免疫檢驗質(zhì)控

1、第十九章第十九章臨床免疫檢驗的質(zhì)量保證臨床免疫檢驗的質(zhì)量保證2 免疫檢驗自動化儀器免疫檢驗自動化儀器 復(fù)習(xí)考查題復(fù)習(xí)考查題l1、化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的檢測原理、化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的檢測原理l2、酶聯(lián)發(fā)光免疫分析儀的檢測原理、酶聯(lián)發(fā)光免疫分析儀的檢測原理l3、電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的檢測原理、電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀的檢測原理3 答案答案l1、直接化學(xué)發(fā)光免疫分析儀直接化學(xué)發(fā)光免疫分析儀是一種用發(fā)光劑直接標(biāo)記抗體是一種用發(fā)光劑直接標(biāo)記抗體或抗原，以磁性微粒為固相載體的一種自動化免疫分析儀器，或抗原，以磁性微粒為固相載體的一種自動化免疫分析儀器，直接（吖啶酯標(biāo)記）發(fā)光只需加入氧化劑和直接（吖啶酯標(biāo)記）發(fā)光

2、只需加入氧化劑和pH糾正液，不糾正液，不需要酶催化。需要酶催化。l2、酶聯(lián)發(fā)光免疫分析儀酶聯(lián)發(fā)光免疫分析儀是用參與催化某一化學(xué)發(fā)光或熒光是用參與催化某一化學(xué)發(fā)光或熒光反應(yīng)的酶來標(biāo)記抗原或抗體，在抗原抗體反應(yīng)后，加入底物反應(yīng)的酶來標(biāo)記抗原或抗體，在抗原抗體反應(yīng)后，加入底物（發(fā)光劑），由酶催化和分解底物發(fā)光，通過光信號的強弱（發(fā)光劑），由酶催化和分解底物發(fā)光，通過光信號的強弱來進(jìn)行定量。常用的標(biāo)記酶有辣根過氧化物酶（來進(jìn)行定量。常用的標(biāo)記酶有辣根過氧化物酶（HRP）和堿）和堿性磷酸酶性磷酸酶(ALP)，常用的發(fā)光底物有魯米諾、，常用的發(fā)光底物有魯米諾、AMPPD和和4-MUP等。等。l3、電化學(xué)發(fā)

3、光免疫分析儀電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀是采用電化學(xué)發(fā)光技術(shù)、生物素是采用電化學(xué)發(fā)光技術(shù)、生物素放大技術(shù)，以磁性微粒為固相載體，用三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記抗原放大技術(shù)，以磁性微粒為固相載體，用三聯(lián)吡啶釕標(biāo)記抗原或抗體，三丙胺或抗體，三丙胺( TPA)為電子供體，而設(shè)計的一種自動化分為電子供體，而設(shè)計的一種自動化分析儀。析儀。4 內(nèi)容內(nèi)容第一節(jié)第一節(jié) 分析前質(zhì)量控制分析前質(zhì)量控制第二節(jié)第二節(jié) 分析中質(zhì)量控制分析中質(zhì)量控制第三節(jié)第三節(jié) 分析前質(zhì)量控制分析前質(zhì)量控制5概述概述l質(zhì)量保證質(zhì)量保證 是臨床實驗室為證明提供給患者臨床診是臨床實驗室為證明提供給患者臨床診療或臨床實驗研究數(shù)據(jù)的有效性而采取的一系列措療或臨床實驗

4、研究數(shù)據(jù)的有效性而采取的一系列措施，涵蓋了實驗室內(nèi)進(jìn)行檢測前后的所有活動施，涵蓋了實驗室內(nèi)進(jìn)行檢測前后的所有活動。l臨床免疫學(xué)檢驗既有手工操作、定性或半定量的試臨床免疫學(xué)檢驗既有手工操作、定性或半定量的試驗，也有以各種新技術(shù)、新方法為基礎(chǔ)的自動化儀驗，也有以各種新技術(shù)、新方法為基礎(chǔ)的自動化儀器定量試驗。由于它們流程復(fù)雜，影響結(jié)果的因素器定量試驗。由于它們流程復(fù)雜，影響結(jié)果的因素很多，包括從樣本采集前患者準(zhǔn)備到檢驗報告的審很多，包括從樣本采集前患者準(zhǔn)備到檢驗報告的審核、發(fā)送以及與臨床進(jìn)行溝通等流程的各個方面。核、發(fā)送以及與臨床進(jìn)行溝通等流程的各個方面。通常，將這個完整的檢驗流程分為通常，將這個完

5、整的檢驗流程分為分析前、分析中、分析前、分析中、分析后三個過程分析后三個過程，對這三個過程實行質(zhì)量控制的側(cè)，對這三個過程實行質(zhì)量控制的側(cè)重點各不相同。重點各不相同。6 第一節(jié)第一節(jié) 分析前質(zhì)量控制分析前質(zhì)量控制l分析前是指從臨床醫(yī)生開出醫(yī)囑起，按時間順序分析前是指從臨床醫(yī)生開出醫(yī)囑起，按時間順序的步驟，包括提出檢驗要求、患者準(zhǔn)備、原始標(biāo)的步驟，包括提出檢驗要求、患者準(zhǔn)備、原始標(biāo)本采集、運送到實驗室并在實驗室內(nèi)傳送，至分本采集、運送到實驗室并在實驗室內(nèi)傳送，至分析檢驗程序啟動前的過程。分析前質(zhì)量管理是決析檢驗程序啟動前的過程。分析前質(zhì)量管理是決定檢驗結(jié)果正確、可靠的前提，涉及包括檢驗人定檢驗結(jié)果

6、正確、可靠的前提，涉及包括檢驗人員、臨床醫(yī)師、護(hù)士、護(hù)工以及受檢者本人等各員、臨床醫(yī)師、護(hù)士、護(hù)工以及受檢者本人等各部門，任何環(huán)節(jié)的疏漏或不規(guī)范均可導(dǎo)致檢驗結(jié)部門，任何環(huán)節(jié)的疏漏或不規(guī)范均可導(dǎo)致檢驗結(jié)果的誤差。果的誤差。l一、檢驗項目的申請一、檢驗項目的申請l 檢驗申請是檢驗流程的重要環(huán)節(jié)，其信息規(guī)范檢驗申請是檢驗流程的重要環(huán)節(jié)，其信息規(guī)范性與完整性對后續(xù)檢驗流程十分重要。申請有紙性與完整性對后續(xù)檢驗流程十分重要。申請有紙質(zhì)和電子形式或兩者同時使用等方式。質(zhì)和電子形式或兩者同時使用等方式。7l（一）申請單格式和填寫（一）申請單格式和填寫l 按照國家相關(guān)規(guī)定，檢驗申請單基本信息應(yīng)至少包按照國家相

7、關(guān)規(guī)定，檢驗申請單基本信息應(yīng)至少包括：受檢者唯一性標(biāo)識，如姓名、性別、年齡、科括：受檢者唯一性標(biāo)識，如姓名、性別、年齡、科別、病房、門診號住院號等；臨床診斷或疑似診別、病房、門診號住院號等；臨床診斷或疑似診斷；標(biāo)本類型；檢驗項目；送檢日期（年、月、日）斷；標(biāo)本類型；檢驗項目；送檢日期（年、月、日）及標(biāo)本采集時間與標(biāo)本接受時間；申請者唯一標(biāo)識及標(biāo)本采集時間與標(biāo)本接受時間；申請者唯一標(biāo)識（醫(yī)師簽字）；收費記賬以及檢驗號等。檢驗申（醫(yī)師簽字）；收費記賬以及檢驗號等。檢驗申請單的填寫內(nèi)容要規(guī)范、完整，以保證為后續(xù)檢驗請單的填寫內(nèi)容要規(guī)范、完整，以保證為后續(xù)檢驗流程提供必需的信息。流程提供必需的信息。l

8、 （二）檢驗項目的申請原則（二）檢驗項目的申請原則l 臨床醫(yī)生可根據(jù)就診者的疾病診療需要而選擇合適臨床醫(yī)生可根據(jù)就診者的疾病診療需要而選擇合適的檢驗項目，檢驗人員也應(yīng)根據(jù)檢驗項目的檢測性的檢驗項目，檢驗人員也應(yīng)根據(jù)檢驗項目的檢測性能，與臨床醫(yī)生定期溝通，以保證檢驗項目的有效能，與臨床醫(yī)生定期溝通，以保證檢驗項目的有效性、及時性、經(jīng)濟(jì)性。性、及時性、經(jīng)濟(jì)性。8l 二、患者準(zhǔn)備二、患者準(zhǔn)備l 醫(yī)護(hù)人員、樣本采集人員、檢驗技術(shù)人員應(yīng)了解采醫(yī)護(hù)人員、樣本采集人員、檢驗技術(shù)人員應(yīng)了解采集前患者的狀態(tài)要求和影響結(jié)果的非疾病性因素，集前患者的狀態(tài)要求和影響結(jié)果的非疾病性因素，并將相關(guān)的要求和注意事項通過合適

9、的途徑告知患并將相關(guān)的要求和注意事項通過合適的途徑告知患者，以獲得患者的配合，保證所采集標(biāo)本能客觀真者，以獲得患者的配合，保證所采集標(biāo)本能客觀真實反映當(dāng)前的疾病狀態(tài)。實反映當(dāng)前的疾病狀態(tài)。 三、標(biāo)本的采集、傳送與保存三、標(biāo)本的采集、傳送與保存l （一）標(biāo)本的采集（一）標(biāo)本的采集l 對用于激素和治療藥物測定的血清標(biāo)本的收集，要對用于激素和治療藥物測定的血清標(biāo)本的收集，要注意收集時間及體位對測定結(jié)果產(chǎn)生的影響。如可注意收集時間及體位對測定結(jié)果產(chǎn)生的影響。如可的松在早晨的松在早晨4:006:00之間，會有一峰值出現(xiàn)；生之間，會有一峰值出現(xiàn)；生長激素、促黃體激素長激素、促黃體激素 (LH)和促卵泡激素

10、和促卵泡激素(FSH)均以均以陣發(fā)性方式釋放；當(dāng)從臥位變?yōu)檎玖⑽粫r，血清中陣發(fā)性方式釋放；當(dāng)從臥位變?yōu)檎玖⑽粫r，血清中腎素活性將出現(xiàn)明顯增高；治療藥物的監(jiān)測，應(yīng)根腎素活性將出現(xiàn)明顯增高；治療藥物的監(jiān)測，應(yīng)根據(jù)藥代動力學(xué)選擇服藥后的最適時間抽血檢測。據(jù)藥代動力學(xué)選擇服藥后的最適時間抽血檢測。9l用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物和特種用于傳染性病原體的抗原和抗體、腫瘤標(biāo)志物和特種蛋白等檢測的血清標(biāo)本的收集則無時間和體位等的影蛋白等檢測的血清標(biāo)本的收集則無時間和體位等的影響。采樣量應(yīng)根據(jù)檢測的需要而定，首先必須滿足檢響。采樣量應(yīng)根據(jù)檢測的需要而定，首先必須滿足檢測需要，但不過分采集。標(biāo)本應(yīng)采

11、集在密閉的容器中，測需要，但不過分采集。標(biāo)本應(yīng)采集在密閉的容器中，以方便后續(xù)的傳送。每個標(biāo)本應(yīng)有唯一性的標(biāo)志，保以方便后續(xù)的傳送。每個標(biāo)本應(yīng)有唯一性的標(biāo)志，保證標(biāo)本與檢驗申請單相對應(yīng)。很多臨床免疫檢測項目證標(biāo)本與檢驗申請單相對應(yīng)。很多臨床免疫檢測項目不能當(dāng)天完成，實驗室經(jīng)常通過不能當(dāng)天完成，實驗室經(jīng)常通過“分單分單”的方式將標(biāo)的方式將標(biāo)本和尚未完成的檢測項目從現(xiàn)有申請單中分出，在這本和尚未完成的檢測項目從現(xiàn)有申請單中分出，在這種情況下，一定要保證分單標(biāo)本有唯一性的標(biāo)志，并種情況下，一定要保證分單標(biāo)本有唯一性的標(biāo)志，并保證能溯源到原始標(biāo)本。保證能溯源到原始標(biāo)本。10l（二）標(biāo)本的傳送及保存（二）

12、標(biāo)本的傳送及保存l 標(biāo)本自采集后到送達(dá)檢驗部門的過程即標(biāo)本標(biāo)本自采集后到送達(dá)檢驗部門的過程即標(biāo)本的傳送。標(biāo)本傳送過程中應(yīng)保證標(biāo)本的密閉、的傳送。標(biāo)本傳送過程中應(yīng)保證標(biāo)本的密閉、防震、防漏、防污染。運送過程盡可能快捷，防震、防漏、防污染。運送過程盡可能快捷，特殊標(biāo)本如胰島素、特殊標(biāo)本如胰島素、C肽等測定時，應(yīng)盡量置肽等測定時，應(yīng)盡量置冰盒中送檢。隨著輔助技術(shù)的發(fā)展，為保證標(biāo)冰盒中送檢。隨著輔助技術(shù)的發(fā)展，為保證標(biāo)本傳送的可靠、及時，有些實驗室選擇安裝了本傳送的可靠、及時，有些實驗室選擇安裝了氣動（真空）或履帶式標(biāo)本智能化傳送系統(tǒng)，氣動（真空）或履帶式標(biāo)本智能化傳送系統(tǒng)，可方便地實現(xiàn)標(biāo)本在病區(qū)、門

13、診、急診和實驗可方便地實現(xiàn)標(biāo)本在病區(qū)、門診、急診和實驗室間的傳送。室間的傳送。11四、影響分析前質(zhì)量的因素四、影響分析前質(zhì)量的因素l由于免疫檢測的被測量對象通常在體內(nèi)的含量由于免疫檢測的被測量對象通常在體內(nèi)的含量很低，因此，影響這些對象檢測結(jié)果的因素也很低，因此，影響這些對象檢測結(jié)果的因素也很多。此外，由于分析前質(zhì)量管理的特點，如很多。此外，由于分析前質(zhì)量管理的特點，如很多因素是實驗室不可控制的，需要臨床醫(yī)生很多因素是實驗室不可控制的，需要臨床醫(yī)生護(hù)士的參與和配合，有些質(zhì)量缺陷不能被及時護(hù)士的參與和配合，有些質(zhì)量缺陷不能被及時發(fā)現(xiàn)，即便發(fā)現(xiàn)問題，有些責(zé)任也無法落實到發(fā)現(xiàn)，即便發(fā)現(xiàn)問題，有些責(zé)任

14、也無法落實到人。因此，建立完整的分析前質(zhì)量管理體系是人。因此，建立完整的分析前質(zhì)量管理體系是確保分析前質(zhì)量的有力保證。確保分析前質(zhì)量的有力保證。12 第二節(jié)第二節(jié) 分析中的質(zhì)量控制分析中的質(zhì)量控制l分析中階段是指從標(biāo)本前處理到標(biāo)本檢測完成，分析中階段是指從標(biāo)本前處理到標(biāo)本檢測完成，形成報告結(jié)果的過程，包括標(biāo)本前處理、標(biāo)本形成報告結(jié)果的過程，包括標(biāo)本前處理、標(biāo)本的檢測，還包括檢測體系的建立、人員培訓(xùn)、的檢測，還包括檢測體系的建立、人員培訓(xùn)、檢測系統(tǒng)的選擇和性能確認(rèn)、室內(nèi)質(zhì)量控制和檢測系統(tǒng)的選擇和性能確認(rèn)、室內(nèi)質(zhì)量控制和室間質(zhì)量控制、實驗室間比對等內(nèi)容，是決定室間質(zhì)量控制、實驗室間比對等內(nèi)容，是決

15、定檢驗結(jié)果正確、可靠的關(guān)鍵，也是臨床免疫檢檢驗結(jié)果正確、可靠的關(guān)鍵，也是臨床免疫檢測質(zhì)量保證的核心。測質(zhì)量保證的核心。13一、工作人員培訓(xùn)一、工作人員培訓(xùn)l臨床免疫檢驗的項目廣泛，檢測技術(shù)眾多，既臨床免疫檢驗的項目廣泛，檢測技術(shù)眾多，既包括手工操作，又包括自動化儀器操作，要求包括手工操作，又包括自動化儀器操作，要求工作人員具有一定的技術(shù)知識和經(jīng)驗。特別是工作人員具有一定的技術(shù)知識和經(jīng)驗。特別是采用手工操作的檢測項目，不同的工作人員的采用手工操作的檢測項目，不同的工作人員的操作及結(jié)果判斷的主觀性往往導(dǎo)致檢測結(jié)果的操作及結(jié)果判斷的主觀性往往導(dǎo)致檢測結(jié)果的差異。因此，為了使工作人員具備進(jìn)行臨床免差異

16、。因此，為了使工作人員具備進(jìn)行臨床免疫檢驗的相關(guān)技能，根據(jù)實際工作的需要，建疫檢驗的相關(guān)技能，根據(jù)實際工作的需要，建立定期培訓(xùn)計劃，保證工作人員的技能滿足臨立定期培訓(xùn)計劃，保證工作人員的技能滿足臨床免疫檢驗的需要。床免疫檢驗的需要。 14二、檢測系統(tǒng)性能的確認(rèn)二、檢測系統(tǒng)性能的確認(rèn)l檢測系統(tǒng)定義檢測系統(tǒng)定義- 是指完成一個檢驗項目的測定所是指完成一個檢驗項目的測定所涉及的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、耗材涉及的儀器、試劑、校準(zhǔn)品、耗材等等的組合。的組合。15l臨床免疫檢驗中使用的檢測系統(tǒng)的好壞，將直接臨床免疫檢驗中使用的檢測系統(tǒng)的好壞，將直接影響檢測結(jié)果的質(zhì)量。在將確定的檢測系統(tǒng)應(yīng)用影響檢測結(jié)果的質(zhì)量。

17、在將確定的檢測系統(tǒng)應(yīng)用到臨床前，需要通過評估來判斷該檢測系統(tǒng)的性到臨床前，需要通過評估來判斷該檢測系統(tǒng)的性能是否符合廠家申明，是否符合臨床要求。臨床能是否符合廠家申明，是否符合臨床要求。臨床免疫檢測系統(tǒng)性能的評估內(nèi)容至少包括免疫檢測系統(tǒng)性能的評估內(nèi)容至少包括精密度精密度（批內(nèi)、批間）、批內(nèi)、批間）、準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度、分析測量范圍、臨床、分析測量范圍、臨床可報告范圍、參考區(qū)間驗證等內(nèi)容。必要時，針可報告范圍、參考區(qū)間驗證等內(nèi)容。必要時，針對某些特殊項目，如促甲狀腺激素對某些特殊項目，如促甲狀腺激素(TSH)、肌鈣、肌鈣蛋白蛋白I(Tnl)等，還需要確定檢測系統(tǒng)的等，還需要確定檢測系統(tǒng)的分析靈敏度。分

18、析靈敏度。16 三、標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程三、標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(standard operation procedure，SOP)的建立的建立l 在免疫測定中，試劑準(zhǔn)備、加樣、溫育、洗板、顯在免疫測定中，試劑準(zhǔn)備、加樣、溫育、洗板、顯色（或測定信號激發(fā)）和測定等每一步驟均可能對測色（或測定信號激發(fā)）和測定等每一步驟均可能對測定結(jié)果產(chǎn)生較大影響。確保檢測結(jié)果可靠性首先考慮定結(jié)果產(chǎn)生較大影響。確保檢測結(jié)果可靠性首先考慮的是改善測定精密度，因此必須著重在最不精密的步的是改善測定精密度，因此必須著重在最不精密的步驟上。為此，需要將每個操作步驟標(biāo)準(zhǔn)化并形成驟上。為此，需要將每個操作步驟標(biāo)準(zhǔn)化并形成SOP。所有的實驗技

19、術(shù)人員在進(jìn)行相關(guān)測定時，必須嚴(yán)格按所有的實驗技術(shù)人員在進(jìn)行相關(guān)測定時，必須嚴(yán)格按相應(yīng)的相應(yīng)的SOP進(jìn)行操作。根據(jù)衛(wèi)生部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行操作。根據(jù)衛(wèi)生部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，SOP內(nèi)容應(yīng)包括實驗原理或檢驗?zāi)康?、?biāo)本種類及收集要內(nèi)容應(yīng)包括實驗原理或檢驗?zāi)康?、?biāo)本種類及收集要求、操作步驟（試劑準(zhǔn)備、加樣、孵育時間、孵育方求、操作步驟（試劑準(zhǔn)備、加樣、孵育時間、孵育方式、顯色時間等）、計算方法、參考范圍、臨床意義、式、顯色時間等）、計算方法、參考范圍、臨床意義、操作注意事項、參考資料等內(nèi)容。對于儀器的標(biāo)準(zhǔn)化操作注意事項、參考資料等內(nèi)容。對于儀器的標(biāo)準(zhǔn)化操作程序也有相應(yīng)的要求。操作程序也有相應(yīng)的要求。17四、標(biāo)準(zhǔn)曲線

20、的校準(zhǔn)與標(biāo)準(zhǔn)品值的溯源四、標(biāo)準(zhǔn)曲線的校準(zhǔn)與標(biāo)準(zhǔn)品值的溯源l（一）標(biāo)準(zhǔn)曲線的校準(zhǔn)（一）標(biāo)準(zhǔn)曲線的校準(zhǔn)l 所謂標(biāo)準(zhǔn)曲線的校準(zhǔn)，是指將標(biāo)定了分析物濃度的定所謂標(biāo)準(zhǔn)曲線的校準(zhǔn)，是指將標(biāo)定了分析物濃度的定標(biāo)品在檢測系統(tǒng)上檢測并獲得分析物濃度高低與檢測設(shè)標(biāo)品在檢測系統(tǒng)上檢測并獲得分析物濃度高低與檢測設(shè)備信號強弱之間關(guān)系的步驟。進(jìn)行校準(zhǔn)的目的是為了實備信號強弱之間關(guān)系的步驟。進(jìn)行校準(zhǔn)的目的是為了實現(xiàn)待檢物質(zhì)的定量檢測，因此，校準(zhǔn)是針對定量檢測設(shè)現(xiàn)待檢物質(zhì)的定量檢測，因此，校準(zhǔn)是針對定量檢測設(shè)備而言的，定性和半定量檢測不存在校準(zhǔn)的概念。備而言的，定性和半定量檢測不存在校準(zhǔn)的概念。l 在下列情況時，需要對標(biāo)準(zhǔn)曲

21、線進(jìn)行校正：在下列情況時，需要對標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行校正：標(biāo)準(zhǔn)曲標(biāo)準(zhǔn)曲線過期；線過期；在新批號試劑使用前；在新批號試劑使用前；儀器相關(guān)部位經(jīng)過儀器相關(guān)部位經(jīng)過較大維修、配件更換或緩沖液等試劑的升級。值得一提較大維修、配件更換或緩沖液等試劑的升級。值得一提的是，室內(nèi)質(zhì)量控制結(jié)果超出范圍時，并不需要在第一的是，室內(nèi)質(zhì)量控制結(jié)果超出范圍時，并不需要在第一時間進(jìn)行校準(zhǔn)，只有在排除其他可能，并確認(rèn)可能是由時間進(jìn)行校準(zhǔn)，只有在排除其他可能，并確認(rèn)可能是由于標(biāo)準(zhǔn)曲線漂移而導(dǎo)致的失控的情況下才需要重新校準(zhǔn)。于標(biāo)準(zhǔn)曲線漂移而導(dǎo)致的失控的情況下才需要重新校準(zhǔn)。18（二）標(biāo)準(zhǔn)品值的溯源（二）標(biāo)準(zhǔn)品值的溯源l標(biāo)準(zhǔn)品的特性應(yīng)該

22、清楚明確，理想的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)該是純品，但如特標(biāo)準(zhǔn)品的特性應(yīng)該清楚明確，理想的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)該是純品，但如特定分析物質(zhì)具有同種型不均一性，則相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品也應(yīng)具備這種定分析物質(zhì)具有同種型不均一性，則相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)品也應(yīng)具備這種特點。這種要求通常難以滿足，因為在純化過程中，使用生化方特點。這種要求通常難以滿足，因為在純化過程中，使用生化方法去除雜質(zhì)會引起特定物質(zhì)同種型的少量丟失。而使用免疫親和法去除雜質(zhì)會引起特定物質(zhì)同種型的少量丟失。而使用免疫親和層析純化，則由于洗滌過程常需在低層析純化，則由于洗滌過程常需在低pH變性條件下進(jìn)行，有可能變性條件下進(jìn)行，有可能會引起某些蛋白的不可逆修飾?；蛑亟M蛋白，一是表達(dá)產(chǎn)物仍

23、會引起某些蛋白的不可逆修飾?；蛑亟M蛋白，一是表達(dá)產(chǎn)物仍需純化和糖基化，二是糖基化可能與天然蛋白有所不同。目前，需純化和糖基化，二是糖基化可能與天然蛋白有所不同。目前，真正具有國際參考物質(zhì)的免疫測定項目并不多，國家臨床實驗室真正具有國際參考物質(zhì)的免疫測定項目并不多，國家臨床實驗室標(biāo)準(zhǔn)化委員會標(biāo)準(zhǔn)化委員會(National Committee of Clinical Laboratory Standardisation，NCCLS)以及美國和加拿大臨床化學(xué)協(xié)會以及美國和加拿大臨床化學(xué)協(xié)會(American Societies for Clinical Chemistry and Canadian

24、 Societies for ClinicalChemistry and Canadian，AACC和和CSCC)等正致力于免疫測定的標(biāo)準(zhǔn)化工作，這些組織也制備一些等正致力于免疫測定的標(biāo)準(zhǔn)化工作，這些組織也制備一些標(biāo)準(zhǔn)品。標(biāo)準(zhǔn)品。19理想的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)具備的特征理想的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)具備的特征1標(biāo)準(zhǔn)品的基質(zhì)通常為含蛋白的緩沖溶液，對測標(biāo)準(zhǔn)品的基質(zhì)通常為含蛋白的緩沖溶液，對測定結(jié)果無明顯影響。定結(jié)果無明顯影響。 l 2對標(biāo)準(zhǔn)品的濃度一般無特殊要求，在方法的對標(biāo)準(zhǔn)品的濃度一般無特殊要求，在方法的測定范圍內(nèi)即可。測定范圍內(nèi)即可。 l3保持穩(wěn)定性，在一定時間內(nèi)，在規(guī)定的保存保持穩(wěn)定性，在一定時間內(nèi)，在規(guī)定的保存條

25、件下應(yīng)有良好的穩(wěn)定性。條件下應(yīng)有良好的穩(wěn)定性。 l4無己知的傳染危險性，對已知的經(jīng)血液傳播無己知的傳染危險性，對已知的經(jīng)血液傳播的病原體如的病原體如HIV、HCV和和HBV等必須作滅活處理。等必須作滅活處理。 l5靶值或預(yù)期結(jié)果已定。靶值或預(yù)期結(jié)果已定。202122應(yīng)選用制造商提供了溯源性應(yīng)選用制造商提供了溯源性的產(chǎn)品的產(chǎn)品l為保證臨床免疫檢測結(jié)果的可比性，針對已建立國際標(biāo)準(zhǔn)為保證臨床免疫檢測結(jié)果的可比性，針對已建立國際標(biāo)準(zhǔn)的檢測項目，應(yīng)要求所選用檢測系統(tǒng)的制造商提供溯源性的檢測項目，應(yīng)要求所選用檢測系統(tǒng)的制造商提供溯源性文件，即證明通過該檢測系統(tǒng)的檢測結(jié)果，通過校準(zhǔn)品可文件，即證明通過該檢測

26、系統(tǒng)的檢測結(jié)果，通過校準(zhǔn)品可逐級溯源到國際參考物質(zhì)逐級溯源到國際參考物質(zhì)(international reference material)。通常國際參考物質(zhì)為一級標(biāo)準(zhǔn)品，國家標(biāo)準(zhǔn)品。通常國際參考物質(zhì)為一級標(biāo)準(zhǔn)品，國家標(biāo)準(zhǔn)品則為二級標(biāo)準(zhǔn)，可溯源至一級標(biāo)準(zhǔn)，二級標(biāo)準(zhǔn)可用來維持則為二級標(biāo)準(zhǔn)，可溯源至一級標(biāo)準(zhǔn)，二級標(biāo)準(zhǔn)可用來維持校準(zhǔn)。三級標(biāo)準(zhǔn)品則通過與二級標(biāo)準(zhǔn)的比對而來，為通常校準(zhǔn)。三級標(biāo)準(zhǔn)品則通過與二級標(biāo)準(zhǔn)的比對而來，為通常使用的商品校準(zhǔn)品。使用的商品校準(zhǔn)品。 l從一級標(biāo)準(zhǔn)的值傳遞到最終試驗所使用的校準(zhǔn)物的過程通從一級標(biāo)準(zhǔn)的值傳遞到最終試驗所使用的校準(zhǔn)物的過程通常由幾個校準(zhǔn)步驟組成，包括標(biāo)準(zhǔn)品和測

27、定方法、緩沖液常由幾個校準(zhǔn)步驟組成，包括標(biāo)準(zhǔn)品和測定方法、緩沖液及其基質(zhì)、稀釋的控制、最終結(jié)果的統(tǒng)計學(xué)評價和質(zhì)量控及其基質(zhì)、稀釋的控制、最終結(jié)果的統(tǒng)計學(xué)評價和質(zhì)量控制等。不同的分析物如血清蛋白、多肽激素或與載體蛋白制等。不同的分析物如血清蛋白、多肽激素或與載體蛋白結(jié)合的低分子量激素等其校準(zhǔn)過程有所不同。結(jié)合的低分子量激素等其校準(zhǔn)過程有所不同。l標(biāo)準(zhǔn)品值的溯源模式圖見圖標(biāo)準(zhǔn)品值的溯源模式圖見圖19-1。23 校準(zhǔn)品值溯源模式圖校準(zhǔn)品值溯源模式圖24 室內(nèi)質(zhì)量控制（室內(nèi)質(zhì)量控制（Internal Quality Internal Quality Control,IQCControl,IQC) )

28、由實驗室人員采取一定的方法和步由實驗室人員采取一定的方法和步驟，連續(xù)評價本實驗室工作的可靠性程度，旨在監(jiān)驟，連續(xù)評價本實驗室工作的可靠性程度，旨在監(jiān)測和控制本室常規(guī)工作的精密度，提高本室常規(guī)工測和控制本室常規(guī)工作的精密度，提高本室常規(guī)工作中批內(nèi)、批間樣本檢驗的一致性。并確定當(dāng)批的作中批內(nèi)、批間樣本檢驗的一致性。并確定當(dāng)批的測定結(jié)果是否可靠，可否發(fā)出檢驗報告。測定結(jié)果是否可靠，可否發(fā)出檢驗報告。 免疫定量測定免疫定量測定IQC的方法，包括的方法，包括(一一)、 (二二)、 (三三)、 (四四)、 (五五)、（六）內(nèi)容略。、（六）內(nèi)容略。五、定量免疫測定的室內(nèi)質(zhì)量控制五、定量免疫測定的室內(nèi)質(zhì)量控制

29、25六、半定量及定性免疫測定的六、半定量及定性免疫測定的IQCl半定量及定性免疫檢驗方法較多，主要有沉淀試驗、凝集半定量及定性免疫檢驗方法較多，主要有沉淀試驗、凝集試驗、熒光免疫試驗、化學(xué)發(fā)光免疫試驗和酶免疫試驗等，試驗、熒光免疫試驗、化學(xué)發(fā)光免疫試驗和酶免疫試驗等，測定結(jié)果的判斷為反應(yīng)性或非反應(yīng)性、陰性或陽性。測定結(jié)果的判斷為反應(yīng)性或非反應(yīng)性、陰性或陽性。此類此類測定的質(zhì)量控制要點是測定下限，因此應(yīng)選擇靶抗原或抗測定的質(zhì)量控制要點是測定下限，因此應(yīng)選擇靶抗原或抗體濃度接近試劑盒或方法的測定下限的質(zhì)量控制品進(jìn)行室體濃度接近試劑盒或方法的測定下限的質(zhì)量控制品進(jìn)行室內(nèi)質(zhì)量控制，并與臨床標(biāo)本的測定同

30、時進(jìn)行，以判斷檢測內(nèi)質(zhì)量控制，并與臨床標(biāo)本的測定同時進(jìn)行，以判斷檢測方法的有效性方法的有效性。如自身抗體檢測的熒光免疫試驗，每次測。如自身抗體檢測的熒光免疫試驗，每次測定都應(yīng)至少帶一個已知的弱陽性對照，從而有助于判斷臨定都應(yīng)至少帶一個已知的弱陽性對照，從而有助于判斷臨床標(biāo)本的檢測結(jié)果是否有效。此外，根據(jù)所用方法的特點，床標(biāo)本的檢測結(jié)果是否有效。此外，根據(jù)所用方法的特點，如酶免疫試驗中雙抗夾心模式中的一步法，還須用高濃度如酶免疫試驗中雙抗夾心模式中的一步法，還須用高濃度質(zhì)量控制品進(jìn)行質(zhì)量控制，以防止前帶現(xiàn)象的發(fā)生。至于質(zhì)量控制品進(jìn)行質(zhì)量控制，以防止前帶現(xiàn)象的發(fā)生。至于陰性質(zhì)量控制，對于定性免疫檢

31、驗來說，也是必需的。陰性質(zhì)量控制，對于定性免疫檢驗來說，也是必需的。l 半定量及定性的免疫測定室內(nèi)質(zhì)量控制結(jié)果，由于結(jié)果半定量及定性的免疫測定室內(nèi)質(zhì)量控制結(jié)果，由于結(jié)果判讀、記錄容易，一般不需要像定量免疫測定項目一樣使判讀、記錄容易，一般不需要像定量免疫測定項目一樣使用質(zhì)量控制圖進(jìn)行判斷。用質(zhì)量控制圖進(jìn)行判斷。26 七、七、 室間質(zhì)量評價室間質(zhì)量評價（External Quality Assessment, EQAExternal Quality Assessment, EQA）l為客觀地比較某一實驗室的測定結(jié)果與靶值的差異，為客觀地比較某一實驗室的測定結(jié)果與靶值的差異，由外單位機(jī)構(gòu)，采取一定

32、的方法，連續(xù)、客觀地評由外單位機(jī)構(gòu)，采取一定的方法，連續(xù)、客觀地評價實驗室的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)誤差并校正結(jié)果，使各實驗價實驗室的結(jié)果，發(fā)現(xiàn)誤差并校正結(jié)果，使各實驗室之間的結(jié)果具有可比性室之間的結(jié)果具有可比性。是對實驗室操作和實驗。是對實驗室操作和實驗方法的回顧性評價方法的回顧性評價。l能力比對（能力比對（ proficiency testingproficiency testing，PTPT ）將多個樣）將多個樣品定期送往實驗室組的成員進(jìn)行分析和品定期送往實驗室組的成員進(jìn)行分析和/ /或鑒定，將或鑒定，將每一實驗室的結(jié)果與同組內(nèi)其他實驗室的結(jié)果或目每一實驗室的結(jié)果與同組內(nèi)其他實驗室的結(jié)果或目標(biāo)值比較，

33、并將比較結(jié)果報告給參與的實驗室。標(biāo)值比較，并將比較結(jié)果報告給參與的實驗室。l室間質(zhì)量評價內(nèi)容，室間質(zhì)量評價內(nèi)容，包括包括(一一)、 (二二)、 (三三) 略略27八、實驗室間比對和人員比對八、實驗室間比對和人員比對l實驗室間比對實驗室間比對是按照預(yù)先規(guī)定的條件，由兩個或是按照預(yù)先規(guī)定的條件，由兩個或多個實驗室對相同或類似檢測物品（通常是新鮮多個實驗室對相同或類似檢測物品（通常是新鮮患者標(biāo)本）進(jìn)行檢測。相對于室間質(zhì)量評價，實患者標(biāo)本）進(jìn)行檢測。相對于室間質(zhì)量評價，實驗室間比對可彌補實驗室因室間質(zhì)量評價項目涵驗室間比對可彌補實驗室因室間質(zhì)量評價項目涵蓋因素，或因成本問題不能參加的缺陷，也可消蓋因素

34、，或因成本問題不能參加的缺陷，也可消除或減少室間質(zhì)量控制品的基質(zhì)效應(yīng)，還可評估除或減少室間質(zhì)量控制品的基質(zhì)效應(yīng)，還可評估實驗室分析前的誤差，特別適用于室間質(zhì)量評價實驗室分析前的誤差，特別適用于室間質(zhì)量評價不包括的項目。通常用于與上級或同級醫(yī)院實驗不包括的項目。通常用于與上級或同級醫(yī)院實驗室間的比對，以評估該檢測項目結(jié)果的可靠性，室間的比對，以評估該檢測項目結(jié)果的可靠性，判斷依據(jù)同室間質(zhì)量評價結(jié)果的評價依據(jù)。判斷依據(jù)同室間質(zhì)量評價結(jié)果的評價依據(jù)。 28l人員比對人員比對是指實驗室為發(fā)現(xiàn)及糾正不同工作人員是指實驗室為發(fā)現(xiàn)及糾正不同工作人員從事相同檢測項目而導(dǎo)致結(jié)果存在不可接受的偏從事相同檢測項目而

35、導(dǎo)致結(jié)果存在不可接受的偏倚而采取的措施。由于不同的實驗室人員可能從倚而采取的措施。由于不同的實驗室人員可能從事同一項目的檢測，特別是對于手工檢測項目，事同一項目的檢測，特別是對于手工檢測項目，實驗室必須定期對人員間進(jìn)行比對，以評估該檢實驗室必須定期對人員間進(jìn)行比對，以評估該檢測項目結(jié)果的可靠性，判斷依據(jù)同室間質(zhì)量評價測項目結(jié)果的可靠性，判斷依據(jù)同室間質(zhì)量評價結(jié)果的評價依據(jù)。結(jié)果的評價依據(jù)。29九、實驗室環(huán)境、設(shè)施及設(shè)備的控九、實驗室環(huán)境、設(shè)施及設(shè)備的控制制l處于良好運行狀態(tài)的臨床實驗室，應(yīng)有充分的處于良好運行狀態(tài)的臨床實驗室，應(yīng)有充分的空間、良好的照明和空調(diào)設(shè)備；實驗室儀器設(shè)空間、良好的照明和

36、空調(diào)設(shè)備；實驗室儀器設(shè)備應(yīng)保養(yǎng)良好；臨床免疫檢測項目檢測過程中備應(yīng)保養(yǎng)良好；臨床免疫檢測項目檢測過程中涉及的關(guān)鍵設(shè)備，包括但不限于離心機(jī)、加樣涉及的關(guān)鍵設(shè)備，包括但不限于離心機(jī)、加樣器、溫度計、孵育箱、酶標(biāo)讀數(shù)儀、各種全自器、溫度計、孵育箱、酶標(biāo)讀數(shù)儀、各種全自動檢測設(shè)備等，均應(yīng)由有資質(zhì)的單位或授權(quán)者動檢測設(shè)備等，均應(yīng)由有資質(zhì)的單位或授權(quán)者進(jìn)行定期校準(zhǔn)，以保證使用中的有效性。進(jìn)行定期校準(zhǔn)，以保證使用中的有效性。30 第三節(jié)第三節(jié) 分析后質(zhì)量控制分析后質(zhì)量控制l分析后的質(zhì)量控制是指對獲得檢驗結(jié)果后的主要分析后的質(zhì)量控制是指對獲得檢驗結(jié)果后的主要過程進(jìn)行質(zhì)量控制，主要包括檢驗結(jié)果的審核和過程進(jìn)行質(zhì)

37、量控制，主要包括檢驗結(jié)果的審核和發(fā)放、檢驗后標(biāo)本的保存與處理及為患者和醫(yī)護(hù)發(fā)放、檢驗后標(biāo)本的保存與處理及為患者和醫(yī)護(hù)提供咨詢服務(wù)等。提供咨詢服務(wù)等。l l 一、檢驗結(jié)果的審核和發(fā)放一、檢驗結(jié)果的審核和發(fā)放 l檢驗結(jié)果的審核是分析后質(zhì)量控制中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，檢驗結(jié)果的審核是分析后質(zhì)量控制中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，只有審核合格后的檢驗報告才能發(fā)送給臨床。檢只有審核合格后的檢驗報告才能發(fā)送給臨床。檢驗報告的報告方式應(yīng)符合規(guī)定，并被臨床接受，驗報告的報告方式應(yīng)符合規(guī)定，并被臨床接受，檢測項目名稱及結(jié)果描述的應(yīng)規(guī)范。檢測項目名稱及結(jié)果描述的應(yīng)規(guī)范。 31l（一）報告審核和發(fā)放制度（一）報告審核和發(fā)放制度 l實驗室應(yīng)當(dāng)制

38、定報告審核和發(fā)放制度。報告審核者由具實驗室應(yīng)當(dāng)制定報告審核和發(fā)放制度。報告審核者由具有中級職稱以上的工作人員承擔(dān)，審核的內(nèi)容應(yīng)包括：有中級職稱以上的工作人員承擔(dān)，審核的內(nèi)容應(yīng)包括：檢驗申請的檢測項目完成是否完整，檢驗結(jié)果的格式是檢驗申請的檢測項目完成是否完整，檢驗結(jié)果的格式是否正確，報告單內(nèi)容是否正確，檢驗過程中的室內(nèi)質(zhì)量否正確，報告單內(nèi)容是否正確，檢驗過程中的室內(nèi)質(zhì)量控制是否在控等。有經(jīng)驗的復(fù)核工作人員還應(yīng)根據(jù)患者控制是否在控等。有經(jīng)驗的復(fù)核工作人員還應(yīng)根據(jù)患者提供的臨床診斷等信息，評估檢測結(jié)果與患者病情的符提供的臨床診斷等信息，評估檢測結(jié)果與患者病情的符合性。如遇到懷疑或明顯不符合的情況，

39、應(yīng)對本次檢測合性。如遇到懷疑或明顯不符合的情況，應(yīng)對本次檢測結(jié)果進(jìn)行認(rèn)真復(fù)核，避免可能存在的問題，可通過及時結(jié)果進(jìn)行認(rèn)真復(fù)核，避免可能存在的問題，可通過及時與臨床醫(yī)護(hù)、患者的溝通來獲得更多的信息。這就要求與臨床醫(yī)護(hù)、患者的溝通來獲得更多的信息。這就要求審核人員具有一定的臨床基礎(chǔ)知識。審核完成的檢驗報審核人員具有一定的臨床基礎(chǔ)知識。審核完成的檢驗報告應(yīng)按與臨床約定的時間和有效的方式送達(dá)臨床，危急告應(yīng)按與臨床約定的時間和有效的方式送達(dá)臨床，危急值的發(fā)送應(yīng)根據(jù)相關(guān)法規(guī)、規(guī)定及時報告。值的發(fā)送應(yīng)根據(jù)相關(guān)法規(guī)、規(guī)定及時報告。32l（二）自動審核系統(tǒng)（二）自動審核系統(tǒng)l 隨著實驗室信息系統(tǒng)隨著實驗室信息系

40、統(tǒng)(laboratory information system)功能的不斷發(fā)展，有條件的實驗室可根據(jù)實功能的不斷發(fā)展，有條件的實驗室可根據(jù)實際情況發(fā)展報告自動審核系統(tǒng)際情況發(fā)展報告自動審核系統(tǒng)(results auto-verification system)，通過設(shè)定一定的規(guī)則，如與，通過設(shè)定一定的規(guī)則，如與歷史結(jié)果的比對、與參考范圍比對等方式實現(xiàn)部分檢歷史結(jié)果的比對、與參考范圍比對等方式實現(xiàn)部分檢測結(jié)果的自動發(fā)送，降低審核者的勞動強度，保證審測結(jié)果的自動發(fā)送，降低審核者的勞動強度，保證審核者將精力放在真正需要復(fù)核的報告中。需要注意的核者將精力放在真正需要復(fù)核的報告中。需要注意的是，設(shè)置的自

41、動審核規(guī)則在應(yīng)用前，應(yīng)使用既往數(shù)據(jù)是，設(shè)置的自動審核規(guī)則在應(yīng)用前，應(yīng)使用既往數(shù)據(jù)進(jìn)行審核，要求與人工審核的符合率為進(jìn)行審核，要求與人工審核的符合率為95%以上。以上。33二、檢驗后標(biāo)本的保存與處理二、檢驗后標(biāo)本的保存與處理l（一）檢驗后標(biāo)本的保存（一）檢驗后標(biāo)本的保存 l檢驗后標(biāo)本保存的目的是為了必要的復(fù)查。對于檢驗后標(biāo)本保存的目的是為了必要的復(fù)查。對于臨床免疫學(xué)檢驗后的標(biāo)本保存時間和保存方法臨床免疫學(xué)檢驗后的標(biāo)本保存時間和保存方法（室溫、（室溫、4冰箱、冰箱、- 20 0C低溫冷藏等）應(yīng)根據(jù)低溫冷藏等）應(yīng)根據(jù)工作需要（相關(guān)法規(guī)的規(guī)定，如工作需要（相關(guān)法規(guī)的規(guī)定，如HIV抗體檢測后抗體檢測后標(biāo)

42、本）及分析物的穩(wěn)定性而定。檢驗后標(biāo)本的保標(biāo)本）及分析物的穩(wěn)定性而定。檢驗后標(biāo)本的保存必須盡可能的保證分析物的穩(wěn)定性，以保證復(fù)存必須盡可能的保證分析物的穩(wěn)定性，以保證復(fù)檢中獲得的結(jié)果與新鮮標(biāo)本的結(jié)果一致。因此，檢中獲得的結(jié)果與新鮮標(biāo)本的結(jié)果一致。因此，在選擇保存條件時，實驗室應(yīng)對各種保存條件對在選擇保存條件時，實驗室應(yīng)對各種保存條件對主要分析物穩(wěn)定性的影響進(jìn)行確認(rèn)，必要時應(yīng)分主要分析物穩(wěn)定性的影響進(jìn)行確認(rèn)，必要時應(yīng)分離血清、血漿、細(xì)胞成分等進(jìn)行分別保存。離血清、血漿、細(xì)胞成分等進(jìn)行分別保存。 34l（二）檢驗后標(biāo)本的檢索（二）檢驗后標(biāo)本的檢索 各實驗室保存的條件不盡各實驗室保存的條件不盡相同，有

43、些保存在冰箱中，有些保存在冷藏庫中，對相同，有些保存在冰箱中，有些保存在冷藏庫中，對于標(biāo)本量特別大的實驗室，檢索一個保存標(biāo)本往往需于標(biāo)本量特別大的實驗室，檢索一個保存標(biāo)本往往需要很長時間。為便于保存標(biāo)本在需要時方便的獲得，要很長時間。為便于保存標(biāo)本在需要時方便的獲得，通常要求按照標(biāo)本的唯一標(biāo)志作為檢索條件。目前，通常要求按照標(biāo)本的唯一標(biāo)志作為檢索條件。目前，有些實驗室已借助于實驗室自動化系統(tǒng)或自動樣本前有些實驗室已借助于實驗室自動化系統(tǒng)或自動樣本前處理系統(tǒng)對所有檢測后標(biāo)本進(jìn)行重新排列，并由信息處理系統(tǒng)對所有檢測后標(biāo)本進(jìn)行重新排列，并由信息系統(tǒng)自動記錄標(biāo)本和保存位置的對應(yīng)關(guān)系，需要時即系統(tǒng)自動記

44、錄標(biāo)本和保存位置的對應(yīng)關(guān)系，需要時即可查詢獲得相關(guān)信息?？刹樵儷@得相關(guān)信息。 l（三）檢驗后標(biāo)本的處理（三）檢驗后標(biāo)本的處理 檢驗后標(biāo)本的處理應(yīng)根據(jù)檢驗后標(biāo)本的處理應(yīng)根據(jù)有關(guān)法律法規(guī)對二級生物實驗室的要求，按照潛在生有關(guān)法律法規(guī)對二級生物實驗室的要求，按照潛在生物危害的物品處理方式進(jìn)行處理。物危害的物品處理方式進(jìn)行處理。35 三、咨詢?nèi)?、咨詢l（一）咨詢服務(wù)的提供（一）咨詢服務(wù)的提供 實驗室應(yīng)主動為患者和臨實驗室應(yīng)主動為患者和臨床醫(yī)護(hù)提供檢驗結(jié)果的解釋和咨詢服務(wù)，以使檢驗床醫(yī)護(hù)提供檢驗結(jié)果的解釋和咨詢服務(wù)，以使檢驗結(jié)果在診斷、治療中發(fā)揮更大的作用。為臨床提供結(jié)果在診斷、治療中發(fā)揮更大的作用。為

45、臨床提供咨詢服務(wù)的工作人員不僅限于檢驗醫(yī)師，也包括具咨詢服務(wù)的工作人員不僅限于檢驗醫(yī)師，也包括具有豐富工作經(jīng)驗的技術(shù)人員。在提供咨詢服務(wù)時，有豐富工作經(jīng)驗的技術(shù)人員。在提供咨詢服務(wù)時，實驗室工作人員應(yīng)對由于檢測系統(tǒng)、疾病的自然發(fā)實驗室工作人員應(yīng)對由于檢測系統(tǒng)、疾病的自然發(fā)展過程、標(biāo)本的質(zhì)量等因素造成檢測結(jié)果的影響做展過程、標(biāo)本的質(zhì)量等因素造成檢測結(jié)果的影響做出解釋，并對由于參考范圍、臨界值、醫(yī)學(xué)決定水出解釋，并對由于參考范圍、臨界值、醫(yī)學(xué)決定水平不同而對檢測結(jié)果的影響做出解釋。由于免疫測平不同而對檢測結(jié)果的影響做出解釋。由于免疫測定對象相對比較微量，且可隨生理活動而出現(xiàn)較大定對象相對比較微量，

46、且可隨生理活動而出現(xiàn)較大范圍的變動，因此向臨床提供咨詢服務(wù)的優(yōu)劣將直范圍的變動，因此向臨床提供咨詢服務(wù)的優(yōu)劣將直接影響到臨床醫(yī)護(hù)人員對免疫測定結(jié)果的認(rèn)同。接影響到臨床醫(yī)護(hù)人員對免疫測定結(jié)果的認(rèn)同。 36l（二）與臨床的溝通（二）與臨床的溝通 實驗室應(yīng)建立與臨床定期實驗室應(yīng)建立與臨床定期溝通的機(jī)制，了解臨床對于實驗室的需求、投訴溝通的機(jī)制，了解臨床對于實驗室的需求、投訴及意見反饋等，并對工作方式和流程及提供服務(wù)及意見反饋等，并對工作方式和流程及提供服務(wù)的質(zhì)量進(jìn)行評估，通過持續(xù)性改進(jìn)措施，提高檢的質(zhì)量進(jìn)行評估，通過持續(xù)性改進(jìn)措施，提高檢測和服務(wù)質(zhì)量。通過與臨床的溝通，實驗室還可測和服務(wù)質(zhì)量。通過與

47、臨床的溝通，實驗室還可推廣檢驗新項目和新方法，并向臨床說明實驗室推廣檢驗新項目和新方法，并向臨床說明實驗室免疫檢測項目檢測結(jié)果的不確定性及檢測方法的免疫檢測項目檢測結(jié)果的不確定性及檢測方法的局限性。因此，加強臨床溝通，是做好實驗室工局限性。因此，加強臨床溝通，是做好實驗室工作、更好地為臨床服務(wù)的基礎(chǔ)，也是實施全面質(zhì)作、更好地為臨床服務(wù)的基礎(chǔ)，也是實施全面質(zhì)量管理的目的。量管理的目的。 37本章小結(jié)本章小結(jié)l臨床免疫檢驗的質(zhì)量保證是臨床實驗室為臨床免疫檢驗的質(zhì)量保證是臨床實驗室為證明提供給患者臨床診療或臨床實驗研究證明提供給患者臨床診療或臨床實驗研究的數(shù)據(jù)的有效性而采取的一系列的措施。的數(shù)據(jù)的有

48、效性而采取的一系列的措施。免疫檢驗的步驟很多，根據(jù)樣本流程，可免疫檢驗的步驟很多，根據(jù)樣本流程，可分為分析前、分析中、分析后流程，各流分為分析前、分析中、分析后流程，各流程實行質(zhì)量保證的內(nèi)容不同。程實行質(zhì)量保證的內(nèi)容不同。38l分析前質(zhì)量管理分析前質(zhì)量管理 由于分析前質(zhì)量管理的特由于分析前質(zhì)量管理的特點，很多因素是實驗室不可控制的，需要臨點，很多因素是實驗室不可控制的，需要臨床醫(yī)護(hù)的參與和配合。因此，建立完整的分床醫(yī)護(hù)的參與和配合。因此，建立完整的分析前質(zhì)量管理體系是確保分析前質(zhì)量的有力析前質(zhì)量管理體系是確保分析前質(zhì)量的有力保證。保證。39l分析中質(zhì)量控制分析中質(zhì)量控制 是實現(xiàn)質(zhì)量保證的重要內(nèi)

49、容，而室內(nèi)質(zhì)量是實現(xiàn)質(zhì)量保證的重要內(nèi)容，而室內(nèi)質(zhì)量控制和室間質(zhì)量評估是重中之重?？刂坪褪议g質(zhì)量評估是重中之重。IQC的概念已覆蓋了測定的概念已覆蓋了測定分析前的儀器設(shè)備狀態(tài)、試劑方法的選擇、分析前的儀器設(shè)備狀態(tài)、試劑方法的選擇、SOP的制定及人的制定及人員培訓(xùn)和測定分析后評價等各個與質(zhì)量有關(guān)的方面。采用統(tǒng)員培訓(xùn)和測定分析后評價等各個與質(zhì)量有關(guān)的方面。采用統(tǒng)計學(xué)方法評價臨床免疫檢驗的結(jié)果，是臨床免疫檢驗計學(xué)方法評價臨床免疫檢驗的結(jié)果，是臨床免疫檢驗IQC的的中心環(huán)節(jié)，其伴隨著每一次常規(guī)檢測的始終，決定了當(dāng)批測中心環(huán)節(jié)，其伴隨著每一次常規(guī)檢測的始終，決定了當(dāng)批測定的有效性，應(yīng)根據(jù)自身實驗室的特點選

50、用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計質(zhì)量定的有效性，應(yīng)根據(jù)自身實驗室的特點選用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計質(zhì)量控制方法?？刂品椒?。EQA作為作為IQC的補充，在臨床免疫檢驗的質(zhì)量保的補充，在臨床免疫檢驗的質(zhì)量保證中是一個不可或缺的部分，但免疫檢驗在臨床指標(biāo)測定中證中是一個不可或缺的部分，但免疫檢驗在臨床指標(biāo)測定中的應(yīng)用極為廣泛，有很多缺乏參考方法，難以校準(zhǔn)，再加上的應(yīng)用極為廣泛，有很多缺乏參考方法，難以校準(zhǔn)，再加上檢測技術(shù)多種多樣，不同方法和試劑間的偏差仍然是不同實檢測技術(shù)多種多樣，不同方法和試劑間的偏差仍然是不同實驗室測定結(jié)果間缺乏一致的直接原因。因此，驗室測定結(jié)果間缺乏一致的直接原因。因此，EQA的實施，的實施，將有力地促進(jìn)臨床免

51、疫檢驗的標(biāo)準(zhǔn)化。對于一些特殊的臨床將有力地促進(jìn)臨床免疫檢驗的標(biāo)準(zhǔn)化。對于一些特殊的臨床免疫檢測，實驗室還應(yīng)定期進(jìn)行實驗室間比對和人員比對工免疫檢測，實驗室還應(yīng)定期進(jìn)行實驗室間比對和人員比對工作。作。40l分析后質(zhì)量控制分析后質(zhì)量控制 l重點在于與臨床醫(yī)護(hù)建立定期的溝通機(jī)制。能重點在于與臨床醫(yī)護(hù)建立定期的溝通機(jī)制。能影響臨床免疫檢測的很多因素常常不在實驗室影響臨床免疫檢測的很多因素常常不在實驗室的直接控制下，但實驗室有責(zé)任為患者或臨床的直接控制下，但實驗室有責(zé)任為患者或臨床醫(yī)生如何正確地使用實驗室測定結(jié)果提供明確醫(yī)生如何正確地使用實驗室測定結(jié)果提供明確的建議，并在適當(dāng)?shù)那闆r下，對測定結(jié)果做出的建

52、議，并在適當(dāng)?shù)那闆r下，對測定結(jié)果做出解釋。解釋。41l臨床免疫檢驗實驗室的質(zhì)量保證是實驗室的核心內(nèi)容，臨床免疫檢驗實驗室的質(zhì)量保證是實驗室的核心內(nèi)容，要做好質(zhì)量保證，必須要了解影響實驗室測定質(zhì)量的要做好質(zhì)量保證，必須要了解影響實驗室測定質(zhì)量的實驗室過程的所有步驟，實驗室測定過程中最薄弱的實驗室過程的所有步驟，實驗室測定過程中最薄弱的環(huán)節(jié)將直接影響整個實驗室的檢驗質(zhì)量。實驗室只有環(huán)節(jié)將直接影響整個實驗室的檢驗質(zhì)量。實驗室只有建立完整的質(zhì)量保證體系，并嚴(yán)格實行，才能從根本建立完整的質(zhì)量保證體系，并嚴(yán)格實行，才能從根本上保證臨床免疫檢測的質(zhì)量符合臨床的需要?，F(xiàn)代的上保證臨床免疫檢測的質(zhì)量符合臨床的需

53、要。現(xiàn)代的免疫檢驗實驗室已經(jīng)進(jìn)入到信息時代，建立實驗室質(zhì)免疫檢驗實驗室已經(jīng)進(jìn)入到信息時代，建立實驗室質(zhì)量管理的信息系統(tǒng)，將使實驗室硬件和軟件的管理變量管理的信息系統(tǒng)，將使實驗室硬件和軟件的管理變得簡單易行，并更容易與臨床建立起有機(jī)的聯(lián)系，從得簡單易行，并更容易與臨床建立起有機(jī)的聯(lián)系，從而樹立實驗室質(zhì)量管理的新理念。而樹立實驗室質(zhì)量管理的新理念。42l 完完43臨床免疫檢驗質(zhì)量保證章節(jié)臨床免疫檢驗質(zhì)量保證章節(jié) 考查題考查題l1、臨床免疫檢驗質(zhì)量保證的主要內(nèi)容包括哪、臨床免疫檢驗質(zhì)量保證的主要內(nèi)容包括哪幾個？幾個？l2、你認(rèn)為臨床免疫檢驗質(zhì)量保證的主要內(nèi)容、你認(rèn)為臨床免疫檢驗質(zhì)量保證的主要內(nèi)容中主

54、要與臨床醫(yī)生、護(hù)士或患者有關(guān)的是什么中主要與臨床醫(yī)生、護(hù)士或患者有關(guān)的是什么環(huán)節(jié)？主要與檢驗人員相關(guān)的又是什么環(huán)節(jié)？環(huán)節(jié)？主要與檢驗人員相關(guān)的又是什么環(huán)節(jié)？ 3、在與檢驗人員主要相關(guān)的環(huán)節(jié)中你認(rèn)為最、在與檢驗人員主要相關(guān)的環(huán)節(jié)中你認(rèn)為最重要的是那幾點？重要的是那幾點？4445第七節(jié)第七節(jié) 影響免疫實驗結(jié)果的影響免疫實驗結(jié)果的標(biāo)本因素標(biāo)本因素46l標(biāo)本類型及采集容器要求標(biāo)本類型及采集容器要求l標(biāo)本采集時間及患者準(zhǔn)備要求標(biāo)本采集時間及患者準(zhǔn)備要求l內(nèi)源性干擾因素內(nèi)源性干擾因素l外源性干擾因素外源性干擾因素一、標(biāo)本的正確收集及處理一、標(biāo)本的正確收集及處理47l最常用的標(biāo)本類型：最常用的標(biāo)本類型：血液

55、（血清、血漿血液（血清、血漿和全血）、唾液或尿液和全血）、唾液或尿液 。l采集容器最好為一次性無菌密閉容器。采集容器最好為一次性無菌密閉容器。建議采用建議采用真空采血管及蝶形針具，真空采血管及蝶形針具，以免以免直接接觸血液。直接接觸血液。標(biāo)本類型及采集容器要求標(biāo)本類型及采集容器要求48二、標(biāo)本采集時間及患者準(zhǔn)備影響因素二、標(biāo)本采集時間及患者準(zhǔn)備影響因素 l激素和治療藥物激素和治療藥物l感染性病原體抗原、抗體感染性病原體抗原、抗體l腫瘤標(biāo)志物腫瘤標(biāo)志物l特定蛋白特定蛋白 后三者是主要的內(nèi)源性干擾，猶應(yīng)重視。后三者是主要的內(nèi)源性干擾，猶應(yīng)重視。49三、內(nèi)源性干擾因素三、內(nèi)源性干擾因素 l有：類風(fēng)濕

56、因子、補體、異嗜性抗體、治療性抗體、有：類風(fēng)濕因子、補體、異嗜性抗體、治療性抗體、自身抗體、溶菌酶、自身抗體、溶菌酶、冷凝集素冷凝集素、磷脂、藥物小分子、磷脂、藥物小分子、總蛋白濃度等?？偟鞍诐舛鹊?。l影響：它們可引起免疫實驗的假陽性或假陰性結(jié)果。影響：它們可引起免疫實驗的假陽性或假陰性結(jié)果。50l稀釋標(biāo)本稀釋標(biāo)本l改變標(biāo)記抗體改變標(biāo)記抗體l用變性用變性IgGIgG預(yù)先封閉標(biāo)本中預(yù)先封閉標(biāo)本中RFRFl測抗原測抗原, ,可先加入還原劑如可先加入還原劑如2-2-巰基乙醇去除巰基乙醇去除RFRFl使用特異的雞抗體使用特異的雞抗體IgYIgY作為標(biāo)記或固相抗體作為標(biāo)記或固相抗體類風(fēng)濕因子干擾的排除類

57、風(fēng)濕因子干擾的排除51補體干擾補體干擾l固相抗體和標(biāo)記抗體的分子可因環(huán)境、固相抗體和標(biāo)記抗體的分子可因環(huán)境、PHPH等因素改變等因素改變而發(fā)生變構(gòu)，使其而發(fā)生變構(gòu)，使其FcFc段的補體段的補體C1qC1q結(jié)合位點被暴露出結(jié)合位點被暴露出來。這時如存在補體，它就成為一個中介物將固相抗來。這時如存在補體，它就成為一個中介物將固相抗體和標(biāo)記抗體二者交聯(lián)起來，從而出現(xiàn)假陽性結(jié)果。體和標(biāo)記抗體二者交聯(lián)起來，從而出現(xiàn)假陽性結(jié)果。l變構(gòu)的固相抗體、標(biāo)記抗體等也會因為活化補體的結(jié)變構(gòu)的固相抗體、標(biāo)記抗體等也會因為活化補體的結(jié)合，封閉抗體的抗原表位結(jié)合能力，而引起假陰性結(jié)合，封閉抗體的抗原表位結(jié)合能力，而引起假

58、陰性結(jié)果或結(jié)果偏低。果或結(jié)果偏低。 52補體干擾的排除補體干擾的排除l56 30min56 30min加熱可使標(biāo)本中補體加熱可使標(biāo)本中補體C1qC1q滅滅活活l使用特異的雞抗體使用特異的雞抗體IgYIgY作為標(biāo)記或固相作為標(biāo)記或固相抗體抗體53異嗜性抗體的干擾異嗜性抗體的干擾天然的異嗜性抗體（天然的異嗜性抗體（IgGIgG）可分為兩類）可分為兩類: :l可結(jié)合于小鼠、大鼠、馬、牛和山羊可結(jié)合于小鼠、大鼠、馬、牛和山羊IgGIgG的的FabFab區(qū)域區(qū)域l可結(jié)合于小鼠、馬、牛和可結(jié)合于小鼠、馬、牛和兔兔IgGIgG的的FCFC區(qū)表位，區(qū)表位，通過交聯(lián)固相和標(biāo)記的單抗或多抗而出現(xiàn)假陽通過交聯(lián)固相和

59、標(biāo)記的單抗或多抗而出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。性反應(yīng)。54異嗜性抗體干擾的排除異嗜性抗體干擾的排除l使用特異的兔使用特異的兔F F(ab)2(ab)2片段片段作為固相或標(biāo)記抗體。作為固相或標(biāo)記抗體。l在標(biāo)本或標(biāo)本稀釋液中加入過量的動物在標(biāo)本或標(biāo)本稀釋液中加入過量的動物IgIg，封閉可能存在，封閉可能存在的異嗜性抗體。但加入量不足或亞類不同時無效。的異嗜性抗體。但加入量不足或亞類不同時無效。l使用靶特異的非使用靶特異的非IgIg親和蛋白（親和蛋白（AffibodyAffibody）替代固相或標(biāo)記）替代固相或標(biāo)記抗體之一。采用噬菌體展示技術(shù)展示來自單個抗體之一。采用噬菌體展示技術(shù)展示來自單個金黃色葡萄金黃色葡

60、萄球菌球菌A A蛋白（蛋白（SPASPA）聯(lián)合文庫的人聯(lián)合文庫的人IgAIgA結(jié)合親和蛋白，用于結(jié)合親和蛋白，用于IgAIgA的測定，不受異嗜性抗體的影響。的測定，不受異嗜性抗體的影響。l使用特異的雞抗體作為固相和測定抗體。使用特異的雞抗體作為固相和測定抗體。55抗鼠抗鼠Ig Ig 抗體的干擾抗體的干擾l抗鼠抗體對使用鼠源性單克隆抗體的免疫測定可抗鼠抗體對使用鼠源性單克隆抗體的免疫測定可產(chǎn)生假陽性結(jié)果，產(chǎn)生假陽性結(jié)果，l排除：排除：l使用特異的抗體使用特異的抗體F(ab)2片段作為固相或標(biāo)記抗體。片段作為固相或標(biāo)記抗體。l在標(biāo)本或標(biāo)本稀釋液中加入過量的鼠在標(biāo)本或標(biāo)本稀釋液中加入過量的鼠Ig，封