異型淋巴細胞檢查操作規(guī)程

1、1原理把血液制成細胞分布均勻的薄膜涂片，用瑞氏染液染色，根據(jù)各類異型淋巴 細胞形態(tài)特征予以分類計數(shù)，得出相對比植包分率），以觀察數(shù)量、形態(tài)和質量 的變化，對疾病有輔助診斷意義。2. 標本的采集及其注意事項2. 1靜脈采血2. 1. 1.方法：采用真空采血管含ee5m2 （3. （w.（m ,按抗凝劑與血液的 比例從肘靜脈采血，采血后輕輕顛倒混勻，室溫保存，4小時內完成檢測。2. 1. 2.注意事項2. 1. 2. l防止溶血，淤血，標本不能從輸液管中或輸液手的同側靜脈采集。2. 1. 2. 2.抗凝管瓶）應貼有標簽，并清楚注明病人姓名、病區(qū)、住院號、 wo標本應與申請單一起及時送檢，室溫保存不

2、得大于4小時。2. 1. 2. 3當肘靜脈不明顯時，可采用手背部，手腕部，？窩部和外踝部靜 脈。幼兒可采用頸外靜脈采血。2. 2.毛細血管采血2. 2. 1.方法2. 2. 1. 1采血部位：成人左手中指或無名指尖內側為宜，半歲以上兒童 以中指為好，半歲以下嬰幼兒通常自拇指或足在底部外側緣采血。2. 2. 1. 2.輕輕按摩采血部位，使其自然充血，用759乙醇棉球消毒局部皮膚待 干。2. 2. 1. 3.緊捏刺血部位，用無菌采血針穿刺，取血動作應迅速，深度約 2-nn）以稍加擠壓血液能流出為宜。2. 2. 1. 4.用干棉球擦去第一滴血，按實驗需要依次采血。2. 2. 1. 5.采血完畢，用干

3、棉球壓住傷口片刻。2. 2. 2.注意事項2. 2. 2. 1.末梢采血要避開凍瘡、發(fā)炎、水腫等部位，以避免影響結果。2. 2. 2. 2.皮膚消毒一定要待乙醇揮發(fā)干燥后采血，否則流出的血液1四處擴散 而不成滴。2. 2. 2. 3.嚴格按照無菌技術操作，保證一人一針一管，杜絕交叉感染。3. 試劑與儀器3. 1試劑:瑞氏染液3. 1. 1瑞氏染液配制：瑞氏染料830卵或lg甲醇閔500ml或600ml先稱干燥事先放入溫箱干燥過夜）瑞氏染料放置乳缽內，用乳棒輕輕敲碎染料 成粉末，再行研磨至聽不到研芝麻聲即呈細粉末，加少許甘油或甲醇溶解研磨， 使染料在乳缸內顯“一面鏡”光澤，而無染料粉粒沉著。再加

4、較多量甲醇研磨呈一面鏡光亮，靜置片刻，將上層液體倒入一淸潔儲存瓶 內最好用甲醇空瓶），再加甲醇研磨,重復數(shù)次，至乳缽內染料及甲醇用完為止， 搖勻，密封瓶口。存室溫暗處，儲存愈久，則染料溶解、分解就越好，一般儲存 3個月以上為佳。3. 1. 2.緩沖液：3. 1. 2. 1.緩沖液作用：染色對氫離子濃度是十分敏感的，據(jù)觀察ph值的改 變，可使蛋白質與染料形成的化合物重新離解。緩沖液須保持一定的ph使染色 穩(wěn)定，pbs的ph般在6.0. 8,偏堿性染料可與緩沖液中酸基起中和作用， 偏酸性染料則與緩沖液中的堿基起中和作用，使ph恒定。3. 1. 2. 2.緩沖液配制（ph6. o. 8,弱酸性）：k

5、h2km 死水）.64gna2hpd 無水）.56glh2o 斷鮮）至 1000ml3. 2.儀器:顯微鏡、松柏油4. 操作4. 1.采血后推制厚薄適宜的血膜片，血膜應呈舌狀，頭、體、尾清晰可分。4. 2.推好的血膜在空氣屮晃動，以促使快干。天氣寒冷或潮濕時，應于37c 溫箱中保溫促干，以免細胞變形縮小。4. 3.染色：采用瑞氏染色法染色平置玻片于染色架上，滴加染液15滴，使其迅速蓋滿血朕，約lmin后，滴 加緩沖液5-10滴，輕輕搖動玻片或對準血片吹氣，于染液充分混合，5-10min 后用水沖去染液，待干。4. 4.選擇涂片的體尾交界處染色良好的區(qū)域，在油鏡下計數(shù)100個白細胞，按其形態(tài)特征

6、進行分類計數(shù)，求出異淋所占比值百分率）。5異型淋巴細胞分型downey將異型淋巴細胞分為三型：5. 1. i型飽沫型或漿細胞型）細胞中等大小，細胞多呈現(xiàn)圓形或部分不規(guī) 則形或阿米巴型，胞質嗜堿性強，呈深藍色，含有大小不等的空泡或呈泡沫狀, 無顆?；蛴猩兕w粒，胞核偏位，呈橢圓形、腎形或分葉形，染色質粗糙，呈粗網 狀或成堆排列。5. 2. ii型不規(guī)則型或單核細胞樣型）細胞胞體較1型大，形態(tài)不規(guī)則，胞質 量多，呈淺灰藍色，但靠胞膜邊緣處較深染且不整齊，無空泡，可有少數(shù)天青胺 藍顆粒，胞核呈圓形、橢圓形或不規(guī)則形，染色質較i型細致，亦呈網狀。5.3.m型 幼稚型或幼淋巴細胞樣型）細胞形態(tài)不規(guī)則，胞質呈藍色，可有 分布較均勻的小空泡，一般無顆粒，胞核圓形或卵圓形，可見核仁12個，染 色質細致、均勻，呈