2013中圖版選修1第一章第2節(jié)《培養(yǎng)基對微生物的選擇作用》ppt課件

1、第第2節(jié)培養(yǎng)基對微生物的選擇作用節(jié)培養(yǎng)基對微生物的選擇作用學(xué)習(xí)導(dǎo)航學(xué)習(xí)導(dǎo)航1.掌握配制培養(yǎng)基的原則、方法和操作步驟。掌握配制培養(yǎng)基的原則、方法和操作步驟。重點重點2.理解培養(yǎng)基對微生物的選擇作用。理解培養(yǎng)基對微生物的選擇作用。 重、難重、難點點3.利用選擇培養(yǎng)基分離土壤中能分解纖維素的利用選擇培養(yǎng)基分離土壤中能分解纖維素的微生物，了解其應(yīng)用價值。微生物，了解其應(yīng)用價值。新知初探思維啟動新知初探思維啟動一、選擇培養(yǎng)基一、選擇培養(yǎng)基1.定義：定義：允許允許_種類的微生物生長，種類的微生物生長，抑制其他微生物生長，從而將所需的微生物抑制其他微生物生長，從而將所需的微生物從混雜的微生物群體中分離出來的

2、培養(yǎng)基。從混雜的微生物群體中分離出來的培養(yǎng)基。特定特定2.配制依據(jù)配制依據(jù)( 1 ) 根 據(jù) 某 一 種 或 某 一 類 微 生 物 的根 據(jù) 某 一 種 或 某 一 類 微 生 物 的_。(2)根據(jù)某些微生物對一些根據(jù)某些微生物對一些_、_的抗性。的抗性。特殊營養(yǎng)要求特殊營養(yǎng)要求物理物理化學(xué)因素化學(xué)因素想一想想一想在混合有細(xì)菌和霉菌的微生物類群中，要對在混合有細(xì)菌和霉菌的微生物類群中，要對霉菌進(jìn)行分離和培養(yǎng)，在培養(yǎng)基中加入某種霉菌進(jìn)行分離和培養(yǎng)，在培養(yǎng)基中加入某種物質(zhì)配制成選擇培養(yǎng)基非常有效，那么這種物質(zhì)配制成選擇培養(yǎng)基非常有效，那么這種物質(zhì)是什么？它對細(xì)菌有什么作用？物質(zhì)是什么？它對細(xì)菌有

3、什么作用？【提示提示】青霉素青霉素;抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的形成。抑制細(xì)菌細(xì)胞壁的形成。二、平板培養(yǎng)基的制備二、平板培養(yǎng)基的制備培養(yǎng)基的配方培養(yǎng)基的配方邊加熱邊攪拌邊加熱邊攪拌原始原始pH高壓蒸汽滅菌鍋高壓蒸汽滅菌鍋50三、纖維素分解菌的分離三、纖維素分解菌的分離1.方法：方法：_法。法。2.步驟步驟(1)制備平板培養(yǎng)基。制備平板培養(yǎng)基。(2)制作制作_。(3)用涂布器將土壤稀釋液涂布均勻。用涂布器將土壤稀釋液涂布均勻。(4)取取_覆蓋于培養(yǎng)基上并壓平。覆蓋于培養(yǎng)基上并壓平。(5)將培養(yǎng)皿置于將培養(yǎng)皿置于_上，在上，在_下培養(yǎng)下培養(yǎng)10 d左右。左右。稀釋涂布平板稀釋涂布平板涂布器涂布器無菌濾紙無菌濾

4、紙干燥器隔板干燥器隔板28 30 判一判判一判(1)為使培養(yǎng)基徹底滅菌，可先將培養(yǎng)基倒入為使培養(yǎng)基徹底滅菌，可先將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿中，然后進(jìn)行滅菌。培養(yǎng)皿中，然后進(jìn)行滅菌。()(2)在接種時，涂布器經(jīng)過火焰之后不需冷卻在接種時，涂布器經(jīng)過火焰之后不需冷卻就可進(jìn)行涂布。就可進(jìn)行涂布。()(3)培養(yǎng)時要保持無菌環(huán)境，為觀察滅菌是否培養(yǎng)時要保持無菌環(huán)境，為觀察滅菌是否徹底，還應(yīng)設(shè)置空白對照。徹底，還應(yīng)設(shè)置空白對照。()(4)選擇培養(yǎng)基依據(jù)培養(yǎng)基的化學(xué)成分應(yīng)屬天選擇培養(yǎng)基依據(jù)培養(yǎng)基的化學(xué)成分應(yīng)屬天然培養(yǎng)基。然培養(yǎng)基。()四、選擇培養(yǎng)基四、選擇培養(yǎng)基選擇培養(yǎng)基分離法是分離微生物的另一種方選擇培養(yǎng)基分離法

5、是分離微生物的另一種方法，通過這種方法，可以法，通過這種方法，可以_地分地分離和培養(yǎng)不同的微生物。離和培養(yǎng)不同的微生物。選擇性選擇性要點突破講練互動要點突破講練互動要點一培養(yǎng)基中各營養(yǎng)要素的作用及配制要點一培養(yǎng)基中各營養(yǎng)要素的作用及配制原則原則1.營養(yǎng)要素營養(yǎng)要素(1)微生物的元素組成：微生物的元素組成：C、H、O、N、P、S等，其中等，其中C、H、O、N占細(xì)胞干重的占細(xì)胞干重的90%以以上。上。(2)營養(yǎng)要素的來源營養(yǎng)要素的來源營養(yǎng)營養(yǎng)要素要素含義含義作用作用主要來源主要來源碳源碳源凡能提凡能提供所需供所需碳元素碳元素的物質(zhì)的物質(zhì)構(gòu)成生物體細(xì)構(gòu)成生物體細(xì)胞的物質(zhì)和一胞的物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物，些

6、代謝產(chǎn)物，有些是異養(yǎng)生有些是異養(yǎng)生物的能源物質(zhì)物的能源物質(zhì)無機化合物：無機化合物：CO 2、NaHCO 3；有機化合；有機化合物：糖類、脂肪酸、物：糖類、脂肪酸、花生粉餅、石油等花生粉餅、石油等氮源氮源凡能提凡能提供所需供所需氮元素氮元素的物質(zhì)的物質(zhì)合成蛋白質(zhì)、合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物的代謝產(chǎn)物無機化合物：無機化合物：N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽、銨鹽、硝酸鹽;有機化合物：尿素、有機化合物：尿素、牛肉膏、蛋白胨等牛肉膏、蛋白胨等營養(yǎng)營養(yǎng)要素要素含義含義作用作用主要來源主要來源生長生長因子因子生長必不可少的生長必不可少的微量有機物微量有機物酶和核酸的組成酶和核酸的組成成分成分

7、維生素、氨基維生素、氨基酸、堿基等酸、堿基等水水在生物體內(nèi)含量在生物體內(nèi)含量很高，在低等生很高，在低等生物體內(nèi)含量更高物體內(nèi)含量更高不僅是優(yōu)良的溶不僅是優(yōu)良的溶劑，而且可維持劑，而且可維持生物大分子結(jié)構(gòu)生物大分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定的穩(wěn)定無機無機鹽鹽為微生物提供除為微生物提供除碳、氮元素以外碳、氮元素以外的各種重要元素的各種重要元素，包括某些大量，包括某些大量元素元素細(xì)胞內(nèi)的組成成細(xì)胞內(nèi)的組成成分，生理調(diào)節(jié)物分，生理調(diào)節(jié)物質(zhì)；某些化能自質(zhì)；某些化能自養(yǎng)菌的能源，酶養(yǎng)菌的能源，酶的激活劑的激活劑特別提醒特別提醒對異養(yǎng)微生物來說，含對異養(yǎng)微生物來說，含C、N的的有機物既是碳源有機物既是碳源,也是氮源，即有些

8、化合物作也是氮源，即有些化合物作為營養(yǎng)要素成分時并不是單一方面的作用。為營養(yǎng)要素成分時并不是單一方面的作用。并不是所有微生物都需添加特殊營養(yǎng)物質(zhì)并不是所有微生物都需添加特殊營養(yǎng)物質(zhì),有些微生物需添加，原因是它們自身缺乏合有些微生物需添加，原因是它們自身缺乏合成這些物質(zhì)所需要的酶或合成能力有限。成這些物質(zhì)所需要的酶或合成能力有限。2.配制原則配制原則(1)目的要明確目的要明確(根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的等等)。例如，培養(yǎng)基可由簡單的無機物組成，。例如，培養(yǎng)基可由簡單的無機物組成，生產(chǎn)用的培養(yǎng)基內(nèi)可加入化學(xué)成分不明確的生產(chǎn)用的培養(yǎng)基內(nèi)可加入化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)，而分類

9、鑒定用的培養(yǎng)基內(nèi)必須加天然物質(zhì)，而分類鑒定用的培養(yǎng)基內(nèi)必須加入已知化學(xué)成分的物質(zhì)。入已知化學(xué)成分的物質(zhì)。(2)營養(yǎng)要協(xié)調(diào)。注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和營養(yǎng)要協(xié)調(diào)。注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例。比例。(3)pH要適宜。各種微生物適宜生長的要適宜。各種微生物適宜生長的pH范范圍不同，如細(xì)菌、放線菌和真菌的最適圍不同，如細(xì)菌、放線菌和真菌的最適pH分分別為：別為：6.57.5、7.58.5和和5.06.0。 氯苯化合物是重要的有機化工原料，氯苯化合物是重要的有機化工原料，不易降解，會污染環(huán)境。某研究小組依照下不易降解，會污染環(huán)境。某研究小組依照下列實驗方案列實驗方案(如圖如圖1)篩選出能高效降解氯苯的篩

10、選出能高效降解氯苯的微生物微生物SP1菌，培養(yǎng)基配方如表所示。菌，培養(yǎng)基配方如表所示。例例1圖圖1培養(yǎng)基的組成培養(yǎng)基的組成液體液體培養(yǎng)培養(yǎng)基基蛋蛋白白胨胨牛牛肉肉膏膏氯苯氯苯氯化氯化鈉鈉硝硝酸酸銨銨無機無機鹽鹽(無無碳碳)蒸蒸餾餾水水號號10 g5 g 5 mg5 g1 L號號50 mg5 g3 g適量適量1 L號號20 mg80 mg5 g3 g適量適量1 L(1)配制配制號固體培養(yǎng)基時，除添加號固體培養(yǎng)基時，除添加號液體號液體培養(yǎng)基成分外，還應(yīng)添加培養(yǎng)基成分外，還應(yīng)添加1%的的_。(2)培養(yǎng)基配制時，滅菌與調(diào)培養(yǎng)基配制時，滅菌與調(diào)pH的先后順序是的先后順序是_。(3)在在號培養(yǎng)基中，為號培

11、養(yǎng)基中，為SP1菌提供氮源的成菌提供氮源的成分是分是_。(4)在營養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時，在營養(yǎng)缺乏或環(huán)境惡劣時，SP1菌的菌體菌的菌體會變成一個圓形的休眠體，這種休眠體被稱會變成一個圓形的休眠體，這種休眠體被稱為為_。(5)將將SP1菌接種在含不同濃度氯苯的菌接種在含不同濃度氯苯的號培號培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到生長曲線養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到生長曲線(如圖如圖2)。從圖。從圖2可可知知SP1菌在菌在_培培養(yǎng)條件下最早停止生長。養(yǎng)條件下最早停止生長。圖圖2【解析解析】本題主要考查微生物的相關(guān)知識。本題主要考查微生物的相關(guān)知識。(1)固體培養(yǎng)基必須含有適量的瓊脂；固體培養(yǎng)基必須含有適量的瓊脂；(2)配制培養(yǎng)基時應(yīng)

12、先調(diào)配制培養(yǎng)基時應(yīng)先調(diào)pH后滅菌；后滅菌；(3)號培養(yǎng)基成分中含號培養(yǎng)基成分中含N物質(zhì)為硝酸銨，則應(yīng)物質(zhì)為硝酸銨，則應(yīng)由它為由它為SP1菌提供氮源；菌提供氮源；(4)在惡劣環(huán)境下一些菌體會形成芽孢休眠體在惡劣環(huán)境下一些菌體會形成芽孢休眠體,來度過不良環(huán)境；來度過不良環(huán)境；(5)SP1菌以氯苯為碳源，當(dāng)氯苯消耗盡時，菌以氯苯為碳源，當(dāng)氯苯消耗盡時，菌株因缺少碳源而不能繼續(xù)生存，故氯苯含菌株因缺少碳源而不能繼續(xù)生存，故氯苯含量越少，量越少，SP1菌越早停止生長。菌越早停止生長?！敬鸢复鸢浮?1)瓊脂瓊脂(2)先調(diào)先調(diào)pH，后滅菌，后滅菌(3)硝酸銨硝酸銨(4)芽孢芽孢(5)20 mg/L氯苯氯苯互

13、動探究互動探究題目中的細(xì)菌在一定條件下可以形成芽孢，題目中的細(xì)菌在一定條件下可以形成芽孢，而有的時候細(xì)菌可以產(chǎn)生孢子，那么芽孢和而有的時候細(xì)菌可以產(chǎn)生孢子，那么芽孢和孢子有區(qū)別嗎？孢子有區(qū)別嗎？【提示提示】芽孢是某些細(xì)菌的一種休眠體，芽孢是某些細(xì)菌的一種休眠體，不是繁殖體；孢子是某些細(xì)菌產(chǎn)生的一種生不是繁殖體；孢子是某些細(xì)菌產(chǎn)生的一種生殖細(xì)胞，是繁殖體。殖細(xì)胞，是繁殖體。要點二培養(yǎng)基種類和功能要點二培養(yǎng)基種類和功能劃分劃分標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基種類特點特點用途用途物理物理性質(zhì)性質(zhì)液體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基不加凝不加凝固劑固劑工業(yè)生產(chǎn)工業(yè)生產(chǎn)半固體培養(yǎng)半固體培養(yǎng)基基加凝固加凝固劑，如劑，如瓊脂瓊脂觀

14、察微生物的運觀察微生物的運動、分類鑒定動、分類鑒定固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基微生物分離、鑒微生物分離、鑒定、活菌計數(shù)、定、活菌計數(shù)、保藏菌種保藏菌種劃分標(biāo)準(zhǔn)劃分標(biāo)準(zhǔn) 培養(yǎng)基種類培養(yǎng)基種類特點特點用途用途化學(xué)成分化學(xué)成分天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基含化學(xué)成分含化學(xué)成分不明確的天不明確的天然物質(zhì)然物質(zhì)工業(yè)工業(yè)生產(chǎn)生產(chǎn)合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基培養(yǎng)基成分培養(yǎng)基成分明確明確(用化學(xué)用化學(xué)成分已知的成分已知的化學(xué)物質(zhì)配化學(xué)物質(zhì)配成成)分類、分類、鑒定鑒定劃分劃分標(biāo)準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基培養(yǎng)基種類種類特點特點用途用途用途用途選擇培選擇培養(yǎng)基養(yǎng)基培養(yǎng)基中加入某種培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的不需要的微生

15、物的生長，促進(jìn)所需要生長，促進(jìn)所需要的微生物的生長的微生物的生長培養(yǎng)、分培養(yǎng)、分離出特定離出特定微生物微生物鑒別培鑒別培養(yǎng)基養(yǎng)基根據(jù)微生物的代謝根據(jù)微生物的代謝特點，在培養(yǎng)基中特點，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或加入某種指示劑或化學(xué)藥品化學(xué)藥品鑒別不同鑒別不同種類的微種類的微生物生物 培養(yǎng)基是人工配制的適合不同微生物培養(yǎng)基是人工配制的適合不同微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)物質(zhì)。先用生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)物質(zhì)。先用完全培養(yǎng)基培養(yǎng)混合菌種，然后分別放在完全培養(yǎng)基培養(yǎng)混合菌種，然后分別放在A、B、C三種特殊培養(yǎng)基上培養(yǎng)，分別得到菌落三種特殊培養(yǎng)基上培養(yǎng)，分別得到菌落、。其中、。其中A培養(yǎng)基以蛋

16、白質(zhì)為唯一碳培養(yǎng)基以蛋白質(zhì)為唯一碳源；源；B培養(yǎng)基中缺氮源；培養(yǎng)基中缺氮源；C培養(yǎng)基中成分如下培養(yǎng)基中成分如下表：表：例例2請分析回答：請分析回答：(1)菌落菌落同化作用類型最可能是同化作用類型最可能是_。A光能自養(yǎng)型光能自養(yǎng)型B化能自養(yǎng)型化能自養(yǎng)型C異養(yǎng)型異養(yǎng)型 DA或或B成成分分粉狀粉狀硫硫MgSO47H2O(NH4)2SO4FeSO4KH2PO4CaCl2H2O含含量量10 g0.5 g0.4 g0.01 g4 g25 g1000 mL(2)如果要獲得具有固氮能力的菌株，應(yīng)選如果要獲得具有固氮能力的菌株，應(yīng)選用菌落用菌落_；如果要培育獲；如果要培育獲得 大 量 蛋 白 酶 的 菌 株 ，

17、 應(yīng) 選 用 菌 落得 大 量 蛋 白 酶 的 菌 株 ， 應(yīng) 選 用 菌 落_。(3)從題中分析可見，生物進(jìn)化的內(nèi)在因素從題中分析可見，生物進(jìn)化的內(nèi)在因素是是_，對生物生存起重要作用的因素是對生物生存起重要作用的因素是_?！窘馕鼋馕觥坑深}目可知：由題目可知：A培養(yǎng)基以蛋白質(zhì)培養(yǎng)基以蛋白質(zhì)為唯一碳源，則菌落為唯一碳源，則菌落的菌株可合成較多的的菌株可合成較多的蛋白酶；蛋白酶；B培養(yǎng)基缺氮源，只能培養(yǎng)固氮微培養(yǎng)基缺氮源，只能培養(yǎng)固氮微生物；生物；C培養(yǎng)基中無碳源且含有大量粉狀硫培養(yǎng)基中無碳源且含有大量粉狀硫,可培養(yǎng)化能自養(yǎng)型微生物。所以生物的生存可培養(yǎng)化能自養(yǎng)型微生物。所以生物的生存是由環(huán)境條件

18、決定的。是由環(huán)境條件決定的?！敬鸢复鸢浮?1)B(2)(3)遺傳和變異外界環(huán)境條件遺傳和變異外界環(huán)境條件【規(guī)律總結(jié)規(guī)律總結(jié)】加入青霉素可以分離出加入青霉素可以分離出酵母菌和霉菌。酵母菌和霉菌。加入高濃度的食鹽可得到金黃色葡萄球加入高濃度的食鹽可得到金黃色葡萄球菌。菌。若培養(yǎng)基中缺乏氮源時，可以分離固氮若培養(yǎng)基中缺乏氮源時，可以分離固氮微生物。微生物。當(dāng)培養(yǎng)基的某種營養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分當(dāng)培養(yǎng)基的某種營養(yǎng)成分為特定化學(xué)成分時，也具有分離效果。例如，石油是唯一碳時，也具有分離效果。例如，石油是唯一碳源時，可以抑制不能利用石油的微生物的生源時，可以抑制不能利用石油的微生物的生長，使能夠利用石油的微生

19、物生存，達(dá)到分長，使能夠利用石油的微生物生存，達(dá)到分離出能消除石油污染的微生物的目的。離出能消除石油污染的微生物的目的。改變微生物的培養(yǎng)條件，也可以達(dá)到分離改變微生物的培養(yǎng)條件，也可以達(dá)到分離微生物的目的，如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中微生物的目的，如將培養(yǎng)基放在高溫環(huán)境中培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物。培養(yǎng)只能得到耐高溫的微生物。變式訓(xùn)練變式訓(xùn)練在培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中加入某些物質(zhì)能分在培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基中加入某些物質(zhì)能分離出所需的微生物。下列選項中，前者是在離出所需的微生物。下列選項中，前者是在培養(yǎng)基中加入的物質(zhì)，后者是能被分離出的培養(yǎng)基中加入的物質(zhì)，后者是能被分離出的微生物，其中正確的是微生物，其中

20、正確的是()A氫氧化鈉，酵母菌氫氧化鈉，酵母菌B鹽酸，放線菌鹽酸，放線菌C適量的青霉素，霉菌適量的青霉素，霉菌D適量的伊紅美藍(lán)，大腸桿菌適量的伊紅美藍(lán)，大腸桿菌解析：選解析：選C。氫氧化鈉、鹽酸為強堿、強酸。氫氧化鈉、鹽酸為強堿、強酸,酵母菌和放線菌都不能生存，加入伊紅美酵母菌和放線菌都不能生存，加入伊紅美藍(lán)的培養(yǎng)基是用來鑒定大腸桿菌，并不能分藍(lán)的培養(yǎng)基是用來鑒定大腸桿菌，并不能分離大腸桿菌。適量的青霉素對原核生物有抑離大腸桿菌。適量的青霉素對原核生物有抑制作用，對真核生物的生命活動并不影響。制作用，對真核生物的生命活動并不影響。要點三微生物培養(yǎng)中有關(guān)實驗操作的注意要點三微生物培養(yǎng)中有關(guān)實驗操

21、作的注意事項事項1.倒平板操作倒平板操作(1)培養(yǎng)基滅菌后，需冷卻至培養(yǎng)基滅菌后，需冷卻至50 左右才能左右才能倒平板，原因是瓊脂在倒平板，原因是瓊脂在44 以下凝固。以下凝固。(2)培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，不要培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，不要完全打開。完全打開。(3)整個操作過程要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，避整個操作過程要在酒精燈火焰旁進(jìn)行，避免雜菌污染。免雜菌污染。(4)平板冷凝后要倒置的原因：防止皿蓋上的平板冷凝后要倒置的原因：防止皿蓋上的冷凝水落入培養(yǎng)基，防止雜菌污染。冷凝水落入培養(yǎng)基，防止雜菌污染。(5)若倒平板時，培養(yǎng)基濺在皿蓋和皿底之間若倒平板時，培養(yǎng)基濺在皿蓋和皿底之間的

22、部位，這個平板應(yīng)丟棄。的部位，這個平板應(yīng)丟棄。2.平板劃線操作平板劃線操作第一次劃線及每次劃線之前都需灼燒接種環(huán)第一次劃線及每次劃線之前都需灼燒接種環(huán)滅菌，劃線操作結(jié)束仍需灼燒接種環(huán)，每次滅菌，劃線操作結(jié)束仍需灼燒接種環(huán)，每次灼燒目的如下表：灼燒目的如下表：第一次灼燒第一次灼燒 每次劃線之前灼燒每次劃線之前灼燒劃線結(jié)束灼燒劃線結(jié)束灼燒目目的的避免接種環(huán)避免接種環(huán)上可能存在上可能存在的微生物污的微生物污染培養(yǎng)物染培養(yǎng)物殺死上次劃線結(jié)束殺死上次劃線結(jié)束后接種環(huán)上殘留的后接種環(huán)上殘留的菌種，使下次劃線菌種，使下次劃線的菌種來自上次劃的菌種來自上次劃線末端線末端殺死接種環(huán)上殺死接種環(huán)上殘留的菌種，殘留

23、的菌種，避免細(xì)菌污染避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操環(huán)境和感染操作者作者3.稀釋涂布平板操作稀釋涂布平板操作(1)稀釋操作時：每支試管中盛有稀釋操作時：每支試管中盛有9 mL水、水、試管和移液管需滅菌；操作時，試管口和移試管和移液管需滅菌；操作時，試管口和移液管應(yīng)在離火焰液管應(yīng)在離火焰1 cm2 cm處。處。(2)涂布平板時：稀釋涂布平板的操作比較復(fù)涂布平板時：稀釋涂布平板的操作比較復(fù)雜，且各個細(xì)節(jié)均需保證雜，且各個細(xì)節(jié)均需保證“無菌無菌”，應(yīng)特別，應(yīng)特別注意：注意：酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適。酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要合適。吸管頭不要接觸任何其他物體。吸管頭不要接觸任何其他物體。吸管要在酒精燈火焰周圍使

24、用。吸管要在酒精燈火焰周圍使用。特別提醒特別提醒用手測溫剛好不燙手即可快速用手測溫剛好不燙手即可快速倒平板，注意無菌操作。倒平板，注意無菌操作。灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后才能伸入灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后才能伸入菌液，以免溫度太高殺死菌種。菌液，以免溫度太高殺死菌種。劃線時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。劃線時最后一區(qū)域不要與第一區(qū)域相連。畫線用力要大小適當(dāng)，防止用力過大將培畫線用力要大小適當(dāng)，防止用力過大將培養(yǎng)基劃破。養(yǎng)基劃破。移液管需要經(jīng)過滅菌。操作時，移液后用移液管需要經(jīng)過滅菌。操作時，移液后用手指輕壓上端的橡皮頭，吹吸三次，使菌液手指輕壓上端的橡皮頭，吹吸三次，使菌液與水充分混勻。與

25、水充分混勻。將涂布器末端浸在盛有體積分?jǐn)?shù)為將涂布器末端浸在盛有體積分?jǐn)?shù)為70%的的酒精的燒杯中。取出時，要讓多余的酒精在酒精的燒杯中。取出時，要讓多余的酒精在燒杯中滴盡，然后將沾有少量酒精的涂布器燒杯中滴盡，然后將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。在火焰上引燃。操作中一定要注意防火！不要將過熱的涂操作中一定要注意防火！不要將過熱的涂布器放在盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中布器放在盛放酒精的燒杯中，以免引燃其中的酒精。的酒精。 金黃色葡萄球菌有很強的致病力，能金黃色葡萄球菌有很強的致病力，能引起食物中毒。某生物課題小組想從已混有引起食物中毒。某生物課題小組想從已混有其他微生物的金黃色葡萄球菌培養(yǎng)液

26、中將其其他微生物的金黃色葡萄球菌培養(yǎng)液中將其分離出來，進(jìn)行純培養(yǎng)，然后進(jìn)行研究。據(jù)分離出來，進(jìn)行純培養(yǎng)，然后進(jìn)行研究。據(jù)此，請回答下列問題。此，請回答下列問題。例例3(1)轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基培養(yǎng)時，常采用平板劃線轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)基培養(yǎng)時，常采用平板劃線法和法和_法接種，獲得單法接種，獲得單菌落后繼續(xù)篩選，采用平板劃線法時在每次菌落后繼續(xù)篩選，采用平板劃線法時在每次劃 線 之 前 都 要 灼 燒 接 種 環(huán) ， 目 的 是劃 線 之 前 都 要 灼 燒 接 種 環(huán) ， 目 的 是_。(2)為了防止感染操作者，接種后，操作者的為了防止感染操作者，接種后，操作者的雙手應(yīng)雙手應(yīng)_。(3)培養(yǎng)時，放入恒溫箱的培養(yǎng)皿倒置的目的培養(yǎng)時，放入恒溫箱的培養(yǎng)皿倒置的目的是是_。(4)實驗結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基必須進(jìn)行滅實驗結(jié)束后，使用過的培養(yǎng)基必須進(jìn)行滅菌處理后才能倒掉，這樣做的目的是菌處理后才能倒掉，這樣做的目的是_?！窘馕鼋馕觥?1)在篩選單菌落時常采用平板劃在