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1、(3)氣相色譜一般都在較高溫度下進(jìn)行的,而高效液相色譜法則經(jīng)常可在室溫條件下工作。 總之,高效液相色譜法是吸取了氣相色譜與經(jīng)典液相色譜優(yōu)點(diǎn),并用現(xiàn)代化手段加以改進(jìn),因此得到迅猛的發(fā)展。目前高效液相色譜法已被廣泛應(yīng)用于分析對(duì)生物學(xué)和醫(yī)藥上有重大意義的大分子物質(zhì),例如蛋白質(zhì)、核酸、氨基酸、多糖類、植物色素、高聚物、染料及藥物等物質(zhì)的分離和分析。 高效液相色譜法的儀器設(shè)備費(fèi)用昂貴,操作嚴(yán)格,這是它的主要缺點(diǎn)。 1高壓輸液系統(tǒng) 由于高效液相色譜所用固定相顆粒極細(xì),因此對(duì)流動(dòng)相阻力很大,為使流動(dòng)相較快流動(dòng),必須配備有高壓輸液系統(tǒng)。它是高效液相色譜儀最重要的部件,一般由儲(chǔ)液罐、高壓輸液泵、過(guò)濾器、壓力脈動(dòng)
2、阻力器等組成,其中高壓輸液泵是核心部件。對(duì)于一個(gè)好的高壓輸液泵應(yīng)符合密封性好,輸出流量恒定,壓力平穩(wěn),可調(diào)范圍寬,便于迅速更換溶劑及耐腐蝕等要求。常用的輸液泵分為恒流泵和恒壓泵兩種。恒流泵特點(diǎn)是在一定操作條件下,輸出流量保持恒定而與色譜柱引起阻力變化無(wú)關(guān);恒壓泵是指能保持輸出壓力恒定,但其流量則隨色譜系統(tǒng)阻力而變化,故保留時(shí)間的重視性差,它們各有優(yōu)缺點(diǎn)。目前恒流泵正逐漸取代恒壓泵。恒流泵又稱機(jī)械泵,它又分機(jī)械注射泵和機(jī)械往復(fù)泵兩種,應(yīng)用最多的是機(jī)械往復(fù)泵。3)高純度。由于高效液相靈敏度高,對(duì)流動(dòng)相溶劑的純度也要求高。不純的溶劑會(huì)引起基線不穩(wěn),或產(chǎn)生“偽峰”。痕量雜質(zhì)的存在,將使截止波長(zhǎng)值增加50IOOnm。(4)化學(xué)穩(wěn)定性好。不能選與樣品發(fā)生反應(yīng)或聚合的溶劑。(5)低粘度。若使用高粘度溶劑,勢(shì)必增高壓力,不利于分離。常用的低粘度溶劑有丙酮、乙醇、乙晴等。但粘度過(guò)于低的溶劑也不宜采用,例戊烷、乙醚等,它們易在色譜柱或檢測(cè)器內(nèi)形成氣泡,影響分離.
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