中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋NGAL

1、中性粒細胞明膠的相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白之巴公共開 創(chuàng)作時間：二O二一年七月二十九日一、臨床適應(yīng)癥布景情況中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(Neutrophil gelatinase-associated lipocalin,NGAL )又稱人脂質(zhì)運載蛋白 2(lipocalin2,Ln2)或噬鐵蛋白(siderocalin) ,是人脂質(zhì)運載蛋白家族中的一個新成員。近年來，NGA昨為一種新的腎損傷標記物倍受關(guān)注。早期急性腎損傷、慢性腎病、心腎綜合癥等疾病血 清和尿液中NGA會顯著升高，且其水平監(jiān)測對病情輕重、療效及 預(yù)后判斷具有較好的診斷價值。臨床檢測NGA由要有免疫層析法、免疫比濁法、速率色散比濁法

2、、乳膠增強免疫比濁法等。膠 乳增強免疫比濁法是近年來出現(xiàn)的一種較為穩(wěn)定、準確的體液蛋 白均相免疫比濁檢測方法。腎臟損傷約占所有泌尿生殖道損傷的65%左右。急性腎損傷是一組臨床綜合征，是指突發(fā)(1-7d內(nèi))和持續(xù)(>24h)的腎功能突然下降，定義為血清肌酊至少上升0.5mg/dl 1 ，表示為氮質(zhì)血癥、水電解質(zhì)和酸堿平衡以及全身各系統(tǒng)癥狀，可伴隨少尿(<400ml/24h 或 17ml/h )或無尿(<100ml/24h )。腎病的發(fā)病遷延難愈，時間超出三個月，病人尿液和相關(guān)的血液指標出現(xiàn)異常，腎臟病理學、影像學發(fā)現(xiàn)異常，或腎臟的腎小球有效濾過率低于60%都可統(tǒng)稱為“慢性腎病”

3、。慢性腎病如未能及時有效 救治，導致病情惡化進展，則隨病程遷延，慢性腎病患者將發(fā)展 成為慢性腎功能不全、腎衰竭，最終形成尿毒癥。心腎綜合征(cardio-renalsyndrome , CRS)即心臟或腎臟對另一器官的損害 不克不及代償時，互為因果，形成惡性循環(huán)，最終加速心臟和腎臟功能的共同損害和衰竭。其發(fā)病率、死亡率高，給社會和患者帶 來沉重的負擔。目前對心腎綜合征的認識有限，缺乏有效的治療 措施，是臨床處理的難題。早期診斷急性腎功能損傷時血、尿NGAL濃度通常會迅速升高，2h最為明顯（比臨界值升十至幾百倍），血清肌酊、尿酶等 傳統(tǒng)指標往往要在 2472h才后明顯升高，因而 NGALM用于急

4、性 腎功能損傷的早期診斷。監(jiān)測病情進展NGAL®可以反映腎功能損傷的嚴重程度。評估預(yù) NGALM作為急性腎功能損傷的預(yù)后指標之 一。研究發(fā)現(xiàn)，慢性腎病患者的血清、尿NGALtK平顯著高于正凡人群，并與腎小球濾過率呈密切負相關(guān)，而血清肌酊與腎小球濾 過率的關(guān)聯(lián)程度不及 NGAL因此，慢性腎病患者 NGAL水平不但 是優(yōu)于血清肌酊反映腎小球濾過率下降的指標，更是評價慢性腎 病患者腎臟損傷程度的標記物。心腎綜合征是一種心臟和腎臟的 病理生理紊亂，即由一個器官的功能不全導致的另一個器官的功 能不全，死亡率高，共分為5個類型。研究發(fā)現(xiàn)血 NGAL診斷1型心腎綜合征時，敏感性和特異性分別為100

5、% 86.7%。因此，作為腎損傷的早期診斷指標，密切監(jiān)測NGA小平，有利于臨床醫(yī)生正確評價心腎綜合征中的腎功能損傷程度，并及時采納干預(yù)治 療，減少并發(fā)癥的發(fā)生。目前臨床檢測NGA由要有免疫層析法、免疫比濁法、速率色 散比濁法、乳膠增強免疫比濁法等.乳膠增強免疫比濁法具有操 縱簡單，可在幾分鐘內(nèi)快速、準確地檢測血清蛋白含量，真實反 映病情進展和評估治療效果，對于疾病的早期診斷和治療具有重 要的臨床意義；不容易受人為操縱和外界因素干擾，檢測穩(wěn)定性 和重復性都很好；能利用普通的生化分析儀進行檢測，容易實現(xiàn) 自動化，可在各級基層醫(yī)療機構(gòu)普及和應(yīng)用等優(yōu)點。二、描述采取兔抗人中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋

6、白抗體致敏的 膠乳顆粒，與待測樣本中中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白在 液相中相遇，立即形成不溶性抗原-抗體復合物，并發(fā)生一定濁度。濁度高低反映樣本中中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白濃 度的高低，通過與同樣處理的校準品比較，即可計算出樣本中中 性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白含量。原料名稱規(guī)格/純度性狀三羥甲基氨基甲烷（Tri§AR白色結(jié)晶顆粒兔抗人NGAL抗體致敏膠乳/乳白色懸濁液中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白（NGAL）/無色或淡黃色液體裝為關(guān)鍵工序，無特殊工序。2 . 4 暗示物料、半成品、成品流向。3 .廠期制（稱量、溶解、混合、定容）、分裝和封口為在 十萬級凈化車間操縱的工

7、序。三、其他1.同類產(chǎn)品在國內(nèi)外批準上市情況目前，經(jīng)國家食品藥品監(jiān)督管理總局（ CFDA批準注冊的同類產(chǎn) 品，國產(chǎn)39個，如：上?？迫A生物工程股份有限公司的中性粒細 胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白測定試劑盒（膠乳增強免疫比濁法）進口 4個，如：雅培的尿中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白測 定試劑盒（化學發(fā)光微粒子免疫檢測法）。臨床檢測NGA住要有以下方法：免疫層析法、免疫比濁法、 速率色散比濁法、乳膠增強免疫比濁法等。因其方法簡便，技術(shù) 純熟，現(xiàn)大多采取膠乳增強免疫比濁法。本公司采取乳膠增強免 疫比濁法研制生產(chǎn)的中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白測定試 劑盒（膠乳增強免疫比濁法 ）檢測結(jié)果準確、精密度高

8、、穩(wěn)定性 好，且可自動化批量分析，能廣泛應(yīng)用于臨床。3.與國內(nèi)外同類產(chǎn)品的比較內(nèi)容波音特生物九強生物方法r膠乳增強免疫比濁法膠乳增強免疫比濁法預(yù)期用途本試劑盒用于人血清中中性粒 細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白 的體外定量測定。用于體外定量測定血漿或尿液中 中性粒細胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載 蛋白（NGAL）的含量。原理樣本中的NGAL在中氨酸緩 沖液中與超敏化的抗NGAL 乳膠顆粒試劑反應(yīng)形成免疫復樣本中NGAL與超敏化的抗 NGAL乳膠顆粒試劑反應(yīng)形成免 疫復合物。其濁度的變更量與樣合物。其濁度的變更量與樣本 中NGAL濃度成函數(shù)關(guān)系。本中NGAL濃度成函數(shù)關(guān)系。主要組成成 分R1:甘氨酸緩沖液：50

9、mmol/L穩(wěn)定劑(Tween-20) 0.1% 防腐劑(ProClin300 ) 0.01%R2:抗NGAL乳膠顆粒懸浮液0.20% (W/V )防腐劑(ProClin300 ) 0.01%R1:甘氨酸緩沖液：50mmol/L穩(wěn)定劑 防腐劑 R2:膠乳試劑：抗NGAL乳膠顆粒 懸浮液0.20% （W/V ）防腐劑儲存條件及 后效期本試劑盒在28 c密閉保管 穩(wěn)定12個月；開啟后在2 8 c保管穩(wěn)定30天。1 .試劑在28c密閉避光保 管，啟效期為12個月。2 .試劑不成冷凍，分歧批號試 劑不成混用。3 .已經(jīng)開啟的試劑注意防止污 染,在28c的條件卜可穩(wěn) 定4周。靈敏度測定600ng/ml的

10、被測物時，吸光度之差（？ A）應(yīng)在0.020.15之間。樣品濃度為600ng/ml時，其吸 光度變更在0.02000.1500之 問。試劑空白波長570nm ,光徑10mm , 測的試劑吸光度值A(chǔ)< 1.6.線性范圍【505000】 ng/ml ,在止匕線性范圍內(nèi)：a）線性相關(guān)系數(shù)r >0.990 ;b）在50500】 ng/ml范 圍內(nèi)，線性絕對偏差的絕對值0 50.0ng/ml;在【5005000 ng/ml 范 圍內(nèi)，線性相對偏差的絕 對值0 10.0% 。在50-5000ng/ml 范圍內(nèi)，線性 相關(guān)系數(shù)r2應(yīng)0.99 ,奮0- 100ng/ml范圍內(nèi)測定的絕對偏 差應(yīng)0

11、30ng/ml ,在00- 5000ng/ml范圍內(nèi)測定的相對 偏差應(yīng)010.0% 。精密度重復性CV< 10.0% ;批間相對偏差010.0% 。a）重復性使用同一血漿樣品重復測定10次，其測定值的變異系數(shù) （CV%）應(yīng)0 10.0% ;b）批問差隨機抽取三批試劑盒的批問差應(yīng)0 10.0% 。準確度相對誤差010.0% 。a）型式檢驗比對試驗：相關(guān)系數(shù)r2 > 0.95 ,相對偏差應(yīng)/、超出土 15. % ;b)出廠檢驗使用質(zhì)控品進行測定，準確性偏差應(yīng)/、超出土10%。參考文獻：1 .陳佩.急性腎衰竭患者血清NGAL測定的臨床意義J.臨床醫(yī)學,2011 , ( 5) : 01.2 .龔淑文 沈水娟 何劍霧.NGAL的結(jié)構(gòu)功能及其在慢性腎病中的 作用J.中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志 .2013, (14) ; 354-355.3 .劉長海.急性腎損傷新的標識表記標幟物NGAL的臨床檢測意義J.中國實