血液凝固和影響血液凝固的因素

1、血液凝固和影響血液凝固的因素浙江中醫(yī)藥大學14級臨床醫(yī)學本部三班 張伊娜【摘要】目的：通過測定某些條件下的血液凝固時間，探究各種因 素對血液凝固的影響及機制o方法：取家兔新鮮血液分別置于室溫、 低溫、涂石蠟于試管壁的試管，加棉花、naci、肝素、草酸鉀、肺組 織浸液，用竹簽攪拌處理，觀察記錄其凝血時間并與不做任何處理的 血液凝固時間進行對比，分析凝血時間的變化。結果：經棉花、肺 組織浸液處理的血凝時間較室溫短，經naci、涂石蠟于試管壁處理的 血凝時間較室溫長，經肝素、草酸鉀、低溫處理的血液不凝，經竹簽 攪拌的血液不凝且竹簽上纏有乳白色絲狀物。結論：增加粗糙面、 組織因了促進血液凝固；稀釋血液

2、、涂石蠟于試管壁可延長凝血時間; 肝素、草酸鉀、低溫抑制血液凝固。纖維蛋白是血液凝固所必需的?！娟P鍵詞】血液凝固；凝血因子；肝素；纖維蛋白 1實驗材料和方法1.1實驗材料1.1.1實驗動物家兔。1.1.2實驗材料和器械棉花，石蠟油，碎冰塊，氯化鈉，肝素，草酸鉀，肺組織浸液，氨 基屮酸乙酯；試管（8支），小燒杯（2支），竹簽，兔手術臺，手術 器械，注射器，動脈夾，動脈插管，恒溫水浴槽，秒表（本實驗用手 機秒表功能）。1.2實驗方法1.2.1家兔稱重后，按5ml/kg體重劑量給家兔耳緣靜脈注射200g/l 的氨基屮酸乙酯使之麻醉，將兔仰臥并固定于兔手術臺上。1.2.2切開頸部皮膚、肌肉后，使兩側頸

3、總動脈暴露，用玻璃分針分 離一側頸總動脈，頭端用線結扎，向心端夾上動脈夾。用眼科剪在近 結扎線處的血管壁剪一 “v”形小口，向心方向插入動脈插管，用線 結扎固定。以備取血之用。123取8支試管，并編號。按下表實驗條件準備完畢（其中4號試管組加 05mlnaci,而 58 組加 2ml naci）編號實驗條件1空白對照2棉花少許3石蠟油潤滑整個試管表面4浸在盛有碎冰塊的燒杯中52mlnaci6iml肝素7o.lml草酸鉀8o.lml肺組織浸液圖示：促凝與抗凝試驗1.2.4放開動脈夾，先放一管血后再18號管每管加入血液iml （約 試管的1/8）,立即用秒表（手機秒表功能）計時，每隔30s將試管傾

4、 斜一次，觀察血液是否凝固，至血液成為凝膠狀時，記下所歷時間。 其中5-8號管需搖晃試管使血液和液體混勻。125由頸總動脈插管放血，分別注入兩個小燒杯內各10ml, 一杯靜 置；另一杯用竹簽不斷地進行攪拌5min,觀察血液的凝固現(xiàn)象。取 出竹簽，用水洗凈，觀察纏繞在竹簽上的物質。1.2.5記錄各管的凝血時間。2實驗結果2.1與空白對照組凝血吋間（1號試管）相比：（1）2、8號試管凝血時間縮短，且8號試管凝血最快，2號其次。（2）3、5號試管凝血時間延長，但3號試管中血凝較5號快。（3）4號試管未凝（理論上浸在0°c冰水混合物中血液不會凝固，但實驗條件下冰塊逐漸溶解導致其溫度上升，可能

5、會出現(xiàn)使4號管血液凝固的現(xiàn)象）。（4）待結束實驗，6、7號管血液始終不凝。詳見下表:編號實驗條件凝血時間（min）與空白組實驗結果對照平均數x標準差sx+s1空白對照37.8111.3237.81+11.322棉花少許11.755.3711.75±5.37縮短3右蠟油潤滑整個試管表面42.892.6542.89+2.65延長4浸在盛有碎冰塊的燒杯中未凝延長52.0ml naci51.251.7351.25+1.73延長6l.oml肝素不凝延長（始終不凝）7o.lml草酸不凝延長（始終鉀不凝）8o.lml肺組織浸液8.152.83& 15+2.83縮短圖示：促凝與抗凝試驗2.2

6、與對照組相比，經竹簽攪拌過的血液不凝固，竹簽洗凈后上面纏 繞著乳白色絲狀物質。3實驗討論3.1血液凝固機制血液由流動的液體狀態(tài)轉為不流動的凝膠狀態(tài)稱為血液凝固血液 凝固是生理性止血功能的重要組成部分。3丄1凝血因子特性包括12個經典的凝血因了，即fixiii （其中因了 v i已被廢除） 以及激肽系統(tǒng)的2個因子，即激肽釋放酶原和高分子量激肽原。 除fiv為金屬離子外，其他均為蛋白質；除組織因子外，其他均 存在于血漿中。3.1.2凝血途徑血液凝固過程是由許多凝血因子參加的酶促反應。根據血液凝固過 程中凝血酶原激活途徑不同，可將血液凝固分為內源性激活途徑和外 源性激活途徑。（1）內源性凝血途徑：內

7、源性凝血途徑是指參與凝血的因子全部 來自血液，通常因血液與帶負電荷的異物表面（如玻璃、白陶土、 硫酸酯、膠原等）接觸而啟動。當血液與帶負電荷的異物表面接 觸時，首先是f刈結合到異物表面，并被激活為f刈業(yè)f刈a的主 要功能是激活fxi成為fxia,從而啟動內源性凝血途徑。（2）外源性凝血途徑：由來自于血液之外的組織因子暴露于血液 而啟動的凝血過程，成為外源性凝血途徑，又稱組織因子途徑。 組織因子是一種跨膜糖蛋白，存在于大多數組織細胞。在生理情 況下，直接與循環(huán)血液接觸的血細胞和內皮細胞不表達組織因子， 但約有0.5%的fvn處于活化狀態(tài)（fvha）o當血管損傷時，暴露出組織因子，后者與fvlla

8、結合而形成fvlla組織因子復合物，后 者在磷脂和存在的情況下迅速激活fx生成fxa。由內源性和外源性凝血途徑所生成的fxa,在cf存在的情況 下可與fvo在磷脂膜表面形成fxafvqc屮一磷脂復合物，即 凝血酶原復合物，進而激活凝血酶原。凝血酶原的激活和纖維蛋白的生成 凝血酶原在凝血酶原復合 物的作用下激活成為凝血酶。木實驗采用動物頸動脈放血取血，血液幾乎未與組織因子接觸。因 此，凝血過程主要是內源性凝血系統(tǒng)的作用。肺組織浸液中含豐富的 組織因子，加入試管觀察外源性凝血系統(tǒng)的作用。3.2對實驗結果本質探究3.2.1棉花對血液凝的影響實驗中加入棉花后血液凝固時間較室溫縮短。棉花給血液凝固提供

9、了一個粗糙的表面，容易使血小板發(fā)生黏著、聚集，然后釋放許多凝 血因子和血小板因子；另外棉花含許多帶負電荷的植物纖維，也能激 活凝血因子xii,啟動內源性凝血途徑。3.2.2涂石蠟油于試管壁對血液凝固的影響實驗中涂石蠟油于試管壁血液凝固時間較室溫延長。由于石蠟油表 面光滑，不易引起血小板黏著，即不易使血小板發(fā)揮促進凝血的作用。 另外石蠟油為絕緣體，其把試管表面所帶的負電荷覆蓋，不利于凝血因子xii的激活，因而延長凝血時間。3.2.3低溫對血液凝固的影響實驗中置于低溫后血液凝固時間較室溫延長。凝血酶發(fā)揮作用需要 適宜的溫度，當溫度降低時，酶的活性就減弱甚至喪失，因此放置于 冰水中的試管血液不凝固。

10、3.2.4naci對血液凝固的影響我們小組的實驗中加入2mlnaci血液凝固時間較室溫延長。原因是 加入的生理鹽水稀釋了血液，使凝血酶的濃度降低，延長了血液凝固 的時間。而14組加入0. 5mlnacl血液凝固時間較室溫縮短，可能 不同濃度的naci產生效果不同，亦有可能是凝血酶發(fā)揮作用有一個 最適濃度，越接近最適濃度，凝血吋間越短。3.2.5肝素對血液凝的影響實驗中加入肝素后血液不會凝固。肝素是機體內外重要的抗凝物質。 抗凝血酶與凝血酶等多種凝血因子的活性中心一一絲氨酸殘基結合， 使這些凝血因子的活性受到抑制或失活，從而達到抗凝的作用。肝素 則主要通過與血漿中的的一些抗凝蛋白，如抗凝血酶ii

11、i結合，加強后 者的抗凝作用。此外肝素還能使血管內壁細胞釋放凝血抑制物和纖溶 酶原激活物，增強纖溶作用。因此在試管內放入肝素時血液不會發(fā)生 凝固。326草酸鉀對血液凝固的影響實驗中加入草酸鉀后血液不會凝固。凝血過程中ca2*是重要的凝血 因子，其參與了血液凝固的許多環(huán)節(jié)，當血液中沒有時血液就不 會發(fā)生凝固。在試管中加入草酸鉀，由于草酸鉀與發(fā)生反應，生 成草酸鈣沉淀，使血液中沒有cfs故血液不會發(fā)生凝固。3.2.7肺組織浸出液對血液凝固的影響實驗中加入肺組織浸出液后血液不會凝固。肺組織浸出液中含有豐 富的組織因子（凝血因子iii）,易通過外源性途徑迅速發(fā)生凝血反應， 因此加肺組織浸出液的試管血液

12、凝固發(fā)生最快。3.2.8竹簽攪拌實驗對血液凝固的影響實驗中經竹簽攪拌實驗后血液不再凝固。在竹簽上可見乳白色絲狀 物，該物質為不溶性的纖維蛋白。血液凝i司的實質就是血漿中的可溶 性纖維蛋白原轉變成不溶性的纖維蛋白的過程。纖維蛋白交織成網, 把血細胞和血液的其他成分網羅在內，從而形成血凝塊。用竹簽攪動 后不溶性的纖維蛋白被粘附在竹簽上，血液中可溶性纖維蛋白原被完 全消耗，不再產生不溶性的纖維蛋白，血液自然無法凝固。4實驗結論經棉花、肺組織浸液處理的血凝時間較家溫短，而涂石蠟于試管壁 處理的血凝時間較室溫長，表明與粗糙面、負離子接觸能夠啟動內源 性凝血途徑使凝血加快，組織因子易通過外源性途徑迅速發(fā)生凝血反 應；經2mlnaci處理的血凝時間較室溫長，原因是加入的生理鹽水稀 釋了血液，使凝血酶的濃度降低，延長了血液凝固的時間。但經 0. 5mlnacl處理的血液凝固時間較家溫短，其機制尚不清；經肝素、 草酸鉀、低溫處理的血