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文檔簡介

1、二、實(shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)原理 抑制劑和底物結(jié)構(gòu)相似，可與底物競爭結(jié)合酶的活性中心，阻礙酶- -底物復(fù)合物形成抑制程度取決于抑制劑與酶的相對親和力，以及抑制劑與底物濃度的相對比例（I/SI/S）第1頁/共9頁HOOCCH=CHCOOHFADFADH2甲烯白MBHMBH2 2 （無色）甲烯藍(lán)MB （藍(lán)色）在在無氧條件無氧條件下以甲烯藍(lán)褪色時(shí)間判斷琥珀下以甲烯藍(lán)褪色時(shí)間判斷琥珀酸脫氫酶活性高低，觀察競爭性抑制作用酸脫氫酶活性高低，觀察競爭性抑制作用 丙二酸丙二酸HOOCHOOCCHCH2 2COOHCOOH琥珀酸脫氫酶琥珀酸脫氫酶第2頁/共9頁三、實(shí)驗(yàn)步驟三、實(shí)驗(yàn)步驟. . 酶促反應(yīng)及競爭性抑制作用 取

2、試管6 6支，按表所列步驟操作。 加液體石蠟以隔絕空氣3737水浴保溫 隨時(shí)觀察并記錄各管褪色時(shí)間！第3頁/共9頁3. 3. 實(shí)驗(yàn)記錄和結(jié)果分析 酶提取液中有沒有琥珀酸脫氫酶活性？各管的褪色情況有何區(qū)別？為什么？丙二酸對琥珀酸脫氫酶抑制作用的類型及其特點(diǎn)是什么？本實(shí)驗(yàn)中5 5號、6 6號試管的作用是什么？第4頁/共9頁四、結(jié)果分析1 1、酶提取液中有沒有琥珀酸脫氫酶活性？2 2、各管的褪色情況有何區(qū)別？為什么？3 3、丙二酸對琥珀酸脫氫酶抑制作用的類型 及其特點(diǎn)是什么？如何證明的？4 4、本實(shí)驗(yàn)中5 5號、6 6號試管的作用是什么？第5頁/共9頁五、注意事項(xiàng)五、注意事項(xiàng)加試劑時(shí)加試劑時(shí)看清底物與抑制劑的濃度看清底物與抑制劑的濃度。注意注意隨時(shí)觀察記錄隨時(shí)觀察記錄各管褪色時(shí)間。各管褪色時(shí)間。3737水浴保溫過程中，水浴保溫過程中，不能振搖試管不能振搖試管，避免甲烯白重新氧化變藍(lán)。避免甲烯白重新氧化變藍(lán)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后一定實(shí)驗(yàn)結(jié)束后一定洗凈試管內(nèi)的液體石蠟洗凈試管內(nèi)的液體石蠟。

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