CLBIII四通道殘留農(nóng)藥測(cè)定儀使用說明PPT學(xué)習(xí)教案

1、會(huì)計(jì)學(xué)1CLBIII四通道殘留農(nóng)藥測(cè)定儀使用說明四通道殘留農(nóng)藥測(cè)定儀使用說明 有機(jī)磷和氨基甲酸酯類殺蟲、殺螨劑的特點(diǎn)。兩類農(nóng)藥的作用機(jī)理均為抑制動(dòng)物體內(nèi)乙酰膽堿酯酶的活性，破壞神經(jīng)傳導(dǎo)，引起一系列的神經(jīng)中毒癥狀，直至死亡。二者的主要區(qū)別在于：有機(jī)磷類殺蟲、殺螨劑對(duì)乙酰膽堿酯酶的抑制是不可逆的，而氨基甲酸酯類殺蟲、殺螨劑對(duì)乙酰膽堿酯酶的抑制是可逆的 。第1頁/共45頁 酶抑制率法和酶系酶源：國家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 5009.199-2003蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量的快速檢測(cè)推薦的酶抑制率法能方便、快速、準(zhǔn)確、成本低廉檢測(cè)出農(nóng)產(chǎn)品中的農(nóng)藥殘留，也同時(shí)肯定了乙酰膽堿酯酶酶系作為快速檢測(cè)推薦試劑

2、的活性量和具體要求。近年來，我們通過對(duì)動(dòng)物源和植物源的多種丁酰膽堿酯酶、乙酰膽堿酯酶進(jìn)行檢測(cè)實(shí)驗(yàn)和比較研究，發(fā)現(xiàn)乙酰膽堿酯酶對(duì)農(nóng)藥的檢測(cè)敏感度和綜合指標(biāo)優(yōu)于丁酰膽堿酯酶；確定了有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)乙酰膽堿酸有較專一性的抑制作用；分析出在抑制率70%以下，大多數(shù)農(nóng)藥濃度和乙酰膽堿酯酶抑制率呈較好的線性關(guān)系，并能實(shí)現(xiàn)對(duì)單種農(nóng)藥的定量分析；解決了酶的活性和穩(wěn)定性控制等技術(shù) 第2頁/共45頁 什么是間接比色法:由于只有當(dāng)?shù)孜锱c產(chǎn)物之間，在光學(xué)性質(zhì)或其它理化性質(zhì)有顯著差異時(shí)，才可能直接用分光光度計(jì)法測(cè)定，因此對(duì)酶活性濃度的監(jiān)測(cè)大多是采用間接監(jiān)測(cè)法。如對(duì)膽堿酯酶的測(cè)定：底物（硫代乙酰膽堿）及酶水解產(chǎn)

3、物（硫代膽堿和乙酸）并不具有顏色，不能用分光光度計(jì)法測(cè)定。所以必須設(shè)法在原來反應(yīng)體系中添加一些試劑，這些試劑必須不與酶作用也不影響酶活性，同時(shí)又能與酶反應(yīng)物迅速作用，產(chǎn)生可以被直接測(cè)定的物質(zhì)。這就產(chǎn)生了Ellman的膽堿酯酶測(cè)定法即間接連續(xù)監(jiān)測(cè)法。目前國內(nèi)大多廠家生產(chǎn)的快速農(nóng)藥測(cè)定儀都采用了 Ellman的膽堿酯酶測(cè)定法即間接比色法。該方法通過監(jiān)測(cè)底物（硫代乙酰膽堿），酶水解產(chǎn)物硫代膽堿與添加的二硫代硝基苯甲酸（DTNB）作用立刻生成黃色化合物的反應(yīng)速度來測(cè)定酶活性變化。第3頁/共45頁 什么是固定時(shí)間法:早期這類方法常被命名為“終點(diǎn)法”、“二點(diǎn)法”、“固定時(shí)間法”和“取樣法”。該方法先選擇一

4、段固定的時(shí)間（固定為3分鐘），先讓酶與底物在一定溫度下進(jìn)行一段固定的時(shí)間（固定為3分鐘）的化學(xué)反應(yīng)，并根據(jù)呈色測(cè)出底物和產(chǎn)物的變化用比色法對(duì)反應(yīng)結(jié)果進(jìn)行評(píng)定。由于“二點(diǎn)法”容易受到干擾，并產(chǎn)生誤差，使檢測(cè)穩(wěn)定性較低。 第4頁/共45頁 什么是連續(xù)監(jiān)測(cè)法：50年代，Warburg首先用分光光度計(jì)測(cè)定酶的活性。該方法不需停止酶反應(yīng)就可測(cè)定反應(yīng)物的變化，容易觀察到反應(yīng)的整個(gè)過程和干擾情況（通過繪制反應(yīng)曲線）。因此逐步取代了固定時(shí)間法成為目前測(cè)酶活性的主要方法。該方法是利用連續(xù)對(duì)反應(yīng)過程進(jìn)行高靈敏度檢測(cè)，并通過繪制整個(gè)酶反應(yīng)曲線避開延滯期和非線性反應(yīng)期，只在線性反應(yīng)期測(cè)定最大反應(yīng)初速度。由于儀器的高精

5、密度，連續(xù)監(jiān)測(cè)法能在很短時(shí)間，甚至在1分鐘反應(yīng)時(shí)間內(nèi)就能準(zhǔn)確測(cè)定出活性的抑制率。 第5頁/共45頁CL-BIII四通道殘留農(nóng)藥測(cè)定儀的技術(shù)指標(biāo)：四通道殘留農(nóng)藥測(cè)定儀的技術(shù)指標(biāo)： 測(cè)量波長：410nm 通道數(shù)：4 檢測(cè)用樣品器皿：10mm比色皿 光電流漂移：1% (3min) 暗電流漂移：1% (3min) 抑制率顯示范圍：0-100% 抑制率測(cè)量范圍：10-100% 農(nóng)藥檢測(cè)：（用甲胺磷農(nóng)藥標(biāo)樣測(cè)試） 抑制率示值誤差：10 % 抑制率重復(fù)性誤差： 5 % 第6頁/共45頁目目 錄錄第7頁/共45頁第8頁/共45頁酶試劑酶試劑ml提取液，加入酶試劑瓶中。顯色劑顯色劑：用移液槍取20ml提取液，加

6、入顯色劑瓶，溶 解后倒入棕色瓶中。底底 物物ml蒸餾水，加入底物瓶中。第9頁/共45頁返回目錄第10頁/共45頁第11頁/共45頁第12頁/共45頁第13頁/共45頁第14頁/共45頁第15頁/共45頁安裝完成桌面上出現(xiàn)的圖標(biāo)第16頁/共45頁檢測(cè)軟件登陸第17頁/共45頁調(diào)0、調(diào)100空白對(duì)照樣品分析第18頁/共45頁注：以上是一個(gè)檢測(cè)窗注：以上是一個(gè)檢測(cè)窗口的步驟，其他三個(gè)窗口的步驟，其他三個(gè)窗口都是如此?？诙际侨绱?。 等待10-15秒 按“確定” 放入黑塊 等待10-15秒 按“確定” 拿出黑塊 按“ ”鍵按“ ”鍵按“ ”鍵 按“ ”鍵第19頁/共45頁用小移液槍取用小移液槍取0.1m

7、l酶試劑加入試管中酶試劑加入試管中 用小移液槍取用小移液槍取0.1ml顯色劑加入試管中顯色劑加入試管中 用小移液槍取用小移液槍取0.1ml底物加入試管中底物加入試管中 迅速搖勻并倒入比色皿迅速搖勻并倒入比色皿 放入比色池放入比色池 按按“開始對(duì)照分析開始對(duì)照分析”鍵鍵 等待對(duì)照結(jié)束等待對(duì)照結(jié)束 ml提取液放入試管中提取液放入試管中第20頁/共45頁按“裝入對(duì)照分析”鍵選擇所需對(duì)照選擇需要裝入對(duì)照的通道號(hào)（在通道號(hào)碼前） 按“讀取”鍵完成裝入工作 注：對(duì)照結(jié)束后，對(duì)照曲線會(huì)自動(dòng)注：對(duì)照結(jié)束后，對(duì)照曲線會(huì)自動(dòng)保存保存. . （標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照庫中已有（標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照庫中已有3030種蔬種蔬菜的對(duì)照，在做這菜的對(duì)

8、照，在做這3030種蔬菜時(shí)，請(qǐng)種蔬菜時(shí)，請(qǐng)參照這些對(duì)照。）參照這些對(duì)照。） 第21頁/共45頁按“裝入對(duì)照分析”鍵選擇所需的空白對(duì)照和相應(yīng)的樣品修正值選擇需要裝入對(duì)照的通道號(hào)（在通道號(hào)碼前） 按“讀取”鍵完成裝入工作 第22頁/共45頁用天平稱取1克果蔬剪成2cm見方 放入燒杯中，用大移液槍抽取5ml提取液加入到燒杯中 靜置15分鐘（或震蕩1分鐘） 用大移液槍從燒杯中抽取2.5ml浸泡液移至空試管中 用小移液槍取0.1ml酶試劑加入試管中 用小移液槍取0.1ml顯色劑加入試管中靜置15分鐘 用小移液槍取0.1ml底物加入試管中 迅速搖勻并倒入比色皿 放入比色池 按“開始樣品分析”鍵 等待檢測(cè)結(jié)

9、果 第23頁/共45頁第24頁/共45頁樣品結(jié)束后，系統(tǒng)自動(dòng)彈出“檢測(cè)結(jié)果”對(duì)話框 選擇該通道所測(cè)蔬菜名 填寫（選擇）檢測(cè)單位 按“退出”鍵 填寫（選擇）被檢單位和生產(chǎn)單位 按“保存”鍵，保存檢測(cè)結(jié)果 第25頁/共45頁返回目錄第26頁/共45頁第27頁/共45頁第28頁/共45頁第29頁/共45頁通道選擇日期設(shè)置第30頁/共45頁第31頁/共45頁調(diào)0、調(diào)100空白對(duì)照樣品分析第32頁/共45頁第33頁/共45頁用小移液槍取用小移液槍取0.1ml酶試劑加入試管中酶試劑加入試管中 用小移液槍取用小移液槍取0.1ml顯色劑加入試管中顯色劑加入試管中 用小移液槍取用小移液槍取0.1ml底物加入試管

10、中底物加入試管中 迅速搖勻并倒入比色皿迅速搖勻并倒入比色皿 放入第一通道的比色池放入第一通道的比色池 按按“對(duì)照對(duì)照”鍵，并選擇鍵，并選擇“新建新建” 等待對(duì)照結(jié)束等待對(duì)照結(jié)束 ml提取液放入試管中提取液放入試管中第34頁/共45頁用天平稱取1克果蔬剪成2cm見方 放入燒杯中，用大移液槍抽取5ml提取液加入到燒杯中 靜置15分鐘 用大移液槍從燒杯中抽取2.5ml浸泡液移至空試管中 用小移液槍取0.1ml酶試劑加入試管中 用小移液槍取0.1ml顯色劑加入試管中靜置15分鐘 用小移液槍取0.1ml底物加入試管中 迅速搖勻并倒入比色皿 放入比色池 按“樣品”鍵 等待檢測(cè)結(jié)果 注：按“樣品”鍵后，四個(gè)

11、通道同時(shí)進(jìn)行檢測(cè)。 第35頁/共45頁第36頁/共45頁返回目錄按按“打印打印”鍵鍵 按按“確定確定”鍵鍵 用用/鍵選擇檢測(cè)數(shù)據(jù)的編號(hào)鍵選擇檢測(cè)數(shù)據(jù)的編號(hào) 按按“打印打印”鍵進(jìn)行打印鍵進(jìn)行打印 按按“確定確定”鍵退出打印狀態(tài)鍵退出打印狀態(tài) 第37頁/共45頁第38頁/共45頁1.儀器聯(lián)機(jī)操作的情況下，在檢測(cè)過程中或者開始檢測(cè)時(shí)，電腦出現(xiàn)“沒有檢測(cè)到指定的設(shè)備”，是怎么回事？ 一般來說出現(xiàn)這種提示說明您的檢測(cè)儀與電腦硬件連接出現(xiàn)問題，檢查的步驟如下： 第一步、確定檢測(cè)軟件的設(shè)備設(shè)置中相關(guān)設(shè)置與硬件連接相匹配； 第二步、電腦串口通訊故障，檢測(cè)方法：重新啟動(dòng)電腦，確認(rèn)是否故障依然存在，如果故障依然存

12、在，檢查下一步； 第三步、更換一下電腦串口，并在檢測(cè)軟件的設(shè)備設(shè)置中進(jìn)行相應(yīng)的改動(dòng)，或者換一臺(tái)電腦，確認(rèn)故障是否存在，如果故障解決，則表明是電腦本身的問題，否則可進(jìn)行下一步檢查； 第四步、更換RS232485轉(zhuǎn)換器，確認(rèn)問題是否存在,如果故障解決，則表明為RS232485轉(zhuǎn)換器連接不通。第39頁/共45頁2.儀器聯(lián)機(jī)操作的情況下，調(diào)100時(shí)看不到紅線是怎么回事？ 首先我們要學(xué)會(huì)看圖譜，圖譜的橫坐標(biāo)為時(shí)間，縱坐標(biāo)為投射比，我們所所的調(diào)100準(zhǔn)確的所是指將投射比值調(diào)整為100。 圖譜在沒有拖拉的情況下，最高只能顯示到100，如果在調(diào)100的過程中，其投射比值大于100，那樣就看不到紅線了，但圖譜右

13、邊的小白框中有數(shù)字顯示，你只要正常的調(diào)0/100就可以了。 另外，對(duì)于小白框內(nèi)數(shù)字，顯示的是當(dāng)前的投射比值。在做對(duì)照或調(diào)0/100時(shí)，小白框內(nèi)的數(shù)字前有一短紅線，在做樣品時(shí)則為短綠線。大家不要把這個(gè)短線認(rèn)為是負(fù)號(hào)大家不要把這個(gè)短線認(rèn)為是負(fù)號(hào)。第40頁/共45頁3.如何檢測(cè)儀器的重現(xiàn)性？ 做一空白對(duì)照后，做一個(gè)雙倍量的樣品，然后一分為二做一個(gè)雙倍量的樣品，然后一分為二，先后或同時(shí)做檢測(cè)，即：取2克樣品，加10ml提取液浸泡，然后取5mlmlmlml底物做檢測(cè)，則是檢查同一通道的重現(xiàn)性。4.如何添加品種名稱？ 一般來說有兩種添加方法： A.可以在基礎(chǔ)數(shù)據(jù)維護(hù)中進(jìn)行添加。 B.在檢測(cè)結(jié)果彈出是，通過 進(jìn)行添加。另外，在添加時(shí)一定要按“增加”鍵，填好相關(guān)信息后按“保存”完成。 第41頁/共45頁5.如何升級(jí)檢測(cè)軟件？ 對(duì)于檢測(cè)軟件的升級(jí)有兩種方法： A.在線升級(jí)：打開檢測(cè)軟件并連接因特網(wǎng)，然后在幫助中選擇在線升級(jí)。 B.本地升級(jí)：執(zhí)行新版檢測(cè)軟件的安裝程序，選擇“修復(fù)或升級(jí)”項(xiàng)，然后按照提示完成安裝即可。6.如何上傳數(shù)據(jù)？ 上傳數(shù)據(jù)有三個(gè)步驟： 1）打開“設(shè)備”菜單中的“系統(tǒng)選項(xiàng)”，并將注冊(cè)ID號(hào)和ID密碼填寫好； 2）打開“統(tǒng)計(jì)匯總”菜單中的“農(nóng)殘檢測(cè)數(shù)據(jù)查詢統(tǒng)計(jì)”，通過查詢項(xiàng)將需要上傳的數(shù)據(jù)查詢出來； 3）按“上傳”鍵完成上傳數(shù)據(jù)的操作。第42頁/共45頁返回目錄7