進一步分化出再生植株。如果花藥開裂釋放出胚狀體， 則一個花 藥內就會產(chǎn)生大量幼小植株，必須在花藥開裂后盡快將幼小植株分開， 分別移植到新 的培養(yǎng)基上，否則這些植株將很難分開。 3.2.5 比較根尖分生組織和愈傷組織的異同 組織類型 細胞來源 細胞形態(tài) 細胞結構 細胞排列 細胞去向 根尖 分生組織 受精卵 正方形 無液泡 緊密 分化成多種 細胞組織 愈傷組織 高度分化細胞 無定形 高度液泡化 疏松 再分化成新個體 相同點 都通過有絲分裂進行細胞增殖 326 生長素和細胞分裂素等植物激素使用的先后順序、用量的比例影響 、植物有效成分的提取 3.1 植物芳香油的提取 3.1.1 芳香油的提

24、取方法：蒸餾、壓榨、萃取。 3.1.2 芳香油的性質：揮發(fā)性強，成分復雜，以萜類化合物及其衍生物為主。 3.1.3 水蒸氣蒸餾法 3.1.3.1 原理：水蒸汽可將揮發(fā)性較強的芳香油攜帶出來形成油水混合物， 冷卻后水油分層。 3.1.3.2 方法：水中蒸餾：原料放在沸水中加熱蒸餾。 水上蒸餾：原料隔放在沸水上加熱蒸餾。 水汽蒸餾：利用外來高溫水蒸氣加熱蒸餾。 3.1.3.3 不足：有些原料不適宜于水中蒸餾 ,如柑橘、檸檬等易焦糊，有效成分容易水解。 3.1.3.4 蒸餾裝置 鐵架臺、酒精燈、石棉網(wǎng)、蒸餾瓶、橡膠塞、蒸 餾頭、溫度計、直型冷凝管、接液管、錐形瓶， 橡皮管。所有儀器必須事先干燥， 保

25、證無水安裝 儀器一般都按照自下而上、從左到右的順序。拆 卸儀器的順序與安裝時相反。具體安裝順序和方 法如下。 (1) 固定熱源酒精燈。 (2) 固定蒸餾瓶，并且保持蒸餾瓶軸心與鐵架臺的水平面垂直。 (3) 安裝蒸餾頭，使蒸餾頭的橫截面與鐵架臺平行。 (4) 連接冷凝管。 保證 上端出水口向上，通過橡皮管與水池相連； 下端進水口向下 使用順序 實驗結果 先生長素， 后細胞分裂素 有利于分裂但不分化 先細胞分裂素， 后生長素 細胞既分裂也分化 同時使用 分化頻率提高 生長素/細胞分裂素比值與結果 比值高時 促根分化， 抑芽形成 比值低時 促芽分化， 抑根形成 比值適中 促進愈傷組織生長 通過橡皮管

26、與水龍頭相連。 （5） 連接接液管（或稱尾接管）。 （6） 將接收瓶瓶口對準尾接管的出口。常壓蒸餾一般用 錐形瓶而不用燒杯作接受器， 接收瓶應在實驗前稱重，并做好記錄。 （7） 將溫度計固定在蒸餾頭上， 使溫度計水銀球的上限與蒸餾頭側管的下限處在同一 水平線上。 （8） 蒸餾裝置安裝完畢后，在蒸餾瓶中加幾粒 沸石，防止液體過度沸騰。在整個蒸餾 過程中，應保證溫度計的水銀球上常有因冷凝作用而形成的液滴。 控制蒸餾的時間和速 度，通常以每秒 12 滴為宜。蒸餾完畢， 應先撤出熱源，然后停止通水 ，最后拆卸蒸 餾裝置。 3.1.4 壓榨法 3.141 原理：通過機械壓力將芳香油從果皮中分離出來 3.

27、1.4.2 方法：石灰水浸泡漂洗T壓榨、過濾、靜置T再次過濾 3.1.4.3 不足：分離困難，出油率低 3.1.5 萃取法 3.1.5.1 原理：芳香油易溶于有機溶劑，溶劑揮發(fā)后得到芳香油。如石油醚、酒精、乙醚等。 3.1.5.2 方法：原料浸泡在溶劑中T得到浸泡液T有機溶劑揮發(fā)T芳香油。 3.1.5.3 不足：有機溶劑中的雜質影響芳香油的品質 3.2 玫瑰精油的提取 3.2.1 試劑目的 0.1g/mL 氯化鈉溶液：促使油水混合物（乳濁液）中油和水的分離 。 無水硫酸鈉：吸收油層中的水分。 3.2.2 實驗步驟 采集玫瑰花：采集 盛花期（5 月中上旬）的玫瑰花，清水清洗瀝干。 裝入蒸餾原料：

28、稱取 50g 玫瑰花放入蒸餾瓶，添加 200mL 蒸餾水。4： 1 安裝蒸餾裝置：按照從左向右、自下到上次序安裝水蒸氣蒸餾裝置。 加熱蒸餾：控制蒸餾時間和速度（ 12 滴/秒），獲得 乳白色乳濁液；拆卸裝置。 分離油層：向乳濁液加入 NaCI 溶液后，利用 分液漏斗 分離出上面的油層。 除去水分：向油層中加入無水硫酸鈉， 24h后過濾，得到玫瑰油。 3.2.3 注意事項：蒸餾時間不能過短，溫度不能過高。3.3 橘皮精油的提取 3.3.1 橘皮精油的主要成分：檸檬烯,主要分布在橘皮中。 3.3.2 試劑目的 石灰水：防止壓榨時滑脫， 提高出油率，降低壓榨液黏稠度，過濾不堵塞篩眼。 小蘇打、硫酸鈉

29、：促進 油和水的分離（用量分別為橘皮質量的 0.25 %和 5 %）。 3.3.3 實驗步驟 橘皮的處理：將新鮮橘皮用清水清洗瀝干。 石灰水浸泡：用 78 %石灰水浸泡橘皮 24h。 清水漂洗：浸泡好的橘皮用流水徹底漂洗干凈，瀝干。 粉碎和壓榨：將橘皮粉碎，加入小蘇打和硫酸鈉后，用壓榨機壓榨得到壓榨液。 過濾壓榨液：用布袋過濾，濾液再高速離心處理，分離出上層橘皮油。 靜置處理：將橘皮油在 510C冰箱中靜置 57d,分離出上層澄清橘皮油。 再次過濾：將下層橘皮油用濾紙過濾，濾液與上層橘皮油合并，得到橘皮精油。 3.3.4 靜置處理目的：除去 果蠟和水分。 3.4 胡蘿卜素的提取 3.4.1 胡

30、蘿卜素性質： 橘黃色結晶，化不溶于水，微溶于乙醇，易溶于石油醚等有機溶劑 。 依據(jù)碳碳雙鍵的數(shù)目劃分為a、 B、丫三類。其中最主要的組成成分為B -胡蘿卜素。 3.4.2 提取胡蘿卜素的方法主要有三種：從植物中提取從大面積養(yǎng)殖的巖藻中獲 得利用微生物的發(fā)酵生產(chǎn) 3.4.3 萃取劑的選擇（影響萃取的主要因素） 水溶性的：乙醇、丙酮 水不溶性的：石油醚、乙酸乙酯、 乙醚、苯、四氯化碳等 （石油醚沸點最高最合適） 選擇：具有較高的沸點，能夠充分溶解胡蘿卜素， 并且不與水混溶。 3.4.4 實驗步驟 粉碎f干燥f萃取f過濾f濃縮 粉碎：使原料與有機溶劑充分接觸，增大溶解度 。 干燥：脫水溫度太高，干燥

31、時間太長會導致胡蘿卜素分解。 3.4.5 裝置的設計 萃取過程應該避免明火加熱，采用 水浴加熱，這是因為有機溶劑都是易燃物，直接 使用明火加熱容易引起燃燒爆炸。 為了防止加熱時有機溶劑揮發(fā)， 還要在加熱瓶口安 裝回流冷凝裝置。萃取液的濃縮可直接使用蒸餾裝置。在濃縮之前，還要進行過濾， 除去萃取液中的不溶物。 3.4.6 鑒定：紙層析法 濾紙：18 cmX 30 cm 基線：濾紙下端距底邊 2 c 血處做一基線，在基線上取 A、B、C D 四點。 點樣：用最細的注射器針頭（毛細吸管）吸取樣品進行點樣。點樣應該快速細致，在 基線上形成直徑2 mm左右的圓點， 每次點樣后，可用吹風機將溶劑吹干， 注

32、意保持 濾紙干燥。等濾紙上的點樣液自然揮發(fā)干后， 將濾紙卷成圓筒狀，至于裝有l(wèi)cm深 的石油醚的密封玻璃瓶中。 等各種色素完全分開后， 觀察標準樣品中位于展開劑前沿 的胡蘿卜素層析帶。 四、酶、DNA、細胞固化 4.1 酶 4.1.1 果膠酶 4.1.1.1 果膠是植物細胞壁以及胞間層的主要成分之一，不溶于水 4.1.1.2 果膠酶不特指某一種， 是一類酶的統(tǒng)稱，包括多聚半乳糖醛酸酶， 果膠分解酶和果膠 酯酶 4.1.1.3 果膠酶的主要作用是分解果膠變成可溶性的 半乳糖醛酸，從而使果汁變得澄清，提升水 果的出汁率 4.1.1.4 探究果膠酶活性 因素：T、pH、酶抑制劑 單一變量原則 分別預熱、預 pH 處理，再混合 最適用量：增加酶用量，直至果汁量不再 增 力口。最適用量與 T、pH 有關。 4.1.2 加酶洗衣粉 4.1.2.1 包含的酶制劑 蛋白酶：蛋白質T氨基酸、多肽 脂肪酶：脂肪T脂肪酸、甘油 淀粉酶：淀