農(nóng)殘檢測(cè)方法

1、農(nóng)殘檢測(cè)方法1. 農(nóng)殘?jiān)噭┡渲镁彌_溶液：取一包緩沖劑，加入500ml蒸餾水，溶解攪拌均勻，密閉、避光、 陰涼處保存。顯色劑：取顯色劑一瓶，加入15ml緩沖溶液溶解，4°C冰箱中保存。底物：取底物一瓶，加入15ml蒸餾水溶解，4C冰箱中保存。乙酰膽堿酯酶：取乙酰膽堿酯酶一瓶，用3ml緩沖溶液溶解，4 C冰箱中保 存。注：因農(nóng)殘?jiān)噭┥a(chǎn)廠家眾多，使用時(shí)請(qǐng)以試劑說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)！2. 樣品處理選取有代表性的蔬菜樣品，擦掉樣品表面泥土，剪成1cm見(jiàn)方碎片，取樣品 1g，放入燒杯或提取瓶中，加入5ml緩沖溶液，振蕩1mi n2mi n，倒出提取液， 靜置3min5min，待用。注意：樣品不可用水沖洗

2、， 應(yīng)擦去表面泥土等雜物后取樣。 為了保證取樣具有代 表性，葉菜一般取來(lái)自不同植株葉片的葉尖部樣本， 果菜從不同個(gè)體的表皮處取 樣。3. 對(duì)照溶液測(cè)試在提取瓶中加入 2.5ml 緩沖溶液，再加入 100ul 酶液、 100ul 顯色劑，搖勻 后于37C放置15分鐘（每批樣品的控制時(shí)間必須一致）。15分鐘后再加入100 yL 底物搖勻，此時(shí)檢液開(kāi)始顯色反應(yīng)，應(yīng)立即倒入1cm比色皿，放入儀器比色池中， 將儀器調(diào)到測(cè)量界面 , 按操作指示面板按鍵區(qū)的 “對(duì)照” 按鈕，儀器開(kāi)始做對(duì)照。 3 分鐘后儀器自動(dòng)對(duì)照完成，對(duì)照完成后將對(duì)照樣取出，保持儀器界面不變。注意：對(duì)照測(cè)試必須在第一通道進(jìn)行，對(duì)照測(cè)試A應(yīng)

3、0.3，若對(duì)照測(cè)試的結(jié)果小于以上數(shù)值時(shí)，儀器會(huì)自動(dòng)提示“對(duì)照錯(cuò)誤” ，須重新做對(duì)照，以保證 測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性。（對(duì)照測(cè)試厶A<0.3的原因：一是酶的活性不夠，二是反應(yīng) 溫度太低。 ）4. 樣品溶液測(cè)試另取干凈的提取瓶，放入 2.5ml 樣品提取液，加入 100ul 酶液、 100ul 顯色 劑，搖勻后于37C放置15分鐘（放置的時(shí)間與對(duì)照液放置的時(shí)間必須一致）。15 分鐘后再加入100卩L底物搖勻，此時(shí)檢液開(kāi)始顯色反應(yīng),應(yīng)立即倒入1cm比色皿, 放入儀器比色池中，按操作指示面板按鍵區(qū)的“測(cè)量”按鈕開(kāi)始測(cè)量， 3 分鐘后 儀器測(cè)量完成,顯示測(cè)量結(jié)果。結(jié)果以酶被抑制的程度（抑制率）表示,當(dāng)蔬

4、菜 樣品提取液對(duì)酶的抑制率50%寸，表示蔬菜中有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類(lèi) 農(nóng)藥存在,樣品為陽(yáng)性結(jié)果,陽(yáng)性結(jié)果的樣品需要重復(fù)檢驗(yàn) 2 次以上。對(duì)陽(yáng)性結(jié)果的樣品，可用其它方法進(jìn)一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。5. 說(shuō)明 蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有對(duì)酶有 影響的植物次生物質(zhì)，容易產(chǎn)生假陽(yáng)性。處理這類(lèi)樣品時(shí)，可采取整株（體）蔬 菜浸提。對(duì)一些含葉綠素較高的蔬菜，也可采取整株（體）蔬菜浸提的方法，減 少色素的干擾。甲醛檢測(cè)方法1. 試劑配置甲醛試劑（一）甲醛試劑（二）： 將甲醛試劑（二）加少量熱水溶解，再加入甲醛試劑 （二），冷卻后定容于50ml容量瓶注意：所有試劑均需避

5、光、低溫（冰箱 4C）保存！甲醛試劑（一）有腐蝕 性；配制好的甲醛試劑（二）可使用一個(gè)月。2. 樣品處理準(zhǔn)確稱(chēng)取0.2g樣品放入哈希管中，加入5滴甲醛試劑（一）和10ml蒸餾水, 混勻后蓋緊瓶蓋，放入沸水中加熱 5min，取出冷卻至室溫，用0.45卩m微孔濾 膜過(guò)濾，以除去懸浮顆粒，此為待測(cè)溶液。3. 空白取蒸餾水10ml于10ml比色管中，加入甲醛試劑（二）1 ml，混合均勻，放 入恒溫水浴鍋中50E加熱15分鐘，取出冷卻至室溫，移入1cm比色皿中，放入 儀器相應(yīng)比色池中，按操作指示面板區(qū)的“對(duì)照”鍵進(jìn)行對(duì)照，對(duì)照完成后，儀 器會(huì)自動(dòng)記錄對(duì)照結(jié)果，并在顯示屏下方顯示為“對(duì)照測(cè)量完成” 。4.

6、 測(cè)量移取處理好的樣品溶液5ml于10ml比色管中，加入蒸餾水定容至10ml，然 后再加入甲醛試劑（二）1 ml，混合均勻，放入恒溫水浴鍋中50°C加熱15分鐘， 取出冷卻至室溫，移入 1 cm 比色皿中，放入已經(jīng)做過(guò)對(duì)照的儀器通道中按操作 提示面板區(qū)的“測(cè)量”鍵進(jìn)行測(cè)量，測(cè)量完成后，儀器自動(dòng)顯示樣品中甲醛濃度 值 X（ mg/kg）。吊白塊檢測(cè)方法1. 試劑配置吊白塊試劑（一）吊白塊試劑（二）：將吊白塊試劑（二）加少量熱水溶解，再加入吊白塊 試劑（二），冷卻后定容于 50ml容量瓶注意：所有試劑均需避光、低溫（冰箱 4C）保存！吊白塊試劑（一）有腐 蝕性；配制好的吊白塊試劑（二）可

7、使用一個(gè)月。2. 樣品處理準(zhǔn)確稱(chēng)取0.2g樣品放入哈希管中，加入5滴吊白塊試劑（一）和10ml蒸餾 水，混勻后蓋緊瓶蓋，放入沸水中加熱 5min，取出冷卻至室溫，用0.45卩m微 孔濾膜過(guò)濾，以除去懸浮顆粒 , 此為待測(cè)溶液。3. 空白取10ml蒸餾水于10ml比色管中，加入吊白塊試劑（二）1 ml，混合均勻， 放入恒溫水浴鍋中50C加熱15分鐘，取出冷卻至室溫，移入1cm比色皿中，放 入儀器相應(yīng)比色池中，按操作指示面板區(qū)的“對(duì)照”鍵進(jìn)行對(duì)照，對(duì)照完成后， 儀器會(huì)自動(dòng)記錄對(duì)照結(jié)果，并在顯示屏下方顯示為“對(duì)照測(cè)量完成” 。4. 測(cè)量移取處理好的樣品溶液5ml于10ml比色管中，加入蒸餾水定容至1

8、0ml，然 后再加入吊白塊試劑（二）1 ml，混勻后放入恒溫水浴鍋中50C加熱15分鐘， 取出冷卻至室溫，移入1 cm比色皿中，放入已經(jīng)做過(guò)對(duì)照的儀器通道中按操作 提示面板區(qū)的“測(cè)量”鍵進(jìn)行測(cè)量，測(cè)量完成后，儀器自動(dòng)顯示樣品中吊白塊濃 度值 X（ mg/kg）。雙氧水檢測(cè)方法1. 試劑配置雙氧水試劑（一）雙氧水試劑（二）注意：所有試劑均需避光、低溫（冰箱4C）保存！雙氧水試劑（一）有腐蝕性，雙氧水試劑（二）有毒。2. 樣品處理準(zhǔn)確稱(chēng)取1.0g樣品放入哈希管中，加2ml雙氧水試劑（一）和6ml蒸餾水, 混勻后蓋緊瓶蓋，放入恒溫水浴鍋50 T下加熱10mi n,取出冷卻至室溫，用0.45卩m微孔濾

9、膜過(guò)濾，濾液移入10ml比色管中，力卩0.2ml雙氧水試劑（二）， 再加蒸餾水至 10ml 刻度，此為待測(cè)溶液。3. 空白向比色管中加入 2ml 雙氧水試劑（一）和 0.2ml 雙氧水試劑（二），再加蒸 餾水至10ml刻度，混勻，轉(zhuǎn)入1cm比色皿，放入儀器相應(yīng)比色池中，按操作指 示面板區(qū)的“對(duì)照”鍵進(jìn)行對(duì)照，對(duì)照完成后，儀器會(huì)自動(dòng)記錄對(duì)照結(jié)果，并在 顯示屏下方顯示為“對(duì)照測(cè)量完成” 。4. 測(cè)量向待測(cè)液中加入2ml雙氧水試劑（一）和0.2ml雙氧水試劑（二），再加蒸餾 水至10ml刻度，搖勻，轉(zhuǎn)入1cm比色皿中，放入儀器比色池中進(jìn)行測(cè)量，測(cè)量 完成后，儀器會(huì)自動(dòng)顯示樣品濃度結(jié)果 X（mg/kg

10、）。亞硝酸鹽檢測(cè)方法1. 試劑配置亞硝酸鹽試劑（一）：加少量熱蒸餾水溶解，冷卻后定容于 50mL容量瓶。 亞硝酸鹽試劑（二）：加蒸餾水溶解，定容于50mL容量瓶。亞硝酸鹽試劑（三）： 將兩種亞硝酸鹽試劑（三）溶于少量熱水中，冷卻后 定容于 50ml 容量瓶。亞硝酸鹽試劑（四）：將亞硝酸鹽試劑（四）加亞硝酸試劑（四）定容 于100mL棕色容量瓶，避光保存。亞硝酸鹽試劑（五）：加蒸餾水溶解，定容于100mL棕色容量瓶，避光保存注意：除試劑（一）需常溫保存外所有試劑均需避光、低溫（冰箱 4C）保 存！亞硝酸鹽試劑（一）容易析出，請(qǐng)用 50C左右水浴加熱1分鐘后使用。配 制好的亞硝酸鹽試劑 （五）有腐

11、蝕性， 可放置一個(gè)月左右， 溶液變綠后不能使用。2. 樣品處理準(zhǔn)確稱(chēng)取0.1g經(jīng)攪碎混勻的試樣，置于哈希管中，加入 1mL亞硝酸鹽試劑 （一）和5mL的蒸餾水，密閉后于沸水浴中加熱 15min，取出后冷卻至室溫， 然后一面轉(zhuǎn)動(dòng)一面加入 1mL 亞硝酸鹽試劑（二） ，搖勻，再加入 1mL 亞硝酸鹽 試劑（三），以沉淀蛋白質(zhì)。加水至 10ml 刻度，搖勻，放置 0.5小時(shí)，除去上層 脂肪，余液用0.45卩m微孔濾膜過(guò)濾，濾液備用。3. 對(duì)照測(cè)試取5ml蒸餾水于10ml比色管中，加入0.1mL亞硝酸鹽試劑（四），混勻，放 置5min后加入0.2ml試劑（五），混勻，靜置15分鐘，轉(zhuǎn)入1cm比色皿，放

12、入 儀器相應(yīng)比色池中，按操作指示面板區(qū)的“對(duì)照”鍵進(jìn)行對(duì)照，對(duì)照完成后，儀 器會(huì)自動(dòng)記錄對(duì)照結(jié)果，并在顯示屏下方顯示為“對(duì)照測(cè)量完成” 。4. 樣品測(cè)定取5ml待測(cè)溶液于10ml比色管中，加入0.1亞硝酸鹽試劑（四）混勻，放 置5min后加入0.2ml試劑（五），混勻，靜置15分鐘，轉(zhuǎn)入1cm比色皿，放入 已經(jīng)做過(guò)對(duì)照的儀器通道中按操作提示面板區(qū)的 “測(cè)量”鍵進(jìn)行測(cè)量， 測(cè)量完成 后，儀器自動(dòng)顯示樣品中亞硝酸鹽濃度值 X（mg/kg）。六價(jià)鉻檢測(cè)方法1. 試劑配置六價(jià)鉻試劑（一）：加蒸餾水稀釋?zhuān)ㄈ萦?00mL容量瓶六價(jià)鉻試劑（二）：加蒸餾水稀釋?zhuān)ㄈ萦?00mL容量瓶六價(jià)鉻試劑（三）：加蒸餾

13、水稀釋?zhuān)ㄈ萦?00mL容量瓶六價(jià)鉻試劑（四）：加蒸餾水稀釋?zhuān)ㄈ萦?00mL容量瓶六價(jià)鉻試劑（五）：將六價(jià)鉻試劑（五）溶解于六價(jià)鉻試劑（五）中， 加水稀釋至100ml，儲(chǔ)存于棕色瓶中置冰箱內(nèi)保存。注意：所有試劑均需避光、低溫（冰箱 4°C）保存！六價(jià)鉻試劑（一）、六 價(jià)鉻試劑（二）、六價(jià)鉻試劑（三）、六價(jià)鉻試劑（四）有腐蝕性；當(dāng)配制好的 六價(jià)鉻試劑（五）溶液色變深后不能使用。2. 樣品處理操作步驟 將待測(cè)的糧食、蔬菜、水果類(lèi)樣品洗凈晾干，碾碎，混勻備用。禽蛋、 水產(chǎn)等洗凈、晾干，取可食部分，混勻備用。 取經(jīng)過(guò)預(yù)處理的均勻樣品 1.000g 于哈希管中（敞開(kāi)），加入 2.0mL 試劑

14、 （一）純硝酸， 4.0mL 試劑（二）過(guò)氧化氫溶液，輕輕搖勻，放入亞臨 界水萃取儀中，從溫度升到140C時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí)，保持恒溫lh，同時(shí)做試 劑空白，取出哈希管待自然冷卻后，將消解液移入 l0mL 比色管中，將 哈希管用水洗凈，合并洗液于比色管中，用水稀釋至10ml刻度，混勻、待測(cè)。3. 對(duì)照測(cè)試取10ml蒸餾水于10ml比色管中，向比色管內(nèi)加入0.1ml六價(jià)鉻試劑（三） 和六價(jià)鉻試劑（四），混勻，再加入0.4ml試劑（五）搖勻，放置10min后，轉(zhuǎn) 入 1cm 比色皿，放入儀器相應(yīng)比色池中，按操作指示面板區(qū)的“對(duì)照”鍵進(jìn)行 對(duì)照，對(duì)照完成后，儀器會(huì)自動(dòng)記錄對(duì)照結(jié)果，并在顯示屏下方顯示為“對(duì)照

15、測(cè) 量完成”。4. 樣品測(cè)定取待測(cè)溶液，加蒸餾水稀釋至刻度，再向比色管內(nèi)加入0.1ml六價(jià)鉻試劑（三） 和六價(jià)鉻試劑（四） ，混勻，再加入 0.4ml 試劑（五）搖勻，放置 10min 后，轉(zhuǎn) 入 1cm 比色皿，放入已經(jīng)做過(guò)對(duì)照的儀器通道中按操作提示面板區(qū)的“測(cè)量” 鍵進(jìn)行測(cè)量，測(cè)量完成后，儀器自動(dòng)顯示樣品中六價(jià)鉻濃度值X （ mg/kg）。重金屬檢測(cè)方法1. 試劑配置重金屬試劑（一）重金屬試劑（二）重金屬試劑（三）：加少量蒸餾水溶解，定容于100ml容量瓶重金屬試劑（四）：加少量蒸餾水溶解，定容于100ml容量瓶注意：所有試劑均需避光、低溫（冰箱4C）保存！重金屬試劑（一）、 重 金屬試劑

16、（二）有腐蝕性。2. 樣品處理操作步驟 將待測(cè)的糧食、蔬菜、水果類(lèi)樣品洗凈晾干，碾碎，混勻備用。禽蛋、 水產(chǎn)等洗凈、晾干，取可食部分，混勻備用。 取經(jīng)過(guò)預(yù)處理的均勻樣品1.0g于哈希管中，加入2mL重金屬試劑（一）， 2mL 重金屬試劑（二）， 4ml 蒸餾水，輕輕搖勻，蓋緊上蓋，放入超聲波 提取儀中提取 1 0分鐘，取出哈希管待自然冷卻后， 打開(kāi)上蓋， 過(guò)濾將溶 液移入10ml比色管中，加重金屬試劑（四）調(diào)節(jié)溶液 PH=9加水至刻 度，此為待測(cè)溶液。3. 對(duì)照測(cè)試取 10ml 蒸餾水于比色管內(nèi)，加入 1ml 重金屬試劑（三），混勻，放置 10min 后，轉(zhuǎn)入 1cm 比色皿，放入儀器相應(yīng)比色

17、池中，按操作指示面板區(qū)的“對(duì)照” 鍵進(jìn)行對(duì)照，對(duì)照完成后，儀器會(huì)自動(dòng)記錄對(duì)照結(jié)果， 并在顯示屏下方顯示為 “對(duì) 照測(cè)量完成”。4. 樣品測(cè)定取待測(cè)溶液，加蒸餾水稀釋至刻度，再向比色管內(nèi)中加入 1ml 重金屬試劑 （三），混勻，放置10min后，轉(zhuǎn)入1cm比色皿，放入已經(jīng)做過(guò)對(duì)照的儀器通道 中按操作提示面板區(qū)的“測(cè)量”鍵進(jìn)行測(cè)量，測(cè)量完成后，儀器自動(dòng)顯示樣品中 重金屬濃度值 X（ mg/kg）。二氧化硫檢測(cè)方法1. 試劑配置二氧化硫試劑（一）：加蒸餾水溶解，定容于 500ml 容量瓶 二氧化硫試劑（二）：加蒸餾水溶解，定容于 50ml 容量瓶 二氧化硫試劑（三）二氧化硫試劑（四）：加蒸餾水溶解，

18、定容于 50ml 容量瓶 二氧化硫試劑（五）：將兩種二氧化硫試劑（五）混合，用熱水溶解，冷卻 后定容于 50ml 容量瓶二氧化硫試劑（六）：將二氧化硫試劑（六）溶解定容于50ml容量瓶中， 取出20ml于100ml容量瓶中，滴加二氧化硫試劑（六）混勻使溶液由紅變黃， 加水至刻度二氧化硫試劑（七）：加蒸餾水溶解，定容于 50ml 容量瓶 二氧化硫試劑（八）注意：所有試劑均需避光、低溫（冰箱 4C）保存！二氧化硫試劑（一） 有毒，二氧化硫試劑（七）、二氧化硫試劑（八）有腐蝕性。2. 樣品處理2.1 水溶性固體樣如白砂糖稱(chēng)取 1.0g ，用少量水溶解，置于 10ml 比色管中， 加入 0.4ml 二

19、氧化硫試劑（七） ，5 分鐘后加入 0.4ml 二氧化硫試劑（八） ，然后 加入 2ml 二氧化硫試劑（一） ，加水至刻度，混勻，此為待測(cè)溶液。2.2 其他固體樣如餅干、 粉絲稱(chēng)取 1.0g 研磨均勻的試樣， 以少量水潤(rùn)濕并移入 10ml比色管中，加入2ml二氧化硫試劑（一），浸泡4小時(shí)以上，若上層溶液不 澄清可加入二氧化硫試劑（四）及二氧化硫試劑（五）各 0.25ml ，混勻，過(guò)濾， 加水至刻度，此為待測(cè)溶液。2.3 液體試樣如葡萄酒可直接吸取1mL置于10ml比色管中，用少量水稀釋?zhuān)?加入 2ml 二氧化硫試劑（一） ，搖勻，最后加水至刻度，混勻，此為待測(cè)溶液。3. 空白取一支干凈的 10

20、mL 比色管，準(zhǔn)確加入二氧化硫試劑（一） 10ml， 1ml 二 氧化硫試劑（二），1ml二氧化硫試劑（三）及1ml二氧化硫試劑（六），混勻， 放置 20 分鐘后，轉(zhuǎn)入 1cm 比色皿，放入儀器相應(yīng)比色池中，按操作指示面板區(qū) 的“對(duì)照”鍵進(jìn)行對(duì)照，對(duì)照完成后，儀器會(huì)自動(dòng)記錄對(duì)照結(jié)果，并在顯示屏下 方顯示為“對(duì)照測(cè)量完成” 。4. 測(cè)量取待測(cè)溶液5ml于10mL比色管中，加入二氧化硫試劑（一）至10ml刻度, 再加入 1ml 二氧化硫試劑（二） ， 1ml 二氧化硫試劑（三）及 1ml 二氧化硫試劑 （六），混勻，放置 20 分鐘后，轉(zhuǎn)入 1cm 比色皿，放入已經(jīng)做過(guò)對(duì)照的儀器通 道中按操作提示面板區(qū)的“測(cè)量”鍵進(jìn)行測(cè)量，測(cè)