索氏提取法步驟

1、索氏抽提法測定粗脂肪含量的改進鐘紅艦1魏紅2( 1 農(nóng)業(yè)部農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)檢中心2 河南省商丘市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督檢驗中心)摘要! 將糧食、油料脂肪測定方法的抽提過程和抽提前后采用的處理手段進行改進, 并將熱浸提- 油重法、殘余法和國標法進行多方面比較對照試驗。結(jié)果表明, 3 種方法測定的結(jié)果無 顯著性差異, 在一定條件下 3 種方法可以相互代替使用。關鍵詞! 測定; 粗脂肪含量; 索氏抽提法; 浸提中圖分類號: TS224文獻標識碼: A文章編號: 1009- 1807 ( 2004) 02- 0039- 02粗脂肪含量是糧食、油料、飼料等產(chǎn)品標準中重要的質(zhì)量指標, 是評價產(chǎn)品品質(zhì), 組織生產(chǎn)的重要依據(jù)之

2、一。在國內(nèi) 外測定粗脂肪含量的 10多種方法中, 索氏抽提法是應用最廣泛的測定方法。在實際生產(chǎn)中, 此法存在的問題主要是抽提時間過長和抽提結(jié)束后抽提瓶不易恒重。圍繞這些問題, 對抽提過程和抽提前后采用的處理手段進行了改進。以國標方法為參照, 熱浸提- 油重法和殘余法為改進方法, 對照比較這 3 種檢測方法的測定結(jié)果。1 方法原理索氏提取法測定脂肪是將樣品放在抽提筒內(nèi)以水浴蒸餾冷凝的乙醚進行回流浸提, 一般要十幾個小時。熱浸提- 油重法由于樣品處于高溫溶劑中, 分子運動加快, 使脂肪的浸出速度加快, 因而 大大地縮 短了浸提 時間, 從而加快了測定速度。一般完成樣品的整個提取過 程不到 2h。此

3、法中鋁杯可代替玻璃瓶, 電熱板可代替水浴加熱, 抽提杯容易恒重, 而且抽提杯不易被污染, 操作簡單容易。殘余法不同之處在于采用抽提過脂肪的殘余物的質(zhì)量來計算脂肪含量。較以前的殘渣法相比, 其不需要恒重紙袋質(zhì)量, 直接在電子天平上稱出試樣質(zhì)量, 抽提前后樣品的質(zhì)量差即為浸出的脂肪含量。測得的結(jié)果為原樣脂肪含量, 不是干基脂肪含量, 與國標法測得的結(jié)果一致。2檢測方法2 1試劑分析純的無水乙醚或沸程為30-60 的石油醚。2 2儀器索氏脂肪提取器、FOSS 2055 型脂肪測定儀、電子天平。2 3試樣制備選取 具 有代 表 性的 樣 品 200g,粉碎后全部通過 60 目篩, 裝于密封容器中, 防

4、止試樣成分的變化。2 4分析步驟2 4 1國標法按 GB/ T5512 食 品中脂 肪的測定方法或 GB/ T 6433 飼料 粗脂肪測定方法進行檢測。為使抽提終點有一量化的概念, 消除不同人員目測產(chǎn)生的差異, 同時避免檢查抽提終點時乙醚大量揮發(fā)傷害檢驗人員的健康。采取同時平行測定 6 個 樣品, 8h 后取出一個抽提瓶, 以后每隔 2h 取出一個, 直到樣品脂 肪含量不 再增加 為止。測出不同類別的樣品需要的抽提時間, 可作為日常工作的參照, 也是改進法試驗條件確定的依據(jù)之一。樣品測定脂肪需要的抽提時間見表 1。表 1 樣品 測定脂肪需要的抽提時間樣品名稱花生大豆魚粉抽提時間 ( h)201

5、6 1816樣品名稱肉粉方便面玉米抽提時間 ( h)181082 4 2熱浸提- 油重法稱樣 1 5g ( M ) 于濾紙筒中,烘干。把濾紙筒放到脂肪測定儀中。鋁 杯 在 105 # 2 條 件 下 恒 重( M 1) 。放到儀器加熱板上, 壓下儀器連接手柄, 使鋁杯與回流器緊密連接。從加液孔加入乙醚 80mL, 接通冷凝水。視脂肪 含量設定 儀器條 件為: 加 熱 溫 度 135 , 浸 提 30 90min, 淋 洗 30min,試 劑 回 收10min, 蒸干 5m in。取下鋁杯, 105糧油加工與食品機械% 2004 年第 2 期39糧油加工與食品機械油脂工程表 2 樣品脂肪含量的重

6、復性測定結(jié)果樣品名稱 檢驗方法12345平均置花生熱浸提52. 8352. 6752. 6452. 9952. 7152. 77殘余法52. 7752. 6452. 4952. 8852. 8452. 72魚粉熱浸提10. 6810. 5210. 3610. 7710. 4410. 55殘余法10. 6610. 4310. 5610. 3410. 4510. 48玉米熱浸提3. 683. 543. 883. 723. 573. 68殘余法3. 663. 803. 743. 563. 553. 66表 4 不同實驗室脂肪含量 ( % ) 測定結(jié)果比較比對單位樣品名稱樣品編號中心測定值熱浸提殘余法

7、比對方測定值結(jié)論農(nóng)業(yè)部谷物品質(zhì)質(zhì)檢中心玉米M - 64. 484. 324. 17符合大豆S- 322. 5922. 1422. 17符合農(nóng)業(yè)部油料質(zhì)檢中心( 武漢)油菜籽2000- 01940. 4339. 9140. 20符合農(nóng)業(yè)部食品質(zhì)檢中心( 武漢)油菜籽2000M - 1344. 7944. 5945. 08符合# 2 烘箱中干燥 30 min, 在干燥器中冷卻, 稱重 ( M 2) 。脂肪含量= ( M 2- M 1) & 100/ M2 4 3殘余法稱取式樣 2g ( M ) 用 濾紙包好( 準確至 0 000 2g) , 105 # 2 烘箱中干 燥 3h 取出, 在干

8、燥器 中冷卻,稱重 ( M 1) 。將樣包裝入索氏脂肪抽提器抽提筒中, 再倒入無水乙醚, 乙醚高度為完全浸泡樣包, 連接好儀器各部分, 浸泡至少 16h。將浸泡后的無水乙醚放入抽提瓶中, 在抽提瓶中放入幾粒玻璃球, 然后, 往抽提筒中重新 倒入無水乙醚 使之完全浸 泡樣包, 連 接好儀器 各部分, 接通冷 凝水, 在 60 75 的水浴上加 熱, 使乙醚回流, 控制 乙醚 回流次 數(shù)為 8次/ h。一般抽提 6 8h。抽提完畢,取出樣包, 置樣包于通風處使乙醚揮發(fā)。將樣包放入 105 # 2 烘箱中干燥 2h, 取出, 在干燥 器中冷卻, 稱重 ( M 2) 。脂肪含量= ( M1- M 2)

9、 & 100/ M3 結(jié)果分析( 1) 樣品 選取脂 肪含 量高的 花生、脂肪含量中等的魚粉和脂肪含量較低的玉米, 采用熱浸提- 油重法和殘余法分別測定, 結(jié)果的重復性見表2。由表中數(shù)據(jù)看出兩種測定方法的重現(xiàn)性都比較好。( 2) 選取一組樣品分別用 3 種方法測定樣品脂肪含量, 取 5 次測定結(jié)果的平均值為最終結(jié)果進行比較, 數(shù)據(jù)見表 3。兩種測定結(jié)果無顯著性差異 ( P > 0 05) 。表 3 3 種方法測定樣品脂肪含量( % )樣品名稱國標法熱浸提殘余法大豆19. 2919. 3619. 20花生52. 7552. 7752. 72魚粉10. 5710. 5510. 48肉

10、粉17. 2617. 3617. 06方便面18. 3518. 4618. 29玉米3. 683. 683. 66小魚料6. 196. 206. 09( 3) 為確定熱浸提法和殘余法的有效性和可比性, 與其他實驗室測定結(jié)果進行了比較, 結(jié)果見表 4。絕對差均小 于 0 5% , 相 對 偏差 最 高為3 6% , 符合標準 GB/ T 6433- 1994、GB/ T5512- 85 不同實驗室間重復性要求。4結(jié)論( 1) 國標法、熱浸提- 油重法和殘余法均具 有較好的重現(xiàn) 性和準確度, 說明兩種改進方法測定結(jié)果準確可靠, 在一定條件下 3 種方法可以相互代替使用。( 2) 熱浸提法的優(yōu)勢在于

11、利用脂肪測定儀使試樣浸入沸騰的溶劑中,使脂肪 迅速進入溶 劑中。樣 品不同時, 只需改變浸提時間, 淋洗時間改變沒有浸提時間改變影響大。30min的淋洗時間足以使脂肪完全洗脫。( 3) 殘余 法浸泡 時間可 利用 晚上, 由于不加熱回流, 不必守護?；亓鲿r間可參照表 1 進行調(diào)整。外加的脂肪如方便面等油炸食品, 雖然含量高, 但脂 肪容易 浸出, 浸泡 后回 流2 3h 即可提取完全。( 4) 試驗過程中應注意稱量, 天平室的環(huán)境條件除滿足一般要求外,相對濕度應 控制在 45% 以下。在 此條件下濾紙包在烘箱中干燥 2h 即達到恒重要求, 不必復烘。鋁杯在整個抽提 過程中 一直 處于 135 的環(huán) 境中, 只需烘 30min 即達到恒重要求。與國標法相比節(jié)約了恒重所需的大量時間, 簡化了試驗操作。5) 脂肪測定儀同時可測定 6 個試樣, 在 1 個工作日內(nèi)可完成檢測,實現(xiàn)脂肪快速、準確地測定。能滿足日常生產(chǎn)和商貿(mào)交易中對脂肪含量測定的要求。殘余法在一套提取器內(nèi)可同時放置多個濾紙包, 同時測定多個樣品, 顯著提高了工作效率, 節(jié)省了水、電和試劑。殘余法對大批量的樣品脂肪檢測時更能顯