細胞工程_植物細胞工程的基本技術(第二章第一節(jié))

1、 19961996年年7 7月月5 5日日, ,世界上第一只體細胞克隆世界上第一只體細胞克隆動物動物-克隆羊克隆羊多利多利誕生于英國。誕生于英國。這樣的生物技術屬于何種生物工程？這樣的生物技術屬于何種生物工程？細胞工程細胞工程 細胞工程是指應用細胞生物學和分子細胞工程是指應用細胞生物學和分子生物學的原理和方法，通過生物學的原理和方法，通過細胞水平細胞水平或或細細胞器水平胞器水平上的操作，按照人們的意愿來上的操作，按照人們的意愿來改改變變細胞內(nèi)的細胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)遺傳物質(zhì)或或獲得細胞產(chǎn)品獲得細胞產(chǎn)品的一的一門綜合科學技術。門綜合科學技術。什么叫細胞工程？包括哪兩什么叫細胞工程？包括哪兩大領域？大領

2、域？細細胞胞工工程程應用的原理和方法應用的原理和方法研究的水平研究的水平研究的目的研究的目的細胞生物學和細胞生物學和分子生物學分子生物學細胞整體水平細胞整體水平或細胞器水平或細胞器水平按照人們的意愿來改按照人們的意愿來改變細胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)變細胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細胞產(chǎn)品或獲得細胞產(chǎn)品概念概念分類分類植物細胞工程植物細胞工程動物細胞工程動物細胞工程理論基礎理論基礎細胞的細胞的全能性全能性2.1植物細胞工程植物細胞工程2.1.1植物細胞工程的基本技術植物細胞工程的基本技術植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)利用菊花花瓣微型繁殖培養(yǎng)的菊花利用菊花花瓣微型繁殖培養(yǎng)的菊花12345再分化再分化(愈傷組織愈傷組織)植

3、植物物組組織織培培養(yǎng)養(yǎng)6脫分化脫分化探究：探究：1 1、為什么植物的一個花瓣就可以培、為什么植物的一個花瓣就可以培育出完整的植株呢？育出完整的植株呢？植物細胞具有全能性。植物細胞具有全能性。2 2、什么是細胞的全能性？、什么是細胞的全能性？1 1、定義：、定義： 生物體的細胞具有使后代細胞發(fā)育成完整生物體的細胞具有使后代細胞發(fā)育成完整個體的潛能的特性。個體的潛能的特性。 2 2、原理：、原理： 生物體的每一個細胞都包含有該物種所特生物體的每一個細胞都包含有該物種所特有的有的全套遺傳物質(zhì)全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成為完整個，都有發(fā)育成為完整個體所必需的體所必需的全部基因全部基因，從理論上講，生物，從

4、理論上講，生物體的每一個體的每一個活細胞活細胞都應該具有全能性。都應該具有全能性。 3 3、差異：、差異： （1 1）受精卵的全能性）受精卵的全能性最高最高 （3 3）受精卵分化后的細胞中，體細胞的）受精卵分化后的細胞中，體細胞的全能性比生殖細胞全能性比生殖細胞低低 受精卵受精卵生殖細胞生殖細胞體細胞體細胞4 4、大?。?、大?。阂弧⒓毎娜苄砸?、細胞的全能性植物細胞動物細胞植物細胞動物細胞 （2 2）生殖細胞的全能性）生殖細胞的全能性較高較高 探究：探究：1 1、克隆羊、克隆羊“多利多利”的誕生說明了什么？的誕生說明了什么？2 2、生物體內(nèi)的細胞為什么沒有表現(xiàn)出全能性，而是分、生物體內(nèi)的細胞

5、為什么沒有表現(xiàn)出全能性，而是分化成不同的組織器官？化成不同的組織器官？3 3、為何已分化的細胞仍具有發(fā)育成完整個體的潛能？、為何已分化的細胞仍具有發(fā)育成完整個體的潛能？表現(xiàn)全能性的條件有哪些？表現(xiàn)全能性的條件有哪些？離體、提供營養(yǎng)物質(zhì)、激素及其它適宜條件。離體、提供營養(yǎng)物質(zhì)、激素及其它適宜條件。細胞核中含有保持物種遺傳性所需的細胞核中含有保持物種遺傳性所需的全套基因全套基因，并沒有因，并沒有因為細胞分化而丟失基因，高度分化的細胞的為細胞分化而丟失基因，高度分化的細胞的細胞核細胞核仍具有仍具有全能性全能性。在特定的時間和空間條件下，在特定的時間和空間條件下，基因選擇性的表達基因選擇性的表達的結果

6、。的結果。生物體的每一個細胞都含本物種的生物體的每一個細胞都含本物種的全套遺傳物質(zhì)全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成完整個體的都有發(fā)育成完整個體的全套基因全套基因。1 1、有關全能性的表述中，不正確的是、有關全能性的表述中，不正確的是（ ） 受精卵在自然條件下能使后代細胞形成受精卵在自然條件下能使后代細胞形成完整個體，因此全能性最高完整個體，因此全能性最高 生物體內(nèi)細胞由于分化全能性不能表達生物體內(nèi)細胞由于分化全能性不能表達 卵細胞和受精卵一樣，細胞未分化，全卵細胞和受精卵一樣，細胞未分化，全能性很高能性很高 植物細胞離體培養(yǎng)在一定條件下能表現(xiàn)植物細胞離體培養(yǎng)在一定條件下能表現(xiàn)出全能性出全能性C趁熱打鐵

7、：趁熱打鐵：2.2.下列植物細胞全能性最高的是（下列植物細胞全能性最高的是（ ）A.A.形成層細胞形成層細胞 B.B.韌皮部細胞韌皮部細胞 C.C.木質(zhì)部細胞木質(zhì)部細胞 D.D.葉肉細胞葉肉細胞3 3下列細胞全能性最高的是（下列細胞全能性最高的是（ ）A A植物的卵細胞植物的卵細胞B B植物的精子細胞植物的精子細胞C C被子植物的受精卵被子植物的受精卵D D被子植物的的葉肉細胞被子植物的的葉肉細胞AC4.4.在生物體內(nèi)，細胞沒有表現(xiàn)出全能性，在生物體內(nèi)，細胞沒有表現(xiàn)出全能性，而是分化為不同的組織、器官，是因為而是分化為不同的組織、器官，是因為 （ ） A A、細胞的基因喪失了全能性、細胞的基因

8、喪失了全能性 B B、基因在特定時間和空間條件下選擇、基因在特定時間和空間條件下選擇性表達的結果性表達的結果 C C、不同的細胞內(nèi)基因不完全相同、不同的細胞內(nèi)基因不完全相同 D D、在個體發(fā)育的不同時期，細胞內(nèi)的、在個體發(fā)育的不同時期，細胞內(nèi)的基因發(fā)生了變化基因發(fā)生了變化 B 要把一塊組織通過培養(yǎng)得到要把一塊組織通過培養(yǎng)得到一株完整植株一株完整植株, , 應該如何操作應該如何操作呢呢? ?請同學們閱讀請同學們閱讀P34實實驗完成驗完成P35討論題。討論題。切取接種培養(yǎng)室愈傷組織的形成試管苗移栽切取切取形成層形成層無菌無菌接種接種誘導愈傷組織誘導愈傷組織的形成的形成試管苗的形成試管苗的形成培養(yǎng)室

9、培養(yǎng)室移栽移栽脫分化脫分化再分化再分化(1)(1)在組織培養(yǎng)實驗中，為什么要強調(diào)所用器械的滅在組織培養(yǎng)實驗中，為什么要強調(diào)所用器械的滅菌和實驗人員的無菌操作？菌和實驗人員的無菌操作？ 植物組織培養(yǎng)中用到的培養(yǎng)基含有豐富的營養(yǎng)成植物組織培養(yǎng)中用到的培養(yǎng)基含有豐富的營養(yǎng)成分，有利于培養(yǎng)物的生長，然而各種雜菌同樣也可以分，有利于培養(yǎng)物的生長，然而各種雜菌同樣也可以在上面迅速生長，所以植物組織培養(yǎng)過程中污染現(xiàn)象在上面迅速生長，所以植物組織培養(yǎng)過程中污染現(xiàn)象經(jīng)常發(fā)生。培養(yǎng)基一旦被污染，迅速生長的各種雜菌經(jīng)常發(fā)生。培養(yǎng)基一旦被污染，迅速生長的各種雜菌不但會和培養(yǎng)物不但會和培養(yǎng)物爭奪營養(yǎng)爭奪營養(yǎng)，而且這些雜

10、菌生長的過程，而且這些雜菌生長的過程中會中會生成大量對培養(yǎng)物有害的物質(zhì)生成大量對培養(yǎng)物有害的物質(zhì)，導致培養(yǎng)物迅速，導致培養(yǎng)物迅速死亡。死亡。 造成培養(yǎng)基污染的因素有很多，一般包括：外植造成培養(yǎng)基污染的因素有很多，一般包括：外植體帶菌、培養(yǎng)瓶和各種器械滅菌不徹底、操作人員操體帶菌、培養(yǎng)瓶和各種器械滅菌不徹底、操作人員操作不規(guī)范等。所以在組織培養(yǎng)實驗中用到的植物材料作不規(guī)范等。所以在組織培養(yǎng)實驗中用到的植物材料和各種器械都要進行徹底地滅菌，實驗人員操作一定和各種器械都要進行徹底地滅菌，實驗人員操作一定要規(guī)范，避免帶入雜菌。要規(guī)范，避免帶入雜菌。(2)(2)在本實驗中，切取胡蘿卜塊根時強調(diào)在本實驗中

11、，切取胡蘿卜塊根時強調(diào)要切取含有形成層部分，原因是這部分要切取含有形成層部分，原因是這部分容易誘導形成愈傷組織。請思考一下，容易誘導形成愈傷組織。請思考一下，胡蘿卜的其他部分（如莖、葉、花），胡蘿卜的其他部分（如莖、葉、花），是否也能培養(yǎng)成小植株，你能用實驗的是否也能培養(yǎng)成小植株，你能用實驗的方法進行驗證嗎？方法進行驗證嗎？胡蘿卜的其他部分（如莖、葉、花）胡蘿卜的其他部分（如莖、葉、花）也能培養(yǎng)再生形成小植株，只是誘導也能培養(yǎng)再生形成小植株，只是誘導愈傷組織比較困難。愈傷組織比較困難。(3)(3)請根據(jù)上面的實驗過程，概括出植物組請根據(jù)上面的實驗過程，概括出植物組織培養(yǎng)技術的流程簡圖?？椗囵B(yǎng)技

12、術的流程簡圖。 植物組織培養(yǎng)就是在植物組織培養(yǎng)就是在無菌無菌和和人工控制人工控制條件下，將條件下，將離體離體的植物器官、組織、細的植物器官、組織、細胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予胞，培養(yǎng)在人工配制的培養(yǎng)基上，給予適宜的培養(yǎng)條件，誘導其產(chǎn)生愈傷組織、適宜的培養(yǎng)條件，誘導其產(chǎn)生愈傷組織、叢芽，最終形成完整的植株。叢芽，最終形成完整的植株。二、植物組織培養(yǎng)二、植物組織培養(yǎng)1 1、概念、概念離體的植物器官、組織或細胞離體的植物器官、組織或細胞愈傷組織愈傷組織叢芽或胚狀體叢芽或胚狀體植物體植物體外植體外植體脫分化脫分化植物激素：植物激素：細胞分裂素、生長素細胞分裂素、生長素再分化再分化2、過程、過程

13、植物組織培養(yǎng)條件植物組織培養(yǎng)條件： 含有全部營養(yǎng)成分的含有全部營養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、一定的溫度、空培養(yǎng)基、一定的溫度、空氣、無菌環(huán)境、適合的氣、無菌環(huán)境、適合的PHPH、適時光照等。適時光照等。遮光遮光光照光照細胞分化細胞分化程度與細程度與細胞分裂能胞分裂能力呈負相力呈負相關。關。 1 1、為什么誘導愈傷組織的過程中應避、為什么誘導愈傷組織的過程中應避光培養(yǎng)？光培養(yǎng)？在有光時，往往容易形成維管組在有光時，往往容易形成維管組織，而不易形成愈傷組織?？?，而不易形成愈傷組織。能力提高能力提高2 2、決定植物脫分化、再分化的關鍵因、決定植物脫分化、再分化的關鍵因素是什么？素是什么？植物激素：如生長素，細胞

14、植物激素：如生長素，細胞分裂素分裂素強調(diào)幾個概念強調(diào)幾個概念：愈傷組織：愈傷組織：離體的植物器官、離體的植物器官、組織或細胞，在培養(yǎng)一段時組織或細胞，在培養(yǎng)一段時間以后，通過細胞分裂，形間以后，通過細胞分裂，形成一種高度成一種高度液泡化液泡化，由，由無定無定形狀態(tài)薄壁細胞形狀態(tài)薄壁細胞組成的排列組成的排列疏松無規(guī)則的組織。疏松無規(guī)則的組織。植物細胞的植物細胞的脫分化脫分化：由高度分化的植物器：由高度分化的植物器官、組織或細胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，又官、組織或細胞產(chǎn)生愈傷組織的過程，又稱稱去分化去分化。脫分化的實質(zhì)和結果分別是什么？脫分化的實質(zhì)和結果分別是什么？實質(zhì)是恢復細胞的全能性過程。實質(zhì)是恢

15、復細胞的全能性過程。結果是形成愈傷組織。結果是形成愈傷組織。植物細胞的植物細胞的再分化再分化：脫分化產(chǎn)生的愈傷組織在：脫分化產(chǎn)生的愈傷組織在培養(yǎng)過程中重新分化成根或芽等器官的過程。培養(yǎng)過程中重新分化成根或芽等器官的過程。知識拓展知識拓展 當當細胞分裂素細胞分裂素和和生長素生長素共同使用時，共同使用時，能刺激愈傷組織的形成，而通過調(diào)節(jié)能刺激愈傷組織的形成，而通過調(diào)節(jié)二者的濃度比，就可以調(diào)控植物細胞二者的濃度比，就可以調(diào)控植物細胞培養(yǎng)過程中芽和根的形成，稱為培養(yǎng)過程中芽和根的形成，稱為“激激素杠桿素杠桿”。 具體內(nèi)容詳見具體內(nèi)容詳見P42P42拓展視野拓展視野反饋練習反饋練習1.1.下列屬于組織培

16、養(yǎng)的是（下列屬于組織培養(yǎng)的是（ ）A.A.花粉培養(yǎng)成單倍體植株花粉培養(yǎng)成單倍體植株B.B.芽發(fā)育成枝條芽發(fā)育成枝條C.C.根尖分生區(qū)發(fā)育成成熟區(qū)根尖分生區(qū)發(fā)育成成熟區(qū)D.D.未受精的卵發(fā)育成植株未受精的卵發(fā)育成植株A2.2.在離體的植物器官、組織或細胞脫在離體的植物器官、組織或細胞脫分化形成愈傷組織的過程中，下列分化形成愈傷組織的過程中，下列哪一項條件是不需要的（哪一項條件是不需要的（ ）A.A.消毒滅菌消毒滅菌B.B.適宜的溫度適宜的溫度C.C.充足的光照充足的光照D.D.適宜的養(yǎng)料和激素適宜的養(yǎng)料和激素C3.3.要將胡蘿卜韌皮部細胞培養(yǎng)成完要將胡蘿卜韌皮部細胞培養(yǎng)成完整植株，不需要（整植株

17、，不需要（ ）A.A.具有完整細胞核的細胞具有完整細胞核的細胞B.B.離體狀態(tài)離體狀態(tài)C.C.導入外源基因?qū)胪庠椿駾.D.一定的營養(yǎng)物質(zhì)和激素一定的營養(yǎng)物質(zhì)和激素C4 4、植物組織培養(yǎng)形成的愈傷、植物組織培養(yǎng)形成的愈傷組織進行培養(yǎng)，組織進行培養(yǎng)， 又可以分又可以分化形成根、芽等器官，這一化形成根、芽等器官，這一過程稱為：過程稱為： A A、脫分化、脫分化 B B、去分化、去分化 C C、再分化、再分化 D D、脫分化或去分化、脫分化或去分化5 5、下列不能作為植物組織培養(yǎng)、下列不能作為植物組織培養(yǎng)的材料是的材料是A A、秋海棠的葉、秋海棠的葉 B B、馬鈴薯的塊莖、馬鈴薯的塊莖C C、成熟

18、的花粉、成熟的花粉 D D、木質(zhì)部中的導管細胞、木質(zhì)部中的導管細胞D因為不同種生物之間存因為不同種生物之間存在著在著生殖隔離生殖隔離，所以用，所以用傳統(tǒng)的有性雜交方法是傳統(tǒng)的有性雜交方法是不可能做到這一點的。不可能做到這一點的。于是，這些科學家試圖用這兩種植物的體于是，這些科學家試圖用這兩種植物的體細胞進行雜交，來實現(xiàn)這一美妙的設想。細胞進行雜交，來實現(xiàn)這一美妙的設想。三、植物體細胞雜交技術三、植物體細胞雜交技術這幅番茄這幅番茄馬鈴薯圖利馬鈴薯圖利用傳統(tǒng)有性雜交方法能用傳統(tǒng)有性雜交方法能實現(xiàn)嗎？為什么？實現(xiàn)嗎？為什么？ 19721972年卡爾森等通過兩個煙草品種之間年卡爾森等通過兩個煙草品種之

19、間原生質(zhì)體的融合，獲得了第一個體細胞雜種。原生質(zhì)體的融合，獲得了第一個體細胞雜種。19781978年梅爾徹斯年梅爾徹斯(Melchers)(Melchers)等首次獲得等首次獲得了番茄和馬鈴薯的屬間體細胞雜種了番茄和馬鈴薯的屬間體細胞雜種“PotamatoPotamato”。 目前，已得到栽培煙草與野生煙草、目前，已得到栽培煙草與野生煙草、栽培大豆與野生大豆、秈稻與野生稻、栽培大豆與野生大豆、秈稻與野生稻、秈稻與粳稻、小麥與鵝冠草等細胞雜種秈稻與粳稻、小麥與鵝冠草等細胞雜種及其后代，獲得了有價值的新品系或育及其后代，獲得了有價值的新品系或育種上有用的新材料。種上有用的新材料。 1 1你認為兩個

20、來自不同植物的體細胞完你認為兩個來自不同植物的體細胞完成融合，遇到的第一個障礙是什么？成融合，遇到的第一個障礙是什么？ 2 2有沒有一種溫和的去壁方法呢？有沒有一種溫和的去壁方法呢？ 3 3為什么兩個原生質(zhì)體能發(fā)生融合，這為什么兩個原生質(zhì)體能發(fā)生融合，這與細胞膜的什么特性有關？與細胞膜的什么特性有關？ 4 4如果兩個來源不同的原生質(zhì)體發(fā)生了如果兩個來源不同的原生質(zhì)體發(fā)生了融合，下一步該做何處理？融合，下一步該做何處理？ 5 5如何將雜種細胞培育成雜種植株？如何將雜種細胞培育成雜種植株？請思考：請思考：雜雜種種植植株株融合的融合的原生質(zhì)原生質(zhì)體體ABAB再再生生出出細細胞胞壁壁脫脫分分化化愈愈傷

21、傷組組織織再再分分化化1 1、過程、過程植物細胞的融合植物細胞的融合植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)植物細胞植物細胞A A原生質(zhì)體原生質(zhì)體B B原生質(zhì)體原生質(zhì)體A A雜種雜種細胞細胞AB去去 壁壁去去 壁壁人人工工誘誘導導方法？方法？促進融合促進融合的方法？的方法？融合融合完成完成的的標志標志植物細胞植物細胞B B二、植物體細胞雜交技術二、植物體細胞雜交技術細胞融合的基礎：細胞融合的基礎： 細胞膜的流動性細胞膜的流動性去壁去壁去壁去壁纖維素酶纖維素酶果膠酶果膠酶原原生生質(zhì)質(zhì)體體植物細胞植物細胞原生質(zhì)體融合原生質(zhì)體融合離心、離心、振動、振動、電刺激、電刺激、聚乙二聚乙二醇醇再生細胞壁再生細胞壁雜種細胞雜

22、種細胞去去分分化化愈傷組織愈傷組織雜種植株雜種植株激素激素篩選篩選等量等量激素激素再分再分化化植物體細胞雜交植物體細胞雜交2、概念 將不同種的植物體細胞，在一定條將不同種的植物體細胞，在一定條件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培件下融合成雜種細胞，并把雜種細胞培育成新的植物體的技術。育成新的植物體的技術。3、優(yōu)勢和未解決的問題 優(yōu)勢優(yōu)勢（與有性雜交方法比較）與有性雜交方法比較） ：打破了不同種：打破了不同種生物間的生殖隔離障礙，大大擴展了可用生物間的生殖隔離障礙，大大擴展了可用于雜交的親本組合范圍。于雜交的親本組合范圍。未解決的問題：未解決的問題：未能讓雜種植物按照人們未能讓雜種植物按照人們 的

23、需要表現(xiàn)出親代的優(yōu)良。的需要表現(xiàn)出親代的優(yōu)良。1.1.為什么為什么“番茄番茄馬鈴薯馬鈴薯”超級雜種植株沒超級雜種植株沒有如科學家所想像的那樣，地上長番茄、地有如科學家所想像的那樣，地上長番茄、地下結馬鈴薯？下結馬鈴薯？ 馬鈴薯馬鈴薯番茄沒有像人們預想的那樣地番茄沒有像人們預想的那樣地上長番茄、地下結馬鈴薯，主要原因是：上長番茄、地下結馬鈴薯，主要原因是：生生物基因的表達不是孤立的，它們之間是相互物基因的表達不是孤立的，它們之間是相互調(diào)控、相互影響的，調(diào)控、相互影響的，所以馬鈴薯所以馬鈴薯番茄雜交番茄雜交植株的細胞中雖然具備兩個物種的遺傳物質(zhì)，植株的細胞中雖然具備兩個物種的遺傳物質(zhì)，但這些遺傳物

24、質(zhì)的表達受到相互干擾，不能但這些遺傳物質(zhì)的表達受到相互干擾，不能再像馬鈴薯或番茄植株中的遺傳物質(zhì)一樣有再像馬鈴薯或番茄植株中的遺傳物質(zhì)一樣有序表達，雜交植株不能地上長番茄、地下結序表達，雜交植株不能地上長番茄、地下結馬鈴薯就是很自然的了。馬鈴薯就是很自然的了。2.2.自然界中有一種含有葉綠體的原生動物自然界中有一種含有葉綠體的原生動物眼蟲，眼蟲，說明植物的細胞器同樣可以在某些動物細胞中存活，說明植物的細胞器同樣可以在某些動物細胞中存活，請?zhí)接懀簞游锛毎c植物細胞之間可以實現(xiàn)雜交嗎？請?zhí)接懀簞游锛毎c植物細胞之間可以實現(xiàn)雜交嗎？如果理論上可行，請設計出具體實驗方案。如果理論上可行，請設計出具體實

25、驗方案。所采用技術的理論基礎 植物細胞工程通常采用的技 術 手 段 植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng) 植物體細胞雜交植物體細胞雜交植物細胞的全能性植物細胞的全能性小結小結：1、植物體細胞雜交尚未解決的問題有：、植物體細胞雜交尚未解決的問題有：A A、去掉細胞壁、去掉細胞壁, ,分離出有活力的原生質(zhì)分離出有活力的原生質(zhì)體體B B、將雜種細胞培育成植株、將雜種細胞培育成植株C C、讓雜種植物按照人們的需要表現(xiàn)出親、讓雜種植物按照人們的需要表現(xiàn)出親代的優(yōu)良性代的優(yōu)良性D D、尚未培育出屬間雜種植物、尚未培育出屬間雜種植物2、不能人工誘導原生質(zhì)體融合的方、不能人工誘導原生質(zhì)體融合的方法是法是A A、振動、振動 B B、電刺激、電刺激 C C、PEGPEG試劑試劑 D D、重壓、重壓3.植物細胞表現(xiàn)出全能性的必要條植物細胞表現(xiàn)出全能性的必要條件是件是 A. 給予適宜的營養(yǎng)和外界條件給予適宜的營養(yǎng)和外界條件 B. 導入其他植物細胞的基因?qū)肫渌参锛毎幕駽. 脫離母體后，給予適宜的營養(yǎng)脫離母體后，給予適宜的營養(yǎng)和外界條件和外界條件D. 將成熟篩管的細胞核移植到去將成熟篩管的細胞核移植到去核的卵細胞內(nèi)